分子生物学复习重点.docx

1、分子生物学复习重点分子生物学研究：核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学。1953年，Watson和Crick提出脱氧核糖核苷酸的双螺旋膜型。染色体包括：DNA和蛋白质两大部分。基因组：由生物体内所有的染色体组成的。真核细胞染色体的组成包括：蛋白质：组蛋白（染色体结构蛋白，组成核小体）、非组蛋白（RNA聚合酶、肌动蛋白、肌球蛋白、微管蛋白），真核生物基因组DNA，染色质和核小体。DNA包装步骤：（核小体，螺线管，超螺线管，染色体）1)核小体的形成是染色体中DNA压缩的第一阶段。核小体的组成：组蛋白+200bp DNA。 核小体组蛋白：H2A、H2B、H3

2、、H4各两分子生成的八聚体，并伴有H1在核小体在外边，直径10nm。2)将200bp的DNA分子（2nm）缠绕在核小体外，从68nm压缩到10nm中，压缩率1/73)六个核小体形成一个螺线管，压缩率1/6，直径30nm?4)螺线管形成超螺线管，压缩率1/40，直径4000nm5)超螺线管形成染色单体，压缩率1/5DNA的结构：（1）DNA的一级结构：四种核苷酸的连接排列顺序。（2）DNA的二级结构：两条多核苷酸链反相平行盘绕所成的双螺旋结构。（3）DNA的高级结构：多数为双链DNA，少数为单链；形成超螺旋，构成质粒分类：右手螺旋（A-DNA构象、B-DNA构象）、左手螺旋（Z-DNA构象）B-

3、DNA构象特点：1）A-T丰富的DNA片段常呈B-DNA构型；2）脱氧核苷酸在外侧，碱基在内侧；3）链间形成的有螺旋状凹槽构成：大沟、小沟（沟用来接收Pr 的结合）；4)相邻碱基对平面间距，结构重复周期，双螺旋直径；5)磷酸二脂键链接核苷酸；6)脱氧核糖环平面基本与纵轴大致平行？A-DNA构象：DNA模板链与转录所得RNA链间形成的双链，双链RNA之间形成的构象也是A-DNA构象.Z-DNA构象特点：1）12个碱基一圈，比A构型紧；2）只有一个螺旋沟，难于蛋白质结合；3）重复的结构式二核苷酸；4）碱基不再中央，外圈的碱基难被化学物质结合识别意义：用于调控基因转录，Z构型变为B构型，可以使得近端

4、区域活化转录；使得远端基因转录停止。DNA的复制：(1)步骤：1)解链：DNA链改变构象，从复制叉开始解链，此为DNA复制的起点2)拓扑：防止超螺旋3)单链结合蛋白（SSB）结合单链DNA：4)引物结合：RNA引物提供3-OH末端|5) DNA聚合酶：去掉结合蛋白，切除RNA引物6)滑动夹：推动DNA聚合酶前进7 )DNA连接(2)原料：1)拓扑异构酶；2)解旋酶；3)单链结合蛋白（SSB）；4)引物合成酶；5 )DNA聚合酶3（复制链）；、6) DNA聚合酶1（切引物）；7)连接酶；8) dNTP；9 )RNA引物（含3-OH末端）DNA半保留复制：每个子代分子的一条链来自亲代DNA，另一条

5、链来自新和成的。DNA半不连续复制：DNA复制时，双链解开，SSB和DNA聚合酶3共同作用合成前导链随复制叉前进（5端3端）；另一条后随链的复制由RNA引物开始一个片段一个片段的复制（5端3端），形成众多冈崎片段，之后切除引物，用DNA连接酶连接断开的单链。DNA修复：（分类，定义，AP位点）（1）错配修复：保存母链，修正子链。识别新合成链中的错配并校正DNA子链。（2）切除修复：1）碱基切除修复：切除AP位点(存在于DNA链上的去嘌呤或去嘧啶位点)两端的磷酸二酯键，换上相应的核苷酸。2）核苷酸切除修复：切除无法形成氢键的核苷酸。DNA的转座：或称移位，是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。转

