UH4150分光光度计测量(透射&反射)操作指南.pdf

1、1 UH4150 分光光度计测量（透射分光光度计测量（透射&反射）操作指南反射）操作指南 目录 一、仪器和软件的开启.2 1.1 仪器开启.2 1.2 软件开启.2 二、仪器校准.4 2.1 波长校准（Wavelength Calibration）.4 2.1.1 条件.4 2.1.2 方法.4 2.2 探测器归零.5 2.2.1 条件.5 2.2.2 方法.5 2.3 基线校准（BaseLine）.7 2.3.1 条件.7 2.3.2 方法.7 三、样品测量.8 3.1 安装组件.8 3.2 测量流程.8 3.2.1 参数设置.8 3.2.2 基线校准（BaseLine）.10 3.2.3

2、量测（Measure）.10 四、测量数据的存储和处理.11 4.1 数据存储设置和操作.11 4.1.1 存储设置.11 4.1.2 存储操作.12 4.2 软件内测量数据处理.14 4.2.1 求平均值.14 4.2.2 两个（或以上）测量结果的叠加和比较.15 2 一、仪器和软件的开启一、仪器和软件的开启 1.1 仪器开启仪器开启 在光谱仪通电的前提下，按下电源开关，开启光谱仪。在仪器开启的情况下，按上电源开关，就关闭光谱仪。图 1-1 仪器开启 1.2 软件开启软件开启 确认好仪器已经开启后再开启电脑的测试软件。双击电脑桌面图标，开启测试软件。开启软件后，会自动进行初始化。初始化完成后

3、，出现绿框 Ready 字样。图 1-2 刚打开软件界面 3 图 1-3 软件完全开启界面 特别注意：特别注意：下面所有的校准和测量操作，都要把样品区间的盖子合上把样品区间的盖子合上，否则来自仪器外面的光会对测量和校准造成干扰。4 二二、仪器校准、仪器校准 2.1 波长校准（波长校准（Wavelength Calibration）2.1.1 条件条件 当软件出现如图所示的错误（错误信息：Calibrate!）时，需要做波长校准。图 2-1 错误信息：Calibrate!测量高吸收率（低透射率）样品时。每三个月（自购买起）。每三个月（自购买起）。2.1.2 方法方法 在校准前确保：样品区间的样品

4、和治具已移除 样品区间盖子已合上 光源镜面 Mask 使用标准组件，尺寸：10mm(H)8mm(W)测试软件已经开启 操作已经到位，在菜单栏先后选择 SpectrophotometerCalibrationCalibrate Wavelength，然后校准开始。图 2-1 波长校准 整个校准过程需花 5 到 10 分钟，校准完成后，会出现绿框的 Ready 字样。错误信息：Calibrate!5 2.2 探测探测器归零器归零 2.2.1 条件条件 当发现出现以下情形时，需做探测器归零操作。测量时出现明显的异常（经 BaseLine 后再测量），例如测量透射率出现如下结果：图 2-3 经过 Ba

5、seLine 后测量异常举例（透射）用不透光物体完全遮挡住样品光（参考光不遮挡）并把样品区间的盖子合上，此时透射率应该为 0，但软件显示的透射率实时值不为 0，或不在 0 上下跳动。图 2-4 2.2.2 方法方法 本仪器有两个探测器，在近红外(NIR)区使用 PbS，在可见光等（除 NIR 外）区使用 PMT（光电倍增管），两个探测器需分别归零（若只有一个异常则只归零一个）。按下，设置探测器感应区的波长，例如PbS感应区设1200nm，PMT感应区设500nm。设置后点 OK。图 2-5 波长设置窗口 实时值 6 用不透明的物品或挡板（shutter）把样品光完全遮挡住，注意不要遮挡参考光。

