《植物组织培养技术》植物脱毒与快繁.docx

1、植物组织培养技术植物脱毒与快繁植物组织培养技术植物脱毒与快繁 模块介绍本模块针对组培研发岗位的工作职责与任职要求，编排了试验方案设计和数据调查与分析二个实训项目，主要内容包括组培的基本理论、提高组培苗遗传稳定性的措施、组培试验方案的制订等，重点阐述了组培快繁的程序与类型、组培研究的技术路线与试验设计方法、组培快繁的常见问题、组培数据调查与分析方法等。在理论学习的同时，开展项目实践活动，培养学生会设计组培试验、撰写试验方案、编制组培试验观察表和技术指标统计分析，具备组培研发工所要求的理论知识、技能水平和相应的职业素质。模块结构设计见表1。表1 模块结构设计项目名称工学任务项目1 蔬菜组培与快繁/

2、马铃薯脱毒与快繁任务11微茎尖培养任务12脱毒苗快繁任务13微型薯诱导项目2 果树组培与快繁/蓝莓组培与快繁任务21初代培养任务22继代培养任务23瓶外生根与驯化移栽项目3 果树组培与快繁/草莓脱毒与无毒苗繁育任务31草莓脱毒任务32 草莓脱毒苗培育项目4 花卉组培与快繁/蝴蝶兰组培与快繁任务41 初代培养任务42 继代培养任务43 壮苗生根培养任务44 驯化移栽任务45 蝴蝶兰组培操作程序与人工授粉项目1 蔬菜组培与快繁/马铃薯脱毒与快繁一、学习目标（一）终极目标掌握植物脱毒与鉴定技术，培育马铃薯等蔬菜脱毒、快繁与脱毒苗的鉴定技术。（二）促成目标1.熟悉植物脱毒的意义、原理与方法，能够运用脱

3、毒技术培育马铃薯等蔬菜脱毒苗；2.掌握脱毒苗鉴定技术，清楚马铃薯等蔬菜脱毒苗鉴定方法；3.清楚马铃薯等蔬菜脱毒苗的保存与无病毒苗繁育体系、方法；4.提高操作水平和分析解决问题能力，培养团队精神、敬业精神、责任意识。二、学习内容1蔬菜组织培养概况；2.马铃薯组培概况；3.马铃薯脱毒种薯繁育流程；4.脱毒苗的优势(含病毒的种类、传染途径、表现症状与危害)；5.植物脱毒技术；6.脱毒苗鉴定技术；7.马铃薯脱毒苗培育与鉴定；8.马铃薯脱毒苗快繁与微型薯诱导；9.马铃薯等蔬菜脱毒苗的保存与繁殖；10.甘薯脱毒与快繁技术要点（拓展）；11.大蒜脱毒与快繁技术要点（拓展）；12.紫背天葵组培与快繁技术（拓展

4、）；13.结球甘蓝组培与快繁技术（拓展）。三、知识点1.蔬菜组织培养概况；2.马铃薯组培概况；3.马铃薯脱毒种薯繁育流程；4.脱毒苗的含义、实质与培育优势(含病毒的种类、传染途径、表现症状与危害)；5.植物脱毒技术（热处理、微茎尖培养、其它脱毒方法）；6.脱毒苗鉴定技术（指示植物法、嫁接法等）；7.马铃薯脱毒苗培育与鉴定；8.马铃薯脱毒苗快繁与微型薯诱导（实验室诱导、温室生产）。四、技能点1.热处理和微茎尖培养脱毒；2.培养基配方设计与无菌操作；3.马铃薯脱毒苗鉴定；4.马铃薯脱毒苗快繁；5.微型薯诱导。五、教学重点1. 脱毒苗的含义与实质与优势；2. 热处理脱毒与微茎尖培养脱毒；3. 马铃薯

