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小鼠缺氧实验实验报告.docx

1、小鼠缺氧实验实验报告小鼠缺氧实验实验报告1 / 13 文档可自由编辑 篇二:缺氧 缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响 【摘要】目的:本实验学习复制乏氧性缺氧和血液性缺氧的动物模型方法,观察缺氧过程中呼吸的反应及血液色泽和全身一般情况的变化,并了解温度和中枢神经系统机能状态对缺氧耐受的影响以及对照实验和控制实验条件重要性。方法:通过复制缺氧动物模型,观察不同类型缺氧过程中呼吸、黏膜和血液色泽的变化。通过测定耗氧量和小鼠的存活时间来观察中枢神经系统机能抑制和低温对缺氧的影响。结果:中枢神经系统功能抑制和低温对动物耐受缺氧的影响与对照组相比,存活时间和总耗氧率有显著性差异;复制

2、不同原因造成的不同缺氧类型小鼠都表现出了不同的呼吸频率和存活时间的变化。结论:给小鼠注射氯丙嗪、冰浴降温可显著降低总耗氧率,延长其存活时间(p0.05);氯丙嗪组小鼠的耗氧量为 12.75.02 ml,生理盐水组小鼠的耗氧量为 16.03.01 ml,两者无明显差异(p0.05);氯丙嗪组小鼠耐缺氧存活时间为 44.717.21 min,生理盐水组小鼠耐缺氧时间为 21.03.61,两者相比有高度显著性差异 3 / 13 文档可自由编辑 (p0.01);氯丙嗪组小鼠的耗氧率为 0.0130.005 (ml/g/min),生理盐水组小鼠的耗氧率 0.030.002 (ml/g/min),两者相比

3、有高度显著性差异(p0.01)。见表 1。 表 1.氯丙嗪、冰浴对小鼠缺氧耐受性的影响实验结果统计表 小鼠体重(g) 样本 1 2 3 4 5 6 7 8 9 对照 23 19 实验 22 25 22 25 24 22 23 22 22 23.01.32 总耗氧量(ml) 对照 19.5 14.0 16.0 14.0 17.4 17.0 11.5 21.0 13.5 16.0 3.01 实验 存活时间(min) 总耗氧率(ml/g/min) 对照 实验 47 52 35 23 24 59 31 60 71 44.717.21* 对照 0.034 0.035 0.033 0.035 0.033

4、0.034 0.031 0.037 0.029 0.03 0.002 实验 0.01 0.011 0.013 0.014 0.016 0.015 0.024 0.005 0.012 0.0130.005# 10.5 25 14.3 21 10.0 8.0 9.5 19.9 17.0 6.0 19.0 12.75.02$ 22 16 21 22 15 26 21 21.0 3.61 22 25 25 23 25 22 22 22.9 x?s 1.96 注:*p0.01 vs 对照组 ;p0.05 vs 对照组,$p0.05 vs 对照组 3.2 不同原因造成的缺氧 由表 2 可知,亚硝酸钠中毒小

5、鼠的存活时间最短,其次为 co中毒组。存活时间最长的是亚硝酸钠美兰组,可见美兰具有抗亚硝酸钠中毒的作用。 表 2.乏氧、co 中毒、亚硝酸钠中毒小鼠的呼吸频率(次/10 秒) 缺氧类型 乏氧 co 中毒 亚硝酸钠 亚硝酸钠 美兰 0min 29.74.90 29.75.90 29.73.54 29.7 5.68 5min 31.26.96 24.78.72 26.17.13 25.9 4.99 4 / 13 文档可自由编辑 10min 30.47.52 26.89.31 28.7 8.38 15min 25.08.97 28.5 6.02 20min 30.16.83 25min 29.56.

6、07 30min 28.96.24 5.3 亚硝酸钠中毒与亚硝酸钠+美兰的两组小鼠的存活时间有显著性差异,美兰组存活时间显著延长(p0.01)。见表 3。 表 3.亚硝酸盐中毒及其美兰的治疗效果 缺氧类型 亚硝酸盐中毒性缺氧 亚硝酸盐中毒性+美兰 存活时间 9.561.59 48.6714.23* 注:p0.01 3.4 分别观察乏氧性缺氧组、一氧化碳中毒组、亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组的小鼠肝脏组织颜色,如表 3。 表 4.乏氧、co 中毒、亚硝酸钠中毒的小鼠存活时间和肝血、耳尾唇颜色比较 类别 乏氧 体重(g) 19 存活时间(min) 18 肝血颜色 暗红色 耳尾唇颜色 青紫色(紫绀) c