6、在菜单栏先后选择 SpectrophotometerCalibration Detector Zero Function，开始归零。图 2-6 Detector Zero Function 完成上一步骤后，%T（或%R）的实时值为 0 或在 0 上下跳动（跳动小数位），则归零结束。图 2-7 归零完成 除了%T 和%R 以外，其他 Data Mode 下归零校准方法类似，此处不赘述。实时值 7 2.3 基线校准（基线校准（BaseLine）2.3.1 条件条件 每次测量前需进行 BaseLine 操作。2.3.2 方法方法 确保样品区间处于载空状态，即不装样品时的状态。特别注意：特别注意：若是

7、测量小片样品，不装样品的小片夹具也要装到组件上。针对 5 度反射（透射）组件，注意其载空状态，对应的光路走向和可动反射镜的摆放。点，在 instrument 菜单下，注意一栏及其他参数（一般已经预先设置完毕）。注意点确定。图 2-8 instrument 菜单 注意要合上样品区间的盖子，点进行基线校准（BaseLine），在弹出框选与上一样相同的 BaseLine 项目：，点 OK 确定。此步需要约 5 分钟的过程。完成之后，显示绿框 Ready 字样。8 三三、样品测量、样品测量 3.1 安装组件安装组件 根据样品的规格（中片、小片等），参照UH4150 分光光度计组件及其安装，选择合适的组

8、件进行安装。安装完成后，方可进行透射率和反射率的测量。各组件样品规格：标准组件：样品尺寸：30 mm30 mm-100 mm100 mm 厚度：不超过 25 mm 小片（透射）组件 样品尺寸：4 到 20（需装小片夹具）厚度：不超过 3mm 可转角度（透射）组件 样品尺寸：40mm40mm 到 140mm140mm 样品厚度：不超过 3mm 5 度反射（透射）组件 样品尺寸：不安装小片夹具时 透射：25 mm 到 50 mm 反射：25mm25mm 到 100mm（宽）150mm（高）安装小片夹具（55mm）时 5mm5mm 到 17 mm 样品厚度：0.2 mm 到 2 mm 3.2 测量测

9、量流程流程 3.2.1 参数设置参数设置 点击图标，按加载预先设置的参数（路径：C:UV Solutionssetting）：测量小片样品时，选择；测量中片（非小片）样品时，选择。加载后点确定即可。图 3-1 测量参数加载 9 若要查看具体的参数，并作适当的调整：点击图标，选择项，然后可以查看和视需要而设置参数。图 3-2 instrument 界面 部分设置项目说明：Data Mode:%T%R 透射率 反射率 目前的对样品的测量主要是这两项 Abs 吸收度，此项在测试中一般用不到 E(S)E(R)样品光强度 参考光强度，这两项可用于测量小片时参考光的校正 Start wavelength&

10、End wavelength：开始和结束波长，注意波长设置由长波到短波，可设区间为 2600nm 到 240nm Slit width:选 Fixded，对小片，设 8nm；对中片，设 4nm。注意：NIR（近红外）区的近红外）区的 Slit 选项选选项选 Auto change 即可。即可。PbS Gain:此项位于 NIR 区。对小片，选 2；对中片，选 1。Wl Lamp&D2 灯：光源的两个灯。若测量波长大于 340nm，可关闭 D2 Lamp，即此项选 Off。其他项目 其他项目若无特别说明，以图片中的设置即可。10 3.2.2 基线校准（基线校准（BaseLine）确认好参数设置后

11、，在不装样品（若准备测小片，则需把不装样品的小片夹具装上）的情况下，按进行基线校准（BaseLine）操作。具体操作参考 2.3 内容。若误按 BaseLine 操作或者需要中断操作，按下，停止后，该项会变成灰色的样子：。特别注意：特别注意：注意小片测量组件的安装，包括参考光路上的光圈的调节，参考UH4150 分光光度计组件及其安装的 3.3.2 的第点内容。若是测量小片样品，基线校准时，不装样品的小片夹具也要装到组件上。针对 5 度反射（透射）组件，注意其载空状态，对应的光路走向和可动反射镜的摆放。校准期间要保证样品区间的盖子合上，中途不得打开。3.2.3 量测（量测（Measure）基线校