5、脱毒技术；4. 马铃薯等脱毒苗鉴定技术；5. 马铃薯脱毒苗繁育体系；6. 影响马铃薯脱毒与快繁的因素；7. 微型薯诱导方法。六、教学难点1.脱毒苗的含义与实质；2.热处理脱毒与微茎尖培养脱毒原理；3.脱毒苗鉴定；4.影响马铃薯脱毒与快繁的因素；5.微茎尖剥离。七、教学设计教学任务教学设计任务1-1微茎尖培养1.教师提前下发工单，学生按单要求自学，完成培养方案（课下完成）；2.实践环节1:学生分组利用课余时间完成培养基制备；现场操作3.教师精讲马铃薯脱毒技术（50min）：学导式、启发式病毒危害（10min）脱毒苗的的含义、实质与优势（5min）脱毒马铃薯的表现（4min）热处理脱毒（10min

6、）微茎尖培养脱毒（20min）其它方法脱毒（6min）。4.实践环节2：学生分组进行材料灭菌、微茎尖剥离、接种（130min）；现场操作5.教师精讲脱毒苗鉴定技术（75min）启发式、动画辅助：指示植物法（35min）抗血清鉴定法（5min）酶联免疫吸附鉴定法（6min）其它鉴定法（4min）马铃薯脱毒效果鉴定（3min）农艺性状鉴定（2min）马铃薯脱毒苗的保存与繁殖（5min）脱毒苗的繁育体系（10min）马铃薯脱毒种薯繁育工艺流程与生产体系（5min）。6.实践环节3：分组培养与管理，注意日常跟踪观察，及时处理污染瓶苗。跟踪观察、现场操作任务1-2脱毒苗快繁任务1-3微型薯诱导1实践环节

7、1：分组制定脱毒苗快繁与微型薯诱导方案；任务导向式、学导式2.实践环节2. 分组观察初代苗（5min）；现场操作3.实践环节3：分组配制继代增殖培养基、微型薯诱导培养基，与实践环节2先后安排（10min）；任务导向式、现场操作4.实践环节4：（3天后安排）继代转接；现场操作5.实践环节5：（1个月后安排）继代增殖苗、微型薯集中观察，并制备生根培养基配方。启发式、讨论式6.实践环节6：（3天后安排）生根转接；现场操作7.实践环节7：（20天后安排）生根苗、微型薯观察，现场操作8.实践环节8：撰写项目实训报告。注：教师关注马铃薯培养进展，督促学生跟踪观察，及时分析处理异常问题。八、拓展学习1.甘薯

8、脱毒与快繁技术要点；2.大蒜脱毒与快繁技术要点；3.紫背天葵组培与快繁技术；4.结球甘蓝组培与快繁技术。九、作业1.分组完成项目实训报告。十、学习建议1.项目1（包括项目24）是在前期学习掌握组培操作与试验设计等技术的基础上，应用组培技术进行项目实训或真正生产。建议撰写培养方案时，要全面、综合应用所学知识科学设计、全面规划，综合考虑。2.建议两人或组内合作学习，集思广议，客观分析对待组培过程中出现的问题。3.善于回忆、联想和跟踪观察，多思多问，注重操作细节；4.项目生产持续时间较长，要有持之以恒精神。十一、教学评价项目 1评价单教学模块模块5 植物脱毒与快繁项目名称项目1 蔬菜组培与快繁/马铃

9、薯脱毒与快繁总分任务名称任务1.1微茎尖培养；任务1.2脱毒苗快繁；任务1.3微型薯诱导项目组别组 员项目组长评价内容与标准标准分值评价形式小组自评（20%）组间互评（20%）教师评价（60%）培养方案和实训报告：方案、报告格式正确，内容全面，书写正规5培养方案项目报告方案科学性、针对性、可行性强；10报告总结全面，分析科学，结论合理10过程控制：能够动态跟踪观察5跟踪观察观察记录齐全、完整、细致10异常问题分析科学，处理及时、合理10技术水平：按无菌操作流程及培养方案要求操作10操作规范、熟练、质量高10种苗质量高10小组表现：组长认真负责，分工合理，组织得力5跟踪观察组员态度积极主动，有协

