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1、9 865例儿科七项呼吸道病毒感染检测及分析9 865例儿科七项呼吸道病毒感染检测及分析 摘要 目的 通过分析该院儿科近3年内七项呼吸道病毒感染的分布情况，病原学确诊可为儿科医生诊疗儿科呼吸系统疾病提供重要依据。 方法 收集整理并分析该院儿科2015年1月2017年11月送检9 865例呼吸道检测咽拭子，对腺病毒（ADV）、流感病毒A型（IA）、流感病毒B型（IB）、呼吸道合胞病毒（RSV）、副流感病毒1型、2型、3型（P1、P2、P3） ?用直接免疫荧光法进行检测。 结果 9 865例儿科送检的呼吸道咽拭子标本中，检测阳性病例1 847例，单项病毒感染1 822例，双重及以上感染25例，总阳

2、性率18.79% 。其中呼吸道合胞病毒（10.31%）、甲型流感病毒（3.32%）、副流感病毒3型（2.48%），感染率位居前3位。阳性检出病例各年龄段均有，以年龄小于6岁者为主。 结论 呼吸道合胞病毒（RSV）在该院儿科七项呼吸道病毒检测中发现感染率居首，其流行与季节交替变化有明显关联，特别是冬春季温度低、气温变化大好发，其它病毒感染次之；防治七项呼吸道病毒感染的重点监控人群是机体免疫力低下的婴幼儿和儿童，病原体的早期检出可以为临床医生诊断和治疗呼吸道疾病提供依据。 关键词 七项呼吸道病毒感染检测；儿科；直接荧光免疫法 中?D分类号 R4 文献标识码 A 文章编号 1674-0742（201

3、8）03（b）-0174-05 Test and Analysis of Seven Respiratory Virus Infections of 9 865 Cases in the Department of Pediatrics ZHANG Zhong-yuan Department of Clinical Laboratory， Nanping First Hospital Affiliated to Fujian Medical University， Nanping， Fujian Province， 353000 China Abstract Objective To anal

4、yze the distributions and pathological diagnosis of seven respiratory virus infections of 9865 cases in the department of pediatrics in recent three years， thus providing important basis for the respiration system diseases in the department of pediatrics for the doctors. Methods 9 865 cases of throa

5、t swabs tested by the respiration tract in our hospital from January 2015 to November 2017 were collected， and the ADV， IA， IB， RSV， parainfluenza virus type 1， type 2 and type 3， were tested by the direct immunofluorescence. Results Of 9 865 cases of throat swab specimens of the respiration tract s

6、ubmitted by the department of pediatrics showed that there were 1 847 positive cases， and 1 822 cases with single virus infection， and 25 cases with double or above infections， and the total positive rate was 18.79%， including the respiratory syncytial virus（10.31%）， influenza A virus （3.32%） and Pa

7、ra influenza virus-3 （2.48%）， and the infection rate was in the top three， and the positive cases existed in various age phases， dominated by the patients aged less than 6 years old. Conclusion The infection rate of RSV in the test of seven respiratory virus infections is in the first place， and the

8、 prevalence is obviously correlated with the seasonal alternation， especially in the winter and spring， other viruses infections are in the second place， and the key monitoring group is the infants and children with low organ immunity， and the early test of pathology can provide basis for the diagno

9、sis and treatment of respiration tract diseases by the clinical doctors. Key words Test of seven respiratory virus infections； Department of pediatrics； Direct immunofluorescence 呼吸道感染位居各类感染之首，常引起世界各地区暴发或流行。在急性呼吸道感染中，尤其是病毒感染常呈现患病率高、传播速度较快、感染病原体不断演化变异等各种临床特点，在感染人群不容易形成持续免疫力，这给临床病情的有效感染控制?戳思?大的挑战1。呼吸道

10、感染的感染病毒种类多抗原存在变异性大，临床出现的症状体征非常相似，鉴别诊断对医生是个挑战，实验室检测对病原学鉴定具有重要意义。现研究表明儿童时期呼吸道感染发病率最高，是我国儿童最常见的疾病之一也是重要的导致儿童死亡的原因，应引起医师和家长们的重视2。现收集整理该院2015年1月2017年11月送检9 865例儿科呼吸道检测标本，对常见七项目呼吸道病毒?用直接免疫荧光法进行检测分析，通过病原体的早期检出可以为临床医生诊断和治疗呼吸道疾病提供依据，现报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 收集整理因急性呼吸道感染在南平市第一医院就诊的门诊与住院儿科病例9 865例，全部病例均符合全国急性呼吸

