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1、生化分离工程习题库 系别： 专业： 班级： 学号： 姓名： 专业： 班级： 学号： 姓名： * *生化分离工程试题一、选择题1. 下列哪项属于初步纯化的单元操作（ ）A. 萃取 B. 结晶 C. 离子交换层析 D. 亲和层析2.在悬浮液的预处理过程中，常采用哪些具体的方法.( )A.加热 B.调节悬浮液的PH值 C.凝聚和絮凝 D.使用助滤剂3.在悬浮液中去除杂蛋白操作中,下列哪些方式是不可逆变性沉淀杂蛋白. ( )A.加热 B. 有机溶剂沉淀C.盐析 D. 金属离子沉淀4.在悬浮液的预处理过程中，哪种方法改变了滤饼的结构.( )A.稀释 B. 凝聚 C.絮凝 D.使用助滤剂5.下列预处理方法

2、中，因架桥作用促进过滤的方法是 （ ）A. 调节pH B. 絮凝 C. 加热 D. 加助滤剂6.下列预处理方法中，能使菌体聚集而易于过滤的方法是 （ ）A. 调节pH B. 絮凝 C. 加热 D. 稀释7.凝聚是指由于胶粒间双电层电排斥作用 ，而使胶体体系不稳定的现象。A、 降低，电位下降 B、降低，电位上升C、升高，电位上升 D.升高，电位下降8.发酵液中通常含有大量的无机离子需要在预处理时将其去除，用下列哪种试剂去除发酵液中的Ca2+最合适（ ）A.草酸 B.草酸钠 C.碳酸 D.碳酸钠9.在蛋白质固相析出操作中,下列哪些方式易导致卵清蛋白发生不可逆变性沉淀. ( )A. 硝酸汞 B. 丙

3、酮 C. 硫酸铵 D. 10%TCA10.在蛋白质固相析出操作中,下列哪些方式易导致蛋白发生可逆沉淀. ( )A.加热 B. 有机溶剂沉淀C.盐析 D. 重金属离子沉淀11. 有机溶剂沉淀蛋白质中,理论上主要基于何种原因导致蛋白发生可逆不变性沉淀.( )A.破坏水膜 B.滑动面电位下降 C.溶剂介电常数降低 D形成络合物12. 在细胞破碎的操作中,下列哪些方法属于固体剪切力导致细胞破碎的方式.( )A. 超声波 B.冻结融化 C.球磨法 D.X-press13. 在分离基因工程蛋白时，采用下列哪种方法进行细胞破碎对蛋白的破坏最轻（ ）A. 超声波法 B. 高压匀浆法 C. X-Press法 D

4、. 干燥法14.下列细胞破碎方法哪种属于非机械法（ ）A. 超声波法 B. 高压匀浆法 C. 细胞破碎 D. 渗透压冲击15.利用高速球磨法破碎细胞，在同样的破碎条件下，下列哪种微生物的细胞破碎率最高（ ）A. 革兰氏阳性菌 B. 革兰氏阴性菌 C.酿酒酵母 D.热带假丝酵母16.利用高压匀浆法破碎细胞，在同样的破碎条件下，下列哪种微生物的细胞破碎率最高（ ）A. 面包酵母 B. 大肠杆菌 C.酿酒酵母 D.热带假丝酵母17. 在细胞破碎的操作中,下列哪种方法属于液体剪切力导致细胞破碎的方式.( )A. 超声波 B.冻结融化 C.球磨法 D.匀浆法18. 花生四烯酸即二十二碳四烯酸是婴幼儿成长

5、必需的不饱和脂肪酸，现已通过发酵表达实现工业化生产。其提取过程中通常要采用辛烷萃取，如果增大水相pH，其萃取的分配系数会发生下列哪种变化（ ）A. 增大 B. 减小 C. 不变 D. 不能确定19. 红霉素为一弱碱性物质，其提取过程中通常要采用乙酸戊酯萃取，如果增大水相pH，其萃取的分配系数会发生下列哪种变化（ ）A. 增大 B. 减小 C. 不变 D. 不能确定20. 采用由阳离子表面活性剂形成的反胶团溶液萃取蛋白质，理论上下列方法中有利于增大蛋白质的分配系数有（ ）A. 增加无机盐浓度 B. 适当调节水相pH大于该蛋白等电点C. 降低无机盐浓度 D. 适当调节水相pH小于该蛋白等电点21.

