TOSOH G糖化血红蛋白仪操作规程.docx

1、TOSOH G糖化血红蛋白仪操作规程TOSOH G糖化血红蛋白仪操作规程1 开机1.1 打开了主电源。1.2 软盘驱动器中除了数据储存盘外，不要插入其他软盘。1.3 按下显示屏右上方的POWER键，键上绿色指示灯亮起。1.4 仪器会自动依次启动检查采样单元，泵清洗，灌注缓冲洗脱液，并进行取样管路和稀释管路的首次冲洗。开始WARMINGUP(预温)1.5 仪器预热完成，将进入STAND-BY状态，可以进行样本分析了。2 质控程序2.1 配合校准品使用质控品TOSOH HbA1c Control His，来控制每天的测试结果。2.2 每瓶质控品加0.5ml去离子水后静置30分钟，轻晃溶解混匀，并标

2、记稀释日期，2-8冰箱密封贮藏，7天之内有效。2.3 分析时以1:50进行稀释（10ul稀释液500ul去离子水），以样本模式进行检测。检测结果在靶值范围内，表示仪器状态良好，可以进行检测。3 校准程序3.1 用带有不同HbA1c值的LEVEL 1和LEVEL 2校准液来校准的。执行TOSOH HbA1c Calibrator Set。3.2 下列情况需要进行校准：每星期一次：如果每天检测100个以内的样品。每天一次：如果在一台仪器上每天要检测100个以上的样品。如果质控结果超出了范围。在更换层析柱后。在分析仪维护后3.3 每瓶校准品加4ml去离子水后静置5-10分钟，轻晃使之溶解，充份混匀并

3、贴上稀释日期的标签，4冰箱密封贮藏，7天之内有效，使用前不必再稀释。使用时，倒出800ul的校准液，放入样本架。3.4按主屏幕中的MENU键进入第二屏，再按下PARAMER键进入参数设置界面点击CALIB-1。按右边数字界面输入Calibrator 1 的校准值。左边CALIB-1值被修改。同样方法输入CALIB-2的值。按EXIT键退出，进入主屏幕。3.5 按主屏幕上的CALIB（校准）键，使之高亮。按下START键，校准即开始。3.6 校准完成后，仪器自动进入样品分析程序。校准出现错误时，仪器将停止进入样品分析程序，并返回，需重新设置校准。4 样本准备程序4.1 全血模式：抽取静脉血，用E

4、DTA抗凝，当用同一个试管进行 HbA1c检测和葡萄糖等检测时，需用EDTA和NaF抗凝。全血置4可以存放一周。4.2 稀释血模式：采集静脉血或末梢血，用去离子水或溶血素/清洗液进行稀释。稀释血需立刻检测。4.3 标本的容器：HLC-723G7分析仪上既可使用原始样本管，也可以使用样本杯，放置顺序是随机的。4.4 最少样本量要求：原始样本管中全血为1 ml；样本杯中全血为50 ul ；样本杯中的稀释血为稀释后400 ul（建议患者样本的稀释比例以1:150为佳）。4.5 原始管的放置：分析仪可以从不同尺寸的原始采血管中通过盖帽穿刺的方式直接吸取样本。尺寸为1575mm和15100mm的试管可以

5、直接放置在试管架上。4.6 样品杯的放置：如果只有少量样品或红血球压积较低时，需要进行预稀释处理。将稀释后的样本颜色与稀释后的质控品或校准品的颜色作比照可以控制稀释处理的尺度。5 标本测定程序（常规检测） 在打开电源键后，第一个出现的屏幕是主屏幕（第一屏幕）。在显示屏最上方会显示出HbA1c/STD ANALYSIS（HbA1c/标准 分析）。5.1 在分析进行时，主屏幕会一直保持显示信息。当前的操作状态会显示在显示屏的左上方。且出现下列状态指示。1 WARMING UP（预温）2 STAND-BY（待机）3 ANALYSIS（分析）4 WASH（冲洗）5 BUFF PRIME（缓冲液灌注）6

