微生物学质量控制.ppt

1、CompanyLOGO微生物学质量控制微生物学质量控制微生物学质量控制微生物学质量控制AA遗传控制标准化遗传控制标准化BB微生物控制标准化微生物控制标准化环境设施标准化C C饲料营养的标准化DD实验动物的实验动物的四个四个“标准化标准化”GB14925 实验动物环境与设施 GB14923 实验动物哺乳类实验动物的遗传质量控制 GB14922.1 实验动物寄生虫学等级及检测 GB14922.2 实验动物微生物学等级及检测 GB14924.1 实验动物配合饲料通用质量标准 GB14924.2 实验动物配合饲料卫生标准GB14924.3 实验动物小鼠、大鼠配合饲料 GB14924.4 实验动物兔配合

2、饲料GB14924.5 实验动物豚鼠配合饲料GB14924.7 实验动物犬配合饲料 GB14924.8 实验动物猴配合饲料 GB14924.6 实验动物地鼠配合饲料GB/T 14927.1 实验动物近交系小鼠、大鼠生化标记检测方法GB/T 14927.2 实验动物近交系小鼠、大鼠皮肤移植法GB/T 14926.4214926.43 实验动物微生物学检测方法（1）GB/T 14926.114926.6 实验动物微生物学检测方法（2）GB/T 14926.814926.17 GB/T 14926.41 GB/T 14926.4414926.49GB/T 14926.5014926.55 实验动物微

3、生物学检测方法（3）GB/T 14926.1814926.32 实验动物检测方法（4）GB/T 14926.5614926.64 GB/T 18448.118448.10 实验动物寄生虫学检测方法 GB/T 14924.9 实验动物配合饲料常规营养成分的测定 GB/T 14924.10 实验动物配合饲料氨基酸的测定 GB/T 14924.12 实验动物配合饲料矿物质和微量元素的测定 GB/T 14924.11 实验动物配合饲料维生素的测定GB/T 17998 SPF鸡微生物学监测总则 v微生物质量控制要求：微生物质量控制要求：要求生产的实验动物达到预定的微生物质量标准，而且动物实验过程也要执行

4、同样的微生物质量标准。污染源污染源生物材料实验动物宠物工作人员饲养材料设施与仪器实验动物按微生物学控制分类按微生物学控制分类无菌动物无菌动物GF，悉生动物，悉生动物GN1234普通动物，普通动物，普通动物，普通动物，CVCV清洁动物，清洁动物，清洁动物，清洁动物，CLCL无特定病原体动物，无特定病原体动物，无特定病原体动物，无特定病原体动物，SPFSPF实验动物微生物等级20012001版国家标准根据微生物和寄生虫等级对实验动版国家标准根据微生物和寄生虫等级对实验动物等级进行了重新设定。物等级进行了重新设定。v小鼠小鼠 清洁级清洁级 SPFSPF级级 无菌级无菌级v大鼠大鼠 清洁级清洁级 SP

5、FSPF级级 无菌级无菌级v地鼠地鼠 普通级普通级 清洁级清洁级 SPFSPF级级 无菌级无菌级 v豚鼠豚鼠 普通级普通级 清洁级清洁级 SPFSPF级级 无菌级无菌级v家兔家兔 普通级普通级 清洁级清洁级 SPFSPF级级 无菌级无菌级v犬犬 普通级普通级 SPFSPF级级v猴猴 普通级普通级 SPFSPF级级普通动物（Conventionalanimal，简称CV动物）定义：定义：不带有动物烈性传染病和人兽共患病病原不带有动物烈性传染病和人兽共患病病原体的动物。体的动物。饲养条件：饲养条件：普通开放环境普通开放环境来源：来源：经微生物学检查不带有上述病原体的动物，经微生物学检查不带有上述病

6、原体的动物，或或SPFSPF动物降级。动物降级。应用：应用：豚鼠、兔、犬、猴等大动物的实验研究。豚鼠、兔、犬、猴等大动物的实验研究。普通动物特点：普通动物特点：1、微生物学特点 要求不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病的病原。2、饲养管理 饲养于开放系统。但仍然对温度，湿度，饲料，垫料，饮水，卫生等有一定控制。3、生理学特点 外观健康，饮食排泄正常，无异常分泌物，无临床症状，脏器无眼观病灶。普通动物的应用：普通动物的应用：v可作为生物医学中教学示教v作为某些科学研究为探索方法而从事的预试验v不可用于科研、生产和检定 由于普通级动物繁殖力强，生产量大，生产成本低，适宜作一般性的教学实验和

