3 消毒与灭菌.ppt

1、 第三章第三章 消毒灭菌与病原消毒灭菌与病原 微生物实验室生物安全微生物实验室生物安全 生长繁殖生长繁殖微生物微生物 变变 异异 死死 亡亡 环境改变环境改变环境适宜环境适宜 环境剧变环境剧变消毒与灭菌消毒与灭菌 基本概念基本概念 消毒消毒(disinfection)：杀死物体上或环境中的病杀死物体上或环境中的病原原 微生物、并不一定杀死细菌芽胞或非病原微生物、并不一定杀死细菌芽胞或非病原 微生物的方法。微生物的方法。灭菌灭菌(sterilization)：杀死物体上所有微生物杀死物体上所有微生物的方的方 法，包括芽孢。法，包括芽孢。清洁清洁(cleaning)：除去尘埃和污秽以减少微生物除去

2、尘埃和污秽以减少微生物 数量的方法。数量的方法。基本概念基本概念 无菌无菌(asepsis)：不存在活菌的意思。不存在活菌的意思。无菌操作无菌操作：防止细菌进入人体或其他物品的：防止细菌进入人体或其他物品的 操作技术。操作技术。防腐防腐(antisepsis):):体外防止或抑制细菌生长繁体外防止或抑制细菌生长繁殖殖 的方法。的方法。例：例：外科手术外科手术 无菌操作无菌操作 内服抗生素内服抗生素 抑菌抑菌 接种环火焰烧灼接种环火焰烧灼无菌无菌 火化火化灭菌灭菌 局部皮肤局部皮肤75%75%酒精擦拭酒精擦拭 消毒消毒 一、消毒灭菌的方法一、消毒灭菌的方法n常用的消毒和灭菌方法常用的消毒和灭菌方

3、法 两大类：两大类：q物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法q化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法（一）物理消毒灭菌法（一）物理消毒灭菌法 1 1、热力灭菌热力灭菌 原理：破坏菌体蛋白质与核酸，使其肽链断原理：破坏菌体蛋白质与核酸，使其肽链断 裂，蛋白质变性凝固，核酸解链崩裂，蛋白质变性凝固，核酸解链崩 解，导致细菌死亡。解，导致细菌死亡。常用热力灭菌法常用热力灭菌法种类种类方法方法效果效果用途用途干干热热焚烧焚烧点燃或焚烧炉点燃或焚烧炉 灭菌灭菌废弃污物、尸体废弃污物、尸体烧灼烧灼火焰烧灼火焰烧灼 灭菌灭菌接种环，试管口接种环，试管口干烤干烤红外线红外线 干烤箱，热空气干烤箱，热空气 160-170C 2h

4、电磁波热效应电磁波热效应 灭菌灭菌 灭菌灭菌玻璃器皿等耐高玻璃器皿等耐高温的物品温的物品医疗器械医疗器械湿湿热热煮沸法煮沸法100C，5-10min，沸水，沸水 消毒消毒饮水饮水.食具食具.注射器注射器高高压压蒸蒸气气灭灭菌菌法法 高压蒸气灭菌高压蒸气灭菌 器器 1.05kg/cm2、121.3C 15-20min 灭菌灭菌耐高温、耐湿物品耐高温、耐湿物品如：如：NS.培养基培养基.手术衣手术衣 常用热力灭菌法常用热力灭菌法种类种类方法方法 效果效果 用途用途湿湿热热巴巴氏氏消消毒法毒法 61.1-62.830 min，71.7 30sec（常用（常用）消毒（杀死病消毒（杀死病原菌，不破坏原菌

5、，不破坏营养成分）营养成分）流流通通蒸蒸气气灭灭菌菌法法 100 蒸气蒸气 1530min牛奶，酒类牛奶，酒类消毒（杀死细消毒（杀死细菌繁殖体，不菌繁殖体，不杀死芽胞）杀死芽胞）不耐高温、不耐高温、高压物品高压物品间歇灭间歇灭菌法菌法反复多次反复多次流动蒸气流动蒸气灭菌灭菌不耐高温、不耐高温、高压物品高压物品湿热效力大于干热湿热效力大于干热 原因原因 （1 1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固变性）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固变性 （2 2）湿热的穿透力比干热大）湿热的穿透力比干热大 （3 3）湿热的蒸汽有潜热效应湿热的蒸汽有潜热效应高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器 2 2、辐射杀菌法、辐射杀菌法 （1