6、座子：又称易位子，存在于染色体DNA上的可自主复制和移位的基本单位。分类：插入序列（IS）、复合型转座子玉米中的控制因子：Ac-Ds系统（激活-解离系统）：Ac能够自主转座，形成不稳定基因突变，使Ds因子活化、转座。Ds属于非自主因子，解离因子，当Ac存在时导致附近结构基因失活和表达水平的变化。转座作用的机制：转座可被分为复制型和非复制型两类。基因表达：转录（拷贝出一条与DNA链序列完全相同的RNA单链的过程，是基因表达的核心步骤）和翻译（以新生的mRNA为模板，把核苷酸三联遗传密码翻译成氨基酸、合成多肽的过程，是基因表达的最终目的）。DPPH依赖于RNA聚合酶基因转录：(1)启动子：基因转录

7、起始所必需的一段DNA序列，确保转录精确起始，是基因表达调控的上游顺式作用元件之一。是指确保转录精确而有效地起始的DNA序列。(2)转录单元：是一段从启动子开始至终止子结束DNA序列，RNA聚合酶从转录起点开始沿模板前进，直到终止子为止，转录出一条RNA连。(3)增强子，或强化子：一种能强化转录起始的序列。(4)原核生物包括：-10区与-35区，其最佳距离大约是16-19bp。真核生物mRNA特点：(1)mRNA的5端存在“帽子”结构（甲基化鸟嘌呤）；(2)绝大多数真核生物mRNA具有多聚A尾巴(1)“帽子”结构作用：1有助于翻译的开始：与核糖体小亚基相结合；2保护mRNA不被降解，半衰期长；

8、3成熟产物运输过程中的必需物质；4促进转录(2)多聚腺苷酸尾巴作用：1穿过核膜所必须的部分；2提高mRNA的稳定性；3与翻译有关原核生物转录终止的类型：不依赖于因子的终止和依赖于因子的终止类型RNA的编辑：是某些RNA，特别是一种mRNA前体的加工方式，如插入、删除、取代一些核苷酸残基，导致DNA所编码的遗传信息的改变，因为经过编辑的mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化。核酶：一类具有催化功能的RNA分子，通过催化RNA链中磷酸二酯键的断裂，特异性剪切底物RNA分子，从而断裂基因的表达。其根据不同的核酸具有的催化功能分为：剪切型核酶、剪接型核酶。遗传密码的性质：（1）密码的连续性；（2）密

9、码的简并性（一个氨基酸有多个密码子）；（3）密码的通用性与特殊性；（4）密码子和反密码子相互作用tRNA的L形状的三级结构（1）tRNA的种类：1）起始tRNA：原核生物起始tRNA携带甲酰甲硫氨酸（fMet），真核生物起始tRNA携带甲硫氨酸（Met）；2）同工tRNA；3）校正tRNA）无义突变：蛋白质合成提前终止（合成UAG、UGA、UAA），合成无功能的多肽。错义突变：结构基因中某个核苷酸变化，使得一种氨基酸的密码变成另一种氨基酸的密码。（2）氨酰-tRNA合成酶：是一类催化氨基酸与tRNA结合的特异性酶。AA-tRNA合成酶既要识别tRNA，又要能识别氨基酸它对两者都具有高度的专一性

10、。蛋白质的生物合成包括：1、氨基酸活化2、肽链的起始3、伸长、终止以及新合成多肽链的折叠和加工。在真核生物中，起始氨基酸是甲硫氨酸，在原核生物中，起始氨基酸是甲酰基氨基酸。生物翻译：（1）原核生物翻译的起始：1）30SrRNA和50SrRNA相分离2）30S小亚基先与mRNA模板相结合（需要识别SD序列）3）30S小亚基再与fMet-tRNAMet（甲酰甲硫氨酸-氨酰tRNA）结合4）30S小亚基与50S大亚基结合(2)真核生物翻译的起始：1）40SrRNA与60SrRNA相分离2）40S小亚基首先与fMet-tRNAMet结合3）40S小亚基mRNA模板相结合（无需识别SD序列）4）40S小