6、 下列关于超临界流体说法正确的是（ ）A. 是物质介于气态和液态之间的一种状态B. 超临界流体的溶解性接近液体C. 超临界流体的溶解能力与其密度有关D. 超临界流体的扩散系数大于该物质处于液态时的扩散系数22.采用由AOT形成的反胶团溶液萃取蛋白质，理论上下列方法中有利于增大蛋白质的分配系数有（ ）A. 增加无机盐浓度 B. 适当调节水相pH大于该蛋白等电点C. 降低无机盐浓度 D. 适当调节水相pH小于该蛋白等电点23.利用PEG/DEX双水相体系萃取蛋白质，下列哪种方法可使蛋白质富集在上相（ ）A. 增加PEG分子量 B.减小PEG分子量C. 增加DEX分子量 D. 减小DEX分子量24

7、下图所示为双水相相图，线段AB为系线，M和N分别为总浓度不同两个双水相体系，下列说法正确的是（ ）A. 图中M和N所示的双水相体系在分相后两相体积比相等B. 同一种蛋白质在M和N的上相和下相分配系数不同C. M的上下相组成与N的上下相组成一样D. M的上下相组成与N的上下相组成不一样25.有关双水相萃取说法正确的是（ ）A. 系线越长，分配系数越大 B. 系线越长，分配系数越小C. 系线越长，上下相差别越大D. 系线越长，上下相差别越小26.关于发酵液的乳化现象，不正确的说法是（ ）A.主要是由于蛋白质引起的B.是W/O型乳浊液C.发酵液中存在表面活性剂D.可以通过离心或在发酵液中加入SDS来

8、降低乳化现象27.采用PEG/Dextran双水相萃取蛋白时，下列方法一定能使蛋白向上相富集的是（ ）A. 增大Dextran分子量 B. 增大pH C. 降低PEG浓度 D. 加入少量KCl28.下列关于多级逆流萃取说法正确的是（ ）A. 在同等条件下比多级错流萃取的萃取率高B. 与单级萃取相比溶剂用量更大C. 萃取相中的产物浓度较大D. 多级逆流萃取与索氏提取器的原理基本相同29.多级逆流萃取与多级错流萃取相比， 萃取剂消耗（ ）A、多 B、少 C、差不多 D.以上都不对30.下列哪种方法不属于非机械法导致细胞破碎的方式 ( ) A. 超声波 B.冻结融化 C.渗透压冲击 D.溶菌酶法31

9、化学法破碎细胞具有什么特点( )A. 破碎率高 B. 产物释放完全 C. 通用性差 D. 杂质含量高32.下列膜分离技术中，可用于蛋白质类产品脱盐的方法有（ ）A. 电渗析 B. 透析 C. 超滤 D. 反渗透33.下列哪一种膜分离过程不是依据筛分的原理进行分离的（ ）A. 超滤 B. 微滤 C. 电渗析 D. 纳滤34浓差极化常发生于膜分离过程中，通常可以采取下列何种操作来缓解浓差极化效应( )A. 高流速 B.高温 C.较高料液浓度 D.高压35.下列哪种膜材料表面带有电荷 ( )A.超滤膜 B.微滤膜 C.纳滤膜 D.反渗透膜36.常用下面的哪种方法除去生啤中的酵母菌及细菌（ ）A.高温

10、高压灭菌 B.微滤 C.超滤 D.电渗析37. 以下关于几种膜分离方法说法正确的有（ ）A. 超滤的操作压力高于反渗透膜分离操作压力B. 利用截流分子量为200的纳滤膜分离技术不能将SO42-截流C. 纳滤膜有明显的孔道结构D. 相同条件下，反渗透膜的水通量大于纳滤膜的水通量38.可用于链霉素浓缩的方法有：（ ）A.纳滤 B. 超滤 C. 微滤 D. 反渗透39.除去发酵液中的热源通常用（ ）A. 反渗透 B超滤 C.透析 D. 微滤40.电渗析其装置由许多阴离子和阳离子交换膜交替排列而成，其中RSO3Na为 膜，可使 离子选择性透过。A.阳离子交换膜，阴 B. 阴离子交换膜，阳 C. 阳离子

