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生药学实验指导.docx

1、生药学实验指导生药学实验指导内蒙古医学院药学院生药学教研室二0 0五年六月实验一 生药中常见化学成分的理化鉴定(一) (2)实验二 生药中常见化学成分的理化鉴定(二) (3)实验三 根类生药 黄芪 (5)实验四 根类生药 甘草 (6)实验五 根类生药 百部 (7)实验六 根茎类生药 黄连 (8)实验七 根茎类生药 大黄 (9)实验八 根茎类生药 半夏 (10)实验九 茎木类生药 关木通 (11)实验十 皮类生药 肉桂 (12)实验十一 皮类生药 黄柏 (13)实验十二 叶类生药 大青叶 (14)实验十三 花类生药 金银花 (15)实验十四 果实类生药 小茴香(16)实验十五 种子类生药 马钱子

2、(17)实验十六 全草类生药 麻黄(18)实验十七 菌类生药 茯苓(19)实验十八 动物及矿物类生药 (20)附录1常用试剂配制法 (21)2常用商品酸碱浓度表 (25)3 层离法常用显色剂 (26)4显微镜测量法(27)5绘图注意事项(27) 一、实验注意事项: 1依照教学进程,温习与本次实验有关的课堂讲授内容。 2认真阅读本次实验的内容,要求弄明白实验的原理与方法。 3预备好各种自备的实验用品,如铅笔、橡皮、直尺、报告纸等。二、实验过程中的几点要求: 1遵守实验室规则,保持实验室安静。 2实验认真,观看认真,观看应当与摸索结合起来,应当手、眼、脑三者并用。 3由于实验时刻有限,实验时应当善

3、于安排自己的工作,注意力应当集中在要紧问题上,不要用过多时刻去钻研细小的次要问题,一时解决不了的次要问题,可留课外时刻去解决o 4在实验过程中,应当随时注意观看到的现象,测量或称量的数据,运算结果等写在报告纸上,养成能随时作出准确、清淅、整齐的记录而不需要重抄的良好适应。 5实验进行过程中,必须注意听取教师的指导。 6实验桌前应随时保持整洁,非实验必要物品一律不许放在桌面或桌架上。 7纸屑、废物应放人污物缸内,不得乱丢地上,污物缸内不得倒入液体。三、实验完毕时的几点要求: 1按照教师指定时刻完成实验报告。 2把实验用仪器、用品等收拾洁净,放在指定位置。发放给个人保管的可放抽屉或柜内。 3临时借

4、用物品应及时归还。4值日生负责最后清扫实验室卫生,并及时清除污物缸内的废弃物。5实验终止后,检查门、窗、水、电,保证无安全隐患后方可离开实验室。实验一 生药中常见化学成分的理化鉴定(一)一、实验目的要求:1了解化学检出法在药材鉴定中的应用。2熟悉药材鉴定中常用的理化鉴定方法。3把握生物碱,羟基蒽醌的理化性质和定性检识反应。二、实验要紧材料、仪器及试剂: 马钱子、黄柏(苦参)黄连、大黄、秦皮、黄连乙醇液。 水浴锅、荧光灯、蒸发皿、锥形瓶、试管、微量升华装置。 , 碘化铋钾试液、碘化汞钾试液、碘一碘化钾试液、浓硝酸、浓硫酸、5NaOH、HCl、乙醚、氨水。三、实验内容:1显微化学反应法:(1)将药

5、材的切片或粉未置载玻片上,滴加适当试液,加盖玻片在显微镜下观看产生的颜色或结晶等,作为鉴别特点。 取干燥马钱子的胚乳部分作徒手切片,加l硫矾酸试剂l滴,镜检,观看结果。 另取一切片,加浓硝酸l滴,镜检,观看结果。(2)取药材粗粉加适当试剂浸出,将浸出液滴于载玻片上,滴加适当试剂,加盖玻片,镜检观看反应结果。取黄连乙醇液1滴,加浓HN03 1滴,镜检,观看结果。(3)取药材的切片或粉末滴加适当试剂,直截了当观看皇现的种种颜色作为鉴别特点。取大黄饮片,加5NaOH l2滴,显现什么颜色?再加稀HCl 12滴,又显现什么颜色? 2微量升华法:是利用药材中所含的某些成分,在一定温度下能升华的性质,获得