6、1）紫外线）紫外线（ultraviolet ray,UV):260nm260nm-266nm-266nm（最佳杀菌波长）最佳杀菌波长）杀菌原理杀菌原理：使：使DNADNA上相邻的上相邻的T T碱基通过共价键结碱基通过共价键结 合成二聚体，干扰合成二聚体，干扰DNADNA复制与转录，复制与转录，导致细菌死亡导致细菌死亡 特点特点：穿透力弱穿透力弱 适用范围适用范围：适于空气和物体表面消毒。适于空气和物体表面消毒。（2 2）电离辐射）电离辐射 如：高速电子，如：高速电子，X-rayX-ray，-ray-ray 机理机理：自由基及自由基离子：自由基及自由基离子 破坏微生物破坏微生物 蛋白质、核酸、酶

7、蛋白质、核酸、酶 死亡死亡适用物品适用物品：不耐热的物品（药品及医疗用品）：不耐热的物品（药品及医疗用品）（3 3）微波（）微波（microwave)microwave)机理机理：热效应：热效应 适用物品适用物品：非金属物品、食品：非金属物品、食品3 3、滤过除菌法、滤过除菌法（filtration）机理机理：用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌：用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌 除去除去,以达到除菌目的以达到除菌目的 器具器具：滤菌器（：滤菌器（filter）适用物品适用物品：不耐高温物品（：不耐高温物品（血清、毒素、抗生素）血清、毒素、抗生素）以及空气等的除菌以及空气等的除菌 4、干燥

8、与低温抑菌法干燥与低温抑菌法在低温状态下真空抽去水分在低温状态下真空抽去水分冷冻真空干燥法：冷冻真空干燥法：用途：保存菌种用途：保存菌种干燥法：保存食物干燥法：保存食物（二）化学消毒灭菌法（二）化学消毒灭菌法 消毒剂杀菌机理：消毒剂杀菌机理：1.1.使菌体蛋白变性和凝固使菌体蛋白变性和凝固 酚、醇、酸硷、醛类酚、醇、酸硷、醛类 重金属盐类重金属盐类(高浓度高浓度)2.2.干扰细菌的酶系统及代谢干扰细菌的酶系统及代谢(破坏破坏-SH-SH，酶失活酶失活)氧化剂、重金属盐类氧化剂、重金属盐类(低浓度低浓度)3.3.损伤菌细胞膜损伤菌细胞膜 酚类酚类(低浓度低浓度)、表面活性剂、表面活性剂按杀菌能力

9、可将消毒剂可分按杀菌能力可将消毒剂可分消毒剂消毒剂类型类型种类种类杀菌机理杀菌机理范围范围高效消高效消毒剂毒剂含氯消毒剂次氯酸钠等酶失活和氧化饮用水、地面等过氧化物类过氧化氢等酶活性丧失物品表面和皮肤醛类甲醛、戊二醛蛋白、核酸变性器械环氧乙烷环氧乙烷蛋白、核酸变性医疗器械中效消中效消毒剂毒剂含碘消毒剂含碘消毒剂碘酊、碘伏氧化、沉淀蛋白皮肤、体温计等醇类醇类乙醇或异丙醇蛋白变性皮肤、体温计等低效消低效消毒剂毒剂季铵盐类季铵盐类新洁尔灭表面活性剂地面、皮肤等氯己定氯己定表面活性剂皮肤黏膜等高锰酸钾高锰酸钾高锰酸钾氧化餐具、水果等类别 作用机制 常用种类酚类 蛋白变性，细胞膜损伤 石炭酸醇类 蛋白变

10、性 乙醇（70%-75%）氧化剂 氧化、蛋白沉淀 高锰酸钾、过氧乙酸 碘酒重金属盐 氧化、蛋白酶变性 红汞、硫柳汞表面活性剂改变细胞壁、膜通透性 新洁尔灭染料 干扰氧化、抑制繁殖 龙胆紫烷化剂 菌体蛋白质及核酸烷基化 甲醛、烷氧乙烷常用消毒剂的种类（按化学成分）常用消毒剂的种类（按化学成分）常用消毒剂的应用常用消毒剂的应用种类种类使用浓度使用浓度用途用途石炭酸石炭酸3%5%地面、器具表面地面、器具表面、皮肤消毒皮肤消毒乙醇乙醇70%75%皮肤、体温计消毒皮肤、体温计消毒高锰酸钾高锰酸钾0.1%皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒红汞红汞2%皮肤、粘膜、小创伤消毒皮肤、粘膜、小创

