方法验证表格汇总.docx

1、方法验证表格汇总质量标准-表1 2质量标准比较-表2 3有关物质检查方法HPLC法的建立-表3 3有关物质检查方法验证结果概要-表4 3系统适用性试验结果-表5 5降解试验结果汇总表-表6 5降解试验结果汇总表-表7 5检测限结果-表8 6定量限结果-表9 6特定杂质的线性考察结果-表10 6溶液稳定性试验结果-表11 7精密度试验结果-表12 7准确度实验结果-表13 7过滤验证样品溶液的制备-表14 8布洛芬吸附结果-表15 8超声验证样品溶液的制备-表16 8研磨验证样品溶液的制备-表17 9耐用性参数变化范围-表18 9不同波长对有关物质测定的影响-表19 9与原研产品质量对比研究的结

2、果-表20 9与已上市产品杂质谱对比研究的结果-表21 10使用中产品稳定性研究结果-表22 10常规稳定性考察结果-表23 10稳定性的比较-表24 11影响因素试验结果-表25 11加速试验结果-表26 11长期试验结果-表27 12稳定性研究结果-表28 12溶出度测定方法验证结果（紫外）-表29 13滤膜吸附试验结果1-表30 13滤膜吸附试验结果2-表31 13稳定性研究结果-表32 14质量标准的比较-表33 14有关物质方法和限度的比较-表34 15有关物质方法学验证结果-表35 15稳定性考察用样品信息-表36 16稳定性考察的条件-表37 16稳定性考察结果-表38 16剂型

3、及其处方组成-表39 17处方组成变化汇总-表40 17生产工艺变化汇总-表41 18批分析汇总-表42 18内包材的相关信息-表43 18典型生产规模批次产品的处方-表44 19主要生产设备的相关信息-表45 19关键工艺步骤的相关信息-表46 19原辅料控制的相关信息-表47 20质量标准的比较-表48 20有关物质方法学验证结果-表49 20检验报告情况小结-表50 21杂质谱分析-表51 21与原研药质量对比研究的结果-表52 22稳定性考察用样品信息-表53 22常规稳定性考察结果-表54 23使用中产品稳定性研究结果-表55 23稳定性的比较-表56 23稳定性研究结果-表57 2

4、3质量标准-表1检查项目方法放行标准限度货架期标准限度性状目视检查3.2.p.5.2.1本品为薄膜衣片，除去包衣后显白色。本品为薄膜衣片，除去包衣后显白色。鉴别化学法3.2.p.5.2.2呈正反应呈正反应HPLC法3.2.p.5.2.3本品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。本品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。有关物质HPLC法3.2.p.5.2.5杂质不得过0.05%，其他单个未知杂质不得过0.1%，总杂不得过0.3%。杂质不得过0.1%，其他单个未知杂质不得过0.1%，总杂不得过0.5%。重量差异3.2.p.5.2.7应符合规定应符合规定溶出度HPLC法

5、3.2.p.5.2.8限度为表示量的85%限度为表示量的85%微生物限度3.2.p.5.2.9应符合规定应符合规定残留溶剂水分粒径分布无菌细菌内毒素其他含量3.2.p.5.2.10含*应为表示量的95.0%105.5%。含*应为表示量的95.0%105.5%。为了保证本品在货架期内均符合标准规定，我们对某些在稳定性留样过程中有变化的项目制订了更加严格的放行标准限度，简述如下：有关物质：中试3批样品稳定性留样过程中未知单杂基本无变化，总杂最大0.04%，杂质最大增加0.01%，严格制订总杂的放行标准限度为0.3%，杂质的放行标准限度为0.05%。质量标准比较-表2检查项目放行标准货架期标准ChP

6、BPUSP其他外观鉴别有关物质残留溶剂水分重金属硫酸盐炽灼残渣粒度分布晶型含量有关物质检查方法HPLC法的建立-表3检测条件确定依据色谱柱流动相波长检测时间已知杂质的控制方法有关物质检查方法验证结果概要-表4项目可接受标准验证结果系统适用性系统适用性溶液色谱图中主峰和杂质的分离度应1.5系统适用性溶液色谱图中主峰和杂质的分离度为59.92，符合要求。系统适用性溶液连续进样6次，杂质峰面积的RSD应2.0%系统适用性溶液连续进样6次，杂质峰面积的RSD为0.2%，符合要求。系统适用性溶液连续进样6次，杂质保留时间的RSD应1.0%系统适用性溶液连续进样6次，杂质保留时间的RSD为0.05%，符合

