土壤中有效磷的测定精.docx

1、土壤中有效磷的测定精土壤中有效磷的测定D e te r m i na ti o n o f Ava il a b l e P ho sp ho ru s i n So il王 芹 1 徐清波 2 姚振琴 1 (1、 淮安市环境监测中心站 江苏淮安 223001; 2、 淮安市环境监察局 江苏淮安 223001 摘要 叙述了土壤中有效磷测定的原理 , 绘制了校准曲线 , 相关系数 、 斜率 、 截距满足分光光度法的 要求 ; 实际土壤样品测定 RS D 为 1. 07 2. 68 , 加标回收率为 93. 4 100 , 精密度和准确度均符合 要求 。关键词 有效磷 ; 分光光度法 ; 土壤中图

2、分类号 X 132 文献标志码 B地壳中磷元素 (以 P2O 5计 的平均含量大约为 0. 28%, 可分为有机磷和无机磷两大类 。 无机磷主要 以钙 、 镁 、 铁 、 铝等形态结合为磷酸盐 , 有机磷以卵磷 脂 、 核酸 、 磷脂为主 。土壤中的磷素大部分以迟效性 状态存在 , 了解土壤有效磷的状况 , 对于施用磷肥有 着直接的指导意义 。1 方法原理用 0. 50mol/L。 在石灰性土壤中碳酸氢钠可以抑制溶液中 Ca 2+的活 度 , 使某些活性较大的磷酸钙盐被浸提出来 ; 在酸性 土壤中因 pH 提高可使活性磷酸铁 、 铝盐水解而被浸 出 。 在浸出液中由于 Ca 、 Fe 、 A

3、l 浓度较低 , 不会产生 磷的再沉淀 ; 可用钼锑抗比色法定量测定 。2 试剂和材料分析时均使用符合国家标准或专业标准的分析 纯试剂和蒸馏水或去离子水 。碳酸氢钠 (分析纯 ;氢氧化钠 (分析纯 :50%(m /V 溶液 ;活性炭 (化学纯 ;盐酸 (化学纯 :1+1溶液 ;钼酸铵 (分析纯 ;硫酸 (分析纯 :1+1溶液 ;酒石酸氧锑钾 K (Sb O C4H 4O 6 1/2H2O, 分析纯 ;抗坏血酸 (C6H 8O 6, 左旋 , 比旋光度 +21+ 22, 分析纯 ;磷酸二氢钾 (分析纯 ;浸提 剂 (0. 50mol/LNaHCO3, pH =815 。将 42. 0g 碳 酸

4、氢 钠 溶 于 约 800mL 水 中 , 稀 释 至 约 990mL, 用氢氧化钠溶液调节至 pH 至 8. 5(用 pH 计 测定 , 1。 , 保存不宜 过久, 应先用 112h 以上 , 然后移放在平板漏斗上抽 气过滤 , 用水淋洗 45次 , 再用浸提剂浸泡 12h 以 上 , 在平板漏斗上抽气过滤 , 用水洗尽碳酸氢钠 , 并 至无磷为止 , 烘干备用 。钼酸盐溶液 :溶解 0. 35g 酒石酸氧锑钾于 100mL 水中。 13. 0g 钼酸铵溶于 200mL 约 60 的水中 , 冷 却 , 缓慢地加入 300mL 1+1硫酸 , 边加边搅 , 冷却。 最后再加上述酒石酸锑钾溶液

5、并且混合均匀 , 加水至 500mL 。 贮存在棕色玻璃瓶中于 4 保存。10%抗坏血酸溶液 :溶解 10g 抗坏血酸于水中 , 并稀释至 100mL 。该溶液贮存在棕色玻璃瓶中 , 在 约 4 可稳定数周 。 如颜色变黄 , 则弃去重配 。 磷标 准 贮 备 溶 液 c (P =100mg/L :称 取 105 烘干的磷酸二氢钾 0. 4394g, 溶于约 200mL 水中 , 加入 5mL 硫酸 , 转入 1L 容量瓶中 , 用水定容 。 磷标准工作溶液 c (P =5mg/L :将磷标准贮 备溶液用浸提剂 (3. 10 准确稀释 20倍 。3 仪器土壤筛 :1mm 方孔筛 ;分析天平 :

6、感量为 0. 01g;锥形瓶 :50mL 和 150mL, 带橡皮塞 ;漏斗 :7c m; 仪器仪表与分析监测 2009年第 4期滤纸 :11c m , 不含磷 ;移液管 :5、 10、 20mL;吸量管 :5mL ;量筒 :50mL;容量瓶 :50mL;分光光度计 :T U 21221;恒温往复振荡机 , 或普通往复振荡机及 251 的恒 温 室 。振 荡 频 率 约 180r/min, 但 在 150 250r/min 的振荡机都可使用 。4 样品4. 1 样品采集和保存本文所采样品来自淮安市某有机食品基地 , 按 “ S ” 形线路采集耕层土壤 (020c m 的 10个点的混 合样品

7、。 1个混合样品重在 1kg 左右 。具体步骤见 参考文献 1。4. 2 试样制备将野外取回的土样 , 进行风干 , 拣去动植物残体 和石块 、 结核等 , 磨细 (样品不能研得过细 , 研的过 细 , 容易破坏土壤矿物晶粒 , 2 1mm 孔筛 、 混匀 、5 分析步骤5. 1 土壤有效磷的浸提称取通过 1mm 筛的风干土样 2. 50g, 置于干燥 的 150mL 锥 形 瓶 中 , 加 入 251的 浸 提 剂 50. 0mL, 用橡皮塞塞紧 , 在 251 的液温下 , 于往 复振荡机上振荡 301m in, 立即用无磷滤纸过滤入 干燥的 150mL 锥形瓶中 。5. 2 滤出液中磷的

