蛋白质电泳相关试剂缓冲液的配制.pdf

1、蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制方法30%(W/V)Acrylamide组份浓度配制量配制方法30%（W/V）Acrylamide1 L1.称量下列试剂，置于1 L烧杯中。2.向烧杯中加入约600 ml的去离子水，充分搅拌溶解。3.加去离子水将溶液定容至1 L，用0.45 m滤膜滤去杂质。4.于棕色瓶中4保存。注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具有积累性，配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。40%(W/V)Acrylamide组份浓度配制量配制方法40%（W/V）Acrylamide1 L1.称量下列试剂，置于1 L烧杯中。

2、2.向烧杯中加入约600 ml的去离子水，充分搅拌溶解。3.加去离子水将溶液定容至1 L，用0.45 m滤膜滤去杂质。4.于棕色瓶中4保存。注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具有积累性，配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。10%(W/V)过硫酸铵组份浓度配制量配制方法5Tris-Glycine Buffer(SDS-PAGE电泳缓冲液)组份浓度配制量配制方法0.125 M Tris,1.25 M Glycine,0.5%（W/V）SDS1 L1.称量下列试剂，置于1 L烧杯中。2.加入约800 ml的去离子水，搅拌溶解。3.

3、加去离子水将溶液定容至1 L后，室温保存。5SDS-PAGELoading Buffer5 ml1.量取下列试剂，置于10 ml塑料离心管中。2.加去离子水溶解后定容至5 ml。3.小份（500 l/份）分装后，于室温保存。4.使用前将25 l的2-ME加到每小份中。5.加入2-ME的Loading Buffer可在室温下保存一个月左右。组份浓度配制量配制方法0.1%（W/V）考马斯亮蓝R-250,25%（V/V）异丙醇,10%（V/V）冰醋酸1 L1.称取1 g考马斯亮蓝R-250，置于1 L烧杯中。2.量取250 ml的异丙醇加入上述烧杯中，搅拌溶解。3.加入100 ml的冰醋酸，搅拌均匀

4、。4.加入650 ml的去离子水，搅拌均匀。5.用滤纸除去颗粒物质后，室温保存。组份浓度配制量配制方法10%（V/V）醋酸,5%（V/V）乙醇1 L1.量取下列溶液，置于1 L烧杯中。2.充分混合后使用。组份浓度配制量配制方法组份浓度配制量配制方法组份浓度0.4%（W/V）AgNO3,1%（V/V）浓NH3H2O,0.04%（W/V）NaOH配制量配制方法100 ml1.量取下列试剂，加入100200 ml的试剂瓶中。2.均匀混合。该溶液应为无色透明状。如氨水浓度过低时溶液会呈混浊状，此时应补加浓氨水,直至透明。3.本染色液应现用现配，不宜保存。组份浓度配制量配制方法0.005%（W/V）柠檬酸,0.02%（V/V）甲醛1 L1.称量下列试剂，置于1 L试剂瓶中。2.加入1 L去离子水后，摇动混合溶解。3.室温保存。