11、道感染诊断标准，所有患者中男为5 012例，女为4 853例，年龄为016周岁，重点人群为6岁及以下儿童（8 878/9 865，90 %）。该研究已征得患儿及家属知情同意，得到福建医科大学附属南平第一医院伦理委员会的批准通过，并严格遵循1975年的赫尔辛基宣言的伦理指南。 1.2 检测原理及方法 1.2.1 检测原理 将标记有荧光素（FITC）的特异性单克隆抗体与人鼻咽部呼吸道病毒感染的上皮细胞特异性抗原结合，形成待检测的抗原-抗体结合物，在日本Olympus荧光显微镜观察到绿色荧光即为阳性标本。 1.2.2 标本采集 由儿科医生用专用呼吸道咽拭子在病人鼻咽部刮擦取样或者使用生理盐水鼻腔灌洗

12、。将鼻咽拭子置于生理盐水管中，必须24 h内送至检验科。 1.2.3 检测试剂与方法 七项呼吸道病毒专用检测试剂盒由美国Diagnostic Hybrids ，Inc厂家研发。七项呼吸道病毒包括易侵害部位为眼部、呼吸道与肠粘膜的腺病毒（AD），易导致喉炎和肺炎及气管炎的甲型流感病毒（IA），乙型流感病毒（IB），副流感病毒1型（P1），副流感病毒2型（P2），副流感病毒3型（P3），呼吸道合胞病毒（RSV）。检测各项操作严格执行SOP规程。 1.2.4 阳性结果判断 在200倍Olympus荧光显微镜下找到每高倍镜视野下2个绿色荧光细胞即判断阳性标本，?翱锥杂呦詈粑?道病毒中一种，否则判断阴性

13、标本。高倍镜视野下被Evans Blue染料染为红色为阴性。 2 结果 2.1 七项呼吸道病毒阳性标本检出分布 在9 865例送检标本中，共检出阳性1 847例，其中混合感染25例，单种病毒感染18 22例，5 012例男性患者中有942例阳性（942/5 012，18.79%），4 853例女性患者中有905例阳性（ 905/4 853，18.65%），二者阳性率差异无统计学意义。送检中标本主要是RSV感染 （1 017/9 865，10.31%），其次为IA（328/9 865，3.32%）、P3（245/9 865，2.48%）、IB（110/9 865，1.11%）、P1（52/9 8

14、65， 0.53%）、AD（38/9 865，0.32%）、P2（32/9 865，0.32%）。混合感染25例（25/9 865，0.25%）。结果分布详见表1。 2.2 七项呼吸道病毒感染与患者年龄的关系 9 865份标本中，6岁以下儿童对7种呼吸道病毒较容易感染，占总检出阳性患者数的95.29%（1 760/1 847）。6个月年龄组的组内检出率最高（31.95%），其次为36岁年龄组（28.09%）、6个月1岁年龄组（21.07%）、12岁年龄组（18.64%）、23岁年龄组（11.98%）、715岁年龄组（20.57%），15岁年龄组（21.57%）。各年龄组患者都以RSV感染为主，

15、其它病毒感染次之。结果详见表2。 2.3 季节与七项呼吸道感染的关系 春、夏、秋、冬季的病毒检出率分别为20.25%、15.08%、15.07%、22.01% ，七项呼吸道病毒冬春季节阳性检出率高。呼吸道合胞病毒（RSV）在该院儿科七项呼吸道病毒检测中发现感染率居首，其流行与季节交替变化有明显关联，特别是春冬季温度低、气温变化大好发，其检出率分别为10.65%、12.86%，夏季检出率最低，仅为8.04%。P3四季的检出率分别为3.00%、2.22%、2.18%、2.36%。其它呼吸道病毒结果详见表3。 2.4 疾病与七项呼吸道感染的关系 病毒检出在不同呼吸道感染疾病患者中的分布不同，以收集的