6、 PUMP CLEAN（泵清洗）5.2 在预温状态下：在进行WARNING UP（升温）操作时，把样品放置在标本架上，金属终止标志放在最后一个样本架的末端，然后放入进样轨道，并按下START（开始）键。并等待WARNING UP（预温）结束。系统会自动进入ANALYSIS（分析）状态,开始分析标本。5.3 在待机状态下：在完成预温，分析或冲洗操作后，分析仪会进入待机状态。在这种状态下，泵会停止运行，不再消耗试剂。在此状态下可以把样品放置在标本架上，金属终止标志放在最后一个样本架的末端，然后放入进样轨道，按下START（开始）键，系统会自动进入ANALYSIS（分析）状态, 开始分析标本。5.4

7、 在分析状态下：确定前批样本还没检测完毕，并将前批最后一个样本架末端的金属终止标志拔下。把增测的样品放置在标本架上，金属终止标志放在最后一个样本架的末端，然后放入进样轨道。仪器会将增加的样本分析完毕。5.5 在缓冲液灌注状态下：当首次打开电源时，分析器会自动吸取并输送2号和1号洗脱液各5ml，以便用新的洗脱液来替换管道中原有的（这个操作就叫PRIME）。不需替换3号洗脱液，这是因为3号洗脱液的含盐浓度很高，对检测结果没有影响。另外，在MAINTE-REAGENT CHANGE（维护-试剂替换）屏幕中，当在进行灌注或替换缓冲液时，显示屏上会显示BUFF PRIME（灌注缓冲液）状态。等待仪器进入

8、WARMING UP（预温）或STAND-BY（待机）状态时，可以把样品放置在标本架上，金属终止标志放在最后一个样本架的末端，然后放入进样轨道，按下START（开始）键，系统会自动进入ANALYSIS（分析）状态, 开始分析标本。5.6 在清洗泵状态下：为了除去泵活塞上的杂质或盐沉淀，在打开电源后，活塞密封装置的背面就会被溶血/清洗液（5ml）自动冲洗，且冲洗完全。等待仪器进入WARMING UP（预温）或STAND-BY（待机）状态时，可以把样品放置在标本架上，金属终止标志放在最后一个样本架的末端，然后放入进样轨道，按下START（开始）键，系统会自动进入ANALYSIS（分析）状态, 开始

9、分析标本。6 标本测定程序（急诊样品检测） 如果在ANALYSIS（分析）时需要一些急诊检测的样品，把样品放在试管槽中间的STAT放样处。但记住STAT样品在待机，冲洗，升温状态时是不能进行分析的。 确定已经没有STAT样品处于分析状态后，才能打开STAT盖子。 步骤：a）先拿走放样处原有的样品容器，然后放入需要检测的样品。b）在主屏幕上按下STAT键，出现STAT（急诊样品检测）屏幕。按照需要记录一个样品ID号。选择容器的类型（如果分析的是全血，不需要按任何键。如果分析的是稀释后的样品，则按下CUP键。此键在按下后会亮起）和稀释度，然后安全地关闭STAT（预先样品检测）放样处的盖子。c）按下

10、START（开始）键 当STAT（急诊样品检测）屏幕的底部显示SCHEDULED时，表示登记完成。按下EXIT（退出）键。当显示回到主屏幕时，STAT键会亮起。在当前的检测结束后，就会马上进行STAT（预先样品检测）的分析。在取样结束后，STAT键会恢复到通常状态（即指示灯变暗）。打开前盖，取走样品。7日常保养程序 日常保养：用布沾取中性清洁液并拧干后擦拭金属部件表面的污垢。当污垢严重时，用布沾取乙醇擦拭。是每天在分析开始前（按START键）需要检查的程序。序列过程检查参照手册1检查显示屏定标键定标3.62检查计数-更换层析柱5.63检查计数-更换滤过膜5.74检查剩余体积-更换洗脱液5.35

