高中生物基因工程试题.docx

1、高中生物基因工程试题阶段质量检测（一）基因工程（时间：45分钟，满分：100分）一、选择题（每小题3分，共45分）1 下列有关基因工程技术的叙述，正确的是 （ ）A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和载体B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C.只要是细菌中的质粒都可以直接作为基因工程中的载体D.载体必须具备的条件之一是有多个限制酶切割位点，以便与外源基因进行连接2. （浙江高考）天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因 B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因 B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是（ ）A.提取矮牵牛蓝色花的 mRNA经逆转录

2、获得互补的 DNA再扩增基因BB. 利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因 BC.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D.将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞3. 日本下村修、美国沙尔菲和钱永健因在发现绿色荧光蛋白 （GFP）等研究方面做出突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP在紫外光的照射下会发出绿色荧光。依据 GFP的特性，你认为该蛋白在生物工程中的应用价值是 （ ）A.作为标记基因，研究基因的表达B.作为标记蛋白，研究细胞的转移C.注入肌肉细胞，繁殖发光小白鼠D. 标记噬菌体外壳，示踪 DNA路径4. 下列有关质粒的叙述，正确的是 （ ）

3、A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B. 质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状 DNAC.质粒只有在侵入宿主细胞后，才能在宿主细胞内复制D. 基因工程中常用的载体除了质粒外，还有核 DNA动植物病毒以及 入噬菌体的衍生 物5. 下列有关基因工程的叙述正确的是 （ ）A. 用同种限制性核酸内切酶切割载体与含目的基因的 DNA片段可获得相同的黏性末端B.以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同C.检测到受体细胞中含有目的基因就标志着基因工程育种已经成功D. 质粒上抗生素的抗性基因有利于质粒与外源基 因连接6. 下列有关基因工程和蛋白质工程步骤的叙述不 正确的是（

4、 ）A.将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用显微注射法B.设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列C. 蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白 质进行改造，或制造一种新蛋 白质的技术D.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质7.利用细菌大量生产人的胰岛素，下列叙述错误的是 （ ）A.用适当的酶对载体与人的胰岛素基因进行切割与黏合B. 用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组 DNA导入受体细菌C. 通常通过检测目的基因产物来检测重组 DNA是否已导入受体细菌D.重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录，并合成人的胰岛素&下列关于图中 P、Q R、S、G的描述，正确的是（ ）A.

5、P代表的是质粒 RNA S代表的是外源 DNAB.Q表示限制酶的作用，R表示RNA聚合酶的作用C.G是RNA与 DNA形成的重组质粒D. G是转基因形成的重组质粒 DNA9. 下列关于目的基因的检测与鉴定的叙述，错误的是 （ ）A. 目的基因在真核细胞中能否稳定遗传的关键是目的基因是否插入质粒 DNA中B.检测受体细胞是否含有目的基因及其是否成功转录的方法都是分子杂交法C.目的基因的鉴定通常是在个体水平上进行的D.如在受体细胞内检测到目的基因表达的蛋白质，可确定目的基因首端含有启动子10. 科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中， 经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞

6、可以合成人的生长激素并分泌到尿液中， 在医学研究及相关疾病治疗方面都具有重要意义。下列有关叙述错误的是 （ ）A.选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞具有全能性B.采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达C.人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用D. 将转基因小鼠体细胞进行核移植 （克隆），可以获得多个具有外源基因的后代11. 某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶 （Amy）基因a，通过基因工程的方法，将基因a与载体结合后导入马铃薯植株中， 经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在。下列有关这一过程的叙述不正确的是（ ）I I | I I

7、iA. 获取基因a的限制酶的作用部位是图中的 B. 基因a进入马铃薯细胞后，可随 马铃薯DNA分子的复制而复制，传给子代细胞C.连接基因a与载体的DNA连接酶的作用部位是图中的 D.通过该技术人类实现了定向改造马铃薯的遗传性状12.某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗， 开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图。下列有关叙述错误的是 （ ）A.步骤所代表的过程是逆转录B. 步骤需使用限制性核酸内切酶和 DNA连接酶C.步骤可用CaCh处理大肠杆菌，使其从感受态恢复到常态D. 检验Q蛋白的免疫反应特性，可用 Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原一抗 体特异性反应实验13.下图是四种不同质粒