6、升华物,在显微镜下观看其形状,颜色及化学反应,作为鉴别特点。具体方法:取金属片,安放在有圆孔(直径约2cm)的石棉板上,金属片上放一小金属圈(高度约0.8cm),对准石棉板上的圆孔,圈内加药材粉末一薄层,圈上放一载玻片,在石棉板下圆孔处用酒精灯慢慢加热(火焰距板约4cm)数分钟,至粉末开始变焦,并有气化物发生,去火待冷,则有结晶状升华物附着于覆盖的载片上,将载玻片取下反转,在显微镜下观看结晶形状,并可加化学试液,观看其变化。 取大黄粉未,进行如上操作,观看反应结果o 3荧光分析法: 将药材切片或粉末或提取液等,在荧光灯下观看荧光,有些药材不产生荧光,如以酸碱处理或其他化学方法处理后,可使其中某

7、些成分在荧光灯下产生荧光,以便鉴别。 2如取黄连饮片、浙贝母粉末或秦皮水浸液,在紫外灯下观看荧光颜色。 4层析法: 分为纸层析、柱层析、薄层层析等(略)。 5化学定性检查:药材中的化学成分可利用其能与某些试剂产生专门的颜色、沉淀反应来进行鉴别。 (1)生物碱的检出:沉淀反应 取黄连,马钱子,黄柏(苦参)粉未各2g,分别盛入锥形瓶中,各加水l 5ml,浓HCl O5ml,60水浴上温浸30分钟,时时振摇,取滤液备用。 各取2ml滤液于试管中,分别加下列试液23滴,观看有何现象?碘化铋钾试液碘化汞钾试液碘一碘化钾试液黄连马钱子黄柏(苦参)(2)羟基功醌的检出:Bomtrger反应 取大黄粉未0.2

8、g,置试管中加入5NaOH试液4ml,在小火上煮沸,取滤液加HCl呈酸性后,再加乙醚5ml,振摇,分取醚层,于醚层中加入等量氨试液,振摇,观看反应现象。四、作业:简要记录各反应的实验步骤和结果。五、摸索题:1显微化学反应法有几种操作方法?2微量升华法用于生药鉴别有何特点?3含何类成分的生药常会产生荧光?4生物碱常甩的沉淀试剂有哪些?Borntrger反应过程的原理是什么?实验二 生药中常见化学成分的理化鉴定(二)一、实验目的要求: 把握香豆精类,强心苷类、皂苷类、鞣质类、氰苷类、黄酮类的理化性质和定性检识反应。二、实验要紧材料、仪器及试剂:秦皮、桔梗、穿山龙、五倍子、儿茶、苦杏仁、洋地黄叶、黄

9、芩(槐米水浴锅 蒸发皿锥形瓶盐酸羟胺甲醇液、l0氢氧化钾甲醇液、乙醚、氯仿、盐酸、l三氯化铁乙醇液、2红血球悬浮液、1盐酸奎宁试液、明胶液、铁铵矾试液、三氯化铁试液、冰醋酸、浓硫酸、镁粉。 三、实验内容:1化学定性检查 3(1)香豆精类的检出:异羟肟酸铁反应 取秦皮粗粉0.2g,置具塞试管中,加乙醚3ml,浸渍510分钟,时加振摇,放置,吸取上清液(或滤过)于试管中加新配制的盐酸羟胺甲醇溶液23滴,l 0氢氧化钾甲醇溶液23滴,水浴温热12分钟,冷后加l 0盐酸,使pH为34,再加l三氯化铁乙醇溶液12 滴,两液混合面或溶液应显什么颜色?(2)强心苷的检出:三氯化铁一冰醋酸反应 取洋地黄叶粉末