11、交换膜，阴 D. 阴离子交换膜，阴41 在食品工业,生物化工以及水处理方面,下列哪种膜操作可以截留大部分单价盐而使溶剂通过,并且操作压力比较高. ( )A.超滤 B.微滤 C.渗析 D.反渗透42能用于分离和浓缩约由10个氨基酸残基构成的多肽的膜分离方法是。 ( )A.超滤 B.微滤 C.纳滤 D.反渗透43. 超滤膜的截留相对分子量是指：（ ）A. 该超滤膜所能截留的最小的溶质的分子量B. 能完全留流分子量等于截留相对分子量的分子C. 是指截留率为90%的溶质相对分子量D. 是指直径与该超滤膜孔径相当的球状蛋白的分子量44.利用D101树脂吸附藏红花素，在下列哪种溶剂中吸附力最强（ ）A.

12、氯仿 B.乙醇 C. 水 D.乙酸乙酯45.利用D101树脂吸附藏红花素，下列哪种溶剂的洗脱能力最弱（ ）A. 氯仿 B.乙醇 C. 水 D.乙酸乙酯46.利用活性炭作吸附剂，在水溶液中对下列哪种物质的吸附力最弱（ ）A.蛋白质 B.多肽 C.氨基酸 D.二肽47.利用硅胶做固定相进行吸附柱层析，下列哪种溶剂的洗脱能力最弱（ ）A.水 B.乙醇 C.氯仿 D.乙酸乙酯48. 下列哪种离子与DEAE-纤维素（Cl型）的亲和力最大（ ）A F- B. Cl- C. Br- D. I-49.非极性分子与非极性分子存在的作用力是（ ）A.氢键B.定向力C.诱导力D.色散力50. 下列分离技术中，不能用

13、于去离子水制备的方法有（ ）A. 离子交换柱层析 B. 膜蒸馏 C. 渗透蒸发 D.电渗析51. 可用于去除注射类药品中热源物质的是. ( )A.透析 B.凝胶层析 C. 亲和层析 D.离子交换层析52.根据物质极性大小不同分离的方法是（ ）A. 吸附层析 B. 离子交换层析 C. 凝胶层析 D.亲和层析53. 吸附作用是指物质从 浓缩到固体表面的过程。A、 液体 B气体 C流体 D.固体54. 下列哪种离子交换树脂适宜制备软水（ ）A. RSO3Na B. RSO3H C. RCOOH D. RCOONa55. 在凝胶过滤（分离范围是5000400000）中，下列哪种蛋白质最先被洗脱下来（

14、）。A、细胞色素C（13370） B、肌球蛋白（400000）C、过氧化氢酶（247500） D、血清清蛋白（68500）56. 下列关于正相色谱与反相色谱说法正确的是（ ）。A. 正相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性 B 正相色谱层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度慢 C. 反相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性 D. 反相色谱层析过程中，极性大的分子比极性小的分子移动的速度慢57. 下列分离技术中，不能作为蛋白质溶液中的无机盐离子去除的方法是（ ）A. 离子交换柱层析 B. 透析 C. 超滤 D. 凝胶过滤58. 不能用于固液分离的手段为（ ）A、过滤 B超滤

15、C双水相萃取 D、离心59.薄层色谱操作中，下列哪个因素不会影响目标物质的阻滞因素Rf值（ ）A.展开剂的组成 B.固定相C.温度 D展开时间60. 分配层析中的载体 A、是固定相B、是流动相 C、能吸附溶剂构成固定相D、对分离有影响二、判断题1. 膜分离时，当截留率等于1时，表明溶质能自由透过膜。（ ）2. 色谱分离技术中固定相都是固体。（ ）3. 在采用反胶团萃取蛋白质时，在其他条件不变的条件下，增大无机盐浓度，蛋白质分配系数一定减小。（ ）4. 凝聚与絮凝作用的原理是相同的，只是沉淀的状态不同。（ ）5. 采用凝胶层析分离时，在所用的凝胶的分离范围内，溶质分子量越小洗脱越快。（ ）6.

