专题17 生物技术实践高考生物考点黄金30题 解析版.docx

1、专题17 生物技术实践高考生物考点黄金30题 解析版专题17生物技术实践1枯草芽孢杆菌菌体可合成淀粉酶等消化酶，在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用，但在紫外线照射下可获得不能合成淀粉酶的突变体。研究发现紫外线处理时间过短，获得突变体不足，若紫外线处理时间过长，又会导致枯草芽孢杆菌大量死亡。为探究紫外线处理最佳时间，需测定经处理后的枯草芽孢杆菌的突变率和存活率。完成相关实验步骤：（1）从临时保存菌种的_培养基中挑取菌体，制成适宜浓度稀释菌液，用稀释涂布平板法或_方法测定枯草芽孢杆菌的密度；（2）将上述稀释菌液_,分别用同等强度的紫外线灯在相同条件下处理A组1分钟、B组3分钟、C组5分钟；

2、（3）将每组处理后的菌液稀释适宜倍数，吸取一定量的菌液涂布在_的选择培养基上，每组菌液需要涂布_个平板，同时另取等量相应浓度菌液涂布在相应的1个牛肉膏蛋白胨培养基上，将上述平板均放置于37恒温培养箱中培养48小时；（4）计算每个平板上菌落数。牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数可用于计算_；其与选择培养基上的菌落数的差值可用于计算_。（选填“突变率”或“存活率”）【答案】斜面显微镜直接计数法均分为3组并标记A、B、C 以淀粉为唯一碳源 3个（或2-3个）存活率突变率【解析】（1）从临时保存菌种的斜面培养基中挑取菌体，制备成菌液，用稀释涂布平板法或显微镜直接计数（或抽样检测）方法测定枯草芽孢杆菌的浓度；

3、（2）将菌液均分为三组，（标记为A、B、C），分别用相同强度的紫外灯处理1min、3min、5min；（3）将每组处理后的菌液稀释适宜倍数，部分涂布在1个以淀粉为唯一碳源的培养基上，等量菌液涂布在1个牛肉膏蛋白胨培养基上。37培养48h。（4）计数每个平板上的菌落数。牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数可用于计算存活率，其与另一种培养基上的菌落数可用于计算突变率。2针对蔬菜废弃物纤维素降解慢的难题，从自然界中采集堆肥、枯树叶等样品进行分离，筛选分解能力较强的纤维素分解菌。某研究小组探究了温度对纤维素分解菌分解能力的影响，实验步骤如下：纤维素分解菌的筛选、分离及纯化纤维素分解菌菌株数量的测定纤维素酶活力

4、测定和降解滤纸能力的检测。请回答下列问题：（1）步骤中，用_法将1 mL菌液逐步稀释成10-6的悬浊液。为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR 溶液水培养基甲+-+培养基乙+-+注：+表示有，-表示无。据表判断，培养基甲_（填能或不能）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_；培养基乙_（填能或不能）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_。某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_。（2）对土壤中该类微生物进行计数，则步骤采用的接种方法是_。（3）纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤

5、维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的_进行定量测定的方法。【答案】梯度稀释不能液体培养基不能分离单菌落且纤维素不是唯一碳源不能培养基乙中没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌菌液浓度过高（土壤溶液稀释不够）稀释涂布平板法葡萄糖【解析】步骤中，若用稀释涂布平扳法接种，则必须将菌液进行一系列的梯度稀释。（2）分析表格可知，培养基甲为液体培养基且纤维素不是唯一碳源，不能用于分离和鉴别纤维素分解菌，纤维素分解菌鉴别培养基属于固体培养基；培养基乙没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌，因此也不能用于分离和鉴别纤维素分

6、解菌。某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高（土壤溶液稀释不够），为避免此种现象，应对菌液进行梯度稀释（加大稀释倍数）。（3）稀释涂布平板法不仅能实现微生物的分离，还能用于微生物的计数。（4）为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。3橘子全身都是宝，不仅果肉的营养价值和药用价值较高，其皮、核、络、叶都是“地道药材”。为了更好的对柑橘综合利用，某研究人员做了以下实验：请回答下列问题：（1）橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用_法提取橘皮精油。若使

7、用图中方法1时一般加入相当于柑橘果皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4，其目的是_。新鲜的柑橘皮直接处理，出油率较低，所以应将其_并用_浸泡。（2）玫瑰精油适合用图中方法2提取，其理由是玫瑰精油具有_的特点。蒸馏时收集的蒸馏液不是纯的玫瑰精油，而是油水混合物，加入_后，混合物又会重新分层。分离的油层还会含有一定的水分，一般可以加入一些_吸水。如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会减少，原因是_。【答案】压榨使橘皮油易于与水分离干燥去水石灰水易挥发、难溶于水、化学性质稳定 NaCl 无水硫酸钠部分玫瑰精油会随水蒸气挥发而流失【解析】（1）橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜

