第九章-二氢吡啶类-钙通道阻滞药物的分析.ppt

1、L/O/G/O第九章二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析学习要求：学习要求：1.掌握：二氢吡啶类药物的基本结构及主掌握：二氢吡啶类药物的基本结构及主要理化性质；结构、性质与分析方法间的要理化性质；结构、性质与分析方法间的关系；铈量法的原理、方法及注意事项。关系；铈量法的原理、方法及注意事项。2.熟悉：二氢吡啶类药物的化学鉴别反应熟悉：二氢吡啶类药物的化学鉴别反应及有关物质检查的方法；及有关物质检查的方法；3.了解：二氢吡啶类药物其他的鉴别试验了解：二氢吡啶类药物其他的鉴别试验及含量测定方法、及体内分析中样品的处及含量测定方法、及体内分析中样品的处理方法。理方法。本章背景：本章背景：离子通道示意图离子

2、通道示意图本章背景：本章背景：钙离子通道模型及及蛋白结构钙离子通道模型及及蛋白结构本章背景：本章背景：第一节第一节 结构与性质结构与性质一、常见药物的结构一、常见药物的结构二氢吡啶类药物二氢吡啶类药物的基本骨架：的基本骨架：为活性必需，为活性必需，变成吡啶环变成吡啶环或六氢吡啶或六氢吡啶环活性消失环活性消失为活性必需，为活性必需，若为乙酰基若为乙酰基或氰基活性或氰基活性降低，若为降低，若为硝基则激活硝基则激活钙通道钙通道邻、间位有吸电子邻、间位有吸电子基团活性较佳，对基团活性较佳，对位取代活性下降位取代活性下降取代基与活性关系次序：取代基与活性关系次序：H 甲基甲基环烷基环烷基苯基或取代苯苯基

3、或取代苯基基影响作用部位，影响作用部位，3,5位取代酯基不同，位取代酯基不同，为手性中心。为手性中心。硝苯地平硝苯地平尼群地平尼群地平尼莫地平尼莫地平苯磺酸氨氯地平苯磺酸氨氯地平非洛地平非洛地平激活开放钙通道的二氢吡啶类化合物激活开放钙通道的二氢吡啶类化合物二、主要理化性质二、主要理化性质1.二氢吡啶环的还原性二氢吡啶环的还原性 氧化还原反应鉴别或氧化还原滴定法含量测定氧化还原反应鉴别或氧化还原滴定法含量测定2.硝基的氧化性硝基的氧化性 重氮化重氮化-偶合反应鉴别偶合反应鉴别3.二氢吡啶环氨基质子解离性二氢吡啶环氨基质子解离性4.稳定性稳定性5.旋光性旋光性6.吸收光谱特性吸收光谱特性第二节第

4、二节 鉴别试验鉴别试验一、化学鉴别法一、化学鉴别法（一）与亚铁盐反应（一）与亚铁盐反应 二氢吡啶类药物苯环上硝基具有氧化性，二氢吡啶类药物苯环上硝基具有氧化性，可将氢氧化亚铁氧化为红棕色氢氧化铁沉淀。可将氢氧化亚铁氧化为红棕色氢氧化铁沉淀。ChP2010尼莫地平的鉴别：尼莫地平的鉴别：取本品约取本品约20mg，加乙醇，加乙醇2ml溶解后，加新制溶解后，加新制的的5%硫酸亚铁铵溶液硫酸亚铁铵溶液2ml，1.5mol/L硫酸溶液硫酸溶液1滴与滴与0.5mol/L氢氧化钾溶液氢氧化钾溶液1ml，强烈振摇，强烈振摇，1分钟内沉淀分钟内沉淀由灰绿色变为红棕色由灰绿色变为红棕色。（二）与氢氧化钠试液反应（

5、二）与氢氧化钠试液反应ChP2010硝硝苯地平的鉴别：苯地平的鉴别：取本品约取本品约25mg，加丙酮，加丙酮1ml溶解，加溶解，加20%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液35滴，振摇，溶液滴，振摇，溶液显橙红色显橙红色。（三）沉淀反应（三）沉淀反应ChP2010尼莫地平注射液的鉴别：尼莫地平注射液的鉴别：取本品适量（约相当于尼莫地平取本品适量（约相当于尼莫地平20mg），），置分液漏斗中，加置分液漏斗中，加乙醚乙醚30ml振摇提取，静置，振摇提取，静置，分取乙醚层，置水浴上蒸干，放冷，残渣加分取乙醚层，置水浴上蒸干，放冷，残渣加乙乙醇醇2ml，搅拌使溶解，移至试管中，加，搅拌使溶解，移至试管中，加1%氯