11、亚基与60 S大亚基结合成80SmRNAMet-tRNAMet起始复合物(3)原核与真核的不同：1)真核核糖体较大;2)有较多的起始因子参与;3)mRNA具有m7GppNp帽子结构;4)Met-tRNAMet不甲酰化;5)mRNA分子参与形成起始复合物蛋白质前体的加工：1、N端fMet或Met的切除；2、二硫键的形成；3、特定氨基酸的修饰；4、切除新生肽链中的非功能片段。蛋白质转运分类：1、翻译-转运同步机制运输：信号链； 2、翻译后运转机制运输：传导链重组DNA技术：按照人的意愿，在体外对DNA进行重组，通过导入细胞的分子，并能大量扩增和繁殖。限制性内切核酸酶：是一类能够识别DNA分子中的某

12、种特定核苷酸的序列，并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。基因工程技术路线：（1）获得目的基因和载体。（2）切割、连接新的重组DNA分子。;（3）重组DNA分子导入受体细胞，并在细胞中复制遗传。（4）对转化子筛选和鉴定。（5）对获得外源基因的细胞或生物体通过培养，获得所需的遗传性状或表达出所需要的产物。核酸凝胶：琼脂糖凝胶电泳和聚丙乙酰胺凝胶电泳。染色：适量溴乙锭（EB）。细菌转化：（1）概念：一种细菌菌株由于捕获来自供体菌株的DNA而导致性状发生可遗传性改变的过程。（2）感受态细胞：易于接受外源DNA的细胞。（3）转化的方法：电击法、CaCl2法（4）CaCl2法是制备大肠杆菌感受态（或许D

13、NA能力增强的状态）最常用的化学方法。聚合酶链式反应技术（PCR）：定义：聚合酶链反应技术，是一种体外快速扩增特定基因或DNA序列的技术。原理：PCR技术实际上是DNA体外合成放大反应。其基本原理是根据细胞分裂中DNA的半保留复制机理。PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成。模板DNA的变性模板DNA与引物的退火(复性) 引物的延伸循环原料：模板DNA、PCR引物、dNTP、Mg2+（保真）、DNA聚合酶方法： 1）高温变性（解链）：94，5S；2）低温退火（引物与模板DNA结合）：50；3）适温延续（DNA合成）：72。实时定量PCR：通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物

14、进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对结果进行分析，计算待测样品的初始模板量。（1）染料：SYBR Green I，激发波长520nm，只能与DNA双链结合，并且只有在与DNA结合时才能被激发出荧光。缺点：只能识别DNA双链而不能区分不同的DNA双链分子。TapMan探针（一端是短波长的荧光基因，一段目的DNA特异的碱基序列、另一端是长波长荧光基因。两荧光基因俱在时，荧光猝灭；而当短波长的荧光基因单独存在时，在激发光下产生绿色荧光）（2）Ct值：产物荧光强度首次超过设定阈值，PCR反应所需的循环数。基因组DNA文库：把某种生物的基因组全部DNA序列切成适当大小，分别与运载体组

15、合，导入微生物细胞，形成克隆，而克隆片段的总汇成为基因组DNA文库。RNA基本操作技术：（1）总RNA的提取：首先，裂解破碎细胞，离心除去细胞核（除去绝大部分DNA），用有机溶剂使蛋白质沉淀变性，同时抽提RNA（在水相），在抽提液中加入酚：氯仿：异物醇（25：24：1），离心后上层为水相，含有RNA，下层为有机相，变性的蛋白质和DNA位于两相界面间。吸出上层水相，在高浓度的乙醇或异丙醇作用下，离心得到RNA沉淀，即细胞总RNA。（2）mRNA的纯化：首先要从细胞中分离出总RNA，然后再从中提取mRNA。个哺乳动物细胞约含10-5ug RNA，其中80 85为rRNA，约15为低分子量RNA (

16、tRNA及核内小分子RNA等)，仅1 5为mRNA。虽然mRNA的大小不一致(数百至数千碱基)，核苷酸序列各异，但它们有相同的3末端多聚腺苷酸尾(Poly A尾)，据此可用寡聚脱氧胸苷酸(oligo(dT）纤维素作为亲合吸附剂，应用亲合层析法从总体RNA中分离纯化mRNA。RNA纯度测定：通过OD260和OD280来测定，OD260/OD280的值在显示纯度良好，有污染则明显低于。（3）cDNA的合成：反转录合成cDNA：1）合成cDNA第一链:反应体系有mRNA、反转录酶、4种dNTP及引物。引物是与mRNA 3端polyA尾互补的oligo-dT，长12到18个脱氧胸腺嘧啶。在反转录酶的作