7、o nano2 nano2+mb 22 18 18.5 7 12 30 樱桃红色 深咖啡色 浅咖啡色 樱桃红色 青石板色 青石板色,稍浅 6.讨论 6.1.实验结果显示氯丙嗪组的存活时间显著长于生理盐水组,耗氧率也显著低于生理盐水组。氯丙嗪为吩噻嗪类抗精神病药物,主要阻断脑内多巴胺受体和 肾上腺素受体和 m 胆碱受体,具有神经安定作用,它对中枢神经系统有较强的抑制作用。小鼠注射氯丙嗪后,置于低温使其进入假冬眠状态。小鼠外界活动停止,新陈代谢率降至最低,因此能量利用减 5 / 13 文档可自由编辑 少,单位时间的耗氧量减少,即耗氧率减小。在氧总量相等的情况下,存活时间就比生理盐水组长。 6.2.

8、乏氧性缺氧,主要表现为动脉血氧分压降低,氧含量减少,组织供养不足。正常毛细血管的血液中氧离血红蛋白浓度约为 26g/l。乏氧性缺氧时,动静脉血中的氧离血红蛋白浓度增高。当毛细血管血液中氧离血红蛋白浓度达到或超过 50 g/l时,可使皮肤和粘膜呈青紫色。 co 与 hb 的亲和力比 o2 大 210 倍,hb 与 co 结合形成碳氢 hb,从而失去运氧功能。co 同时还能抑制红细胞内糖酵解,使其 2,3-dpg 生成减少,氧离曲线左移,妨碍 hbo2 中的氧解离,从而造成组织严重缺氧。此时外呼吸功能正常,故动脉血氧分压及血氧饱和度正常,但 hb数量减少或性质改变,使血氧容量降低。组织中 hbco

9、 增多,故皮肤、粘膜呈樱桃红色。 亚硝酸盐可使 hb 中二价铁氧化成三价铁,形成高铁 hb(hbfe3+oh),三价铁因与羟基牢固结合而丧失携氧能力,加上 hb 四个二价铁中有一部分氧化为三价铁后使剩余的 fe2+与氧亲和力增高,导致氧离曲线左移,使组织缺氧。高铁 hb 呈咖啡色或青石板色,因而使皮肤和粘膜呈现相同颜色2。低浓度美兰为还原剂,抑制了氧化剂(亚硝酸钠)的中毒反应,中毒后即刻肌注可有效使小鼠存活时间延长 2 倍以上。本实验结果也显示,亚硝酸钠+美兰组小鼠的存活时间明显长于亚硝酸钠中毒小鼠的存活时间(表 3),说明美兰具有较好的拮抗作用。 6.3.钠石灰的作用:钠石灰在两个实验中的用

10、途也有很大区别:实验一中缺氧瓶内钠石灰吸收小鼠呼吸产生的 co2 造成负压,利于正确地测出耗氧量;实验二中加入钠石灰是为了排除高碳酸血症对缺氧实验的影响。 参考资料: 1.陆源,夏强.生理科学实验教程.杭州:浙江大学出版社,2004:240. 2.陈季强.基础医学各论(上册).北京:科学出版社,2004:492,495496.篇三:小鼠缺氧模型及其分析 缺氧的类型及影响缺氧耐受性的因素 高伟飞 (浙江中医药大学滨江学院 10 级 临床专业临滨 1 班 4 组 20102090114) 6 / 13 文档可自由编辑 一、实验目的: 1.观察原因和条件在疾病发生发展中的作用 2.复制几种类型缺氧的

11、模型,观察血液颜色的特点,分析其机制 根据大纲要求: 掌握概念:缺氧、低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧,紫绀、肠源性紫绀。 熟悉并理解原因和条件在疾病发生发展中的作用。 熟悉反映血氧情况的一些指标(氧分压、氧含量、氧容量、氧饱和度,动静脉血氧含量差)。 掌握各型缺氧发生的原因及主要发病机制,掌握各型缺氧的特征(血氧变化的特点和皮肤黏膜颜色变化)。 二、实验原理: 当组织供应组织的氧不足,或组织利用氧障碍时,机体的机能和代谢可发生异常变化,这种病理过程称为缺氧。不同类型的缺氧,其机体的代偿适应性反应和症状也不同。根据缺氧原因不同可将缺氧分为乏氧性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中