7、要求。系统适用性溶液色谱图中杂质的拖尾因子应2.0系统适用性溶液色谱图中杂质的拖尾因子均小于2.0，符合要求。专属性空白辅料应无干扰空白辅料无干扰，符合要求。主成分与各个杂质分离度1.5；各杂质间1.2主成分与各个杂质分离度均大于1.5；各杂质间均大于1.2，符合要求。破坏试验中，主峰的纯度因子980破坏试验中，主峰的纯度因子均980，符合要求。灵敏度检测限S/N3.0检测限S/N3.0时，主峰和杂质的检测限分别为0.5ng和0.25ng。定量限S/N10.定量限浓度的溶液，进样6次，主峰保留时间的RSD不大于2.0%；峰面积的RSD应不大于5.0%。S/N10时，主峰和杂质的定量限分别为1.

8、0ng和0.75ng。主峰和杂质的定量限溶液重复进样6次，保留时间的RSD分别为0.05%和0.06%，峰面积的RSD分别为2.4%和2.1%，符合要求。线性以浓度为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归，回归线的相关系数（R）不得小于0.990.主峰在0.1017ug/ml10.1698ug/ml浓度范围内峰面积与浓度呈线性相关，线性方程为：Y=1416X+40.688，回归线的相关系数（R）为1.0，符合要求。杂质在0.1013ug/ml10.1325ug/ml浓度范围内峰面积与浓度呈线性相关，线性方程为：Y=20384X-228.49，回归线的相关系数（R）为0.9999，符合

9、要求。溶液稳定性供试品溶液放置48h，主峰面积无明显变化。精密度重复性一个分析人员在相同的条件下进行测试，所得6份供试液杂质含量的RSD应15%6份供试液，杂质均未检出，总杂含量的RSD为3.0%，单杂含量RSD为3.0%，符合要求。中间精密度分别由两个分析人员使用不同的仪器进行测试，所得12份供试液杂质含量的RSD应20%12份供试液，杂质均未检出，总杂含量的RSD为12.2%，单杂含量RSD为8.8%，符合要求。准确度分别配制高中低三个杂质浓度的供试品溶液，杂质各浓度下的平均回收率应在80%120%之间，RSD（9份）应10%杂质高中低三个浓度下的平均回收率分别为97.9%、98.6%、1

10、01.3%，RSD（9份）为2.1%，符合要求。相对相应因子杂质的相对相应因子为1.4，确定选用加校正因子的主成分自身对照法计算杂质的含量。耐用性检测波长变化5nm各个变动的色谱条件参数下，杂质含量的绝对值在0.1%以内各个变动的色谱条件参数下，杂质含量的绝对值在0.1%以内，符合要求。柱温变化5流速变化10%流动相有机相比例变化5%流动相ph变化0.2更换色谱柱系统适用性试验结果-表5主峰的理论塔板数主峰与杂质的分离度杂质色谱峰保留时间峰面积拖尾因子112390859.9211.9671.61141.06212479760.1211.9651.60811.07312496860.2511.9

11、731.61221.06412519260.3111.9771.6141.05512480760.2411.9731.61721.05612547960.1011.9831.61411.1RSD（%）/0.050.19/降解试验结果汇总表-表6破坏条件未破坏1未破坏2光破坏热破坏酸+热破坏碱+热破坏氧化+热破坏样品量mg32.8633.6232.7832.9234.0732.9533.03稀释体积ml25252525252525主峰面积7382.27600.17460.87344.17243.66405.17031.0总峰面积7385.97600.17466.17374.57417.37191

12、.77075.5杂质个数10354610最小分离度20.91/13.785.343.312.851.86降解率%/101.399.394.186.094.8物料守恒%/101.399.796.396.695.3主峰纯度因子999.966999.995999.981999.964999.966999.990999.982降解试验结果汇总表-表7RRT杂质来源归一化含量%未破坏光破坏热破坏酸+热破坏碱+热破坏氧化+热破坏0.05未知降解杂质/0.270.030.12未知/0.020.471.70/0.15未知/0.030.19未知/0.040.22未知/0.030.24未知/3.030.040.4