17、用下，以mRNA为模板可合成互补的DNA单链，即cDNA第一链。2）合成cDNA第二链:采用外加引物合成法可克隆mRNA的5瑞，获得全长的cDNA。这是在cDNA第一链合成后，用末端转移酶在其3尾端加oligo-dG，然后以oligo-dC为引物合成cDNA第二链。cDNA合成中，常用的引物是oligo dT核酸杂交：用放射性特异DNA探针用于高密度的菌落杂交筛选。是基因文库筛选中最常用的一种方法。SNP（单核苷酸多态性）：指基因组DNA序列中由于单个核苷酸的突变而引起的多态性。cSNP（基因编码区SNP）分为：同义cSNP、非同义cSNPSNP检测技术：基因芯片技术、Taqman技术、分子信

18、标技术、焦磷酸测序法。蛋白质组：一个细胞或一个组织或一个机体的基因组所表达的全部蛋白质。蛋白质组学：是从整体的角度，分析细胞内动态变化的蛋白质组成成分、表达水平和修饰状态，了解蛋白质之间的相互作用和联系，揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律的一门新的学科。双向电泳技术：结合了等电聚焦和SDS-聚丙烯酰胺凝胶双向电泳，根据等电点和相对分子量来分离蛋白质。蛋白质印迹法（Western blotting）：依据被测蛋白能与特异性抗体结合的特性，测量蛋白质的相对分子质量。步骤：蛋白质样品的制备；经过SDS-PAGE分离样品；分离的蛋白转移到膜载体上，转移后首先将膜上未反应的位点封闭起来以抑制抗体的非特异性

19、吸附；用固定在膜上的蛋白质作为抗原，与对应的非标记抗体（一抗）结合；洗去未结合的一抗，加入酶偶联或放射性同位素标记的二抗，通过显色或放射自显影法检测凝胶中的蛋白成分。蛋白质的质谱分子技术：超敏性检测蛋白质质量的技术。分类：基质辅助的激光解析电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF）、电喷雾质谱（ESI-MS）基因表达系列分析技术（SAGE）：一种以DNA序列测定为基础定量分析全基因组表达模式技术，能够直接读出任何一种细胞类型和组织的基因表达信息。原位杂交（ISH）：用标记的核酸探针，经放射自显影或非放射检测体系，在组织、细胞、间期核及染色体上对核酸进行定位和相对定量研究的一种手段，通常分为RNA

20、原位杂交和染色体原位杂交两大类。核酸杂交：互补的核苷酸序列通过Waton Crick 碱基配对形成非共价键，从而形成稳定的同源或异源双链分子的过程。基因敲除（基因打靶）：（1）概念:通过外源DNA与染色体DNA之间的同源重组，进行精确的定点修饰和基因改造，具有专一性强、染色体DNA可与目的片段共同稳定遗传的特点。%(2)分类： 1）完全基因敲除：通过同源重组法完全敲出细胞或动物个体中的靶基因。2）条件型基因敲除：通过定位基因系统实现特定时间和空间基因敲除。(3)高等动物基因敲除的技术路线：1)构建重组基因载体2)用电穿孔、显微注射方法将重组DNA分子导入胚胎干细胞纯系中酵母单杂交系统：用于研究

21、DNA与蛋白质之间的相互作用。酵母双杂交系统：直接检测细胞内蛋白质间的相互作用。原理：转录激活因子需具有DNA结合结构域（DNA binding ）和转录激活结构域（activation domain. AD）；只有DB和AD结合才能激活转录。RNA干扰（RNA interference，RNAi）：(1)概念:指内源性或外源性双链RNA（dsRNA）介导的细胞内mRNA发生特异性降解，从而导致靶基因的表达沉默，产生相应的功能表型的缺失现象。这一现象属于转录后的基因沉默机制（PTGS）。(2)原理：首先外源的较长的双链RNA分子被Dicer降解为小分子的双链RNA即siRNA，siRNA再与蛋