10、0.5g,加水5ml,水浴加热20分钟,滤液加3mlCHCl3,振摇萃取后,再加乙醚3ml,待分层,用吸管吸取取下层,将CHCl3层转于蒸发皿中蒸干,放冷,加冰醋酸lml使残渣溶解,移人试管中,加三氯化铁溶液1滴,并沿管壁慢慢注入浓H2S04 l520滴,观看上层液及界面的颜色变化。(3)皂苷的检出: 泡沫反应 取桔梗粉末0.2g,加水5ml,加热煮沸,过滤,滤液在试管中强烈振摇,注意是否产生大量持久性泡沫。 溶血试验 取穿山龙的l生理盐水溶液lml和l生理盐水lml,分别置试管中,各加2红血球悬浮液0.3ml,摇匀后放置,注意观看哪支试管溶液变清而透亮。(示溶血现象)(4)鞣质的检出: 显色

11、及沉淀反应 取五倍子,儿茶粉末各0.5g,分别置于锥形瓶中,加25ml水,水浴加热,过滤备用。各取滤液2ml,分别加下列试剂,观看反应现象。1盐酸奎宁试液明胶液铁铵矾试液、五倍子儿茶 (5)氰苷类的检出: 苦味酸钠反应 取苦杏仁一粒捣碎,用水潮湿置试管中,试管中悬挂用NaHC03饱和溶液潮湿的苦味酸试纸一条,用软木塞塞紧,置4050C水浴中,观看试纸颜色变化。 (6)黄酮苷的检出: 盐酸镁粉反应 取黄芩(槐米)粉末约0.2g,加乙醇5ml,水浴温热约5分钟,滤过,取滤液2ml,加镁粉少量,混匀,滴加盐酸数滴,注意有气泡产生,同时观看出现什么颜色。四、作业:简要记录各反应的实验步骤和结果。五、摸

12、索题:1、香豆精苷,强心苷,氰苷,黄酮苷及鞣质的反应机理是什么?2、黄酮类成分遇盐酸一镁粉是否都显红色?如不显红色是否能够否定黄酮成分的存在?4实验三 根类生药黄芪 Rabix Astragali一、实验目的:l、把握黄芪生药性状。 2、把握黄芪横切面组织特点和粉末显微特点。二、实验要紧仪器及试剂: 显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛溶液。三、实验材料: 蒙古黄芪 Astragalis membranaceus BgcVarmongholieus(Bgc)Hsiao原植物标本、生物、组织横切片及粉末。四、实验内容及步骤: l、观看蒙古黄芪的原植物标本,注意其属于豆科植物的形状特点。 2、性

13、状鉴定 观看黄芪生药,注意其表面色泽,皮孔形状,栓皮有无剥落;折断面是否呈纤维状,横断面形成层环是否明显?观看皮部与木部的色泽,尝味。 3、显微鉴定(1)镜检黄芪根的横切片,自外至内观看其组织特点? 木栓层 为数列木细胞。 栓内层 由数列薄壁细胞组成。 韧皮部 纤维群与筛管群交互排列,射线弯曲。 形成层 成环,束内形成层明显。 木质部 导管单个散在或23个相聚,直径l8l60微米,木纤维成束,木薄壁细胞少数壁稍厚,具多数单纹孔;木射线发达。 (2)镜检黄芪粉末,分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片,注意以下特点: 纤维 众多,成束,细长,直径936,壁厚,非木化,孔沟不明显。另取黄芪生药,刮取少量纤

14、维(粉末),透化后装片,注意纤维的先端常纵裂成扫帚状。 导管 主为具缘纹孔导管,纹孔呈椭圆形,类方类或斜方形。 木栓细胞表面观呈多角形或类方形。 淀粉粒单粒类圆形、椭圆形或类肾形,直径313,复粒由24分粒组成。五、作业: 1、绘黄芪横切面组织简图。 2、绘黄芪粉末特点图,示纤维,导管,木栓细胞与淀粉粒。六、摸索题: l、黄芪什么缘故不易折断? 2、如何能方便而有效地鉴别甘草和黄芪粉末? 5实验四 根类生药甘草 Radix Clycyrrbizae一、实验目的:l、把握甘草生药性状特点。2、把握甘草根横切面组织和粉末显微特点。二、实验要紧仪器及试剂: 显微镜、临时装片用具、白瓷板、蒸发皿、蒸馏

