流行性感冒裂解疫苗临床安全性及免疫原性研究.docx

1、流行性感冒裂解疫苗临床安全性及免疫原性研究流行性感冒裂解疫苗临床安全性及免疫原性研究（作者:_单位: _邮编: _） 【摘要】 目的 探讨流行性感冒病毒裂解疫苗的临床安全性与免疫效果。方法 采用随机、双盲原则分为试验组和对照组，分别接种试验疫苗和对照疫苗，观察接种反应率和3型抗体阳转情况，微量血凝抑制试验测定流感抗体。结果 接种试验疫苗后，儿童、成人、老年组整体全身反应率4.13，局部反应率为4.13，与对照疫苗比较无显著差异。试验疫苗免疫后各血清HI抗体阳转率分别为H1 N1 88.34%、H3N2 77.67%、B（亚）型83.62%，与对照疫苗比较无显著差异；血清保护率分别为H1N1 9

2、9.26%（400/403）、H3N2 97.27%（392/403）、B（亚）型为92.31%（372/403），H1N1试验组高于对照组，差异有显著性；H1N1、H3N2和B（亚）型HI抗体GMT平均增长倍数试验疫苗和对照疫苗分别为12.3、10.8、12.1和20.2、16.0、9.7，平均增长倍数均大于2.5倍，B（亚）型试验组高于对照组，差异有显著性。结论 试验疫苗的免疫效果达到欧盟标准，其安全性和免疫原性良好，适于推广使用。 【关键词】 流行性感冒病毒裂解疫苗 安全性 免疫原性 Abstract Objective To discuss the safety and immunog

3、enicity of trivalent split influenza virus vaccine.Methods The test group and control group were devided based on randomized and double-blind principle .Two groups were inoculated with the test vaccine and the control vaccine.Observed response rate and 3-antibody positive conversion. The influenza a

4、ntibodies were tested by the micro-hemagglutination inhibition(HI)test.Results After test vaccine inoculated,the rate of systemic response was 4.13% and the rate partial response was 4.13% in children group,adult group and elder group. It was no significant statistical difference comparing with the

5、control vaccine.The anti-HI seroconversion rate were H1N1 88.34%,H3N2 77.67%,B-type 83.62% after the test vaccine inoculated.It was no significant statistical difference comparing with the control vaccine.The rates of serum protection were H1N1 99.26%（400/403）,H3N2 97.27%（392/403）,B-type 92.31%（372/

6、403）,the H1N1 group was higher than the control group,two of them had significant statistical difference.The average growth of multiples of anti-HI GMT of H1N1,H3N2 and B-type groups of test group and control group were 12.3,10.8,12.1 and 20.2,16.0,9.7, and the average growth of multiples of B-type

7、test group was 2.5 times higher than control group, which had significant statistical difference. Conclusion These results indicate that the trial vaccine has excellent safety and immunogenicity and may be suited for wide use. Key words split influenza virus vaccine；safety；immunogenicity 流行性感冒(以下简称流

8、感)是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病，临床表现为发热、头痛、肌痛、乏力、鼻炎、咽痛和咳嗽。近3个世纪，流感一直是困扰人类的主要传染病之一。随着人们对流感严重危害性的进一步认识，应用流感疫苗进行免疫预防正日益受到重视。接种流感疫苗被认为是预防流感发生与传播的最佳方法1。为探讨澳大利亚CLS有限公司研制的流行性感冒病毒裂解疫苗（Fluavax）临床安全性与免疫效果，论证其在国内推广使用的可行性，实现其预防疾病的价值，根据国家药品监督管理局有关要求，我中心于2007年5月2007年7月选择广西崇左市江州区为研究现场对该疫苗进行了临床研究与评价。 1 资料与方法 1.1 一般资料 观察对象以知情同意

9、，自愿参加为原则。选择年龄3岁以上江州区常住健康人群，近期无流感病毒感染史、无流感疫苗接种史及其接种禁忌证，符合临床研究入选标准者和排除标准者。研究对象分成3个年龄组，即儿童组(3岁年龄16岁)、成人组(16岁年龄60岁)、老人组(60岁年龄80岁)。每年龄组按受试到达接种现场顺序，采用随机、双盲原则分别接种试验疫苗和对照疫苗，即分层整群的抽样方法使受试人群随机化。现场临床反应观察以及标本检测均按盲法进行。 1.2 疫苗选择 1.2.1 试验疫苗 由澳大利亚CLS有限公司研制的流行性感冒病毒裂解疫苗（Fluavax），2006年用于疫苗生产的流感病毒株符合北半球疫苗专家组(VEG)的推荐。疫苗