8、的示意图，其中 ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示同一种限制性核酸内切酶的酶切位点。下列有关 叙述正确的是（ ）A.基因amp和 tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因B. 质粒包括细菌细胞中能自我复制的小型环状的 DNA和病毒中的DNAC. 限制性核酸内切酶的作用部位是 DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键D.用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长14.某线性DNA分子含有3 000个碱基对（bp），先用限制酶a切割，再把得到的产物用 限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的识别序列和切割

9、位点如图所示。 下列有关说法正确的是（ ）affe b 酶I IAGA1XT- -GGATCC-Tl.TAtiA- CCTAGG-a酶切割产物（bp）b酶再次切割产物（bp）1 600 ; 1 100 ; 300800; 300A. 在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有 3个和2个B.a酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接C.a酶与b酶切断的化学键不同D.用这两种酶和 DNA连接酶对该 DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后,AGATC15下表列举了部分限制酶及其识别的核苷酸序列和切点，有关叙述错误的是 （ ）限制酶识别的核苷酸序列和酶切位点Apal(X；(；CCCCCCGGGJL

10、Bci T130IMvalBstOIJbEco72I(t TGC ACAPspOMICCCGGG4A. Apal与PspOM识别的核苷酸序列相同，但两者切割 DNA形成的黏性末端不同B.不同限制酶可识别相同的核苷酸序列，同一种限制酶也可识别不同的核苷酸序列C.BciT130I将其识别的核苷酸序列切开后，形成的黏性末端都能连接在一起D.ECO72I切割的化学键和 RNA聚合酶、DNA聚合酶催化合成的 化学键相同二、非选择题（共55分）16.（12分）下图表示两种限制性核酸内切酶识别 DNA分子的特定序列，并在特定位点对DNA进行切割的示意图，请回答以下问题：甲：L fTC 仃A AT丁C3r-A

11、TT-AA-（；EcoR ITC-;AATT-CAGC T1 AA乙：L *D；r i-A - AC才-IA AT 1(；H削1T-TA-ACAA1T图中甲和乙代表 。(2)EcoRI、Hpa代表 。(3)图中甲和乙经过相应操作均形成两个片段，切口的类型分别为 、 。甲中限制酶的切点是 之间，乙中限制酶的切点是 之间。由图解可以看出，限制酶的作用特点是 (5) 如果甲中 G碱基发生改变，可能发生的情况是 17.(10分)除草剂草甘膦会把普通大豆植株与杂草一起杀死。科学家从抗草甘膦的矮 牵牛中分离克隆出 EPSP合成酶基因，培育出了抗草甘膦的转基因大豆，从而大大降低了田(1)科学家在进行上述基因

12、操作时，通常要用同一种 分别切割质粒和含目的基因的DNA质粒的黏性末端与目的基因两侧的黏性末端就可通过 而黏合。这一过程体现了质粒作为运载体必须具备的条件是 。为了确定转基因大豆是否培育成功，既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测， 又要用 方法从 个体水平鉴定大豆植株的抗除草剂特性。(3)有人提出，种植上述转基因大豆，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物 种造成“基因污染”。另一方观点认为，由于存在 ，它们很难与其他植物杂交。18.(13分)科学家研究发现，一种植物激素油菜素内酯能促进农药在植物体内的 降解和代谢。研究人员发现，用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因 (如

13、P450)的表达和酶活性都得到提高，在这些基因的“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶 性物质或低毒无毒物质，有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作， 请回答：第步用PCF技术扩增基因时用到的耐高温的酶通常是指的酶有 。(2)图中导入重组质粒的方法是 。在导入之前应用 处理。(3)导入重组质粒以后，往往还需要进行检测和筛选，可用 制成探针，检测是否导入了重组基因；在培养基中加入 可将含有目的基因的细胞筛选出来。(4)请你为该课题命名： 。(5)请你说说该研究发现的生态学意义 (至少写出三项)： 1大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它O设计 EcoRI和 BarHI双酶切

14、的目的是 要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有 (3)经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是 20.(10分)为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用 SHH基因的非模21.板链转录合成的 RNA乍为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情请回答:(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时， (填“需要”或“不需要”)启动子。(2)步骤中，用Ca2+处理大肠杆菌，使之成为重组菌。进而判断SHH基因的转录情况。答案1.选D载体不属于酶。不同的限制酶识别不同的核苷酸序列。天然质粒大多不符合 要求，要进行