15、水、水合氯醛试液、80硫酸。三、实验材料:甘草clycyrrbiza uralensis Fisch.原植物标本、生药、饮片、组织横切片和粉末。四、实验内容及步骤:l、观看甘草植物腊叶标本,注意根茎和根的形状,复叶上的小叶数和花序或果实形状等。2、性状鉴定 观看甘草生药,注意其表面色泽,有无纵皱及横向皮孔?断面色泽与特点、质地如何?将它折断,有无粉尘飞扬?尝味。3、显微鉴定 (1)镜检甘草根横切片,自外向内观看其组织特点: 木栓层 数列至2030列木栓细胞,红棕色,排列整齐。 皮层 较窄,为数列薄壁细胞,有纤维群散在。 韧皮部 韧皮纤维与韧皮薄壁细胞及筛管群相问排列,靠外方的筛管组织常被挤压而

16、颓废成条状;韧皮纤维壁厚,微木化,其周围薄壁细胞中多含草酸钙方晶;韧皮射线广,多弯曲;常有裂隙。 形成层 束内形成层明显,为数列扁平细胞,束间形成层不明显o 木质部 导管较大,直径约至l 6,常单个或23个相聚;木纤雏多成群,其周围薄壁细胞中也含草酸钙方晶;木射线较平直,宽35列细胞。 髓部 根中心无髓。根茎中心有髓。髓由薄壁细胞组成,近木质部处偶见有些细胞含红棕色物质。 薄壁细胞中含众多细小的淀粉粒。 (2)镜检甘草粉末 分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片,注意以下特点: 纤维 众多,成束或散离,细长,直径614,壁厚,木化或非木化,孔沟不明显;晶鞘纤维易察见,草酸钙方晶类双锥形,长方形或类方形

17、,含晶细胞的壁增厚,微木化或非木化。 导管 主为具缘纹孔导管,多破裂,纹孔椭圆形或略呈斜方形,对列或互列,有的导管旁可见小型具缘纹孔管胞。 木栓细胞棕红色,壁薄,微木化,表面观呈多角形。 淀粉粒众多,单粒椭圆形、卵形或类球形,直径316,脐点点状或短缝状。复粒稀少,由2分粒组成。此外,尚有少数黄棕色或红棕色的色素块。 6五、作业:1、绘甘草横切面组织简图。2、绘甘草粉末显微特点图,示晶纤维,具缘纹孔导管,木栓细胞和淀粉粒。六、摸索题:l、甘草的组织构造中,有哪些较显著的鉴别特点?2、什么是晶鞘纤维?实验五 根类生药百部 Radix Stemonae一、实验目的:l、把握百部生药性状特点。2、把

18、握直立百部根的组织特点,并了解其与蔓生百部根和对叶百部根的鉴别。二、实验要紧仪器及试剂:显微镜、临时装片用具、水合氯醛试液、间苯三酚、浓盐酸。三、实验材料: 直立百部 Stmona sessilifolia(Mig)Miq蔓生百部S japanica(B1)Miq对叶百部Stuberosa Lour三种百部的原植物标本、生药及其组织横切片。四、实验内容及步骤:l、观看三种百部的植物标本,从叶序、叶柄的长短、叶脉、花的着生等方面比较其异同点。2、性状鉴定观看百部生药形状,外表皱缩情形、色泽及质地;注意直立百部及蔓生百部的根较小而干、空、质轻;对叶百部根较粗大,角质而坚实。3、显微鉴定 (1)观看

19、直立百部根的横切片,注意下列组织特点: 根被 34列多角形细胞,外侧细胞常破裂,壁木栓化及木化,具致密交错的细条纹。 皮层 宽广,约占半径的23,外皮层为一列排整齐、切向延长的细胞,内皮层明显,有时可见凯氏点。 中柱鞘 l2列薄壁细胞组成。 维管束 辐射型,韧皮部束与木质部束相间排列,各l923个,韧皮部束内侧有单个或23个相聚的非木化纤维,木质部导管偶成2轮排列。 髓 薄壁细胞组成,散有单个或23个相聚的非木化纤维。 7(2)镜检对叶百部根横切片 注意其与直立百部根横切面特点的要紧区别;根被约为3列细胞,壁木化,无细条纹,最内层细胞的内壁特厚;皮层外缘散有纤维,壁微木化;韧皮部束和木质部束3