10、作精神，责任心强5小组工作效率高，合作学习氛围浓，有创新意识，分析解决问题能力强10总 分100教师点评：组长签字 教师签字 签字日期年 月 日签字日期年 月 日项目2 果树组培与快繁/蓝莓组培与快繁一、学习目标（一）终极目标掌握蓝莓快繁技术，培育蓝莓组培苗。（二）促成目标1.能通过茎尖、茎段诱导生长获得蓝莓嫩茎梢；2.掌握蓝莓苗瓶外生根与驯化移栽技术；3.熟练进行蓝莓组培苗快繁，培育健壮增殖苗；4.提高操作水平，培养团队精神和责任意识。二、学习内容1.蓝莓组培概况；2.蓝莓组培快繁流程与植株再生途径；3.茎尖和茎段培养方法；4.蓝莓瓶外生根与驯化移栽技术；5.组培苗特点；6.组培苗生境与实生

11、苗生境的比较；7.组培苗驯化移栽的目的、原则与方法；三、知识点1.蓝莓组织培养概况；2.蓝莓组培快繁流程；3.茎尖和茎段培养方法；4.茎尖和茎段培养的影响因素；5.蓝莓瓶外生根技术；6.蓝莓组培苗驯化移栽技术；7.组培苗特点；8.组培苗生境与实生苗生境的差异；9.蓝莓组培植株再生途径；10.组培苗驯化移栽目的、原则与方法。四、技能点1.蓝莓外植体采集与处理；2.蓝莓培养基配方设计；3.蓝莓无菌操作；4.蓝莓瓶外生根处理；5.蓝莓组培苗驯化移栽。五、教学重点1.蓝莓组培快繁流程；2.茎尖、茎段培养及影响因素；3.蓝莓瓶外生根技术；4.蓝莓组培苗驯化移栽技术；5.组培苗特点；6.组培苗生境与实生苗

12、生境的差异；7.蓝莓外植体采集与处理；8.蓝莓培养基配方设计；9.蓝莓无菌操作。六、教学难点1.茎尖、茎段培养的影响因素；3.蓝莓瓶外生根技术；4.蓝莓培养基配方设计；5.蓝莓组培苗驯化移栽；七、教学设计教学任务教学设计任务2-1初代培养1.教师提前下发工单，提供资料，学生按单要求自学，制定培养方案（课下完成）；学导式、任务导向、引导文式、案例式2.实践环节1:学生分组利用课余时间完成培养基制备；现场操作3.实践环节2：接种用品准备（30min）现场操作安排1个组准备接种用品和接种室灭菌，其它各组检查所需用品是否齐全、够用。4.外植体预处理与灭菌（30min）现场操作枝条剪成12cm茎段，流水

13、冲洗后用1.3%次氯酸钠灭菌，最后无菌水漂洗。要求分组操作，材料修整到位，灭菌彻底。5.实践环节3：初代接种（70min）现场操作、以考促训每人接种5瓶，每瓶接种5个茎段。要求严格遵守无菌操作规程。5.实践环节4：培养与跟踪观察现场观察课外时间跟踪接种后上架培养。要求各组跟踪观察培养变化，并做观察记录，及时处理掉异常苗。6.讨论与总结（10min）启发式、讨论式任务2-2继代培养1.实践环节1：分组配制培养基（90min）与观察组培苗（90min），分组、分项轮流交叉进行，组内边操作边讨论；现场操作、讨论式，分组完成2.实践环节2：（3天后）分组转接芽苗（180min）。要求注意切茎大小的整齐

14、度。组长负责，教师巡回指导。任务导向、现场操作3.实践环节3：继代培养与跟踪观察。接种后上架培养。要求各组跟踪观察瓶苗变化，并做观察记录，及时处理掉异常苗。现场观察课外时间跟踪4讨论与总结（10min）。启发式、讨论式任务2-3瓶外生根与驯化移栽1.2个月后教师安排1个组学生提前进行水苔处理（180min）；引导文、任务导向2.教师现场下发工单及增殖苗观察表，并讨论组培苗驯化移栽相关问题(10min)；任务导向、启发式、讨论式2.实践环节2：学生分组观察蓝莓继代苗（35min）；现场操作、启发式3.实践环节3：学生分组进行基质装盘（90min）；现场操作、任务导向4.实践环节4：出瓶与组培苗生

