1、犬瘟热的诊断和治疗青岛农业大学本科生毕业论文题目: 犬瘟热的诊断与治疗 姓名: 臧玉鹏 学院: 动物科技学院 专业: 动物医学 班级: 2010级w1002班 学号: 20100039 指导教师: 杨海燕 2012年5月6日中文摘要 1Abstract 1引言 11 诊断材料与方法 31.1 诊断材料 31.1.1 试验动物 31.1.2 器具和药物 31.2 诊断方法 31.2.1 临床症状诊断 31.2.2犬瘟热病毒试剂盒诊断 31.2.3 血常规诊断 41.2.4 尿常规诊断 41.3 治疗 41.3.1 分组 41.3.2 治疗措施 42 结果与分析 42.1 诊断 42.1.1 临床
2、症状诊断 42.1.2犬瘟热病毒试剂盒诊断 52.1.3 血常规诊断 52.1.4 尿常规诊断 62.2 各种方案治疗患犬效果的比较 63 讨论 63.1 尿常规检查 63.2对症治疗药物的选择 63.3干扰素、单抗、浓缩血浆、联合用药的选择 73.4 鉴别诊断 73.4.1 犬细小病毒感染 73.4.2 犬传染性肝炎 73.5 病后监护 73.6 犬瘟热的预防措施 83.6.1 免疫接种 83.6.2 加强饲养管理 84 结论8致谢 9参考文献 10犬瘟热的诊断与治疗动物医学专业 臧玉鹏指导老师 杨海燕摘要:通过临床症状诊断、血常规检查、尿常规检查、血清学检查对疑似患有犬瘟热的患犬进行诊断,
3、将确诊的病犬随机分成五组,在对症治疗和防治继发感染的基础上,分别应用犬干扰素;犬瘟热单克隆抗体;浓缩血浆;联合用药治疗,并对各种治疗方案的效果进行比较。结果表明:临床症状诊断结合犬瘟热病毒试剂盒诊断可作为犬瘟热确诊的依据;联合用药治疗犬瘟热效果显著,犬干扰素次之,单纯应用犬瘟热单克隆抗体效果最差。关键词:犬瘟热病毒;诊断;治疗Diagnosis and Therapy of Canine DistemperStudent Majoring in Veterinary Medicine ZANG Yu-pengTutor YANG Hai-yanAbstract: Through observa
4、tion of clinical symptoms, blood routine examination, urine routine examination and serologic examination, suspected canine distemper cases were diagnosed. Diagnosed cases of canine distemper were divided into five group at random. On the basis of symptomatic treatment and control secondary infectio
5、n, The diagnosed cases of canine distemper were treated with interferon, monoclonal antibody, concentrated plasma and combination. The results showed that the combination of observation of clinical symptoms and serologic examination could diagnose canine distemper exactly: the best remedial effect o
6、f drug was combination, the worst one was monoclonal antibody.Key word: Canine distemper; Diagnosis; Therapy引言犬瘟热(Canine distemper CD)是由犬瘟热病毒(Canine distemper virus CDV)感染肉食兽中犬科(尤其是幼犬)、鼬科及一部分浣熊科动物的一种高度接触性、致死性传染病1。CDV单负股病毒目、副黏病毒科、麻疹病毒属成员。病毒粒子多为球形,有时呈长丝状,直径为110550nm,多数在150330之间,亦有畸形和长丝状的病毒粒子,带囊膜,囊膜表面密