16、9 865例病例中主要几种病因进行讨论，其中肺炎患者检出率最高（24.02%），其余依次为发热待查（21.81%）、上呼吸道感染（21.23%）、急性支气管炎（20.16%）、抽搐惊厥待查（19.12%）、急性支气管肺炎（12.68%）。此外，130例哮喘急性发作患儿有9例病毒阳性（6.92%），176例腹泻患儿有8例病毒阳性（4.55%）。结果见表4。 3 讨论 ?澳暝诿拦?、日本及欧洲大约有1亿2千万人感染流感病毒。而发生于2009年的甲型流感（H1N1）病毒大流行曾引发国际医学界学者的高度关注，H1N1大流行主因在于没有快速准确鉴别出甲型H1N1流感是导致肺炎的病原体3。因此在儿科中进行

17、常规的七项呼吸道病毒检测，是减少误诊、防止滥用抗生素，控制呼吸道疾病的暴发规模流行具积极意义。通常病毒是呼吸道感染的主要病原体，在小儿呼吸道感染中较为常见的是如下7项：IVA、IVB、RSV、PIV、PIV、PIV、ADV，而直接免疫荧光法检测呼吸道病毒，是一种快速、高效、直观、简便的诊断呼吸道病毒感染最特异的方法。 南平地区地理位置上处于福建省西北部，降水较多，气候潮湿，冬天气温低，冬春季气温变化大。七项呼吸道病毒各地呈现不同的流行形势与年龄、季节、地域等关系密切4。该文收集2015年1月2017年11月南平地区9 865份?吮荆?有1 847例标本阳性，阳性总检出率为18.79% 。在男性

18、、女性阳性检出率无明显差别（其中男性18.79%，女性18.65%），单一感染1 822例，双重感染25例。单一感染的主要病原为RSV（10.31%），其次为IA（328/9 865，3.32%）、P3（245/9 865，2.48%）、IB（110/9 865，1.11%）、P1（52/9 865，0.53%）、AD（38/9 865， 0.32%）、P2（32/9 865，0.32%）。混合感染25例（25/9 865， 0.25%）。但是与赖剑秀等5报道的629例病毒当中，病毒阳性总检出率为47.3%，构成比前3位的病 毒分别为FluA、RSV、FluB， 构 成 比 分 别 为38.6

19、3% （243/629）、31.48% （198/629）、12.08%（76/629）存在较大差异，这可能与所收集的标本数量，所取标本中含上皮细胞多少，患者的年龄构成或地区气候差异相关5。有学者6经过大量细致的调查及综合分析，环境因素的综合影响可能存在着差异变化大或者是数据的不确定性，气候变化和地理位置的差异是重要的影响因素，实验设计的不同可能影响了结果及数据的正确解释。由于医生样本采集不规范或患者不配合导致咽拭子所含病毒感染的上皮细胞较少有关，也可能操作者水平差异引起细胞丢失相关，或与患者在标本采集前已接受联合抗感染药物，该研究显示南平地区常见的七项呼吸道病毒阳性检出率低于其它相关报道地区

20、。 冬春季是双重感染高发季节，其中P3合并RSV复合感染发现19例，IA合并P3复合感染发现6例。19例P3合并RSV复合感染病例年龄分布为6个月2岁患儿，该年龄段尤其以RSV感染为主，P3感染其次，倾向于该混合感染以RSV感染为主，P3感染为伴随感染的可能性较大。6例P3合并IA感染病例年龄段为12岁患儿，此年龄段P3阳性检出率高于IA检出率，故可能该混合感染以P3感染为主，IA感染为伴随感染的可能性最大。从各年龄组来分析病毒的检出率存在较大差异。该研究发现 1 847例七项呼吸道病毒感染儿童中RSV感染1 017例，阳性检出率（10.31%），明显高于其它六项呼吸道病毒，差异有统计学意义，

21、近年来临床医生越来越重视儿童七项呼吸道病毒感染检测，由于各地区、医院、年份、季节及年龄的不同存在差别而引起七项呼吸道病毒感染病原谱不同，冬春季为高发季节，RSV是该院儿童呼吸道病毒感染的最重要致病因素，尤其是6岁以下患儿，远高于其他病毒，与严华杰等7研究一致。提示 20072010 年，RSV 呈现秋初开始流行，至冬季发病高峰，在冬季组中 RSV 检出最多（138例，13.6%），远高于其他病毒，提示冬春季小婴幼儿中预防 RSV 的非常重要，期盼着RSV疫苗的早日研发成功投入临床使用。病原体的早期检出可以为临床医生诊断和治疗呼吸道疾病提供依据8。 呼吸道疾病的主要感染人群为02 岁的免疫力低下