15、改造。2选A获得目的基因通常有两种办法：如果目的基因的序列是已知的，可以用化学方法合成目的基因，或者用聚合酶链式反应 (PCR)扩增目的基因；如果目的基因的核苷酸序列是未知的，我们可以建立一个包括目的基因在内的基因文库， 把DNA分子的所有基因都包括在这个基因文库中，从基因文库中找到我们想要研究的目的基因。目的基因 （基因B）与质粒连接应用DNA连接酶，而非DNA聚合酶。不能将目的基因直接导入受体细胞， 并且植物一般是用土壤农杆菌导入目的基因。由于 mRNA!通过转录获得的，DNA RNA的碱基之间遵循碱基互补配对原则，所以在逆转录酶作用下，通过逆转录可以获得目的基因 B,再通过扩增获得大量的

16、基因B。3选B绿色荧光蛋白基因在基因工程中常作为标记基因，其产物可作为标记蛋白，用于研究细胞的转移。4.选B质粒是独立存在于细菌 DNA之外的小型环状 DNA分子，不是细胞器。真核细 胞的核内DNA或细菌拟核的DNA都不能作为基因工程的载体。5选A用同种限制性核酸内切酶切割载体与含目的基因的 DNA片段可获得相同的黏性末端，以便载体与目的基因连接。由于一个氨基酸可能对应多个密码子， 故以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列可能不同。 目的基因导入受体细胞后稳定维持和表达其遗传性状标志着基因工程育种已经成功。 质粒上的抗生素抗性基因作为标记基因，可用作重组 DNA勺鉴定和选择

17、。6选B将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用显微注射法；所设计引物应能与表达载体两端的序列互补配对；蛋白质工程是指以分子生物学相关理论为基础， 通过对基因修 饰或基因合成，对现有的蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质的技术； 通过蛋白质工程 可合成自然界不存在的蛋白质。7选C 检测重组DNA是否已导入受体细菌，需要对载体的标记基因 进行检测，检测目的基因的表达产物是检测目的基因是否表达的常用方法。&选D 质粒是小型环状 DNA分子，因此P是质粒DNA S是外源DNA G是质粒和外 源DNA通过DNA连接酶连接而成的重组质粒；质粒和外源DNA需经过同一种限制性核酸内切 酶切割出相同的黏性末端。9

18、. 选A目的基因在真核细胞中能否稳定遗传的关键是目的基因是否插入到核 DNA中; 检测目的基因用的方法是 DNA分子杂交法，检测mRNA用到的是DNA-RNA分子杂交法；基因 能成功表达，说明其首端含有启动子。10. 选B受精卵的全能性最高； 采用DNA分子杂交技术可检测受体细胞是 否含目的基 因；人的生长激素基因能在小鼠细胞中表达， 说明生物共用一套遗传密码； 通过克隆产生的 细胞相同。11. 选C DNA连接酶和限制酶的作用部位都是磷酸二酯键，即图中 部位。12. 选C由图可知，步骤 所代表的过程是逆转录；步骤 需使用限制性核酸内切酶 和DNA连接酶；步骤 可用CaCb处理大肠杆菌，使其细

19、胞从常态转化为感受态细胞；检验Q蛋白的免疫反应特性， 可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原一抗体特异性反应实验。13. 选D质粒上不含等位基因；质粒是细胞染色体 （拟核）外能够自主复制的很小的环状DNA分子；限制性核酸内切酶的作用部位是 DNA分子中特定的两个相邻核苷酸之间的磷酸二酯键，而不是氢键。14. 选D由表中信息可知，a酶的识别序列有2个，b酶的识别序列是1个。a酶与b 酶切断的化学键相同。 a酶与b酶切出的黏性末端可以互补。GGGCCC15. 选C Apal与PspOM识别的序列都是 八由于切点不同，形成的黏性末端也CCCGGGCCATGG CCTAGG就不同；从表格第二栏中的