12、毒性缺氧四种类型。 影响机体对缺氧耐受性的因素很多,如年龄、机体的代谢、功能状况以及锻炼适应等。本实验才缺氧的不同环节入手观察呼吸变化及皮肤黏膜的颜色改变。实验通过动物的不同代谢状况、中枢神经系统功能和动物所处环境温度,观察动物的缺氧耐受性。 三、实验对象:小鼠 四、实验材料:电子秤、注射器、钠石灰、广口瓶、测耗氧量装置、剪刀、镊子、滤纸;生理盐水、美兰亚硝酸钠、氯丙嗪、冰块、量筒等 五、实验方法: 1、 取 2 只小鼠,注射及处理: 1 号:亚硝酸钠及美兰 0.2ml ,左下腹注射 2 号:亚硝酸钠及生理盐水各 0.2ml ,左下腹注射 注射完,观察,2 号小鼠立即死亡,1 号小鼠仍存活;然

13、后处死解剖,剪下一片肝脏组 织放于滤纸上,观察肝的颜色。 2、取 2 只小鼠称重,编号 3、4 注射及处理: 3 号:氯丙嗪 0.2ml,左下腹注射 4 号:生理盐水 0.2ml 左下腹注射 7 / 13 文档可自由编辑 将 3、4 号小鼠分别分别放入钠石灰的广口瓶,塞上塞子,记录下量筒的液面,连通耗氧装置,开始计时,直至小鼠死亡,记录下时间和量筒下降的液面刻度 计算两只小鼠的耗氧量 小鼠耗氧率 r(ml/min/g) =a/(w*t.) 六、实验结果: 1、几种类型的缺氧 序号 1.注射及处理 nano2+美兰 0.2ml 2.nano2+生理盐 水 0.2ml 2、不同条件下小鼠缺氧耐受性

14、 序体重注射及处理 存活时 间 氯丙嗪 0.2ml (冰浴) 4 20.6 生理盐水(常 温) 27 分 18 0.032 27 分 总耗氧量(ml) 8 耗氧率(ml/min/g) 0.016 血液性缺氧 青石板色 缺氧类型 血液性缺氧 肝脏颜色 暗红色 号 (g) 3 18.8 七、实验分析: 1、血液性缺氧:由于血红蛋白的质或量的改变引起的缺氧。 亚硝酸盐可使血红素中二价铁氧化成三价铁,形成高铁血红蛋白,导致高铁血红蛋白血症。美兰为还原剂,可抑制氧化剂的中毒反应。因此 1 号小鼠存活,2 号小鼠死亡。 2、不同条件下小鼠缺氧耐受性 氯丙嗪是中枢多巴胺受体的阻断剂,具有镇静、抗精神病、镇吐

15、、降低体温及基础代谢、-肾上腺素能受体及 m-胆碱能受体阻断、抗组织胺、影响内分泌等作用,再加上冰浴,制造低温环境,使得 3 号小鼠的基础代谢率将为最低,可延长其死亡时间。 八、实验结论: 1、缺氧是这 2 小鼠死亡的共同原因,不同的药物是小鼠死亡的条件,氯丙嗪加上低温可延长小鼠的死亡时间。 8 / 13 文档可自由编辑 2、高铁蛋白血症(亚硝酸盐中毒)属于血液性缺氧,原因:二价铁离子被氧化为三价铁离子,肝脏呈青石板色。篇四:抗缺氧实验 中药药理学 实验教学大纲 (供四年制中药学、五年制中医学类本科学生使用) 前言 本大纲适用于四年制中药学、五年制中医学类本科学生使用。编写本大纲的目的是要求学

16、生在学习中药药理学基础课的过程中,通过实验课的学习使学生掌握必要的中药药理实验原理、方法和技能,能正确、合理地使用仪器,为学习中医学基础课、中药学专业课打下牢固的基础;培养学生严肃认真的工作作风、实事求是的科学态度和独立分析问题、解决问题的能力;培养学生观察和分析实验现象的能力,巩固和加深对中药药理现象和规律的理解。现将大纲使用中有关问题说明如下: 一 为了使教师和学生更好地掌握教材,大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标,教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别,教学内容与教学要求级别对应,并统一标示(核心内容即知识点以下划实线,重点内容以下划虚线,一边内容不