13、8未知/0.200.67/0.49杂质A/1.635.200.120.52未知/0.54未知/0.090.190.59未知/0.030.71未知/0.07/0.79未知/0.010.070.060.83杂质D/0.25/0.96杂质C/0.051.22未知/0.02/1.27未知工艺杂质0.050.050.03/1.40未知/0.01/超过0.05%的杂质个数/112464杂质分析/超过0.05%的杂质有1个，为RRT1.27处的未知杂质无明显降解产物增加RRT0.54的未知降解产物和杂质D增加明显RRT0.12、0.52、0.71处的未知降解产物和杂质A增加明显RRT0.05/0.12/0.

14、24/0.52/0.79处的未知降解产物和杂质A增加明显，未知降解产物数量明显增加RRT0.54/0.79处的未知降解产物、杂质A和杂C增加明显，未知降解产物数量明显增加检测限结果-表8主峰杂质检测限ng0.50.25信噪比3.74.5相当于主峰检测浓度的/0.005%结果显示，杂质的检测限小于有关物质供试品浓度的0.05%，因此本品有关物质测定的供试品浓度能满足杂质的检测要求。定量限结果-表9定量限ng1.00.75序号RT（min）面积S/NRT（min）面积S/N124.7522.710.212.4881.611.1224.732.713.312.4891.711.6324.7442.6

15、13.112.4831.713.5424.722.69.412.4731.712.9524.7332.711.312.4891.713.6624.7222.611.512.4951.714保留时间RSD%0.050.06峰面积RSD%2.12.4特定杂质的线性考察结果-表10仪器：Waters 26952996主峰杂质线性方程Y=14716X+40.688Y=20384X-228.49相关系数10.9999特定杂质的线性考察结果2仪器：Agilent 1100线性方程Y=14.864X+0.2676Y=19.818X-0.6069相关系数0.99980.9999特定杂质的线性考察结果3仪器：T

16、hermo U3000线性方程Y=0.2621X-0.001Y=0.353X-0.0016相关系数0.99991范围0.1017ug/ml10.1698ug/ml0.1013ug/ml10.1325ug/ml结果显示，主峰和杂质线性方程回归线的相关系数均大于990。符合要求。溶液稳定性试验结果-表11时间（h）024681012243648峰面积126.3126.4126.4126.4126.5126.4126.6126.6126.8126.8平均面积126.5RSD%0.1结果显示，供试品溶液放置48h，主峰面积无明显变化，供试品溶液在48h内稳定。精密度试验结果-表12人员日期仪器次数总杂

17、%单杂%杂质%甲2014.03.11Thermo U300010.050.05未检出20.050.05未检出30.040.04未检出40.050.05未检出50.050.05未检出60.050.05未检出RSD（n=6）3.0%3.0%/乙2014.03.14Agilent 110010.060.05未检出20.050.05未检出30.060.04未检出40.060.05未检出50.060.06未检出60.060.05未检出RSD（n=6）4.1%2.4%/RSD（n=12）12.2%8.8%/结果显示，重复性考察各杂质及总杂测定结果RSD（n=6）均小于15%，中间精密度考察各杂质及总杂测定

18、结果RSD（n=12）均小于20%。本方法精密度符合要求。准确度实验结果-表13水平50%100%150%加入量ug12.9425.8938.83已知量ug1.641.641.641.641.661.661.641.651.64测得量ug14.0914.3714.4827.4526.6327.4640.9141.3140.72回收率%96.298.399.299.796.599.7101.1102.2100.6平均值%97.998.6101.3RSD%2.1回收率：在供试品中加入高中低的各杂质，分别制得三种浓度的供试品溶液各3份，分别测定其中杂质的含量，将实测值与理论值比较，计算回收率，并计算

19、9个回收率数据的相对标准偏差。该项目的可接受标准为：各浓度下的平均回收率均应在80%120%之间，相对标准偏差不大于10%。测定方法：取杂质约10mg，加溶剂溶解并稀释制成含杂质约5ug/ml的溶液，作为杂质的母液。精密称取供试品细粉适量（约相当于主药25mg），9份，分别置50ml量瓶中，分别加入上述杂质母液2.5ml、5ml、7.5ml，各3份，再加溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。再精密量取杂质适量，加稀释剂制成0.5ug/ml浓度溶液，作为杂质对照品溶液。平行制备2份。取上述溶液各10ul，注入液相色谱仪，记录色谱图，以外标法按峰面积计算杂质的含量，并将实测值与理论值