16、高压匀浆法破碎细胞具有破碎率高、产物释放完全等特点，但不适合霉菌的细胞破碎。（ ）7. 采用截流相对分子量为250的纳滤膜浓缩分子量为216的6-氨基青霉烷酸时，该纳滤膜对此分子的截留率可能大于95%。（ ）8中空纤维膜组件要求对分离的悬浮液进行预处理。（ ）9. 采用CTAB形成的反胶团萃取淀粉酶时，应将水相pH调到大于淀粉酶的等电点。（ ）10. 双水相相图中蛋白质在系线较长的双水相体系中，上下相分配差异较大。（ ）11.助滤剂是一种可压缩的多孔性颗粒。（ ）12. 压力和温度微小变化会引起超临界流体密度大的变化。（ ）13. 在PEG/Dextran双水相体系中，在其他条件不变的条件下，

17、增大PEG分子量蛋白质分配系数一定减小。（ ）14. 流动相为气体的色谱称为气相色谱。（ ）15. 凝胶层析会使得大分子后流出，小分子先流出。（ ）16. 物理法破碎细胞具有产物释放完全的特点。（ ）17. 超滤膜的截流相对分子量是指该超滤膜所能截流的最小的溶质的分子量。（ ）18中空纤维膜组件单根膜管破损时需要更换整个膜组件。（ ）19. 采用AOT形成的反胶团萃取淀粉酶时，应将水相pH调到小于淀粉酶的等电点。（ ）20. 双水相相图中蛋白质在系线较长的双水相体系中的分配系数较大。（ ）21. 反相层析的固定相和流动相都含有高极性基团，可用来分离生物物质。22. 酸性、中性、碱性氨基酸在强碱

18、性阴离子交换树脂上的吸附顺序为酸性中性碱性氨基酸。23. 采用活性炭为吸附剂时，所用洗脱剂应从高极性开始，逐渐降低洗脱剂的极性。24. 临界温度是气体液化的最高温度。25. 凝胶层析会使得大分子后流出，小分子先流出。26.离子交换树脂是一种不溶于酸、碱及有机溶剂的固体化合物。27.细胞壁破碎的主要阻力是连接细胞壁网状结构的共价键。（ ）28.除去发酵液中的杂蛋白质的最常用方法是离心分离。（ ）29.在蛋白质盐析操作中，溶液中蛋白质浓度越高越好。（ ）30.离子交换的推动力是离子浓度差。（ ）31. 发酵液预处理的目的是浓缩目标产物。( )32.在蛋白质盐析操作中，溶液中蛋白质浓度越高越好。(

19、)33蛋白质为两性电解质，改变pH可改变其荷电性质，pHpI蛋白质带负电。( )34离子交换树脂的交联度大，其网孔大，机械强度大。( )35.利用阳离子交换树脂去除钙镁离子后的水称为无盐水。( )36.反胶团萃取时无机离子浓度越低越好。（ ）37.絮凝剂须有长链的线性结构，越长越好。（ ）38.临界压力是液化气体所需的压力。（ ）39.超临界流体温度不变条件下，溶解度随密度（或压力）的增加而增加，而在压力不变时，温度增加情况下，溶解度有可能增加或下降。（ ）40.由于pH值可能对蛋白的稳定性有较大的影响，故一般通常采用改变离子强度的梯度洗脱。（ ）41.高压匀浆法可破碎高度分枝的微生物。（ ）

20、42.在沉淀目标蛋白时，可采用Al3+进行凝聚。（ ）43.测定阴离子交换树脂的总交换容量可采用Cl-将OH-交换下来后用稀盐酸滴定洗脱液中OH-的量即得到树脂的总将换容量。（ ）44.膜分离是能耗较高的单元操作。（ ）45.超声波破碎法的有效能量利用率极低，操作过程产生大量的热，因此操作需在冰水或有外部冷却的容器中进行。（ ）46.若两性物质结合了较多阳离子（如Ca2+、Mg2+、Zn2+等），则等电点pH升高。（ ）47.冻结-融化法冻结的作用是破坏细胞膜的疏水键结构，增加其亲水性和通透性来破坏细胞的。（ ）48.采用凝胶过滤分离蛋白质主要取决于蛋白质分子的大小，先将蛋白质混合物上柱然后进

21、行洗脱，小分子的蛋白质由于所受排阻力较小首先被洗脱出来。（ ）49.不同高分子化合物的溶液相互混合可形成两相或多相系统，如葡聚糖与聚乙二醇（PEG）按一定比例与水混合后，溶液先呈浑浊状态，待静置平衡后，逐渐分成互不相溶的两相，上相富含PEG，下相富含葡聚糖。（ ）50. 物质的临界温度越低，这种物质越适合作为超临界流体萃取剂（ ）三、名词解释1.凝聚2.絮凝3.助滤剂4.错流过滤5.离心过滤6.盐析7.盐溶8.萃取9.反萃取10.分配常数11.分配系数12.分离因数13.乳化14.双水相萃取15.胶团16.反胶团17.反胶团萃取18.超临界流体19.夹带剂20.临界温度21.临界压力22.膜污