10、为水针剂型，规格为0.5 ml/支，批号：CTSLCHF0625A，有效期至2007年7月19日。每剂含45 mcg流感血凝素抗原，2006/2007年度北半球已认可的流感株15 mcg。 1.2.2 对照疫苗 由英国GSK公司生产的福禄立适（Fluarix）流感裂解疫苗，已在中国注册。疫苗为水针剂型，规格为0.5 ml/支，批号为XFLUA207AA，有效期至2007年7月。每剂含45 mcg流感血凝素抗原，2006/2007年度北半球已认可的流感株15 mcg。疫苗保存于2 8 暗处，严防冻结，在冷藏条件下运输。 1.3 方法 1.3.1 免疫程序及要求 接种前测量腋下体温并询问健康状况，

11、合格者于上臂三角肌附着处肌肉内接种疫苗。每人接种0.5 ml。 1.3.2 接种效果观察 (1)临床安全性于接种后30 min内观察即时反应，并连续3日观察局部反应(红、肿、热、痛等)和全身反应(发热、肌痛、头痛、皮疹等)；追踪反应者至反应消退；随访接种者，了解有无迟发性反应发生。(2)免疫原性观察对象于免疫前及免疫后4周采集血标本，分离血清于-20 保存。统一用微量血凝抑制(HI)试验检测流感病毒分型抗体滴度。(3)安全性判定标准：按1997年版预防接种手册的判断标准分类2。局部反应：红肿直径0.5 cm为无反应；0.62.5 cm 为轻反应；2.65.0 cm 为中反应；5.1 cm为强反

12、应。全身反应：腋下体温37.0 为无反应；37.1 37.5 为轻反应，37.6 38.5 为中反应，38.6 为强反应。(4)免疫原性判定标准(依据欧盟标准3):抗体阳转率：免疫前HI抗体110者则免疫后应140；免疫前HI抗体110者，以4倍增长计算。1860岁分型抗体阳转率应40，60岁分型抗体阳转率30。疫苗免疫前后血清HI抗体几何平均滴度(GMT)的增长倍数：免疫前HI抗体110者按15计算，统计疫苗免疫前后血清HI抗体GMT，进行疫苗免疫前后HI抗体GMT比较。1860岁分型抗体GMT增长应2.5倍，60岁分型抗体GMT增长应2.0倍。疫苗的保护率：以免疫前HI抗体滴度140为易感

13、者，HI抗体滴度140为非易感者，且以HI抗体滴度140为阳转和保护水平阳性界限值。1860岁保护率应70，60岁保护率应60。以上3项标准中达到其中1项即可。 1.3.3 统计学方法 统计所有受试者接种疫苗后的局部和全身反应，统计受试者有效血清的抗体阳转率、GMT增长倍数、抗体保护率。不同组之间的不良反应发生率、血清抗体阳转率、抗体保护率采用2检验进行比较，抗体GMT增长倍数采用t检验进行比较。 2 结果 2.1 临床安全性研究 2.1.1 临床反应观察 共对690名儿童、成人、老年人进行了临床反应观察，其中接受试验疫苗者460名（儿童组184名、成年组184名、老年组92名），对照疫苗者2

14、30名（儿童组92名、成年组92名、老年组46名），所有受试者均分别接种一剂疫苗后，均未观察到即时反应。 对接种试验疫苗者经72 h随访观察，有19例出现全身性反应（发热），反应率4.13%（其中轻度16例，占84.21%；中度3例，占15.79%）。 接种对照疫苗经72 h全身反应随访观察，有12例出现发热反应，反应率为5.22%（其中轻度11例，占91.67%；中度1例，占8.33%）。试验疫苗和对照疫苗的全身性反应（发热）率经统计学处理，显示差异无统计学意义（2=0.42，P0.5 ）。 2.1.2 局部反应观察 试验疫苗组接种疫苗后72 h系统观察期内，共观察到19例局部反应（反应率为

15、4.13），其中轻度16例（84.21%），中度2例（10.53%），重度1例（5.26%）。症状分别为红斑、疼痛、硬结和肿。其中儿童组4例，均为轻度反应；成人组6例(4例轻度、2例中度)；老年组9例中，1例为重度反应，肿块（43 mm）在72 h内消退，其余8例为轻度反应，未观察到重度及其以上局部反应。 对照疫苗接种后，共观察到8例局部反应（反应率为3.48），全部为轻度局部反应，未观察到中度及以上的局部反应。症状分别为红斑、疼痛、硬结、肿和淤斑。其中儿童组有2例，成人组1例,老年组5例。试验疫苗和对照疫苗的局部反应率经统计学处理，显示差异无统计学意义（2=0.17，P0.5）,见表1。表1

16、 观察对象接种疫苗后局部反应情况 2.2 免疫原性研究 本研究免疫前、后有效双份血清样本共610对，占所有受试者的88.41%（610/690）；其中试验组有效样本403对（儿童组171对、成人组155对、老年组77对），占其总人数的87.61%（403/460），对照组有效样本207对（儿童组83对、成人组81对、老年组43对），占其总人数的90%（207/230）；各年龄组受试者试验和对照组人群采血率分布差异均无统计学意义（2儿童组=0.62，P儿童组0.05；2成人组=0.72，P成人组0.05；2老年组=1.80，P老年组0.05）。 2.2.1 两种流感疫苗免疫后HI抗体阳转率比较