7、预实验用。清洁动物清洁动物（Clean animalClean animal，简称，简称CLCL动物）动物）定义：定义：微生物控制级别介于微生物控制级别介于SPFSPF动物和普通动物之间动物和普通动物之间的动物。除普通级动物应排除的病原外，不携带的动物。除普通级动物应排除的病原外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原。对动物危害大和对科学研究干扰大的病原。饲养条件：饲养条件：屏障系统屏障系统大规模生产大规模生产来源：来源：SPFSPF动物扩群动物扩群应用：应用：各种科研、教学用大小鼠各种科研、教学用大小鼠清洁级动物特点：清洁级动物特点：1、微生物特点 清洁级动物比普通级动物要求排除的微生

8、物和寄生虫多，但比SPF动物少。清洁级动物除肉眼观察无病外，尸体解剖时，主要脏器、组织无论是肉眼观看还是病理组织切片均应无病变。2、饲养管理 清洁级动物饲养于温湿度恒定的万级空气净化的屏障系统中。其所用的饲料、垫料、饮用水、笼器具等都经过消毒灭菌处理。工作人员需换灭菌工作服、鞋、帽、口罩等进入动物室进行操作。无特定病原体动物无特定病原体动物（Specific pathogen free animalSpecific pathogen free animal，简称，简称SPFSPF动物动物)定义：定义：指不携带普通动物、清洁动物应排除的病原外，指不携带普通动物、清洁动物应排除的病原外，不携带主要

9、潜在感染或条件致病和对科学实验干扰不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原。大的病原。饲养条件：饲养条件：屏障系统内屏障系统内大规模生产大规模生产/隔离器内隔离器内保种保种最初来源：最初来源：将无菌动物将无菌动物/悉生动物转移到屏障系统悉生动物转移到屏障系统中饲养繁殖中饲养繁殖SPF动物特点：动物特点：1、微生物特点 SPF动物除一、二级动物应排除的病原体外，不携带主要潜在感染或条件致病和对研究实验干扰大的病原。2、来源 SPF动物来源为无菌动物或剖腹产动物。3.饲养管理 SPF动物必须饲养在温湿度恒定的万级空气净化的屏障系统中，实行严格的微生物控制。洗刷消毒间洗刷消毒间污染走廊污

10、染走廊实实验验室室消消毒毒后后室室储储物物间间实实验验室室实实验验室室清洁走廊清洁走廊检检疫疫室室饲饲养养室室饲饲养养室室饲饲养养室室风淋风淋二更二更接收间接收间淋浴淋浴污染走廊污染走廊 一更一更外走廊外走廊无菌动物无菌动物（Germfree animalGermfree animalGermfree animalGermfree animal，简称，简称，简称，简称GFGFGFGF）定义：定义：定义：定义：指用现有的实验手段检测，动物的体表体内指用现有的实验手段检测，动物的体表体内指用现有的实验手段检测，动物的体表体内指用现有的实验手段检测，动物的体表体内不携带其它生命体（包括一切微生物和寄

11、生虫）不携带其它生命体（包括一切微生物和寄生虫）不携带其它生命体（包括一切微生物和寄生虫）不携带其它生命体（包括一切微生物和寄生虫）的实验动物。的实验动物。的实验动物。的实验动物。饲养条件：饲养条件：饲养条件：饲养条件：无菌隔离器内无菌隔离器内无菌隔离器内无菌隔离器内来源：来源：来源：来源：第一代通过无菌剖第一代通过无菌剖第一代通过无菌剖第一代通过无菌剖腹产术，人工哺乳获得；腹产术，人工哺乳获得；腹产术，人工哺乳获得；腹产术，人工哺乳获得；以后通过无菌动物雌雄交以后通过无菌动物雌雄交以后通过无菌动物雌雄交以后通过无菌动物雌雄交配繁殖或无菌剖腹产术，配繁殖或无菌剖腹产术，配繁殖或无菌剖腹产术，配