6、化氯化汞溶液汞溶液3ml，即发生，即发生白色沉淀白色沉淀。（四）重氮化（四）重氮化-偶合反应偶合反应BP2010硝苯地平的鉴别：硝苯地平的鉴别：取本品取本品25mg，加，加10ml盐酸盐酸-水水-乙醇混合溶液乙醇混合溶液（1.5 3.5 5），温热，加入锌粒），温热，加入锌粒0.5g，放置，放置5分钟，滤过，滤液加亚硝酸钠溶液分钟，滤过，滤液加亚硝酸钠溶液（10g/L）5ml，放置，放置2分钟，再加入氨基磺酸铵分钟，再加入氨基磺酸铵溶液（溶液（50g/L）2ml，摇匀，加入盐酸，摇匀，加入盐酸萘乙二胺萘乙二胺溶液（溶液（5g/L）2ml，即显红色（持续，即显红色（持续5分钟以上）分钟以上）。二

7、、分光光度法二、分光光度法（一）紫外分光光度法（一）紫外分光光度法ChP2010尼群地平软胶囊的鉴别：尼群地平软胶囊的鉴别：避光操作。取本品的内容物约避光操作。取本品的内容物约1g，置，置100ml量量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，取瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，取10ml，置，置100ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，在量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，在353nm与与303nm的波长处分别测定吸光度，在的波长处分别测定吸光度，在353nm与与303nm的吸光度比值应为的吸光度比值应为2.12.3。（二）红外分光光度法（二）红外分光光度法ChP2010尼群地平片的鉴别：尼群地平片的鉴别：

8、避光操作。取本品（约相当于尼群地平避光操作。取本品（约相当于尼群地平100mg），研细，加），研细，加丙酮丙酮10ml，振摇使溶解，振摇使溶解，滤过，滤液滤过，滤液暗处暗处挥干，残渣经挥干，残渣经减压干燥减压干燥，依法，依法测定。本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱测定。本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集（光谱集600）一致。）一致。五、色谱法五、色谱法（一）高效液相色谱法（一）高效液相色谱法ChP2010尼莫地平片的鉴别：尼莫地平片的鉴别：在含量测定项下记录的色谱图中，供试品在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的

9、保留时间一致。保留时间一致。（二）薄层色谱法（二）薄层色谱法BP2010硝苯地平的鉴别：硝苯地平的鉴别：取本品加取本品加甲醇甲醇制成每制成每1ml 中约含中约含1mg的溶液，作为的溶液，作为供试品溶液；另取硝苯地平对照品适量，加甲醇制成供试品溶液；另取硝苯地平对照品适量，加甲醇制成每每1ml 约含约含1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶，分别点于同一硅胶F254薄层板上，以薄层板上，以乙酸乙酯乙酸乙酯-环己烷环己烷（40 60）为展开剂，展开，晾干，）为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯（置紫外光灯（254nm）下检视，

10、供试品溶液所显主斑）下检视，供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点一致。点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点一致。第三节第三节 有关物质的检查有关物质的检查 二氢吡啶类药物遇光极不稳定，易发生光二氢吡啶类药物遇光极不稳定，易发生光化学歧化作用，引入杂质，因此各国药典标准化学歧化作用，引入杂质，因此各国药典标准中均规定在中均规定在避光条件避光条件下进行有关物质检查，大下进行有关物质检查，大多采用多采用HPLC法。法。 硝苯地平在光照和氧化剂存在条件下分别硝苯地平在光照和氧化剂存在条件下分别生成两种降解氧化产物：生成两种降解氧化产物：杂质杂质I：2,6-二甲基二甲基-4-(2-硝基

11、苯基硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯吡啶二甲酸二甲酯杂质杂质II：2,6-二甲基二甲基-4-(2-亚硝基苯基亚硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯吡啶二甲酸二甲酯ChP2010硝苯地平有关物质的检查：硝苯地平有关物质的检查：避光操作。取本品，精密称定，加甲醇溶解并定量避光操作。取本品，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每稀释制成每1ml中约含中约含1mg的溶液，作为供试品溶液；的溶液，作为供试品溶液；另取另取2,6-二甲基二甲基-4-(2-硝基苯基硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯吡啶二甲酸二甲酯(杂质杂质)对照品与对照品与2,6-二甲基二甲基-4-(2-亚硝基苯基亚硝基苯基)-3,5-