17、试验疫苗免疫后各血清HI抗体阳转率分别为H1N1 88.34%;H3N2 77.67%,B（亚）型83.62%；对照疫苗免疫后各血清HI抗体阳转率分别为H1N1 91.30%；H3N2 82.13%,B（亚）型79.71%。试验疫苗与对照疫苗各(亚)型两组间差别均无显著性（2H1N1=1.26，PH1N10.25；2H3N2=1.65，PH3N20.1；2B=1.44，PB0.1）。见表2。表2 两种流感疫苗免疫后HI抗体阳转率比较 2.2.2 两种流感疫苗免疫后抗体GMT增长倍数的比较 试验疫苗组和对照疫苗组免疫后H1N1亚型的平均增长倍数分别为12.3和20.2。其中儿童组分别为13.6和

18、23.3，成人组分别为12.3和19.8，老年组分别为9.7和16.0，对照疫苗组高于试验疫苗组，差异有统计学意义。 试验疫苗组和对照疫苗组免疫后H3N2亚型的平均增长倍数分别为10.8、16.0。其中儿童组分别为5.9、6.6；成人组分别为17.4、27.2，老年组分别为16.1、32.5，对照疫苗组高于试验疫苗组，差异有统计学意义。 试验疫苗组和对照疫苗组免疫后B（亚）型的平均增长倍数分别为12.1、9.7，试验疫苗组高于对照疫苗组，差异有统计学意义。其中成人组分别为13.1、11.0，老年组分别为12.3、13.4。儿童组分别为11.1、7.2，试验疫苗组高于对照疫苗组，差异有统计学意义

19、。见表3。 2.2.3 两种流感疫苗免疫后血清保护率的较 试验疫苗免疫后各(亚)型血清保护率分别为H1N1 99.26%（400/403）、H3N2 97.27%（392/403）、B（亚）型92.31%（372/403）；对照疫苗免疫后各(亚)型血清保护率分别为H1N1 96.62%（200/207）、H3N2 99.03 %（205/207）、B（亚）型88.41%（183/207）。H1N1试验疫苗组高于对照疫苗组，差异有统计学意义（2=4.38，P0.05）；H3N2和B（亚）型组间差别无显著性（2H3N2=1.28，P0.25；2B=2.54，P0.1）。 3 讨论 流感是人类至今尚

20、不能有效控制的世界性传染病。自1957年以来的3次流感世界性大流行的新亚型均首发于中国4，随着国际的交流增加，流感病毒传播的可能性及范围均扩大，因此，流感的预防随着疫苗的开发和使用逐渐引起人们的关注。目前国内对流感疫苗的研制工作方兴未艾。裂解型流表3 流感疫苗免疫前后抗体GMT增长倍数的比较注：*P0.05 感疫苗可降低全病毒灭活疫苗的接种不良反应，并保持相对较高的免疫原性，可扩大疫苗的使用范围1。 本次对澳大利亚CSL有限公司和英国GSK公司研制的同类流行性感冒病毒裂解疫苗观察表明：试验疫苗与对照疫苗1针接种后儿童、成人、老年人全身及局部反应率分别为4.13%、4.13%和3.70%、3.4

21、8%，差异无统计学意义。同时反应轻微，一般在48 h内消退，未发现其他异常反应及耦合反应。本次研究结果与诸多同类疫苗临床反应率大致相同，提示这两家公司生产的流行性感冒病毒裂解疫苗的安全性良好。 免疫原性研究结果表明，澳大利亚CSL有限公司和英国GSK公司生产的流行性感冒病毒裂解试验疫苗和对照疫苗接种后，HI抗体总阳转率分别为77.67%88.34%和79.71%91.30%，均大于40；H1N1、H3N2和B（亚）型血清保护率分别为99.26%、97.27%、92.31%和96.62%、99.03%、88.41%，均大于70；H1N1、H3N2和B（亚）型HI抗体GMT平均增长倍数均大于2.5

22、倍。符合欧盟颁布的流感疫苗的质量标准，说明接种两种疫苗后其免疫原性良好。 上述结果显示，此次观察的澳大利亚CSL有限公司生产的流行性感冒病毒裂解疫苗在人群中使用，具有良好的安全性和免疫原性，值得推广使用。【参考文献】 1 戚凤春.流感疫苗的研究进展.中国生物制品学杂志，2004，17(3)：190-192. 2 迮文远.预防接种手册.上海：上海科学技术文献出版社，1997，14-22. 3 胡月梅，方捍华，高桂华，等.进口加拿大流行性感冒裂解疫苗临床安全性与免疫原性评价.中华流行病学杂志，2005，26（7)：503-506. 4 耿贯一.流行病学，第2版.北京：人民卫生出版社，1997，458.