11、检查剩余体积-更换溶血素/清洗液5.36检查剩余空间-更换和初始化软盘4.77检查剩余量-更换打印纸5.88检查体积-按照要求处理废液瓶-9检查流路-按要求拧紧从管中泄漏- 开始分析之前（START 命令）检查：序列检查时间表参照手册1 层析柱1500测试5.6 2 过滤膜400测试5.7 3 吸引过滤器6个月5.9 4 FDD清洗装置1个月-5 取样针弯曲/损坏5.10 6 针O-型环1年5.11 7 活塞密封圈1年5.12 消耗品的种类、规格和储存条件产品号消耗品名称规格储存要求669-5013-7TSKgel G7HSi1个/盒4 -25保存669-5018-5G7洗脱缓冲液No.1(S

12、)800ml/包4 -25保存669-5019-9G7洗脱缓冲液No.2(S)800ml/包4 -25保存669-5020-3G7洗脱缓冲液No.3(S)800ml/包4 -25保存669-5016-8溶血素/清洗液（L）2000ml/瓶4 -25保存669-5026-5HbA1c校准品（定值 1,2）4ml5/类2 -8保存669-5027-9HbA1c质控品（低值、高值）0.5ml4/类2 -8保存669-6071-7过滤器5片/包常温干燥669-5025-1打印纸40m60mm- 以下需要维修人员检查序列保养时间表保养检查11年注射阀马达密封更换21年自动进样阀马达密封更换31年进样环更

13、换41年泵监测阀清洁51年泵驱动单元上润滑油61年检测室清洁71年注射器Teflon头更换85年或更长备份电池（2节）更换9不要求更换检测器LED灯源更换8 消耗品的更换程序8.1 校准品质控品的配置和使用8.1.1 校准品（定值 1,2）的准备 每瓶校准品加4ml去离子水静置5-10分钟，轻晃使之溶解，充份混匀贴上稀释日期的标签，4冰箱密封贮藏，7天之内有效，使用前不必再稀释。使用时，倒出800ul的校准液。8.1.2 质控品（低值、高值）的准备 每瓶质控品加0.5ml去离子水静置30分钟，轻晃使之溶解，充份混匀贴上稀释日期的标签，2-8冰箱密封贮藏，7天之内有效。分析时以1:50进行稀释（

14、10ul 稀释液500ul去离子水）。8.2 层析柱的准备和更换 在下述情况下需要置换层析柱8.2.1 当超过初始压力10MPa，经更换过滤膜无改善时。8.2.2 当色谱峰（特别是SA1c峰）阴影指示变得平坦或分解第二部分时。8.3 更换步骤：8.3.1 STAND-BY状态下打开显示屏下的门，打开层析柱盒盖。取走旧层析柱。8.3.2 确认主屏（第二屏）上SV1键已打开（O）。8.3.3 将实验室用抹布放在层析柱导管的右侧。8.3.4 按PUMP键启动泵。8.3.5 去掉层析柱上防护塞，保存好以备后用。8.3.6 先将新层析柱与泵侧（入口）相连，留意标签上的箭图表示的液流方向，指示缓冲液从右到

15、左流入层析柱。当缓冲液从层析柱出口流出，按PUMP键使液流停止。8.3.7 将层析柱出口与检测器一侧（左边）相连，按PUMP键启动泵。8.3.8 确认泵压力在6MPa或以上，并且柱连接部无渗漏。8.3.9 将层析柱放置于铝盒区，关闭层析柱盒盖。8.3.10按PUMP键停止泵运行。8.4 过滤器的准备和更换 在下述情况下需要置换过滤器：8.4.1 当过滤器计数达到400个注入。8.4.2当使用该过滤器是，泵压力超过初始压力2MPa时。 更换步骤：a）等待检测结束STAND-BY显现，或按STOP键使检测仪恢复到STAND-BY状态。b）打开显示屏下的门，确认主屏（第二屏）上SV1键已打开（O）c