8、采用压榨法提取橘皮精油。若使用图中方法1时，为了使橘皮油易于与水分离，要加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4，并调节pH至78。为了提高出油率，应将其干燥去水并用石灰水浸泡。（2）玫瑰精油易挥发、难溶于水、化学性质稳定，提取玫瑰精油适合用图中方法2水蒸气蒸馏法。蒸馏时收集的蒸馏液不是纯的玫瑰精油，而是油水混合物，加入NaCl将其重新分层，加入无水硫酸钠吸水。如果蒸馏过程中不进行冷却，部分玫瑰精油会随水蒸气挥发而流失，导致精油提取量会减少。4将没有吃完的西瓜，盖上保鲜膜后放入冰箱，是很多人日常储藏西瓜的办法。但事实上，有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没

9、用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液，研究细菌的种类和数量。(1)该研究小组需配制用于培养微生物的培养基，配制的培养基一般都含有水、碳源、_和_。一般采用_法对培养基进行灭菌。(2)为了避免培养基污染，在培养过程中，需将平板_(填“正置”或“倒置”)。为了观察浸出液中微生物的种类和数量，采用_法接种。接种时，为了避免环境中微生物的污染，实验操作应在_附近进行。(3)在培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，说明西瓜的浸出液中有_（填“一种”或“多种”）细菌。细菌总数越多，说明西瓜被细菌污染的程度越_（填“高”或“低”）。【答案】氮源无机盐高压蒸汽灭

10、菌倒置稀释涂布平板酒精灯火焰多种高【解析】（1）培养基一般含有水、碳源（提供碳元素）、氮源（提供氮元素）和无机盐，为微生物提供生长繁殖必需的营养物质。实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，其中对培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌法。（2）为防止培养皿出现冷凝水影响菌落生长，污染培养基，需将培养皿倒置，不可正置。微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，在统计样品中的活菌数目时，通常采用稀释涂布平板法，当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。酒精灯火焰附近为无菌区域，可以有效避

11、免杂菌的污染，因此接种操作需要在酒精灯火焰附近进行。（3）一般来说，在一定的培养条件下，微生物表现出稳定的菌落特征，如菌落形状、大小、隆起程度、颜色等。若在平板上观察到形态和颜色等菌落特征不同的菌落，说明平板上菌落种类多，推知西瓜浸出液中存在多种细菌。浸出液中的细菌总数越多，浸出液中有机物的含量越高，西瓜被污染的程度越重。5玫瑰精油是制作高级香水的主要成分，能使人产生愉悦感。由于它的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，根据题意完成以下问题：（1）完成上述图解：_；_；_。（2）新鲜的柑橘皮中含有大量的果蜡、果胶和水分。橘皮中的精油提取适宜采用压榨法，为了提高出油率，需要

12、将橘皮用_浸泡。橘皮精油不适合采用蒸馏法的原因是_。（3）胡萝卜含有丰富的胡萝卜素，在提取胡萝卜素的实验中，_为最适宜的萃取剂。将提取的胡萝卜素粗品通过_法进行鉴定。通过分析该实验，写出影响萃取效率的主要因素_（写出两点即可）。【答案】水中蒸馏/水蒸气蒸馏 NaCL 无水Na2SO4石灰水原料易焦糊，有效成分易水解石油醚纸层析萃取剂的选择、原料颗粒的大小、紧密程度、萃取温度、时间【解析】（1）玫瑰精油的提取的实验流程是；鲜玫瑰花+清水水蒸气蒸馏（水中蒸馏）油水混合物油水分层除水过滤得玫瑰精油，为了促进油水分层要在油水混合物中加NaCl，除水过程加入的物质是无水Na2SO4。（2）橘皮精油主要存

13、在于橘皮中，用橘皮提取橘皮精油时，水蒸气蒸馏过程中部分橘皮精油会分解，用水中蒸馏又会出现原料易焦糊问题，因此提取橘皮精油不适合用蒸馏法，一般采用压榨法；由于橘皮中含有果胶和果蜡，压榨时容易滑脱，使出油率低，因此为了提高出油率需要将橘皮用石灰水浸泡。（3）胡萝卜素化学性质稳定，不溶于水，易溶于乙醚等有机溶剂，因此常用萃取法提取胡萝卜素，由于石油醚沸点较高、能较充分溶解胡萝卜素且不与水混溶，因此是提取胡萝卜素的最适宜的萃取剂；萃取获得的胡萝卜素常用纸层析法进行鉴定；影响萃取效率的主要因素的萃取剂的性质和用量，其次还受原料颗粒大小、紧密程度和含水量萃取的温度和条件等有关。6临床使用抗生素前，有时需要

