微生物的控制与菌种保藏.ppt

1、第九章第九章 微生物的控制与菌种的保藏微生物的控制与菌种的保藏9.1 消毒与灭菌消毒与灭菌9.2 菌种保藏菌种保藏9.1 消毒与灭菌消毒与灭菌9.1.1 基本概念基本概念9.1.2 常用的消毒方法常用的消毒方法9.1.3 常用的灭菌方法常用的灭菌方法课后习题课后习题1 1、何谓灭菌、消毒、防腐？、何谓灭菌、消毒、防腐？2 2、常用的灭菌、消毒方法有哪些？各种方法、常用的灭菌、消毒方法有哪些？各种方法的原理、适用范围是什么？的原理、适用范围是什么？9.1.1 基本概念基本概念 1、灭菌：采用灭菌：采用强烈强烈的理化因素杀死或的理化因素杀死或清除任何物体内外清除任何物体内外所有微生物所有微生物的方

2、法，的方法，其结果是无菌。实践中灭菌可以分为其结果是无菌。实践中灭菌可以分为杀菌和溶菌。前者使菌体死亡，但形杀菌和溶菌。前者使菌体死亡，但形体尚存；后者使细菌裂解而消失。体尚存；后者使细菌裂解而消失。高压蒸汽灭菌锅高压蒸汽灭菌锅紫外线灭菌紫外线灭菌 2、消毒：采用消毒：采用较温和较温和的理化因素，仅的理化因素，仅杀死物体表面或内部杀死物体表面或内部部分微生物部分微生物(有害有害微生物微生物)，而对被消毒的对象基本无害，而对被消毒的对象基本无害的措施。的措施。生活中消毒通常指杀死病原微生物；生活中消毒通常指杀死病原微生物；工业上则指消除杂菌，除去引起感染的工业上则指消除杂菌，除去引起感染的微生物

3、。微生物。3、防腐：能够防腐：能够防止或抑制防止或抑制微生物的生长，微生物的生长，但但不能杀死不能杀死微生物群体的方法。微生物群体的方法。防腐剂：那些可以抑制微生物生长，但防腐剂：那些可以抑制微生物生长，但对人体或动物体的毒性较低的化学试对人体或动物体的毒性较低的化学试剂。剂。低温低温干燥（晒干）干燥（晒干）干燥（烤干、烘干）干燥（烤干、烘干）除氧除氧高渗（糖）高渗（糖）高渗（盐）高渗（盐）桐油桐油油漆油漆防腐剂防腐剂n n方便面、饼干、火腿肠、榨菜、咸菜、膨方便面、饼干、火腿肠、榨菜、咸菜、膨化食品、各种罐头、腌渍食品等都各类含化食品、各种罐头、腌渍食品等都各类含有防腐剂！有防腐剂！n n倡

4、导绿色消费！倡导绿色消费！n n关注新型的天然防腐剂！如葡萄糖氧化酶、关注新型的天然防腐剂！如葡萄糖氧化酶、鱼精蛋白、溶菌酶、乳酸菌、果胶分解物鱼精蛋白、溶菌酶、乳酸菌、果胶分解物等。等。9.1.2 常用的消毒方法常用的消毒方法1、煮沸消毒法煮沸消毒法2、巴斯德消毒法巴斯德消毒法3、利用消毒剂处理利用消毒剂处理1、煮沸消毒法煮沸消毒法物品在水中煮沸物品在水中煮沸15min，可杀死绝大多数微生物可杀死绝大多数微生物所有的营养细胞和一部所有的营养细胞和一部分芽孢。分芽孢。一般用于饮用水的消毒。一般用于饮用水的消毒。2、巴斯德消毒法巴斯德消毒法主要针对主要针对不宜长时间高温灭菌的液体食品不宜长时间高

5、温灭菌的液体食品，能杀死能杀死无芽孢无芽孢的病原菌，又能保持食品的的病原菌，又能保持食品的风味。风味。方法：待消毒的液体食品置于方法：待消毒的液体食品置于6085下下处理处理15s30min，然后迅速冷却。，然后迅速冷却。3、利用消毒剂处理利用消毒剂处理化学消毒剂：凡是可以抑制或杀灭微生化学消毒剂：凡是可以抑制或杀灭微生物的化学药品。用量少时称为防腐剂。物的化学药品。用量少时称为防腐剂。（1）酸碱类酸碱类酸类酸类n n作用机制：破坏微生物的细胞膜和蛋白质。作用机制：破坏微生物的细胞膜和蛋白质。n n代表：代表：无机酸如硫酸、盐酸等杀菌力虽强，但腐蚀无机酸如硫酸、盐酸等杀菌力虽强，但腐蚀性大，实