16、）取走过滤器出口（上部）导管。d）逆时针方向旋转使过滤器固定装置松开，直接拔出方式来移动过滤器固定物e）轻压固定器顶端取出旧过滤元件。小心的将新元件安放在过滤器表面。灰色面朝出口（朝上）。f）用手拧紧过滤器固定装置上部，到拧不动为止。g）将实验室用抹布放在过滤器固定装置的出口并按PUMP键以驱除元件内大气泡。核实无气泡从出口侧出来，按PUMP键停止泵运行。h）连接出口侧导管。i）再次按PUMP键启动洗脱液运送。确认泵压力在6MPa或以上，并且过滤室或导管连接部无渗漏，如发现渗漏，用力拧紧过滤器固定装置。8.5试剂的准备和更换 当试剂剩余不多时，请尽早更换缓冲液、溶血素/清洗液。剩余缓冲液的体积

17、在主屏（下行键进入第二屏幕）通过图例显示。8.6更换步骤：a）等待检测结束STAND-BY显现，或按STOP键使检测仪恢复到STAND-BY状态。b）用新试剂替换缓冲液或溶血/清洗液。c）使试剂进样管插入包装的底部。并采用密封膜以保证瓶盖紧闭。d）在维护屏幕按REAGENT CHANGE键，相对应的试剂更换键（D/W）变亮。e）按CHANGE键。确认信息将出现。如果全好，按OK键。分析仪流路中的试剂将自动被新试剂替换。f）当CHANGE出现，操作既完成。确认试剂更换后图例回复到100%。g）再次开机时仪器自动进行缓冲液No.1 、No.2灌注，并使流路中的缓冲液得以更新，然后泵运行与检测开始。

18、8.7如果长时间停机，需要进行手动试剂灌注，步骤如下：a）等待检测结束STAND-BY显现，或按STOP键使检测仪恢复到STAND-BY状态。b）按维护（MAINTE）屏上的试剂更换键（REAGENT CHANGE）。c）将进行试剂灌注的键变亮d）按灌注（PRIME）键，确认信息将出现。如果全好，按OK键。e）分析仪流路中的试剂将自动被更新。f）当PRIMING出现，操作既完成，可以关机。8.8打印纸的准备 拉开打印机盖（上盖）往下推动纸支持杆至最前面，使剩余纸卷拢拉起纸卷，取出卷轴。将卷轴插入到新纸卷中，注意方向。将纸支持杆回复至最后面并将纸插入到打印机中。纸将自动传送。因为支持杆安装有2档

19、，确认回复至最后面档。核实纸是否有扭曲。如存在，推动纸支持杆至最前面，调整好纸张，使支持杆复原。9 关机a）分析结束，仪器自动进入WASH（冲洗）状态，完成冲洗后，仪器进入STAND-BY（待机）状态如果1小时内键区或触摸屏上没有任何指令输入，电源会自动关闭。b）待机时间可以通过PARAMETER(参数)界面中的OFF TIME(关机时间)来设定。c）一般情况不进行紧急关机操作，如果必须，在待机状态将主电源开关按向O一侧。10注意事项a）抗干扰能力：葡萄糖1000mg/dl，氰酸50mg/dl，乙醛50mg/dl，游离胆红素180mg/dl，结合胆红素200mg/dl，乳糜2860浊度单位，阿

20、司匹林50mg/dl，抗坏血酸50mg/dl，尿酸50mg/dl时，检测无干扰。b）血液病患者尤其是溶血性贫血的患者，其红细胞寿命缩短，导致GHb形成的时间也相对应缩短，由此测定的结果就会受到影响，所以当某些基础疾病存在继发性溶血现象，往往使GHb测得值偏低，如肝硬化、脾肿大、糖尿病性肾病患者的EPO治疗以及极度贫血患者的输血治疗后等。肾病患者体内过多的尿素生成，其代谢产物结合于Hb的链及链N端的氨基，形成氨基甲酰Hb(carbamyl Hb),主要分离出HbA1a+b,HbA1c及HbAo,此时测得的GHb偏高（HPLC法），而慢性酒精中毒患者因生成乙酰醛的结合物，也会引起结果偏高。c）血红蛋白珠蛋白链结构异常和合成不均匀会导致异常血红蛋白的产生。虽然异常血红蛋白的存在未必有一定的临床表现，但HbS、HbC、HbE的突变点若分别发生在链的6号、26号位，在用HPLC法测定HbA1c时会有一定的干扰,这也应注意。