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1、忍冬藤忍冬藤的功效与作用要点 篇一：中草药忍冬藤抗氧化毕业论文 (1) 毕业设计（论文） 题 目 学 院： 专 业： 班 级： 姓 名 学 号： 指导教师 目录 中英文摘要1 绪论2 1忍冬藤提取工艺2 1.1 所需仪器2 1.2 提取方法2 2忍冬藤抗氧化活性研究方法3 2.1dpph法3 2.1.1 dpph法实验原理3 2.1.2 dpph法实验过程3 2.1.3 dpph法实验分析与结果3 2.2福林酚法5 2.2.1 福林酚法实验原理5 2.2.2 福林酚实验过程5 2.2.3 福林酚实验分析与结果6 2.3 abts法7 2.3.1 abtss实验原理7 2.3.2 abts实验过

2、程7 2.3.3 abts实验分析与结果8 2.4铁离子螯合能力法9 2.4.1 铁离子螯合实验原理9 2.4.2 铁离子螯合实验过程9 2.4.3 铁离子螯合实验分析与结果10 2.5还原力测定法10 2.5.1 还原力实验原理10 2.5.2 还原力实验过程11 2.5.3 还原力实验分析与结果12 3 总结13 致谢14 参考文献15 中草药抗氧化活性研究 忍冬藤抗氧化活性 摘要 中草药是天然的抗氧化活性物质的重要来源，因其种类繁多，如菊花，甘草，忍冬藤，金银花，决明子，等中草药抗氧化成分复杂，因此活性差异较大。用于开发体内自由基清除药物，保健品，和食品的抗氧化剂。中草药中的抗氧化活性物

3、质有黄酮，多酚，生物碱，多糖，皂苷等等，都是非常好的天然抗氧化活性成分。本文以忍冬藤为例。其成分有皂苷，绿原酸，黄酮，多糖，都具有清除自由基能力和抗菌能力。 忍冬藤能采用多种方法分析其抗氧化活性。dpph方法是目前最常用的检测清除自由基能力被广泛应用于实验室中。福林酚法用于检测样品中的总酚含量，是研究抗氧化活性的因素之一。abts法原理与dpph相似，都是应用到了抗氧化活性物质具有自由基清除的能力。铁离子螯合法，通过测定样品的铁离子螯合能力从而得出样品的抗氧化能力大小。样品的螯合能力越强，则抗氧化活性也越强。还原力测定法也是最常用的方法之一。 关键词 忍冬藤;dpph ;福林酚法;abts,;

4、还原力测定 the study of the antioxidant activity of chinese herbal medicine the antioxidant activity of honeysuckle cane key word honeysuckle cane ;dpph ;foline-phenol ;abts ;fe chelating 绪论 中草药种类繁多，且抗氧化能力各不相同。含有的抗氧化活性成分也是种类较多。但是中草药活性成分的提取和研究抗氧化活性的方法是大致相同。因此本文以忍冬藤为例子。详细阐述其抗氧化活性研究方案。得出适合中草药抗氧化研究的一般方法。 忍冬藤

5、又叫，大薜荔，千金藤，是金银花的干燥茎枝。其主要含有，皂甘，黄酮，绿原酸等具有抗氧化活性。现代医学证明其含有较强的抗菌和抗氧化功效，能抑制自由基的生成，从而保护机体。延缓机体的衰老。 中草药提取物的抗氧化活性研究主要可以利用福林酚法，abts法，还原力测定法，dpph法，铁离子螯合等一些方法来测定其抗氧化活性的大小。通常实验室较常用的抗氧化检测方法为dpph法。dpph法利用抗氧化活性物质具有清除自由基的能力，从而得出dpph的清除曲线。福林酚法通常检测抗氧化活性物质所含的总酚量。其抗氧化能力的大小通常用没食子酸的量表示。abts法和dpph的原理大致相同，都是利用抗氧化活性物质具有自由基清除