14、做细菌耐药实验。试验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：（1）为了从样本中获取致病菌单菌落，可用_法或_法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。（2）取该单菌落适当稀释，用_法接种于固体培养基表面，而在37培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该病菌对抗生素B_；含C的滤纸片周围

15、的透明圈比含A的小，说明_；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的_。（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素_。【答案】平板划线法稀释涂布平板法涂布敏感不敏感该致病菌对C的敏感性较A的弱耐药菌 A 【解析】（1）从样本中分离菌落常用稀释涂布平板法或平板划线法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。（2）取该单菌落适当稀释，使其“均匀生长”的方法是用涂布法接种于固体培养基表面，适宜温度培养。（3）在抗药性检验过程中，如果在菌落周围出现透明的圆圈，说明此种抗生素可抑制该细菌；透明圈的大小表

16、示着此种抗生素抗菌的强弱将分别含有A、B、C三种抗生素的滤纸均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A敏感；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该病菌对抗生素B不敏感；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明该病菌对C的敏感性比对A的弱含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的耐药菌。（4）根据（3）的分析，实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好。7某新能源研究兴趣小组尝试用木薯块根的淀粉制备燃料酒精。他们用酶将木薯淀粉分解成单糖。查阅资料后，安装的酒精发酵装置、采用的发酵条

17、件如图。（1）向发酵瓶中加入5g酵母菌开始试验，发酵初期，通气阀需要偶尔短时间打开，并在A通气口处打气，以利于_；实验过程中，通气阀需要偶尔短时间打开，但目的是_。（2）第3天，取出少量发酵液，滴加含有_的浓硫酸永夜来检测酒精。（3）检测后发现，尽管酵母菌菌种合适、淀粉酶解物充足、操作正确、发酵温度和PH值适宜，但酒精含量（+）比预期低，我们展开了讨论，认为还有其它影响因素，如_，请设计试验对此因素进行探究并预测实验结果_（用表格形式呈现；用“+”表示酒精量，最高含量为“+”）。（4）请对预测的结果进行分析，并得出结论_。【答案】使酵母菌进行有氧呼吸，以便其增殖排出部分CO2保持装置内气压平衡

18、及pH值相对稳定重铬酸钾酵母菌数量组别加酵母菌种的量三天后酒精含量15g+27g+39g+411g+513g+如果随着酵母菌种数量增加，酒精含量也增加，则酵母菌数量是影响发酵的因素，如果随着酵母菌种数量增加，酒精含量没有增加，则酵母菌数量不是影响发酵的因素【解析】（1）图中的发酵装置是选修一果酒制作装置的一个改变，通气阀是进气口，发酵初期，通气阀需要偶尔短时间打开，并在A通气口处打气，以利于酵母菌进行有氧呼吸，代谢快，增殖快，繁殖大量酵母菌利于后期发酵；实验过程中，酵母菌进行酒精发酵，产生CO2，装置内气压升高，通气阀需要偶尔短时间打开，排出部分CO2保持装置内气压平衡。（2）重铬酸钾在酸性条

19、件下与酒精发生颜色反应，用来鉴定有酒精生成。（3）影响酵母菌发酵的因素除了菌种、淀粉酶解物充足、操作正确、发酵温度和pH值外，还有酵母菌数量等因素。可以通过以加入的酵母菌种数量为自变量，以生成的酒精含量为因变量设置实验进行探究。在表格设计中要注意对照原则，等量原则和单一变量原则。表格如图所示：组别加酵母菌种的量三天后酒精含量15g+27g+39g+411g+513g+（4）根据实验探究过程，其结果应该有两种情况，即如果随着酵母菌种数量增加，酒精含量也增加，则酵母菌数量是影响发酵的因素；如果随着酵母菌种数量增加，酒精含量没有增加，则酵母菌数量不是影响发酵的因素。8已知泡菜中亚硝酸盐含量与泡制时间

20、有关。为了测定不同泡制天数泡菜中亚硝酸盐的含量，某同学设计了一个实验，实验材料、试剂及用具包括：刻度移液管、比色管、不同浓度的亚硝酸钠标准溶液、亚硝酸盐的显色剂、不同泡制天数的泡菜滤液等。回答相关问题：请完善下列实验步骤。标准管的制备：用_和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管。样品管的制备：用刻度移液管分别吸取一定量的_，加到不同的比色管中，然后在各个比色管中加入等量的显色剂进行显色，得到样品管。将每个_分别与系列标准管进行比较，找出与样品管颜色深浅_的标准管，该管中亚硝酸钠含量即代表样品管中的亚硝酸盐含量，记录各样品管亚硝酸盐的含量。下图表示的是泡菜中_趋势。泡菜制作过程中产酸的细菌主要是_