20、640个,木质部束的木化纤维及木化薄壁细胞连接成环。髓部纤维少,常单个散在o(3)镜检蔓生百部根横切片,注意其与直立百部根横切面特点的要紧区别:根被细胞26列,无角质条纹,韧皮部纤维木化;导管较大,并深入分布于髓部,大多呈23轮排列。四、作业: l、绘直立百部根横切面组织简图。2、绘直立百部根的根被细胞,示角质条纹。五、摸索题: 试列直立百部、蔓生百部与对叶百部的生药性状检索表及组织构造检索表。实验六 根茎类生药黄连Rhizoma Coptidis一、实验目的:l、把握黄连的生药性状特点。2、把握黄连根茎横切面组织特点与粉末显微待征。3、了解其它根及根茎类中药的性状特点二、实验要紧仪器及试剂:

21、 显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛试液。三、实验材料: 黄连 Coptis chinensis Franch原植物标本、生药(味连)组织切片及粉末。四、实验内容及步骤:1、性状鉴定 观看味连性状 味连根茎多簇状分枝,有时弯曲,形如倒鸡爪。分枝类圆柱状,长37cm直径0.30.9cm。表面黄棕色或灰黄色,粗糙,有不规则结节状隆起,上有较密的环纹,着生须根或须根残基,并有鳞叶,顶端常有残留的茎基和叶柄基,根茎中段的节间有时较细,表面光滑,习称“过桥,长l4参谋。质硬,折断面不平坦;横断面可见皮部棕红色或暗棕色,木部鲜黄色或橙黄色,具放射状统纹理。髓部红棕色,有时中空,气微,味极苦。 2、显微

22、鉴定 (1)镜检黄连根茎横切面组织切片 自外向内观看其要紧组织特点:8木栓层为数列扁平细胞,壁薄,其外有时可见鳞叶的横切面组织,由上下表皮及多角形薄壁细胞组成。皮层较宽,薄壁组织中有石细胞,单个或成群散在。常可见根迹维管束和叶迹维管束。维管束外韧型,韧皮部较狭窄,外侧有中柱鞘纤维束,约由l020个纤维组成,或伴有少数石细胞;形成层细胞扁平,束问形成层不明显;木质部由导管、管胞、木纤维、木薄壁细胞组成,木纤维较发达。 髓部由薄壁细胞组成,无石细胞。 注:三角黄连Cdeltoidea C。YCheng et Hsiao的根茎(雅连)髓部有石细胞。云连Cjteetoides C.YCheng的根茎皮

23、部、髓部均无石细胞。 薄壁细胞均含淀粉粒。 (2)取黄连粉末分别以蒸馏水及水合氯醛试液装片,镜检下列特点:石细胞鲜黄色、类圆形、类方形或类多角形,有时稍延长,长径25 75m,孔沟及纹孔明显。韧皮纤维鲜黄色,纺锤形或长梭形,直径:2040m,壁较厚,纹孔少。 木纤维众多,常成束,鲜黄色,直径l 535m,壁具裂隙状纹孔。导管多为孔纹导管,也有具缘纹孔,网纹及螺纹导管。 鳞叶表皮细胞类方形或长方形,壁薄曩垂厨壁微波状。淀粉粒单粒长圆形、肾形或类球形,直径ll0,复粒少,由24分粒组成。五、作业: l、描述记载黄连根茎性状。 2、绘黄连根横切面简图。3、绘黄连粉末显微特点图,示石细胞、韧皮纤维、木

24、纤维、导管、鳞叶表皮细胞及淀粉粒。六、摸索题:l、如何从性状与组织上鉴别“味连”、“雅连”和“云连”?实验七 根茎类生药大黄 Rhizomo Rhei一、实验目的: l、把握大黄的生药性状特点。2、把握大黄横切面组织特点与粉末显微特点。二、实验要紧仪器及试剂:显微镜、临时装片用具、蒸馏水 水合氯醛试液。9三、实验材料:大黄Rheum Palmatum L.原植物标本、生药饮片、组织横切片及粉末。四、实验内容及步骤:l、性状鉴定 取大黄标本,从形状、表面特点、断面特点、气味等方面描述大黄性状特点。2、显微鉴定(1)镜检大黄根茎横切面组织切片,自外向内观看其要紧组织特点:木栓层与皮层多已除去,偶残