7、布纤突,具有吸附细胞的作用。病毒的基因组为单股不分节段、非重叠的负链RNA,由15616个核苷酸组成,包括6个非重叠基因区,它们编码的基因按3-5端顺序为N-P-M-F-H-L系列,共编码八种病毒蛋白,其中包括6种结构蛋白,即核衣壳蛋白(N)、磷蛋白(P)、大蛋白(L)、基质膜蛋白(M)、融合蛋白(F)、附着或血凝蛋白(H),其中N蛋白和F蛋白与麻疹病毒和牛瘟病毒具有很高的同源性,是引起交叉免疫保护的共同抗原。F蛋白能引起动物的完全免疫应答2。还有2种非结构蛋白V和C。V和C两种非结构蛋白由磷蛋白基因表达3。负链RNA位于犬CDV粒子内部,被一个螺旋状衣壳包裹,主要由N组成,P和L也是核衣壳的
8、成分4。核衣壳呈螺旋对称,直径为1517nm,外被双层囊膜,其内部为M,膜上有长约1.3nm的纤突病毒(H和F糖蛋白),只有一个血清型4。CDV可在来源于犬、貂猴鸡和人的多种原代及传代细胞以及Vero细胞系等细胞中生长繁殖,初次培养困难,毒株之间有差异,后者是培养本病毒的首选细胞5。但只有在传代与接毒同步进行时或同时加有胰酶的情况下,细胞才出现CPE,表现胞浆出现空泡、细胞逐渐圆缩、拉网,最后脱落。某些毒株可使肾细胞产生颗粒变性,形成空胞、巨细胞或合胞体等病变(CPE),并在胞浆内出现包涵体。本病毒连续通过雪貂可增强对雪貂的致病力,但对犬的毒力逐渐减弱。病毒通过鸡胚绒毛膜接种传代,毒力可减弱6
9、。最适pH7.0,在pH4.59.0条件下均可存活7。病毒对热和干燥敏感,在-70可存活数年,冻干可长期保存,506030min灭活8。病毒对紫外线和乙醚、氯仿等有机溶剂敏感,对酸碱抵抗力弱。3%福尔马林、5%石炭酸溶液以及3%苛性钠等对本病都具有良好的消毒作用9。本病一年四季均可发生,但以冬春多发10,有一定的周期性,每23年一次大流行,特别是犬类比较集中的单位或地区多发。不同年龄、性别和品种的犬均可感染,但以112月龄的幼犬最为易感。纯种犬、警犬比土种犬易感性高,而且病情反复重,死亡率高。未进行免疫的犬,在天气突变、饲养管理不当和运输等不利因素影响下,机体抵抗力降低,均有可能自然感染11。
10、病犬和带毒犬是主要的传染源,其次是患CD的其他动物和带毒动物,病毒存在于肝、脾、肺、肾、脑、淋巴结等多种脏器与组织中,通过泪液、鼻汁、唾液、尿液以及呼出的空气排出病毒,污染周围空气、饮水、食物和周围环境,通过直接接触和空气传播可感染健康犬。此外,还可通过胎盘和交配感染。CD潜伏期随机体的免疫状况和所感染的病毒毒力与数量不同,一般为36d,多数以感染后第4天体温升高,以双相型发热、眼鼻分泌物呈黏液性或脓性、淋巴细胞减少、白细胞吞噬能力降低、神经症状为特征,临床表现为呼吸道型、消化道型、中枢神经型和混合型4种。呼吸道型:以小叶性肺炎和上呼吸道炎症症状为主,体温升高,食欲降低,倦怠,鼻镜干裂,呼出恶
11、臭气体,初期眼、鼻流出水样分泌物,并常在12d内转变为黏液性、脓性,严重时堵塞鼻孔,病犬张口呼吸,并不时以爪搔鼻甚至将上下眼睑黏合在一起。可能并发脓性结膜炎,角膜发生溃疡,甚至穿孔。患犬发生先干后湿性咳嗽,肺部听诊时,呼吸音粗历,有湿性啰音或捻发音。消化道型:食欲降低或完全丧失,呕吐,排带黏液的稀便或干粪,腹部因肠卡他性炎而压痛,粪便有粘液,有时恶臭,有时排高粱米汤样的血便。患犬迅速脱水、消瘦,与病毒性肠炎症状非常相似。尤其是那些离乳不久的幼犬,有时仅表现为出血性肠炎症状,消化道型偶尔与消化道型并发。中枢神经型:通常在全身症状恢复后721天出现,也有一发热就表神经症状,鼻部和脚垫的表皮角化可引
12、起不同类型的神经症状根据CDV侵害中枢神经系统的部位不同,临床症状有所差异。大脑受损表现癫痫、好动、转圈和精神异常;中脑、小脑、前庭和延髓受损表现为步态及站立姿势异常;脑膜受损表现为感觉过敏和颈部强直。此外,咀嚼肌群反复出现阵发性颤抖是中枢神经型的常见症状。皮肤型:单纯皮肤型较为少见。单纯皮肤型的特点是发热初期,少数幼犬下腹部、大腿内侧和外耳道发生水疱性脓疱型皮疹。康复时干枯消失。有少数病例在疾病末期,主要是以上三种病例的末期,于腹部和股内侧有皮肤坏死的现象。临床上,根据特征性临床症状(双相体温升高、急性鼻卡他和随后的支气管炎、卡他性肺炎、严重胃肠炎和神经症状,鼻和脚垫的角化等),再结合流行病