6、际上不宜作消毒剂。性大，实际上不宜作消毒剂。一般以醋酸一般以醋酸用于房间熏蒸消毒。用于房间熏蒸消毒。某些有机酸如某些有机酸如苯甲酸苯甲酸可用作防腐剂。可用作防腐剂。碱类碱类n n作用机制：强碱能水解蛋白质和核酸。作用机制：强碱能水解蛋白质和核酸。n n代表：石灰水、氢氧化钠、碳酸钠等。代表：石灰水、氢氧化钠、碳酸钠等。强碱由于其毒性大，其用途局限于对排泄物强碱由于其毒性大，其用途局限于对排泄物及仓库、棚舍等环境的消毒。及仓库、棚舍等环境的消毒。（2）重金属盐类重金属盐类n n作用机制：重金属离子使蛋白质变性或沉淀。作用机制：重金属离子使蛋白质变性或沉淀。n n代表：作用最强的是代表：作用最强的

7、是Hg、Ag、Cu等等。汞溴红（红汞）：汞溴红（红汞）：2红汞水溶液即红汞水溶液即红红药水，药水，常消毒皮肤、黏膜及常消毒皮肤、黏膜及小创伤小创伤，不不可与碘酒共用可与碘酒共用。硫酸铜：对真菌和藻类有强杀伤力。硫酸铜：对真菌和藻类有强杀伤力。波尔多液波尔多液：由约：由约500克的克的硫酸铜硫酸铜、500克的克的生生石灰石灰和和50千克的水配制成的天蓝色胶状悬千克的水配制成的天蓝色胶状悬浊液。广泛用于防治蔬菜、果树、棉、麻浊液。广泛用于防治蔬菜、果树、棉、麻等的多种病害。等的多种病害。（3 3）氧化剂）氧化剂n n作用机制：能放出游离氧或使其他化合物放出作用机制：能放出游离氧或使其他化合物放出氧

8、，通过氧化菌体蛋白的活性基因使其失活。氧，通过氧化菌体蛋白的活性基因使其失活。n n代表代表高锰酸钾：高锰酸钾：0.1%的该溶液用于皮肤、水果、饮的该溶液用于皮肤、水果、饮具的消毒。具的消毒。0.01%0.02%的溶液用于食物或的溶液用于食物或药物中毒时洗胃。药物中毒时洗胃。过氧化氢（双氧水）：常用过氧化氢（双氧水）：常用3%3%的溶液进行伤口的溶液进行伤口消毒。其缺点是化学性质极不稳定，容易分解消毒。其缺点是化学性质极不稳定，容易分解失效。失效。漂白粉漂白粉8484消毒液消毒液（4）有机化合物有机化合物醇类醇类 n n作用机制：醇类是脱水剂、蛋白质变性剂，作用机制：醇类是脱水剂、蛋白质变性剂

9、，也是脂溶剂，可使蛋白质脱水、变性，损害也是脂溶剂，可使蛋白质脱水、变性，损害细胞而具杀菌能力。细胞而具杀菌能力。n n代表代表：70%75的乙醇杀菌效果最好，常的乙醇杀菌效果最好，常用于皮肤及器械的消毒。用于皮肤及器械的消毒。醛类醛类 n n作用机制：主要是使蛋白质烷基化，改变酶或作用机制：主要是使蛋白质烷基化，改变酶或蛋白质的活性，使微生物的生长受到抑制或死蛋白质的活性，使微生物的生长受到抑制或死亡。亡。n n代表：代表：甲醛甲醛，因有刺激性和腐蚀性，不宜在人，因有刺激性和腐蚀性，不宜在人体使用，常以体使用，常以2甲醛溶液浸泡器械，甲醛溶液浸泡器械，10甲甲醛溶液进行熏蒸以消毒厂房、无菌室

10、或者传染醛溶液进行熏蒸以消毒厂房、无菌室或者传染病患者的家具、房屋等。病患者的家具、房屋等。福尔马林福尔马林：3740甲醛溶液，常用于制作甲醛溶液，常用于制作生物标本。其稀溶液生物标本。其稀溶液(0.10.5)农业上可用农业上可用来浸种，给种子消毒。来浸种，给种子消毒。福尔马林浸泡的动物标本福尔马林浸泡的动物标本福尔马林浸福尔马林浸泡的种子泡的种子表面活性剂表面活性剂 n n作用机制：降低表面张力，改变细胞的透性作用机制：降低表面张力，改变细胞的透性和稳定性，使细胞内物质逸出，菌体死亡。和稳定性，使细胞内物质逸出，菌体死亡。n n代表：代表：肥皂肥皂 一种阴离子表面活性剂，但一般认为一种阴离子