21、（填“醋酸杆菌”或“乳酸菌”）。【答案】不同浓度亚硝酸钠标准溶液不同泡制天数的泡菜滤液样品管一致亚硝酸盐含量的含量随发酵时间的变化乳酸菌【解析】在亚硝酸盐的含量测定中，用不同浓度亚硝酸钠标准溶液和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管；用刻度移液管分别吸取一定量的不同泡制天数的泡菜滤液，加到不同的比色管中，然后在各个比色管中加入等量的显色剂进行显色，得到样品管；将每个样品管分别与系列标准管进行比较，找出与样品管颜色深浅相近的标准管，该管中亚硝酸钠含量即代表样品管中的亚硝酸盐含量，记录各样品管亚硝酸盐的含量。据图可知，该图表示亚硝酸盐的含量随发酵时间的变化曲线。制泡菜时使用的微生物是乳酸菌。9豆豉是

22、大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并在32 h内定期取样观测发酵效果。回答下列问题：（1）该实验的自变量是_、_。（2）如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好，说明该发酵菌是_。（3）如果在实验后，发现32 h内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵的最佳时间；若要确定最佳发酵时间，还需要做的事情是_。（4）从大豆到豆豉，大豆中的成分会发生一定的变化，其中，蛋白质转变为_，脂肪转变为_。【答案】菌种发酵时间好氧菌延长发酵时间，观测发酵效果

23、，最好的发酵效果所对应的时间即为最佳发酵时间氨基酸和肽脂肪酸和甘油【解析】（1）根据题干信息可知，该实验的自变量是菌种和发酵时间。（2）发酵容器内上层为有氧环境，底层为无氧环境，若发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好，则说明该发酵菌是好氧（需氧）微生物。（3）如果在实验后，发现32h内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵的最佳时间；若要确定最佳发酵时间，可在原操作的基础上，继续延长发酵时间，观测发酵效果，最好的发酵效果所对应的时间即为最佳的发酵时间。（4）从大豆到豆豉的过程中，蛋白质被蛋白酶分解成小分子肽和氨基酸，脂肪被脂肪酶分解成甘油和脂肪酸。10物质W是一种含氮

24、有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌）。回答下列问题。（1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是_。（2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应该选择_菌落进一步纯化，选择的依据是_。（3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即_。（4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）。为了比较酶E与天

25、然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加_，三处滴加量相同。一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明_；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明_。【答案】W 乙乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W 将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源缓冲液缓冲液不能降解W 酶E与天然酶降解W的能力相近【解析】（1）该研究小组的目标菌是能够降解物质W的细菌，而物质W是一种含氮有机物，故可作筛选培养基中的氮源。（2）研究小

26、组的目标菌，是能够降解物质W的细菌，培养基中乙菌落的周围出现透明圈，说明乙菌落能够降解物质W，故乙菌落为该小组的目标细菌。（3）目标菌能够利用空气中的氮气作为氮源，故选用的筛选培养基不添加氮源，能够在无氮源的培养基上生存的细菌便是目的细菌，故实验操作为：将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源。（4）C处作为空白对照，要排除作为溶剂的缓冲液对实验可能造成的影响，故需要在C处滴加缓冲液，且保持滴加量相同；培养基中的透明圈表示物质W被降解的情况，若C处不出现透明圈，则说明缓冲液不能降解物质W；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明物质W被降解的程度

27、相近，即酶E与天然酶降解物质W的能力相近。11空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：配置培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）；制作无菌平板；设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；将各组平板置于37恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题：（1）该培养基中微生物所需的氮来源于_。若要完成步骤，该培养基中的成分X通常是_。（2）步骤中，实验组的操作是_。（3）若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了

28、6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了_现象。若将30（即36-6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法_（填“正确”或“不正确”）。【答案】牛肉膏、蛋白胨琼脂将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间污染不正确【解析】（1）依据配制培养基的成分可知：该培养基中微生物所需的氮来源于牛肉膏、蛋白胨。因为该实验是 “用平板收集教室空气中的微生物”，所使用的培养基应为固体培养基，配制时，需加入凝固剂，据此推知：该培养基中的成分X通常是琼脂。（2）依题意可知，该实验的目的是：用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。所以步骤中，实验组的操作是：将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间，以收集教室不同高度空气中的微生物。（3）设置的空白对照组，在整个实验过程中没有用来收集空气中的微生物，若空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，说明培养基的配制是不成功的，在此次调查中出现了污染现象，所以若将30（即36-6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法不正确。12下列是与微生物培养有关的问题，请回答：某细菌固体