13、学和病理变化的特点,可以作出初步诊断。若要确诊还需进行实验室诊断,具体方法有包涵体检查、病毒分离鉴定、中和试验、补体结合试验、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验、RT-PCR诊断技术和核酸探针技术。CD确诊后,应该尽快使用特异性疗法(免疫血清)的同时,还应该以保护和提高病犬免疫力以及对症治疗为中心的支持疗法。有条件的最好通过对所继发感染的细菌做药敏试验,有针对性地选择对抗继发感染细菌的抗菌药物。并配合对症治疗,以止呕、止咳、止泻、强心补液、制止出血,预防继发感染等为原则,准确及时用药,往往能达到较好的效果。CD是18世纪中后期发现的,CDV在1980年被我国首次发现,随着改革开放将更多的病原引入,
14、和养犬数量的增多,CD它不仅给家庭宠物犬带来极大的身体危害,同时也给养犬业、毛皮动物养殖业和野生动物保护带来难以估算的损失。以前人们对CD的认识仅仅局限于典型病例,诊断和治疗也是仅仅用旧的传统的方法,造成患犬的误诊和治疗效果下降。目前,CD在临床症状和病理变化表现出非典型性变化,为兽医诊治工作带来新的困难。本临床试验是对犬瘟热的诊断和治疗做进一步地探讨和研究,并对各种治疗方案的效果进行比较,找出犬瘟热在不同情况下的最佳治疗方案,从而为犬瘟热的诊治提供相应的临床指导。1 材料与方法1.1材料1.1.1试验动物就诊于城阳蓝十字动物医院的病犬。1.1.2器具和药物体温计、听诊器、显微镜、血液分析仪、
15、载玻片、棉签、离心机、玻璃平皿、滤纸、酒精灯、移液器、滴管、温箱或烘箱(37)、打孔器、冰箱、尿液干化学分析试剂带、手术刀、手术剪、止血钳、天平、烧杯(或三角瓶)、药匙、玻璃棒、水浴锅等;犬瘟热病毒(CDV)试剂盒;犬干扰素、犬瘟热单克隆抗体、血浆、青霉素、链霉素、林可霉素、卡那霉素、庆大霉素、头孢噻呋钠、头孢曲松钠、溴那米普鲁卡因(爱茂尔)、辅酶A、复方布他磷注射液(科特壮)、止血敏等。1.2诊断方法1.2.1临床症状诊断对疑似患CD的犬进行诊断,询问主人病犬的具体不正常表现,例如饮食欲、排粪、排尿情况。测量体温、脉搏,观察呼吸数和方式,观察其精神状态,观察眼角处有无脓性分泌物,触摸其脚垫是
16、否增厚。1.2.2犬瘟热病毒试剂盒诊断用干净的棉签蘸去病犬的眼屎、唾液或者鼻涕,放入装有稀释液的专用管中充分搅拌混合,用吸管抽取上层清液,向试剂盒(或测试条)样品孔中滴加4滴提取液,等待510min,观察结果。根据检测线与对照线的结果来判断阴性和阳性。对照线(C):无论被检物内是否存在CDV抗原,呈现红色或紫色线。检测线(T):根据被检物内存在CDV抗原与否,检测阴性或阳性。1.2.3血常规诊断对患犬进行血常规检查,项目有红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、红细胞压积、血红蛋白(Hb)、嗜中性分叶、嗜中性杆状、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞等各项指标,将测得数据再与其生理参数值
17、进行比较。1.2.4尿常规诊断首先采集患犬尿液,再将尿液干化学分析试剂带与标准比色板进行比色对照,观察尿液中各项变化情况。1.3治疗1.3.1分组将在门诊中确诊患有CD的68只患犬根据用药不同随机分成五组,分别为A、B、C、D、E五组,其中A组9只、B组8只、C组9只、D组28只,E组14只。1.3.2治疗措施在常规对症治疗的基础上,A组单独使用犬干扰素进行治疗,B组单独使用CD单克隆抗体进行治疗,C组单独使用浓缩血浆进行治疗,D组进行联合用药,E组为对照组。几种药物的用量如下:A组:犬干扰素,1501500单位/kg体重,1次/d,连用3d。B组:犬瘟热单克隆抗体,1ml/kg体重,1次/d