25、存。 韧皮部射线l4列细胞,内含棕色物。形成层环状。木质部导管径向稀疏排列。髓宽广,散有多数异型维管束(星点),系复合维管束,由多个外木式维管束组成,形成层类圆形,射线呈星芒状射出。(2)取大黄粉末分别以蒸馏水及水合氯醛试液装片,镜检下列特点:草酸钙簇晶大而多,棱角大多短钝。, 。导管主为网纹导管,并有具缘纹孔及细小螺纹导管,直径约至140m,非木化。 淀粉粒单粒呈圆球形或长圆形,脐点大多呈星状,复粒由27个分粒组成。3、观看所示标本的性状特点。五、作业: l、描述大黄性状特点。2、绘大黄根茎横切面简图。3、绘大黄粉末显微特点图,示草酸钙簇晶、导管、淀粉粒。实验八 根茎类生药半夏 Rhizom

26、a Pinelliae一、实验目的: l、把握半夏的生药性状特点。2、把握半夏粉末显微特点。二、实验要紧仪器及试剂:显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛试液。三、实验材料:半夏Pinellia ternata(Thunb)Breit.原植物标本、生药、饮片、粉末。 10四、实验内容及步骤: 1、性状鉴定 取半夏块茎,从形状、表面、质地、断面、气味等方面描述半夏性状特点。 2、显微鉴定 取半夏粉末先后以蒸馏水及水合氯醛试液装片,镜检下列特点: 淀粉粒单粒类圆形、半圆形或圆多角形,直径220,脐点裂缝状,人字状或星状;复粒由26分粒组成。 草酸钙针晶成束存在于椭圆形粘液细胞中或随处散在,针晶长2

27、0ll0m。 螺纹导管直径1024m o 3、观看所示标本的性状特点。五、作业: l、描述半夏性状特点。 2、绘半夏粉末显微特点图,示淀粉粒,草酸钙针晶束,导管。实验九 茎木类生药关木通Caulis Aristolocbiae Manshuriensis一、实验目的: l、把握关木通的生药性状。 2、熟悉关木通茎的组织及粉末特点。二、实验要紧仪器及试剂: 显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛试液。三、实验材料: 东北马兜铃Aristolochia manshuriensis Kom生药、组织横切片及粉末。四、实验内容及步骤: l、性状鉴定 观看关木通生药,注意茎呈圆柱形,稍弯曲。表面灰黄或淡

28、棕色,节明显,稍膨大。节间有浅纵沟及浅棕色残余的斑块状木栓。体轻质坚,不易折断,触之稍有弹性。横切面黄白色,皮部薄,木部占切面的绝大部分,密布导管小孔,与浅色射线排列呈蛛网状,髓部不明显,味苦。 2、显微鉴定 (1)镜检关木通茎横切片,自外向内观看下列特点: 木栓组织多已刮去,仅残存数列扁平的木栓细胞。 栓内层为十余列扁平薄壁细胞。 中柱鞘众多纤维成群,切向排列于韧皮部外,常呈新月形,纤维群中有少数石细胞散在。维管束外韧型,约为l 2个。韧皮部狭窄,颓废筛管和韧皮薄壁细胞相间层状排列,形成层明显成玮,木质部中导管口径大,多单个散在,切向整齐排列11 成环,木薄壁细胞稀少。初生射线宽而长,次生射线窄而短。 髓狭小,条状,细胞多颓废。 薄壁细胞含有草酸钙簇晶和淀粉粒。 (2)取关木通粉末少量,分别以蒸馏水和水合氯醛试液透化装片,镜检下列特点: 导管 庞大,多破裂,具缘纹孔排列紧密,孔径可达l 3pm。 木纤维 要紧为纤维管胞,多成束,单个纤维长梭状,有明显的具缘纹孔。 韧皮纤维长梭形,壁较厚,有斜纹孔。 石细胞较少,类方形或类长方形,壁较厚。 此外,尚有傍管木薄壁细胞和木栓细胞,以及淀粉粒、

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