22、白酶结合并且将双链RNA中的一条链降解，形成RNA诱导的沉默复合体RISC，然后RISC再与细胞中的相应的能配对的mRNA结合，mRNA会被降解，降解后一部分的mRNA被彻底降解，而另一部分的mRNA则被合成双链，并且继续被Dicer降解为小片段的双链siRNA，然后siRNA又继续上述步骤。所以RNA干扰只需要少量的外源双链RNA变可使信号放大，达到全面的基因沉默。基因芯片：制备步骤：1将序列DNA在玻片上固化；2用DNA杂交技术将芯片与cDNA杂交；3经过计算机扫面处理数据，用来分析基因表达调控情况基因芯片分类：（1）Expression ships（表达谱）；（2）Gnomic chip

23、s（基因谱=表达谱+非表达谱）；（3）Sequencing chips（测序、功能）基因表达：从DNA到蛋白质或功能RNA的过程。即基因转录及翻译的过程。对你这个过程调节就称基因表达调控。原核基因调控分类：负转录调控、正转录调控$(1)负转录调控（负控）：没有调节蛋白（阻遏蛋白）存在时基因是开启的, 加入调节蛋白（阻遏蛋白）之后，基因活性被关闭(2)正转录调控（正控）：没有调节蛋白（激活蛋白）存在时基因是关闭的，加入调节蛋白（激活蛋白）之后，基因活性被开启操纵子：是基因表达的协调单位，由启动子、操纵基因及其所控制的一组功能上相关的结构基因所组成。操纵基因受调节基因产物的控制。Z编码-半乳糖苷酶

24、：将乳糖水解成葡萄糖和半乳糖Y编码-半乳糖苷透过酶：使外界的-半乳糖苷（如乳糖）能透过大肠杆菌细胞壁和原生质膜进入细胞内。A编码-半乳糖苷乙酰基转移酶：乙酰辅酶A上的乙酰基转到-半乳糖苷上，形成乙酰半乳糖。；安慰诱导物：如果某种物质能够促使细菌产生酶而本身又不被分解，这种物质被称为安慰诱导物，如IPTG（异丙基- D-硫代半乳糖苷）； TMG（巯甲基半乳糖苷）；ONPG（ O-硝基半乳糖苷）。（1）葡萄糖对lac操纵子的影响：如果将葡萄糖和乳糖同时加入培养基中， lac操纵子处于阻遏状态，不能被诱导；一旦耗尽外源葡萄糖，乳糖就会诱导lac操纵子表达分解乳糖所需的三种酶。研究发现，葡萄糖对lac

25、操纵子表达的抑制是间接的。例如，有一个大肠杆菌突变体，它在糖酵解途径中不能将葡萄糖-6-磷酸转化为下一步代谢中间物，这些细菌的lac基因能在葡萄糖存在时被诱导合成。说明不是葡萄糖而是它的某些降解产物抑制lac mRNA的合成，葡萄糖的这种效应成为代谢物阻遏效应。（2）乳糖操（lac）纵子：乳糖操纵子真正的诱导物异构乳糖（别乳糖）。乳糖操正控机制：1)葡萄糖存在时，cAMPase具有活性，形成cAMP-CRP复合物，转录因子有活性，基因开启。2)无葡萄糖时，葡萄糖代谢产物抑制cAMPase活性，基因开启受到抑制。本底水平表达：非诱导状态下，有少量的lacmRNA酶（乳糖mRNA酶）的合成。，代谢

26、物阻遏效应：葡萄糖的某些代谢产物抑制了lacmRNA的合成，使得细菌无法分解半乳糖。（3）大肠杆菌乳糖操纵子受控过程：1）葡萄糖、半乳糖同时存在，细菌的生长呈现出2次曲线，cAMP的表达为1次曲线2）只有葡萄糖时，葡萄糖代谢产物抑制cAMP酶的活性，cAMP不表达，没有cAMP-CRP的结合，lacmRNA无法合成，基因不表达。3）只有半乳糖是，cANP酶表达，cAMP量增加，cAMP-CRP复合物与启动子结合，lacmRNA合成，基因表达。4）二者皆无，基因不表达。色氨酸（trp）操纵子（弱化子模型）：在低色氨酸含量情况下，核糖体缓慢经过两个AUG，导致mRNA前导区3、4区互补配对（形成发