15、根处理（30min）；现场操作、操作示范、启发式5.实践环节5：栽苗（180min），要求达到质量要求；现场操作，教师、组长巡回检查6.实践环节6：栽后处理（15min）；现场操作7.安排小组轮流管理。任务导向，以考促训八、拓展学习1.非试管快繁技术；2.树莓组培与快繁技术要点；3.樱桃脱毒与快繁。九、作业分组完成项目实训报告。十、学习建议1.蓝莓和草莓同属于浆果类果树，但在组培技术路线与再生途径上却有很大不同。学习时最好比较学习。2.蓝莓组培属于无菌短枝型，在学习茎段、茎尖培养一般方法与要求后再学习比较容易；3.比较瓶外生根与瓶内生根、组培苗驯化移栽与实生苗移栽二者在操作与管理上的不同；4.

16、学会应用逆向思维方法考虑问题。十一、教学评价项目2评价单教学模块教学模块5项目名称项目2 果树组培与快繁/蓝莓组培与快繁总分任务名称任务2.1初代培养；任务2.2 继代培养；任务2.3 瓶外生根与驯化移栽 项目组别组 员项目组长 评价内容与标准标准分值小组自评（20%）组间互评（20%）教师评价（60%）组培苗观察：观察内容全面，观察方法得当10记录完整10瓶外生根处理与驯化移栽：用品准备齐全、适用5按流程操作5操作规范、熟练，动作协调10装盘质量达到基质装填松紧适宜，低于盘沿0.5cm，无杂质10捻苗力度适宜，芽苗基部损伤少10消毒与生根方法正确，药剂浓度和处理时间适宜10移栽质量达到打孔及

17、移栽深浅适宜，布局合理，不能轻易拔出15小组表现：小组成员课下积极自学5组长积极组织，组员态度积极，注重细节，配合默契10总 分100教师点评：组长签字 教师签字 签字日期年 月 日签字日期年 月 日项目3 果树组培与快繁/草莓脱毒与脱毒苗繁育一、学习目标（一）终极目标掌握草莓脱毒与脱毒苗繁育技术。（二）促成目标1能通过形态指标和化学方法确定草莓花粉发育时期；2了解草莓花药预处理与表面灭菌方法；3掌握草莓脱毒处理与检测方法；4掌握草莓脱毒苗快繁方法；5. 清楚草莓无毒苗繁育流程。二、学习内容1草莓生物学特性与组织培养概况；2草莓脱毒与快繁流程；3草莓脱毒方法（微茎尖培养、花药培养、匍匐茎处理）

18、；4草莓花粉发育时期的确定；5草莓脱毒苗鉴定方法；6. 草莓脱毒苗繁育流程与方法。三、知识点1草莓生物学特性与组织培养概况；2草莓脱毒与快繁流程；3草莓脱毒方法（微茎尖培养、花药培养、匍匐茎处理）；4草莓花粉发育时期的确定；5草莓脱毒苗鉴定方法；6. 草莓脱毒苗繁育流程与方法。四、技能点1.草莓脱毒方法；2.草莓花粉发育时期的确定；3.草莓脱毒苗鉴定。五、教学重点1.草莓脱毒与快繁流程；2.草莓脱毒方法；3.草莓花粉发育时期的确定；4.草莓脱毒苗繁育流程与方法。六、教学难点1.草莓花药培养；2.草莓花粉发育时期的确定。七、教学设计教学任务教学设计任务3-1 草莓脱毒方法任务3-2 草莓脱毒苗繁

19、育1.校内教师提前下发工单，学生按单要求自学，撰写自学笔记（课下完成）；2.兼职教师借助实物介绍草莓生物学特性（6min）；实物教学、启发式3.兼职教师详细讲解草莓脱毒方法（匍匐茎脱毒、花药培养脱毒和微茎尖培养脱毒）(64min)。学导式、实物教学、启发式4.兼职教师介绍草莓无病毒苗繁育流程与方法（20min）。案例式、启发式八、拓展学习1.果树花药培养的影响因素；2.单倍体植株的鉴定与染色体加倍技术。九、作业1将受损的花药进行培养,其结果怎样？2.花药培养的花药可能起哪些作用？ 十、学习建议1.草莓属于浆果类果树，与蓝莓、树莓组培比较学习。2.草莓花药培养脱毒与以前所学的营养器官培养有较大不