12、准完成后，装上样品（参考UH4150 分光光度计组件及其安装相关内容），按下，即开始量测。若误按该操作，或者需要中断操作，按下，停止后，该项会变成灰色的样子：。测试会实时显示测量结果，测量完成后，会弹出测量结果的曲线图。图 3-3 测量结果示意（透射率）特别注意：特别注意：测量过程要确保样品区间的盖子是合上的，测量中途不得打开。注意测量反射时光路的调整，参考 UH4150 分光光度计组件及其安装 中 5 度反射（透射）组件的相关内容。测量过程中，NIR 区（设置为大于 850nm 时）使用 PbS 探测器，低于 850nm 时使用 PMT探测器，因此在测量到 850nm 时会有一个切换探测器的

13、过程，测量结果也会在这个位置有一个突变。11 四四、测量数据的存储和处理、测量数据的存储和处理 4.1 数据存储设置和操作数据存储设置和操作 4.1.1 存储设置存储设置 已经预先设置好，一般在测量时，直接对测试结果进行存储就可以了。若要设置，注意要在在测量前设置。点击图标，选择项，在 output 栏选择 Use Microsoft(R)Excel，在 Include data listing 中选择 Print All Data。其他项目视情况进行勾选，灰色部分无法进行更改操作。完成之后点确定即可。图 4-1 MethodReport 界面 点击图标，则可以设置保存测试结果的 Raw Da

14、ta。Raw Data 可以用本软件直接打开，跟后来直接测量的结果进行处理，注意其他软件无法读取到里面的数据。Sample name：设置的名称会在测量坐标上显示。Auto File：此项勾选上，则每次测量完成后，Raw Data 会自动保存；若不勾选，则 Raw Data 需手动保存。Destination:保存路径，默认为 C:UV SolutionsData，按可更改路径。File name:可设置默认保存名。若勾选 Auto File，则 Raw Data 文件名会自动添加上测试时间后缀。12 图 4-2 Sample 设置界面 4.1.2 存储操作存储操作 鼠标点中测试结果窗口（即激

15、活激活相应的窗口），如下图所示：图 4-3 激活测试数据结果窗口 点，选菜单，可重新命名样品名，这样导出结果就能在 Excel 中看到相应的样品名。操作完成后点确定。样品名显示在这里 鼠标点这个地方 13 图 4-4 更改样品名 点，可将结果导出到 Excel 上（4.1.1 已设置好）。导出的 Excel 没有图，只有数据，若需作图，根据数据在 Excel 添加图表即可。最后需将相应的 Excel 文件保存到电脑上（位置自定）。图 4-5 Excel 上作图示意 14 激活数据结果窗口，在 File 菜单可以打开（Open）、保存（Save）、另存（Save As）Raw Data。图 4-

16、6 File 菜单 特别注意：特别注意：若更换电脑重装软件，建议将 C:UV SolutionsData 和 C:UV Solutionssetting 复制过去。4.2 软件内测量数据软件内测量数据处理处理 4.2.1 求平均值求平均值 激活相应的结果窗口，点，即进入算平均的窗口。设置 Start 波长和 End 波长，再按 Calculate，即可求平均值。图 4-7 算平均值 15 4.2.2 两个两个（或以上）（或以上）测量结果的叠加和比较测量结果的叠加和比较 鼠标按住其中一个结果窗口（A 窗口）蓝色部分，将其拖到另一窗口（B 窗口），则可在 B 窗口叠加两个测量结果。此时 A 窗口还在，B 窗口为叠加后的结果 图 4-8 结果的叠加 叠加的结果可以导出 Report 到 Excel，也可以另存为 Raw Data，但不能进行求平均值操作（此时相应的按钮是灰色的：）。三个以上结果的叠加，操作类似，不作赘述。若需要比较两个结果的差异（两者需要有相同的波长区间），可以在叠加后的结果窗口，按进行操作；不叠加结果，当软件内打开有两个以上数据结果时，直接按也可操作。图 4-9 两个结果的