11、表面活性剂，但一般认为肥皂的作用主要是机械地移去微生物，微生肥皂的作用主要是机械地移去微生物，微生物附着于肥皂泡沫中被水冲洗掉。物附着于肥皂泡沫中被水冲洗掉。新洁尔灭新洁尔灭 0.050.1新洁尔灭溶液用于新洁尔灭溶液用于皮肤、黏膜和器械消毒。皮肤、黏膜和器械消毒。1、高温灭菌高温灭菌2、过滤除菌过滤除菌3、辐射灭菌辐射灭菌9.1.3 常用的灭菌方法常用的灭菌方法1、高温灭菌高温灭菌n n作用机制：高温使菌体蛋白质、核酸、酶作用机制：高温使菌体蛋白质、核酸、酶等细胞重要物质发生凝固或变性失活，从等细胞重要物质发生凝固或变性失活，从而导致微生物死亡。而导致微生物死亡。n n代表：高压蒸汽灭菌代表

12、：高压蒸汽灭菌 火焰灼烧法火焰灼烧法火焰灼烧法火焰灼烧法 干热灭菌法干热灭菌法干热灭菌法干热灭菌法 烘箱内热空气灭菌法烘箱内热空气灭菌法烘箱内热空气灭菌法烘箱内热空气灭菌法高温灭菌高温灭菌高温灭菌高温灭菌 分开灭菌法分开灭菌法分开灭菌法分开灭菌法 常压下常压下常压下常压下 湿热灭菌法湿热灭菌法湿热灭菌法湿热灭菌法 间歇灭菌法间歇灭菌法间歇灭菌法间歇灭菌法 低压下低压下低压下低压下 低压灭菌法低压灭菌法低压灭菌法低压灭菌法 加压下加压下加压下加压下 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌法法 湿热灭菌效果比干热灭菌效果好湿热灭菌效果比干热灭菌效果好（1)1)干热灭菌法干热灭菌法火焰灼烧

13、法火焰灼烧法 此此法法灭灭菌菌彻彻底底，迅迅速速简简便便，但但使使用用范范围围有有限限。常常用用于于接接种种工工具具、污污染染物物品品以以及及实验动物尸体等废弃物的处理。实验动物尸体等废弃物的处理。火焰灼烧法火焰灼烧法烘烤灭菌法烘烤灭菌法 主主要要在在干干燥燥箱箱中中利利用用热热空空气气进进行行灭灭菌菌。通通常常160160处处理理1 12h2h便便可可达达到到灭灭菌菌的的目目的的。此此法法只只适适用用于于玻玻璃璃器器皿皿、金金属属用用具具等等耐耐热热物品的灭菌。其优点是可保持物品干燥。物品的灭菌。其优点是可保持物品干燥。烘箱烘箱（2 2）湿热灭菌法）湿热灭菌法高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌是湿热灭

14、菌中最好的方法，通是湿热灭菌中最好的方法，通常在常在0.1MPa的压力下的压力下,此时温此时温度是度是121,处理处理1530min。要排冷空气，否则会形成假压，要排冷空气，否则会形成假压，虽然压力达到要求，温度却达虽然压力达到要求，温度却达不到相应高度，而影响灭菌效不到相应高度，而影响灭菌效果。果。食用菌高压蒸汽灭菌食用菌高压蒸汽灭菌间歇灭菌法间歇灭菌法是用是用常压常压蒸汽反复几次进行灭菌的方法。蒸汽反复几次进行灭菌的方法。主要用于主要用于不宜高压不宜高压灭菌的培养基，灭菌的培养基，不耐热不耐热的药的药物和营养物等。物和营养物等。方法是将待灭菌物品置于蒸锅内加热到沸腾维方法是将待灭菌物品置于

15、蒸锅内加热到沸腾维持持151530min30min杀死营养细胞，取出冷却后在杀死营养细胞，取出冷却后在3737恒温培养恒温培养2424小时，小时，使芽孢萌发使芽孢萌发，再用此法灭菌，再用此法灭菌，反复三次，即可达到灭菌目的。反复三次，即可达到灭菌目的。分开灭菌分开灭菌培养基中糖类等培养基中糖类等不耐高温不耐高温的成分；的成分；培养基中含有培养基中含有CaCa2+2+，FeFe3+3+成分与磷酸盐等成分成分与磷酸盐等成分,以免形成沉淀以免形成沉淀。低压灭菌低压灭菌葡萄糖经过葡萄糖经过112112灭菌灭菌15min15min，只会破坏，只会破坏0.6%0.6%。降低灭菌温度或缩短灭菌时间。降低灭菌温度或缩短灭菌时间。2、过滤除菌过滤除菌n n作用机制：通过作用机制：通过过滤器滤除空气或不过滤器滤除空气或不耐热液体耐热液体中微生物的方法。中微生物的方法。n n代表：代表：膜滤器、超净工作台膜滤器、超净工作台膜滤器膜滤器超净工作台超净工作台3、辐射辐射n n作用机制：作用机制：能量能量以以电磁波电磁波传递的物理现象传递的物理现象称为辐射。以电磁辐射产生的称为辐射。以电磁辐射产生的电磁波电磁波杀死杀死微生物的方法为辐射杀菌。微生物的方法为辐射杀菌。n n代表：代表：紫外线、电离辐射、强可见光。紫外线、电离辐射、强可见光。紫外线灯管紫外线灯管