20、同，学习时注意互相比较；3.学会类比学习方法。十一、教学评价结合阶段性考试进行。项目4 花卉组培与快繁/蝴蝶兰组培与快繁一、学习目标（一）终极目标掌握蝴蝶兰组培快繁技术，生产出蝴蝶兰组培苗。（二）促成目标1.熟悉蝴蝶兰组培快繁概况、快繁流程与植株再生途径；2.会采集和处理蝴蝶兰外植体；3.清楚蝴蝶兰培养基的成分、特点，以及组培产生褐化、黄化的原因与对策；4.掌握蝴蝶兰组培快繁的影响因素；5.掌握蝴蝶兰无菌操作技术要求；6.会驯化移栽蝴蝶兰试管苗；7.提高操作水平和分析解决问题能力，培养团队精神和责任心。二、学习内容1.蝴蝶兰组培概况；2.蝴蝶兰组培与快繁工艺流程；3.蝴蝶兰组培快繁的影响因素；

21、4.蝴蝶兰组培苗褐化、黄化和污染的原因与对策；5.蝴蝶兰组培各阶段培养基配方的成分、特点及培养条件要求；6.蝴蝶兰组培各阶段无菌操作技术要求；7.蝴蝶兰外植体采集、预处理及表面灭菌技术；8.蝴蝶兰组培苗驯化移栽技术。三、知识点1.蝴蝶兰生物学特性；2.蝴蝶兰组培组培与快繁工艺流程；3.蝴蝶兰组培快繁的影响因素；4.蝴蝶兰组培苗褐化、黄化和污染的原因与对策；5.蝴蝶兰外植体选择与处理6.蝴蝶兰配方及培养条件要求；7.蝴蝶兰植株再生途径；8.蝴蝶兰组培各阶段无菌操作技术要求；9.蝴蝶兰组培苗驯化移栽技术。10.水苔选购原则；11.组培苗驯化移栽原则、方法与注意事项；12.人工授粉方法；13.提高组

22、培苗移栽成活率的措施。四、技能点1.蝴蝶兰组培三代培养基制备；2.蝴蝶兰外植体采集与处理；3.蝴蝶兰无菌操作；4.蝴蝶兰组培问题的识别与调控；5.蝴蝶兰驯化移栽。五、教学重点1.蝴蝶兰组培与快繁工艺流程；2.蝴蝶兰组培快繁的影响因素；3.蝴蝶兰组培苗褐化、黄化和污染的原因与对策；4.蝴蝶兰培养基配方设计与培养基制备；5.蝴蝶兰外植体采集与处理；6.蝴蝶兰转接材料修整与接种；7.蝴蝶兰组培苗驯化移栽；8.组培苗驯化移栽原则方法与注意事项；9.水苔的处理。六、教学难点1.蝴蝶兰外植体采集与处理；2.蝴蝶兰转接材料修整与接种；3.蝴蝶兰组培苗褐化、黄化和污染的原因与对策；4.蝴蝶兰组培快繁的影响因素

23、；5.蝴蝶兰原球茎发生型再生途径；6.组培苗驯化原则与移栽要领;7.人工授粉方法。七、教学设计教学任务教学设计任务4-1初代培养一、初代培养基制备（4学时）1.教师提前下发工单，学生按单要求自学，制定蝴蝶兰组培与快繁的方案（课下完成）。2.教师检查自学效果、答疑，概述蝴蝶兰组培（40min）。3.实践环节1:初代培养基配制与灭菌（120min）学生先讨论制备的要点，老师再点评修正，学生再操作。最后师生讨论总结，并说明下节课学习与准备的内容。二、初代培养无菌操作（4学时） 学生做好课前初代培养无菌操作的准备，老师精讲本次课内容，然后学生操作。4.实践环节2：（3天后进行）外植体采集与处理（40m