20、比较，按下式计算回收率。回收率（%）=（加标样品实测值-已知样品测定值）/加标量*100%过滤验证样品溶液的制备-表14编号123弃去体积 (ml)0510收集体积 (ml)0-55-1010-15本次试验考察不同材质的滤头对药品吸附的情况。通过对照品溶液和低浓度的准确度测试溶液分别按上表过滤。弃去相应体积并收集相应体积的供试品溶液。每份过滤后的样品均与离心样品对比。布洛芬吸附结果-表15处理方法对照品溶液R1 -50%测试溶液峰面积较离心回收率（%）峰面积较离心回收率（%）离心100.0100.0尼龙：取0-5 ml尼龙：取5-10 ml尼龙：取10-15 mlPTFE：取0-5 mlPTF

21、E：取5-10 mlPTFE：取10-15 ml可接受标准过滤样品溶液相对于离心样品溶液的回收率在98.0%102.0%。超声验证样品溶液的制备-表16编号123超声时间(min)45300布洛芬%100单杂%100总杂%100杂质B100相对45min有关（%）100可接受标准有关结果稳定在80.0%120.0%的最低超声时间为合适的超声时间。研磨验证样品溶液的制备-表17编号123研钵未研磨玛瑙研磨普通研磨布洛芬%100单杂%100总杂%100杂质B100相对未研磨有关（%）100可接受标准有关结果稳定在80.0%120.0%的研磨处理方式为最佳处理条件。耐用性参数变化范围-表18耐用性考

22、察项目标准条件确认的参数范围检测波长266nm261nm271nm流速1.0ml/min0.9ml/min1.1ml/min柱温353040水相ph4.03.84.2水相-有机相比例85:1586:148416色谱柱C18不同牌子C18不同波长对有关物质测定的影响-表19波长nm保留时间min总杂%单杂%杂质A%主峰杂质26124.82112.5270.180.050.0826624.82112.5280.180.060.0827124.82112.5270.170.050.07质量标准制定依据提供充分的依据（包括是否符合我国与ICH颁布的指导原则、各国现行版药典的要求、与原研药质量对比研究的

23、结果等），证明质量标准制定的合理性。说明各项目设定的考虑，总结分析各检查方法选择以及限度确定的依据。提供三批本品与多批已上市原料药（如可能，应为原研发厂生产的原料药）的质量对比研究的资料及结果，以充分证明仿制品的质量与已上市原研发厂产品的质量是一致的。示例如下:与原研产品质量对比研究的结果-表20样品项目原研产品自制品批号1批号2批号1批号2批号3性状外观溶解度熔点检查酸碱度有关物质重金属炽灼残渣含量与已上市产品杂质谱对比研究的结果-表21样品杂质（含量）已上市原研发厂的原料药已上市原料药自制品批号1批号2批号1批号2批号1批号2批号3已知杂质杂质A杂质B杂质C其他单个杂质总杂质对超出鉴定限度

24、的杂质，均应按照国内外相关指导原则的要求作进一步的研究（包括该杂质的结构确证研究、安全性研究等)，并结合与原研厂产品杂质谱对比研究的结果及现行版国内外药典收载的同品种对该特定杂质的限度要求，在质量标准的有关物质项下作为特定杂质单独制定合理的限度。详细提供以上研究的资料与图谱等。使用中产品稳定性研究结果-表22项目放置条件考察时间考察项目分析方法及其验证研究结果配伍稳定性多剂量包装产品开启后稳定性制剂与用药器具的相容性试验其他试验“分析方法及其验证”项需说明采用的方法是否与已验证并列入质量标准的方法一致。如所用方法和质量标准中所列方法不同，或质量标准中未包括该项目，还应在上表中明确方法验证资料在申报资料中的位置，并在申报资料中说明原因，提供详细的分析方法及其验证资料，以证明该分析方法的可行性。常规稳定性考察结果-表23项目