22、的新生儿及婴幼儿，发热呼吸道综合征是目前全球发病最多的传染病之一，约有 20 多种常见的呼吸道病毒可引起人体发热及呼吸道症状。由于病毒的传播、流行及进化深受地理环境、气候、人口构成以及当地农业生产和经济发展等多种因素综合影响，因此不同地区的发热呼吸道综合征存在着不同的病毒性病原谱构成9。小儿上呼吸道病毒感染的主要临床特征为：入院时发现有不同程度上的流涕、鼻塞、咳嗽、肌肉痛、头痛、咽痛、疲倦 、恶寒等症状，50%，少数患儿伴随全身中毒症状，而且大多年轻、没有基础疾病的人群构成为主10。对七项呼吸道病毒的病原学进行统计分析在一定程度上可以为临床的有效诊治及流感病毒的流行预测提供重要的参考价值11。

23、 婴幼儿由于免疫系统尚在发育中，呼吸道病毒感染性疾病的发病率较高，P3常引起3岁及以下婴幼儿下呼吸道感染。病毒感染率呈现出明显下降的趋势与婴幼儿随着年龄的增长，以及日常通过与各种各样病原体广泛接触而获得相应免疫力，该研究提示婴幼儿及儿童是防治七项呼吸道病毒感染的重点防控人群。呼吸道病毒在人群普遍容易感染特别在免疫力低下的人群及未发育完全的儿童健康危害性更大，给社会和家庭造成极大的疾病负担和经济负担12预防措施是关键环节。急性呼吸道感染是造成儿童感染和死亡的主要原因，而病毒是引起呼吸道感染的最主要病原菌，据统计分析，全世界至少有6%的人因为呼吸道疾病而导致伤残或死亡。而病原体早期主要是侵犯鼻、咽

24、、扁桃体以及喉部而引起人体炎症，若炎症进一步发展，可引起支气管炎、支气管扩张、肺坏死等疾病。因此，明确该地区七项呼吸道病毒的临床分布及其特征，对于儿科呼吸道病毒引起呼吸系统疾病的预防及治疗起到指导作用。 肺炎患者病毒检出率在该研究中检测的所有呼吸道病毒感染患者中最高（24.02%）。下呼吸道感染的病毒检出率高于其他疾病，婴幼儿急性呼吸道感染最常见病毒是RSV。发展中国家导致5岁以下儿童死亡的主要疾病是重症肺炎，其致死率约20%30%5，该院1 549例肺炎患儿病毒检出率占24.02%，以RSV居首，准确，快捷检测出病原体对于重症肺炎患儿的预后及降低病死率具有指导价值。重症肺炎研究在国内有很多新

25、进展，有研究表明强离子隙（SIG）作为重症肺炎患者病情危险分层、治疗预后及有重要价值。相关研究表明，强离子隙和乳酸一样，是新生儿贫血症中酸碱失衡的一个重要检测指标，强离子隙是一个新的、重要的判断呼吸衰竭病人酸碱失衡的指标，对于临床医生适当适时补液纠正患者酸碱平衡失常，关键时刻抢救患者生命起到重要作用13-14。 各种急性呼吸道病毒感染是引起90%小儿哮喘的急性发作首要原因，且大多是由呼吸道病毒感染发病，该研究收集的130例哮喘急性发作患儿病毒阳性检出率为6.92%。特别是发生在上呼吸道病毒感染后，63.9%的哮喘发作患儿在（4.2 3.1）d 内发生哮喘急性发病，“呼吸道病毒感染诱导哮喘急性发

26、作窗口期”平均时间大概4 d，直接免疫荧光法可以在2 h内准确检出病原体，在此期间如果及时进行相关检测，可为临床医师采取相应措施防治哮喘的急性发作起到决定性作用。 该文的研究结果显示呼吸道合胞病毒（RSV）在该院儿科七项呼吸道病毒检测中发现感染率居首，其流行与季节交替变化有明显关联，特别是冬春季温度低、气温变化大而好发，其它病毒感染次之；防治七项呼吸道病毒感染的重点监控人群是机体免疫力低下的婴幼儿和儿童，病原体的早期检出可以为临床医生诊断和治疗呼吸道疾病提供依据。 参考文献 1 Kabir MS，Clements MO，Atkins M，et al. Application of RT-Bst

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