11、伤消毒硫柳汞硫柳汞0.1%皮肤消毒、手术部位消毒皮肤消毒、手术部位消毒过氧乙酸过氧乙酸0.2%0.3%塑料、玻璃器材消毒塑料、玻璃器材消毒碘酒碘酒2.0%2.5%皮肤消毒皮肤消毒新洁尔灭新洁尔灭0.41.6%手术手术洗手、浸泡手术器械洗手、浸泡手术器械龙胆紫龙胆紫2%4%浅表浅表创伤消毒创伤消毒二、消毒灭菌的应用二、消毒灭菌的应用医疗器械物品的消毒灭菌医疗器械物品的消毒灭菌室内空气的消毒灭菌室内空气的消毒灭菌手和皮肤的消毒手和皮肤的消毒黏膜的消毒黏膜的消毒病人排泄物和分泌物的消毒灭菌病人排泄物和分泌物的消毒灭菌病人污染物品的消毒病人污染物品的消毒饮水的消毒饮水的消毒环境的消毒环境的消毒根据消毒

12、或灭菌对象，选择合适的消毒灭菌方法根据消毒或灭菌对象，选择合适的消毒灭菌方法消毒剂消毒剂微生物微生物 环境环境性质性质浓度浓度作用时作用时间间种类种类数量数量有机物有机物温度温度酸碱度酸碱度三、影响消毒灭菌效果的因素三、影响消毒灭菌效果的因素 病病原微生物实验室生物安全原微生物实验室生物安全 生生 物物 安安 全全（biosafety）是是 生生 物物 技技 术术 安安 全全（safetyofbiotechnology）的简称。的简称。狭狭义义地地指指现现代代生生物物技技术术的的研研究究、开开发发、应应用用及及转转基基因因生生物物可可能能对对生生物物多多样样性性、生生态态环环境境和和人人类类健

13、健康产生潜在的危害。康产生潜在的危害。广广义义地地指指与与生生物物有有关关的的各各种种因因素素对对社社会会、经经济济、人类健康及生态环境所产生的危害或潜在风险。人类健康及生态环境所产生的危害或潜在风险。病病原原微微生生物物所所致致的的安安全全问问题题，如如病病原原微微生生物物实实验验室室的的安安全全隐隐患患、生生物物武武器器、生生物物恐恐怖怖、重重大大传传染染病病的的暴暴发发流流行行等等，也也是是人人类类社社会会所所面面临的最现实的生物安全问题。临的最现实的生物安全问题。病病原原微微生生物物实实验验室室生生物物安安全全的的核核心心是是防防扩扩散散和和防感染防感染。关关于于病病原原微微生生物物实

14、实验验室室生生物物安安全全，我我国国法法令令包包括括对对病病原原微微生生物物的的分分类类管管理理，对对实实验验室室的的分分级级管管理理，实实验验室室感感染染的的控控制制以以及及监监督督和和法法律律责责任等。任等。一、病原微生物的分类一、病原微生物的分类 根根据据传传染染性性、感感染染后后对对个个体体或或者者群群体体的的危危害害程程度度，病原微生物分为四类：病原微生物分为四类：第第一一类类：能能够够引引起起人人类类或或者者动动物物非非常常严严重重疾疾病病的的微微生生物物，以以及及我我国国尚尚未未发发现现或或者者已已经经宣宣布布消消灭灭的的微微生生物物。如如天天花花、埃博拉病毒等。埃博拉病毒等。第

15、第二二类类：能能够够引引起起人人类类或或者者动动物物严严重重疾疾病病，比比较较容容易易直直接接或或者者间间接接在在人人与与人人、动动物物与与人人、动动物物与与动动物物间间传传播播的的微微生生物物。如如乙乙脑脑、狂狂犬犬病病病病毒毒、HIVHIV、脊脊灰灰、结结核核、霍霍乱等。乱等。一、病原微生物的分类一、病原微生物的分类第第三三类类：能能够够引引起起人人或或动动物物疾疾病病，但但一一般般情情况况下下对对人人、动动物物或或环环境境不不构构成成严严重重危危害害，传传播播风风险险有有限限，实实验验室室感感染染后后很很少少引引起起严严重重疾疾病病，并并且且具具备备有有效效治治疗疗和和预预防防措措施施的

16、的微生物。微生物。如肝炎、风疹、疱疹、流感、破伤风病毒等。如肝炎、风疹、疱疹、流感、破伤风病毒等。第第四四类类：在在通通常常情情况况下下不不会会引引起起人人或或动动物物疾疾病病的的微微生生物物。如小鼠白血病病毒等。如小鼠白血病病毒等。第一类、第二类统称为高致病性病原微生物。第一类、第二类统称为高致病性病原微生物。二、病原微生物实验室的分级二、病原微生物实验室的分级级别级别处理对象处理对象一级一级对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、动植物致病的致病因子动植物致病的致病因子。二级二级对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危致病因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危害，害，具具有有效的预防和治疗措施有有效的预防和治疗措施。三级三级对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动植物胶使人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动植物和环境