17、标示)便于学生重点学习。 二 教师在保证大纲核心内容的前提下,可根据不同教学手段,讲授重点内容和介绍一般内容。 三 总教学参考学时为 12 学时。 四 使用教材:中药药理学实验指导,由中药药剂教研室自编。 正文 实验一 柴胡对发热家兔的解热作用 一 教学目的 观察柴胡对发热家兔及正常兔体温的影响,了解柴胡解热作用的特点 二 教学要求 (一)掌握发热动物模型的制作方法。 (四)掌握肛温计测定家兔体温的方法。 (五)掌握动物模型分组方法。 (六)熟悉实验结果的统计处理方法。 (七)了解实验数据座标图示法。 9 / 13 文档可自由编辑 三 教学内容 (一)动物选择原则。 (二)测量正常体温值。 (

18、三)分组。 (四)家兔发热模型的制作。 (五)给药。 (六)测量不同时段的体温值。 (七)实验数据的处理与图示法。 (八)实验报告的书写要求。 实验二 生大黄、制大黄以及大黄、芒硝配伍对小白鼠小肠运动的影响(炭末法) 一 教学目的 了解生大黄、制大黄对肠蠕动的影响以及大黄、芒硝配伍的药理意义 二 教学要求 (一)掌握泻下药推进小肠运动的实验方法。 (二) 熟悉炭末法。 (三)掌握炭末推进率测量与计算方法。 (四)了解小白鼠幽门与回盲部解剖部位。 三 教学内容 (一) 动物选择原则。 (二) 称重,标记。 (三)分组。 (四)灌胃给药。 (五)处死动物,解剖。 (六)测量尺寸。 (七)计算,实验

19、数据处理。 (八)实验报告的书写要求。 实验三 延胡索及金铃子散镇痛作用 一 教学目的 了解用热板法和扭体法筛选镇痛药的实验方法;观察延胡索及金铃子散的镇痛作用。 二 教学要求 (一)掌握热板法与扭体法。 (二)掌握痛阈值的测定方法。 10 / 13 文档可自由编辑 (三)掌握合格小鼠筛选方法。 (四)熟悉实验结果的统计处理方法。 (五)了解实验数据座标图示法。 (六)掌握判定扭体反应的方法。 三 教学内容 (一)动物选择原则。 (二)测量正常痛阈值。 (三)筛选,分组。 (四)给药。 (五)测量不同时段的痛阈值。 (六)实验数据的处理与图示法。 (七)实验报告的书写要求。 实验四 人参抗应激

20、作用 一 教学目的 学习小白鼠游泳和耐常压缺氧的实验方法,研究人参抗应激作用。 二 教学要求 (一)掌握小白鼠游泳实验方法。 (二)掌握小白鼠耐常压缺氧的实验方法。 (三)熟悉实验结果的统计处理方法。 三 教学内容 (一)动物选择原则。 (二)测量水温。 (三)筛选,分组。 (四)给药,记时。 (五)测量小鼠游泳时间和耐缺氧时间。 (六)实验数据的处理。 (七)实验报告的书写要求。 教学组织与考核方法 一 实施机构:由中药药剂教研室执行。 二 组织内容:教案讲义审核、集体教学备课、教学方法研究、教学手段应用。 三 教学方法: (一)实验教学:采用启发式、讨论式、交互式课堂教学方式,辅助现代教育

21、技术和传统教学手段。重点内容以介绍为主,一般内容以自学为主。 11 / 13 文档可自由编辑 (二)教学点:在中药药剂实验室教学,承担教师由中药药剂教研室委派。 (三)辅导形式:课堂答疑、讨论、复习等结合。 四 考核办法:每次实验后批改实验报告,学生的实验操作及报告成绩占课程总评成绩的 20%;实验要点考核占课程期末考试卷面成绩的10%左右。 教学时数分配表 实验内容 教学时数 实验类型 实验一 柴胡对发热家兔的解热作用 3 验证型 实验二 大黄对小白鼠小肠运动的影响 3 验证型 实验三 元胡及金铃子散对小白鼠的镇痛作用 3 验证型 实验四 人参抗应激作用 3 验证型 合计 12 篇五:小白鼠