12、繁殖或无菌剖腹产术，保姆鼠代奶扩群。保姆鼠代奶扩群。保姆鼠代奶扩群。保姆鼠代奶扩群。隔离器隔离器种种 类类 培育者及育成时间培育者及育成时间小小 鼠鼠 Pleasants,1959Pleasants,1959大鼠大鼠 Reyniers1946Reyniers1946；ustafsson,1948ustafsson,1948豚鼠豚鼠 Miyakawa1958;Tanami,1959;Miyakawa1958;Tanami,1959;兔兔 Wostmann1959;Luckey,1963Wostmann1959;Luckey,1963狗狗 Glimsedt,1946Glimsedt,1946猫猫

13、Bleby,1969Bleby,1969山羊、绵羊山羊、绵羊 Smith,1961,1966Smith,1961,1966猪猪 Whitenair,1960Whitenair,1960马马 DrummondDrummond等等,1973,1973猴猴 Reyniers,1942Reyniers,1942鸡鸡 Reyniers,1943Reyniers,1943鹌鹑鹌鹑 WoodardWoodard等等,1965;Miles,1966,1965;Miles,1966无菌动物特点：n n1.1.微生物特点：微生物特点：在动物体内外任何部位均检不出任何活的在动物体内外任何部位均检不出任何活的微生物和

14、寄生虫。微生物和寄生虫。“无菌无菌”是个相对的概念，只是根据现有是个相对的概念，只是根据现有的科学知识和检验方法在一定时期内不能检出的科学知识和检验方法在一定时期内不能检出病原体而已。随着科学技术的发展，现在认为病原体而已。随着科学技术的发展，现在认为是无菌的动物或许将来可以检出病原体而不是是无菌的动物或许将来可以检出病原体而不是无菌动物。无菌动物。2.2.形态学特点：形态学特点：n n消化系统消化系统 (1)(1)(1)(1)盲肠肥大，盲肠肥大，(2)(2)(2)(2)肠道肌层薄，肠绒毛变细变短肠道肌层薄，肠绒毛变细变短 (3)(3)(3)(3)肝脏变小肝脏变小n n循环系统 (1)(1)(

15、1)(1)心脏变小心脏变小 (2)(2)(2)(2)白细胞数变少，且数量波动范围小白细胞数变少，且数量波动范围小n n免疫系统(1)(1)(1)(1)胸腺，淋巴组织，网状内皮系统发育 不良(2)(2)(2)(2)脾脏小，无二级滤泡脾脏小，无二级滤泡n n 免疫功能 (1)(1)(1)(1)血清中IgG、IgM水平低，几乎不存在丙种球蛋白和特异性抗体 (2)(2)(2)(2)免疫应答速度慢，过敏反应、对异体移植物的排斥反应以及自身免疫现象消失或减弱n n生长率(1)(1)(1)(1)不同种属不同(2)(2)(2)(2)无菌鸟类生长率高于同种普通鸟(3)(3)(3)(3)无菌大、小鼠与普通鼠差不多

16、(4)(4)(4)(4)无菌豚鼠和无菌兔比普通的慢n n生殖(1)(1)(1)(1)无菌大、小鼠略高于普通大小鼠无菌大、小鼠略高于普通大小鼠(2)(2)(2)(2)豚鼠和兔繁殖能力比普通级低豚鼠和兔繁殖能力比普通级低n n代谢和营养代谢和营养 无菌动物血中含氮量少，肠管对水的吸收率无菌动物血中含氮量少，肠管对水的吸收率低，代谢周期比普通动物长低，代谢周期比普通动物长 体内不能合成维生素体内不能合成维生素B B和和K K，易产生这两种维，易产生这两种维生素的缺乏症生素的缺乏症n n抗辐射能力抗辐射能力 无菌动物抗辐射能力强，抗实验性烫伤和抗无菌动物抗辐射能力强，抗实验性烫伤和抗休克死亡能力也强于普通动物休克死亡能力也强于普通动物n n寿命寿命 无菌动物的寿命普遍长于普通动物无菌动物的寿命普遍长于普通动物悉生动物悉生动物（GnotobioticGnotobiotic animal animal，简称，简称GNGN）定义：定义：定义：定义：又称已知菌动物，指动物体内带有明确的微又称已知菌动物，指动物体内带有明确的微又称已知菌动物，指动物体内带有明确的微又称已知菌动物，指动物体内带有明确的微生