18、,连用3d。C组:浓缩血浆,12ml/kg体重,1次/d,连用3d。D组:犬干扰素,1501500单位/kg体重,1次/d;犬瘟热单克隆抗体,1ml/kg体重,1次/d,连用3d。E组:仅进行对症治疗。对症治疗:使用头孢噻呋钠预防继发感染;当患犬出现呕吐时可选用山莨菪碱注射液和维生素B6等,也可用胃复安、维生素B6混合皮下注射;补充钙剂和维生素C有一定的止血作用,出血严重时可注射维生素K3和止血敏;缓解咳嗽症状可选用咳必清、急支糖浆等。2 结果与分析2.1 诊断2.1.1 临床症状诊断患犬临床症状主要表现为初期鼻镜干燥,眼鼻流出水样分泌物,食欲差,体温升高,在39.541之间,并呈双相型发热。
19、眼有黏性或脓性分泌物,角膜水肿,呈现角膜炎和结膜炎症状。严重时上下眼睑粘合在一起,角膜溃疡。鼻孔流出浆液样分泌物,咳嗽,呼吸音粗历,食欲减退。大部分患犬表现为急性胃肠炎,食欲废绝,饮欲增加,腹泻,粪便呈胶冻样或红褐色水样,具有腥臭味,间或呕吐,最后严重脱水。患犬通常是呼吸道症状和消化道症状同时出现。面部咬肌阵发性强直抽搐,伴发流涎,或四肢阵发性抽搐,以幼犬多见。抽搐的间隔期越短病情越重。2.1.2犬瘟热病毒(CDV)试剂盒诊断图1用犬瘟热病毒(CDV)试剂盒检验的72例病犬中,68例呈阳性,阳性率为94.4%。2.1.3血常规检查犬瘟热病毒感染期白细胞减少,继发感染时白细胞增多,淋巴细胞减少,
20、嗜中性粒细胞相对增多,轻度核左移和单核细胞增多。结果见表1。表1 患犬血常规检查Table 1 Results of blood routine examination项目标准值测定值(XS)红细胞(109/L)5875375650白细胞(107/L)132638181201138红细胞压积(%)40.253.8158.439.22血红蛋白(g/L)136.110.821.47.8嗜酸性粒细胞(%)2192.11.2嗜碱性粒细胞(%)少见0.20.12淋巴细胞(%)16.834.6929.16.8单核细胞(103个/l)l.352.880.322.1.4尿常规检查尿常规检查发现,患犬尿液中胆红
21、素含量明显升高,尿胆素原呈现不同程度的升高,此外,部分患犬可出现不同程度上的潜血和酮体变化,而亚硝酸盐、pH值、蛋白质、葡萄糖等变化不明显。2.2 各种方案治疗患犬效果的比较对患犬进行特异性试验发现,不同患犬对药物的敏感性存在明显差异,而患犬对联合用药最为敏感。结果见表2。表2 五种治疗方案的临床效果Table 2 The clinical effects of five therapeutic regimen用药患犬数量(只)治愈犬数量(只)治愈率(%)犬干扰素9555.6单抗8225浓缩血浆9333.3联合用药281967.9对症治疗组14214.3由表2可知,使用犬干扰素、犬瘟热单克隆抗
22、体和浓缩血浆对治疗犬瘟热有一定疗效,明显高于对照组,单独使用犬干扰素的效果好于单抗和血浆,单独使用单抗和血浆疗效相似,而联合使用的效果好于单独使用。3 讨论3.1 尿常规检查由于病毒侵袭肝脏和肾脏等组织都有不同程度病变,这样尿液中胆红素含量、尿胆素原呈现不同程度的升高,此外,部分患犬可出现不同程度上的蛋白尿和血尿,这可能与肾脏的损伤有关,病程长的病例酮体有不同程度升高,在此主要考虑到机体消耗,而亚硝酸盐、pH值、葡萄糖等变化不明显12。3.2 对症治疗药物的选择由于抗生素的广泛使用、滥用,造成病原体对药物的敏感性下降,出现药物反应不明显,以及个体间对药物的反应性差异增大;在临床治疗过程中,因没
23、有合适的药物选择,引起继发感染。对患犬瘟热的患犬进行抗生素敏感筛选,待选用的药物有青霉素、链霉素、林可霉素、卡那霉素、庆大霉素、头孢唑啉钠、头孢曲松钠等。试验发现,不同患犬对药物的敏感性存在明显差异性,而患犬对头孢唑啉钠的敏感性趋于一致,有一定的药物敏感性。当患犬出现呕吐时,选用山莨菪碱注射液和维生素B6等,一般都能获得较好的效果,也可用胃复安1ml、维生素B62ml混合皮下注射,1次/d,直至患犬不发生呕吐为止;补充钙剂和维生素C有一定的止血功能,出血严重时可注射维生素K31ml,止血敏2ml,1次/d,直至患犬不拉血便为止,用0.5%高锰酸钾温水深部灌肠,1次/d,连用2d,排除直肠和结肠