20、信息可知， B正确；BciT130I可识别 和 序列，经GGTACC GGATCC切割后形成的黏性末端不能互连； ECO72I切割的是磷酸二酯键， RNA聚合酶、DNA聚合酶催化合成的也是磷酸二酯键。16.解析：从图解可以看出，甲和乙代表的是不同的 DNA片段，在相应的限制酶（EcORI、Hpal）的作用下，在特定的位点被剪切成两部分。 前者是在识别序列的中心轴线两侧分别切开，形成的末端是黏性末端；后者是 在识别序列的中心轴线处切开，形成的末端是平末端。答案：（1）有特殊脱氧核苷酸序列的 DNA片段（2） 两种不同的限制酶（3） 黏性末端 平末端 G A T、A（4） 能识别双链DNA分子上特

21、定的脱氧核苷酸序列，并从特定的位点将 DNA分子切开（5） 限制酶不能识别切割位点17. 解析：在构建基因表达载体时， 要用限制酶分别切割目的基因和运载体。检测目的 基因是否导入或表达可用 DNA分子杂交的方法。不同物种之间存在着生殖隔离。答案：（1）限制酶（限制性核酸内切酶）碱基互补配对 具有一个或多个限制酶切点（2）EPSP合成酶基因（目的基因）喷施除草剂（草甘膦）（3）生殖隔离18. 解析：（1）油菜素内酯基因是目的基因，获得目的基因的方法有：从 cDNA文库中获取、从基因文库中获取、人工合成目的基因或利用 PCR技术扩增等。PCR技术中耐高温的酶是DNA聚合酶（Taq酶）。步骤用到的是

22、对质粒进行剪切和拼接，要用到限制酶和 DNA连接酶。（2）将重组质粒导入受体细菌中，采用 CeT转化法，导入前应用 CaCb溶液处理，使受体菌成为感受态细胞，增加受体细菌细胞膜的通透性。 （3）对目的基因检测和筛选中应用红霉素抗性基因制作成探针， 检测是否导入重组基因； 筛选出含有目的基因的细胞可在培养基中加入红霉素。（4）课题命名可以是：探究油菜素内酯能否促进土壤中农药的分解。 （5）该项研究的意义：加速农药的分解，降低植物体内的农药含量，有利于环境保护和人体健康。答案：（1）从cDNA文库中获取、从基因文库中获取、 人工合成目的基因或利用 PCR技术扩增（任答两种即可）DNA聚合酶 限制酶

23、和DNA连接酶2 +（2） Ca转化法氯化钙溶液（3） 红霉素抗性基因 红霉素（4） 探究油菜素内酯能否促进土壤中农药的分解（5） 加速农药的分解，降低植物体内的农药含量，有利于环境保护和人体健康19. 解析：（1）由题干信息可知，Klenow酶是一种DNA聚合酶。合成的双链 DNA中碱基 对数为 72 + 72 - 18= 126。（2）大肠杆菌繁殖快，遗传物质相对较少，是作为基因工程理想的受体细胞。双酶切可 防止目的基因和载体任意连接。 （3）由题干信息可知，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基现象。答案：（1）DNA聚合 126 （2）繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少（答案合理也给分）2保

24、证目的基因和载体定向连接 （或防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接 ）3标记基因 （3）合成的核苷酸单链仍较长，产生缺失碱基的现象20. 解析：（1）重组载体中SHH基因表达需要启动子。（2）大肠杆菌细胞用 Cai +处理后就 成为感受态细胞；能在添加氨苄青霉素的培养基上生存的细菌含有氨苄青霉素抗性基因， 没有氨苄青霉素抗性基因的细菌将会死亡。 （3）能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有 IPTG和X-gal的培养基上会形成蓝色菌落，重组菌中 LacZ基因被SHH基因插入后不表达，重组菌在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成白色菌落。（4）判断SHH基因的转录情况，也就是判 断S

25、HH基因是否转录出 mRNA答案：需要（2） 感受态 Amp或氨苄青霉素抗性或抗性）（3） 白色SHH转录的mRNA只写mRNA不给分）19.(10分)降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、 半衰期长的新型降钙素， 从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条各含 72个碱基的DNA单链，两条链通过 18个碱基对形成部分双链 DNA片段，再利用 Klenow酶补平，获得双链DNA过程如下图。5 3FN丸单犍3 5)NA 单谴Klnow 酶* Q JT血 * * .贾链UN為在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：(1)Klenow酶是一种 酶，合成的双链 DNA有 个碱基对。(2)获得的双链DNA经EcoRI (识别序列和切割位点一 & AATTC-)和BanHI (识别序列和切割位点一& GATT)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中， 筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。