22、的缺氧实验 缺氧对小白鼠体征的影响 (潍坊医学院 2009 级临床 26 班 山东潍坊 261053) 摘要目的:观察缺氧对小白鼠体征的影响。 方法:取五只小白鼠,通过制作小白鼠的乏氧性缺氧、一氧化碳中毒性缺氧、亚硝酸钠中毒性缺氧三种模型并与正常状态的小白鼠作对比,观察小白鼠的行为及皮肤、黏膜、肝脏的变化。 结果:小白鼠的乏氧性缺氧模型肝脏为青紫色,一氧化碳中毒性缺氧模型为樱桃红色,亚硝酸钠中毒性缺氧模型肝脏青石板颜色,正常小白鼠肝脏为红色。 结论:不同的缺氧因素对小白鼠肝脏颜色有不同影响。 关键词乏氧性缺氧,一氧化碳中毒性缺氧,亚硝酸钠中毒性缺氧,青石板颜色 前言 缺氧是由于机体供氧不足或组

23、织利用氧障碍引起的机体代谢、功能和形态结构改变的病理过程1。理论上由于不同机制的缺氧通过对血红蛋白的影响改变了血红蛋白的颜色从而我们可以复制相应模型以观察其血液的变化。至于类似的实验,前人已经将其机制研究清楚了,做本次实验只是加以验证,观察是否与理论相符合,有时也许会有新的发现,但主要是为以后的临床学习打下基础。 材料与方法 12 / 13 文档可自由编辑 1.实验材料 器材:小白鼠缺氧瓶、co 发生装置、1ml 注射器、酒精灯、剪刀、镊子。 药品:钠石灰、甲酸、浓硫酸、5%亚硝酸钠、1%亚硝酸钠、1%美兰、生理盐水。 动物:小白鼠 2.缺氧模型的制备 21 乏氧性缺氧模型的制备 (1) 取钠

24、石灰约 5g 及小白鼠一只放入缺氧瓶内。观察动物的一般情况,呼吸频率(次/10s),深度,皮肤和口唇粘膜颜色,然后紧塞瓶塞,记录时间,以后每 3min 重复观察上述指标 1 次(如有其他变化则随时记录)直到动物死亡为止。 (2) 动物尸体留待 2.2、2.3、2.4 实验做完后,再依次打开其腹腔,比较血液或肝脏颜色。 3.2 一氧化碳中毒性缺氧模型的制备 (1) 装好 co 发生装置。 (2) 将小白鼠放入广口瓶中,观察其正常表现,然后与 co 发生装置连接。 (3) 取甲酸 3ml 放入试管中,加入浓硫酸 2ml,塞紧。(可用酒精灯加热,加速 co 产生,但不可过热以至液体沸腾,因 co 产

25、生过多过快动物迅速死亡,血液颜色改变不明显。) (4) 观察指标与方法同上。 4.3 亚硝酸钠中毒性缺氧模型的制备 (1) 取体重相近的两只小鼠,观察正常表现后,向腹腔注入 5%亚硝酸钠 0.3ml,其中一只注入亚硝酸钠后,立即再向腹腔注入 1%美兰溶液 0.3ml,另一只再注入生理盐水 0.3ml。 (2) 观察指标与方法同 2.1,比较两鼠表现及死亡时间有无差异。 5.4 解剖正常小白鼠 取一只未做处理正常的小鼠,观察体表特征,后处死,观察其肝脏颜色。 实验结果 类型 呼吸频率、幅度 肝脏颜色 皮肤粘膜颜色 先加深加快 低张性缺氧 后变浅变慢 暗红色 青紫色 13 / 13 文档可自由编辑

26、 一氧化碳中毒 无改变 樱桃红色 樱桃红色 亚硝酸钠中毒 无改变 青石板颜色 青石板颜色 正常小白鼠 无改变 红色 红色 讨论 1.乏氧性缺氧:轻度缺氧使呼吸中枢兴奋,呼吸先加深加快,重度缺氧抑制呼吸中枢使呼吸变浅变慢,皮肤黏膜呈暗红色则是由于 hb 结合的氧气过少引起,钠石灰用于吸于甁中 co2 以排除 co2 的干扰,po2 降低里,也因肺通气量的增加,呼出较多的co2,使体内 pco2 和 h+浓度降低,从而减弱低氧的刺激作用2。 2.co 中毒:呼吸无改变,主要与 pao2 正常有关,皮肤黏膜、肝脏呈樱桃红色。是由于 cohb 引起,co 中毒性缺氧属等张性缺氧,呼吸系统的代偿不明显,

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