24、内的腥臭血便,破坏致病性细菌生长繁殖环境;在抗菌消炎的基础上,适当选用镇咳化痰药物配合治疗,如咳必清、急支糖浆等,可缓解咳嗽症状。3.3 干扰素、单抗、浓缩血浆、联合用药的选择研究发现,单纯的使用单抗或浓缩血浆对犬瘟热的治疗效果不如联合用药明显,干扰素可明显的提高机体免疫力,对病毒性疾病效果明显;单纯使用单抗不足以保持机体较高的抗体水平,机体免疫力仍没有激活;而单纯使用浓缩血浆只能提高机体抗体水平中和病毒,机体免疫力也未能激活,在治疗该病的过程中,由于病毒的侵袭,势必造成机体免疫机能的下降,因此,在治疗过程中要考虑该问题。3.4 鉴别诊断以下几种疾病的临床症状与犬瘟热相似,所以诊断时一定要注意
25、鉴别。现列出这几种病的主要示病症状:3.4.1犬细小病毒病感染冬春季多发,依据临床症状可分为肠炎型和心肌炎型。肠炎型呕吐,呕吐物清亮,胆汁样或者带血。随后开始腹泻初始粪便为灰色、黄色,随后呈血色或含有血凝块。剖检可见空肠回肠病变严重。心肌炎型多见于2842日龄幼犬,仅表轻度腹泻,继而突然衰弱,呼吸困难,脉搏快而弱,短时间内死亡。3.4.2犬传染性肝炎除呕吐、腹痛、腹泻和粪中带血外,特征性症状是角膜水肿,即“蓝眼”病,病犬眼睑痉挛,羞明和浆液性分泌物。病变主表以出血为中心的败血症,特征病变是肝肿大,斑驳状,表面浮膜性炎症。胆囊壁水肿增厚,灰白色,半透明,浆膜也可见浮膜性炎。3.5 病后监护治疗C
26、D的关键是确诊后的特异性疗法和缓解临床症状,但一定配合对病犬犬的监护,让病犬自身的免疫力去抵抗疾病也是治疗的关键。对腹泻和呕吐较严重的患犬,输液后72小时内禁食、禁水,并注意防寒,呕吐症状不明显食欲差的病犬,可以适当喂以易消化的流体食物如米汤、面条和动物营养餐等,少食多餐。每天检测病犬体温、脉搏和呼吸数。注射双黄连或冲服黄芪多糖,再配合板蓝根冲剂预防感冒,除非高热避免使用肾上腺皮质激素,避免这类药物对病犬的免疫抑制。眼部症状明显的病犬,可用以下配方滴眼:庆大霉素2ml利巴韦林2ml林可霉素4ml地塞米松1ml复合维生素B1ml,配成10ml液体,46次/d。疾病期间不要洗澡,保证病犬充足睡眠,
27、不要运动过量,不要和病犬玩耍。3.6 犬瘟热的预防措施3.6.1免疫接种预防CD的合理措施就是免疫接种。CDV弱毒疫苗的保护效果比较理想,喝过初乳的犬只建议在68周龄首免,之后隔34周免疫一次,直到1416周龄。无母源抗体犬,建议4周龄首免,24周二免。犬瘟热的疫苗免疫确实,但不产生终生免疫,因此每年需进行1次加强免疫。市场上现有二联苗、四联苗、五联苗、六联苗等,应尽量避免使用多联苗,因为它们之间可能有干扰作用,影响彼此之间的免疫效果。3.6.2加强饲养管理及时打扫犬生活环境卫生,定期消毒。病犬和可疑感染犬要立即隔离观察,发现情况立即采取治疗措施。喂给犬营养全面的全价日粮,日粮搭配合理,肉素搭
28、配合理。日常生活中多观察犬只的生活状况,例如饮食、喝水、排粪和排尿情况。此外,还应观察犬只的鼻头、脚垫和精神状况。刚刚买的新犬,应该注射高免血清,过1520天后,发现无异常,方可与其他犬只混养。由于本论文所用的实验动物都是门诊病犬,受实际条件所限没有设对照组,加之实习时间以及试验动物有限,统计数据较少,试验数据可能不是很准确,所以有待于进一步研究得出更加广泛而准确的结论,并应用到临床。4结论临床症状诊断结合犬瘟热病毒试剂盒诊断可作为犬瘟热确诊的依据;联合用药治疗犬瘟热效果显著,犬干扰素次之,单纯应用犬瘟热单克隆抗体效果最差。致谢两年以前带着迷茫和无知走进了青岛农业大学,在这里幸亏有平易近人的老师和亲如兄弟姐妹的同学伴我一路走来,是老师和同学们对我各个方面的无尽帮助我在这里的生活这么丰富多彩,回想在这里的时光,倍感充实。在这里我不仅学到了专业方面的知识,更是学会了怎样去学习,我觉得读
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