27、夹结构），形成抗终止子构型，有利于色氨酸生产基因的转录；在高色氨酸含量情况下，核糖体快速通过两个AUG，mRNA前导区2、3区互补配对（形成发夹结构）终止转录，色氨酸生产相关基因被关闭。（1）原因：阻遏物从有活性向无活性转变速度较慢，而弱化子模型能更为快速地做出反应。而阻遏物系统依旧存在作用是，在有大量外源色氨酸存在时阻止非必须的先导mRNA的合成，是的合成更为经济。/（2）弱化子：可导致DNA转录过早终止的一段DNA序列。（3）trp操纵子的阻遏系统：低Trp时：阻遏物不结合操纵基因；高Trp时：阻遏物+Trp合操纵基因。（4）trp 操纵子的弱化机制：衰减子（attenuator）/弱化子

28、（DNA中可导致转录过早终止的一段核甘酸序列（123-150bp区）；前导序列（leader sequence）（在trp mRNA5端trpE基因的起始密码前一个长162bp的mRNA片段。）真核生物基因结构与转录活性：（选择，填空）（1）一条成熟的mRNA只能翻译一条多肽链（亚基、蛋白质），没有多基因操纵子。（2）真核细胞DNA与组蛋白和非组蛋白结合，只有小部分DNA是裸露的。（3）高等真核细胞DNA中有许多部分不转录，某些DNA序列重复出现上百次，真核细胞基因中还有内含子。（4）真核生物能够进行有序地根据生长发育需要对DNA片段进行重排，还能够在需要情况下增加某些基因的拷贝数。（5）基因

29、转录的调控区很大，距离核心启动子有几百几千碱基对，不直接影响启动子对于RNA聚合酶的亲和程度，而通过改变整个控制基因5上游区的DNA构型来影响它与RNA聚合酶的结合能力。（6）真核生物的RNA在细胞中合成，经过转运穿膜，在胞质中翻译（7）有复杂的成熟和剪接过程。基因家族：真核生物的基因组中有很多来源相同、结构相似、功能相关的基因。基因簇：同一家族中的成员有时紧密地排列在一起成为基因簇。真核基因的断裂结构：（1）外显子和内含子外显子(Exon) ：真核细胞基因DNA中的编码序列，这些序列被转录成RNA并进而翻译为蛋白质。10%。内含子(Intron) ：真核细胞基因DNA中的间插序列，这些序列被

30、转录成RNA，但随即被剪除而不翻译。（2）外显子内含子链接区的特征：内含子两端不存在同源性，序列不能互补；序列区短，但高度保守（3）外显子内含子可变调控：组成型剪接：一个基因的转录产物通过剪接只能产生一种成熟的mRNA。选择性剪接：同一基因的转录产物由于不同的剪接方式形成不同mRNA。 真核生物DNA水平上的基因表达调控：（1）染色质结构与基因表达调控（2）基因丢失（3）基因扩增（4）基因重排|（5）DNA的甲基化与基因调控： 1）DNA的甲基化：两种甲基化酶：日常型甲基转移酶和从头合成型甲基转移酶 2）DNA甲基化抑制基因转录的机理：DNA甲基化导致某些区域DNA构象变化，从而影响了蛋白质与

31、DNA的相互作用,抑制了转录因子与启动区DNA的结合效率。 3）DNA甲基化与X染色体失活：雌性胎生哺乳动物细胞中两条X染色体之一在发育早期随机失活，果蝇，雄性个体中x染色体超表达线虫，XX染色体共同表达量相当与雄性个体中X的表达量。剂量补偿效应：1基因活化：1）处于活跃状态的基因（染色浅染）比非活性状态的DNA更容易被DNA酶1降解；2）右旋型变为左旋型（Z-DNA），导致结构基因暴露；3）组蛋白的变化（乙酰化修饰）；4）甲基化程度；2基因扩增：在蛋白质形成过程中发生多次DNA复制，增加基因拷贝数。3基因丢失：部分组成细胞会出现基因丢失，只有生殖细胞生成细胞会保有的基因。真核基因转录的主要组成：（1）顺式作用元件：影响自身基因表达活性的非编码DNA序列，组成基因转录的调控区。（2）启动子：在DNA分子中，RNA聚合酶能够识别、结合并导致转录起始的序列。；（3）增强子：能使与它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列。（4）沉默子：某些基因含有负性调节元件沉默子，当其结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。（5）反式作用因子：1）概念：能直接或间接地识别或结合在各类顺式