22、染23.浓差极化24.膜的截留相对分子质量25.截留率26.电渗析27.离子交换28.吸附29.阻滞因子Rf30.色谱图31.基线32.色谱峰33.保留时间34.保留体积35.正相色谱36.反相色谱37.相对保留时间38.相对保留体积39.分离度40.临界压力四、简答题1.简述生物物质的特点？2.简述生化分离的特点？3.以发酵液为例，简述生化分离的一般工艺过程？4.简述生化分离的选择依据？5.发酵液为什么要预处理？6.常见的发酵液预处理的方法有哪些？7.简述凝聚、絮凝与盐析的区别与联系？8.影响絮凝的因素有哪些？9.在固液分离操作过程中，如何选择助滤剂？10.改善过滤的方法有哪些？11.常见的

23、细胞破碎方法有哪些？12.影响高速球磨法的因素有哪些？13.比较各种细胞破碎方法的原理及特点？14.简述细胞破碎的选择依据？15.简述差速离心、速率区带离心及等密度梯度离心的特点？16.沉淀与结晶有何区别与联系？17.影响盐析的因素有哪些？18.影响有机溶剂沉淀的因素有哪些？19.如何选择用于盐析作用的盐？20.有机溶剂沉淀中，有机溶剂的选择应该注意哪些？21.在有机溶剂萃取中，作为萃取剂的有机溶剂应满足哪些要求？22.有机溶剂萃取的影响因素有哪些？23.举例说明在有机溶剂萃取中pH对弱电解质的萃取效果有何影响？为什么？24.简述萃取的方式有哪几种？各有什么特点25.乳化对有机溶剂萃取有什么影

24、响？如何减轻？26.简述双水相萃取有何特点？27.浅谈双水相萃取体系常见的类型与原因，及其在生物活性物质萃取中所体现的优势28. 浅谈反胶团的形成过程、结构特征及萃取蛋白质的影响因素29. 浅谈双水相萃取体系的影响因素30. 简述超临界流体的性质，以及超临界流体萃取的原理31. 超临界流体萃取中，作为萃取溶剂的超临界流体必须具备什么条件32. 膜组件在形式上有哪几种？各自有何优缺点？33.以静压力差为推动力的膜分离过程有哪几种？各有何特点34.影响膜分离的因素有哪些？35.如何减轻浓差极化现象的发生？36.什么是膜污染？影响膜污染的因素有哪些？怎么样减轻膜污染？37.以蒸气分压差为推动力的膜分

25、离过程有哪几种？各有何应用？38.以浓度差为推动力膜分离过程有哪几种？各有何特点39.以电位差为推动力膜分离过程有哪几种？各有何特点40.影响物理吸附的因素有哪些？41.常见的物理吸附剂有哪几种？42.简述薄层吸附色谱的操作？43.硅胶薄层层析有何应用？44.简述吸附柱色谱的操作45.影响Rf的因素有哪些？46.离子交换树脂在结构上由哪几部分组成？47. .离子交换树脂在使用前为什么要预处理？48.针对分离生物小分子（如氨基酸，抗生素，有机酸），与分离生物大分子（如蛋白质）两个领域，在离子交换剂选择上有何不同，为什么？49.简述离子交换柱层析的操作50.影响离子交换选择性的因素有哪些？ 五、论述题1. 论述细胞壁破碎常用方法，并比较各方法的特点。2. 举例分析微滤、超滤、纳滤及反渗透这四种膜分离的特点及其应用。3. 论述生物物质常用的萃取技术有哪几种？各有什么优势？有何应用？4. 以分离天冬氨酸（pI2.77）和赖氨酸(pI9.74)这二种混合氨基酸为例，试论述离子交换柱层析的原理、一般过程及注意事项。5.请用反胶团萃取和反萃取的原理分离细胞色素C(Mr12384，pI10.6）、溶菌酶(Mr14300，pI11.1 )、核糖核酸酶a (Mr13683，pI7.8 ) 这三种蛋白质混合物，并说明理由。6.根据溶质与固定相作用原理的不同，试论述色谱分离有哪几种技术？各有何用处？