8、定量在浸提土样的当天 , 吸取滤出液 10. 00mL 1(含 125g P 放入干燥的 50mL 锥形瓶中 , 加入 10%抗坏血酸溶液 1mL, 慢慢摇动 , 使二氧化碳逸出 。 30s 后 加 2mL 钼酸盐溶液 , 慢慢摇动 , 使 CO 2逸出 。 再加入 12. 00mL 水 , 充分摇匀 , 逐尽 CO2。 在室温高 于 15 处放置 30m in 后 , 用 1c m 光径比色槽 3在 880nm 波长处比色 4, 测读吸光度 。减去空白溶液 10100mL 浸提剂代替土壤滤出液 , 同上处理 的吸 光度 , 并从校准曲线上查出磷含量 。5. 3 校准曲线的绘制在土样测定的同时

9、 , 吸取磷标准工作溶液 0、 1. 50、 2. 50、 5. 00、 10. 00、 15. 00、 20. 00、 25. 00mL, 分别放入 50 mL 容量瓶中 , 并用浸提剂定容。 此标准系列溶液中磷 的浓度依次为 0、 0. 15、 0. 25、 0. 50、 1. 00、 1. 50、 2. 00、 2150mg/LP 吸取标准 系列溶 液各 10. 00mL, 同 上 (512 处理显色 , 以零浓度溶液为参比 , 测读系列溶液 的吸光度。 然后以上述标准系列溶液的磷浓度为横坐 标 , 相应的吸光度为纵坐标绘制校准曲线。6 结果计算土壤中有效磷 (P 含量 (kg 按下式计

10、算 :P3k1000:查 得 P 的 质 量 浓 度 (g/ mL ;V 显色时定容体积 (mL ;m 风干土质量 (g ;ts 为分取倍数 (即浸提液总体积与吸取浸提 液体积之比 ;k 将风干换算成烘干土质量的系数 ;103 将 g 换算成 mg;1000 换算成每 kg 含 P 量 。7 结果与讨论7. 1 实验本次实验共做 5条校准曲线 , 测定数据如表 1所 示 。 精密度测定数据如表 2所示 。实际样品测定 (一例 如表 3所示 。表 1 空白值测定及校准曲线的绘制序号空白 空白 1234567含量 /(mg/L 00. 060. 10. 20. 40. 60. 81吸光度 0. 0

11、040. 0030. 0040. 0590. 1010. 1850. 4100. 6050. 796吸光度 2空 白 0000. 0550. 0970. 1850. 4060. 6010. 792标准曲线 =0. 9997 y =1. 001x -0. 0042吸光度 0. 0030. 0030. 0030. 0610. 1030. 1820. 4110. 6020. 802吸光度 2空 白 0000. 0580. 1000. 1790. 4080. 5990. 799标准曲线 =0. 9996 y =1. 005x -0. 004土壤中有效磷的测定 王 芹 , 等 续上表序号空白 空白 12

12、34567含量 /(mg/L 00. 060. 10. 20. 40. 60. 83吸光度 0. 0030. 0040. 0030. 0590. 1000. 1860. 4130. 6050. 797吸光度 2空 白 0000. 0540. 0960. 1820. 4090. 6010. 793标准曲线 =0. 9996 y =1. 004x -0. 0044吸光度 0. 0040. 0040. 0050. 0600. 1020. 1840. 4150. 6040. 798吸光度 2空 白 000. 0010. 0560. 0980. 1800. 4110. 6000. 794标准曲线 =0.

13、 9996 y =1. 004x -0. 0045吸光度 0. 0030. 0030. 0030. 0570. 1000. 1850. 4110. 6010. 798吸光度 2空 白 0000. 0540. 0970. 1820. 4080. 5980. 795标准曲线 =0. 9996 y =1. 004x -0. 004空白均值0. 003相关系数 0. 9996灵敏度 1. 004标准差 Sb0. 0005回归方程 y =1. 004x -0. 004表 2 精密度测定平行号试样0. 1c 0. 5c 0. 9c测定 结果 / (mg/L 10. 090. 090. 50. 890. 2

14、0. . 0. 89 30. 09. 0. 0. 500. 890. 89 40. 080. 090. 500. 500. 890. 88 50. 090. 090. 500. 500. 890. 89 60. 090. 090. 490. 500. 880. 89平均值 x /(0. 090. 500. 89标准偏差 S /(mg/L0. 0030. 0040. 005相对标准偏差 /%3. 240. 910. 44表 3 实际样品测定 (一例 平行号 1(麦田 2(油菜田 测定结果 (mg/kg 148. 950. 336. 938. 4 251. 249. 738. 339. 2 347

15、. 548. 939. 137. 2 449. 650. 138. 639. 1 548. 649. 538. 239. 5 650. 449. 237. 738. 6平均值 x /(mg/kg 49. 449. 638. 138. 7标准偏差 S /(mg/L 1. 320. 530. 760. 83续上表 平行号 2(油菜田 . 681. 072. 002. 13加标回收率 /%/g 49. 549. 738. 937. 2加标量 /g 50505050加标样品测定值 /g 97. 896. 489. 186. 5回收率 /%96. 693. 4100. 098. 6 7. 2 讨论从表 1、 表 2、 表 3可以看出校准曲线的相关系 数 、 斜率 、 截距满足分光光度法的要求 ; 实际土壤样 品测定 RS D 为 1. 07%2. 68%, 加 标