12、吡啶吡啶二甲酸二甲酯二甲酸二甲酯(杂质杂质)对照品，精密称定，加甲醇溶解对照品，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每并定量稀释制成每1ml中各约含中各约含10g的混合溶液，作的混合溶液，作为对照品贮备液；分别精密量取供试品溶液与对照品为对照品贮备液；分别精密量取供试品溶液与对照品贮备液各适量，用流动相定量稀释制成每贮备液各适量，用流动相定量稀释制成每1ml中分别中分别含硝苯地平含硝苯地平2g、杂质、杂质1g与杂质与杂质1g的混合溶液，的混合溶液，作为对照溶液。作为对照溶液。 对照高效液相色谱法试验。用对照高效液相色谱法试验。用十八烷基硅烷键合硅胶十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以为填充剂；以甲醇

13、甲醇-水水(60:40)为流动相；检测波长为为流动相；检测波长为235nm。取硝苯地平对照品、杂质。取硝苯地平对照品、杂质对照品与杂质对照品与杂质对对照品各适量，加照品各适量，加甲醇甲醇溶解并稀释制成每溶解并稀释制成每1ml中各约含中各约含1mg、10g与与10g的混合溶液，取的混合溶液，取20l，注入液相色，注入液相色谱仪，谱仪，杂质杂质峰、杂质峰、杂质峰与硝苯地平峰之间的分离度峰与硝苯地平峰之间的分离度均应符合要求。取对照溶液均应符合要求。取对照溶液20l，注入液相色谱仪，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，调节检测灵敏度，使硝苯地平色谱峰的峰高约为满量使硝苯地平色谱峰的峰高约为满量程的程的5

14、0%；再精密量取供试品溶液与对照溶液各再精密量取供试品溶液与对照溶液各20l，分别，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的间的2倍。供试品溶液的色谱图中如有与杂质倍。供试品溶液的色谱图中如有与杂质峰、峰、杂质杂质峰保留时间一致的色谱峰，峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰按外标法以峰面积计算，均不得过面积计算，均不得过0.1%；其他单个杂质峰面积；其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液中硝苯地平峰面积（不得大于对照溶液中硝苯地平峰面积（0.2%）；）；杂质总量不得过杂质总量不得过0.5%。第四节第四节 含量测定含量测定一、铈量法一、铈量法硝苯地

15、平与硫酸铈反硝苯地平与硫酸铈反应的摩尔比为应的摩尔比为1 2。ChP2010硝苯地平的含量测定：硝苯地平的含量测定：取本品约取本品约0.4g，精密称定，加无水乙醇，精密称定，加无水乙醇50ml，微热，微热使溶解，使溶解，加高氯酸加高氯酸溶液（取溶液（取70%高氯酸高氯酸8.5ml，加水至，加水至100ml）50ml、邻二氮菲邻二氮菲指示液指示液3滴，立即用硫酸铈滴滴，立即用硫酸铈滴定液（定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，在水浴中加热至）滴定，至近终点时，在水浴中加热至50左右，继续缓缓左右，继续缓缓滴定至橙红色滴定至橙红色消失，并将滴定的消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每结果用空白

16、试验校正。每1ml硫酸铈滴定液硫酸铈滴定液（0.1mol/L）相当于）相当于17.32mg的的C17H18N2O6。二、紫外二、紫外-可见分光光度法可见分光光度法ChP2010尼群地平软胶囊的含量测定：尼群地平软胶囊的含量测定：避光操作，取本品避光操作，取本品10粒置小烧杯中，用粒置小烧杯中，用剪刀剪破嚢壳剪刀剪破嚢壳，加无，加无水乙醇少量，振摇使溶解后，将水乙醇少量，振摇使溶解后，将内容物与嚢壳全部转移至具塞锥内容物与嚢壳全部转移至具塞锥形瓶中形瓶中，用，用无水乙醇反复冲洗剪刀及小烧杯无水乙醇反复冲洗剪刀及小烧杯，洗液并入，洗液并入锥形瓶锥形瓶中中，将锥形瓶密塞，置，将锥形瓶密塞，置40水浴中水浴中加热加热15分钟，并时时振摇，将分钟，并时时振摇，将内容物移入内容物移入100ml量瓶中，用无水乙醇量瓶中，用无水乙醇反复冲洗反复冲洗嚢壳和锥形瓶，嚢壳和锥形瓶，洗液并入量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取洗液并入量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置，置100ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，在量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，在353nm的的波长波长处测