24、in）：教师边讲边演示操作，然后学生分组采集花梗，并进行预处理。5.实践环节3：无菌操作（100min）教师演示蝴蝶兰初代接种操作过程（20min），然后学生分组进行外植体灭菌、切割、接种，最后上架培养（80min）。6.实践环节4：讨论与总结（20min）师生针对操作存在问题讨论、总结并考评；最后布置作业，安排学生跟踪观察、下发下节课的工单。7.实践环节5：分组培养与管理，注意日常跟踪观察，及时处理污染瓶苗。任务4-2继代培养1.教师提前下发工单，学生按单自学，制定继代培养方案。2.实践环节1：继代培养基制备（课前利用业余时间准备好）老师精讲本次课内容，包括初代培养材料的观察和继代增殖培养无

25、菌操作技术（40min），然后学生操作。3.实践环节2：蝴蝶兰初代培养组培苗观察4.实践环节3：蝴蝶兰继代转接同学变作，教师提示操作的注意事项（80min），最后上架培养，卫生清理（15min）。5.实践环节4:讨论与总结（25min）师生针对操作存在问题讨论、总结并考评；最后布置作业，安排学生跟踪观察，调查增殖率及生长状况。6.实践环节5：分组培养与管理，注意日常跟踪观察，及时处理异常苗。任务4-3壮苗与生根培养1.学生按工单要求自学，并制定蝴蝶兰壮苗与生根培养方案。2.实践环节1：课前准备，包括壮苗和生根培养基制备。老师精讲本次课内容，包括：继代增殖培养材料观察的与方法；壮苗与生根培养无菌

26、操作技术要点与注意事项（40min）3.实践环节2：继代增殖培养材料的观察（30min）4.实践环节3：生根转接（110min）学生分组进行蝴蝶兰壮苗与生根培养无菌操作，老师巡回指导；最后上架培养，卫生清理。5.实践环节4:讨论与总结（15min）师生针对操作存在问题讨论、总结并考评；最后布置作业，安排学生跟踪观察，调查生根率及生根质量。6.实践环节5：分组培养与管理，注意日常跟踪观察，及时处理异常苗。7. 实践环节6：最后生根成品苗观察与项目评价.任务4-4驯化移栽1. 提前下发工单，学生自学，并做好实施安排。2.实践环节1：水苔浸泡24h（提前安排学生处理）（30min）3.实践环节2：组

27、培苗瓶内驯化，适时出瓶，阴干（提前安排各组学生代表操作，之后由他们再教本组学生）（45min）。4.实践环节3：用具准备（提前安排学生准备好）（15min）。5.实践环节4：师生互动，检查自学效果，并提出本次项目任务（15min）。6.实践环节5：蝴蝶兰组培苗现场观察（15min）。7.实践环节6：移栽（120min）。教师先演示，强调操作注意事项，然后学生分组操作，将蝴蝶兰组培苗移至1.5寸塑料小钵内。组长负责，教师巡回指导。8.实践环节7：讨论分析（15min）。以问答式讨论如何提高组培苗驯化移栽成活率，以及违规操作后，蝴蝶兰栽后根系的异常变化。9.实践环节8：栽后处理（10min）蝴蝶兰

28、组培苗移栽后，轻浇薄水，以钵底有水渗出为止。10.教师总结（2min）。任务4.5蝴蝶兰组培快繁流程与人工授粉1.教师精讲蝴蝶兰3种组培快繁操作流程与方法（40min）；人工授粉方法(20min)。2.实践环节1：现场识别蝴蝶兰花(20min)；3.实践环节2：蝴蝶兰人工授粉(60min)。4.现场讨论（15min）5.老师总结(10min)。八、拓展学习1.蝴蝶兰脱毒苗培育；2.大花蕙兰组培与快繁技术；3.墨兰组培与快繁技术；4.人工种子；5.种子培养。九、作业1项目实训报告。十、学习建议1.结合台企兰花种苗繁育与工厂化生产管理，学习项目11蝴蝶兰组培快繁技术；2.熟悉蝴蝶兰外植体类型与规格要求，在此基础上学习蝴蝶兰组培各阶段材料修整要求；3.蝴蝶兰花梗不易消毒彻底，本身容易褐化，针对这两方面要重点学习。4.蝴蝶兰组培每周期持续时间较长，做好及时观察，动态跟踪；发现问题及时分析并寻求解决的办法。十一、教学评价项目4评价单1教学