6、能力，通过自由基清除的强弱来表示抗氧化能力的强弱。铁离子螯合能力也是反应样品抗氧化能力的一个因素，即螯合率越高，样品的抗氧化能力也越高。还原力测定是利用铁氰化钾还原为亚铁氰化钾后，亚铁氰化钾能与三价铁离子反应生成普鲁斯蓝来测定样品的抗氧化能力大小。通常结果用样品vc所含vc的当量表示。 1 忍冬藤的提取方法 1.1 所需仪器: 1.2 提取方案 a 材料粉碎： 称取忍冬藤20克，粉碎，并且50目过筛 b 热回流提取：将破碎后的忍冬藤放置于磨口的圆底烧瓶中，加入适量的乙醇或甲醇，用恒温水浴锅加热至微沸的状态。并且回流2次，第一次1小时，第二次0.5小时。 c 抽滤 ：用布氏漏斗减压抽滤浸提液，滤

7、液放入圆底烧瓶中。 d 浓缩 ：合并浸提液，用旋转蒸发仪，温度控制在40度左右慢慢蒸发掉乙醇，至没有乙醇的味道。 e 离心 ：浓缩液必须4度存放24小时后，并且10000转离心30分钟，取上清液，加乙醇定容至1g/ml,（即浓缩液的质量与定容的刻度相同）。篇二：忍冬藤 忍冬藤 rendongteng lonicerae japonicae caulis 本品为忍冬科植物忍冬lonicera japonica thunb.的干燥茎枝。秋、冬二季采割，晒干。 【性状】 本品呈长圆柱形，多分枝，常缠绕成束，直径1.56mm。表面棕红色至暗棕色，有的灰绿色，光滑或被茸毛；外皮易剥落。枝上多节，节间长6

8、9cm，有残叶和叶痕。质脆，易折断，断面黄白色，中空。气微，老枝味微苦，嫩枝味淡。 【鉴别】 (1)本品粉末浅棕黄色至黄棕色。非腺毛较多，单细胞，多断碎，壁厚，表面有疣状突起。表皮细胞棕黄色至棕红色，表面观类多角形，常有非腺毛脱落后的痕迹，石细胞状。薄壁细胞内含草酸钙簇晶，常排列成行，也有的单个散在，棱角较钝，直径515m。 (2)取本品粉末lg，加50%甲醇loml，超声处理30分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取忍冬藤对照药材lg，同法制成对照药材溶液。再取马钱苷对照品，加50%甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录b)试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各10

9、l、对照品溶液5l，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷一甲 醇水(65：35：10)10以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 【检查】 水分 不得过12. 0%（附录h第一法）。 总灰分 不得过4.0%(附录k)。 【浸出物】 照醇溶性浸出物测定法(附录x a)项下的热浸法测定，用50%乙醇作溶剂，不得少于14.0%。 【含量测定】 绿原酸 照高效液相色谱法(附录d)测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.4%磷酸溶液

10、(10：90)为流动相；检测波长为327nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于1000。 对照品溶液的制备 取绿原酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含40g的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率250w，频率30khz)30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液lol与供试品溶液510l，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含绿原酸(c16h1809)不得少于0.10%。 马钱苷 照高效液相色谱

11、法(附录d)测定。 色谱条件与系统适用性试验 以苯基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.4%磷酸溶液(12：88)为流动相；检测波长为236nm。理论板数按马钱苷峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备 取马钱苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含40g的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率500w，频率40khz)30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液10l与供试品溶液210l，注入液相色谱仪，测定，

12、即得。 本品按干燥品计算，含马钱苷(c17h26010)不得少于0.10%。 饮片 【炮制】 除去杂质，洗净，闷润，切段，干燥。 本品呈不规则的段。表面棕红色（嫩枝），有的灰绿色，光滑或被茸毛；外皮易脱落。切面黄白色，中空。偶有残叶，暗绿色，略有茸毛。气微，老枝味微苦，嫩枝味淡。 【含量测定】 同药材，含绿原酸(c16h1809)木得少于0.070%。 【鉴别】 【检查】 【浸出物】 【含量测定】（马钱苷） 同药材。 【性味与归经】 甘，寒。归肺、胃经。 【功能与主治】 清热解毒，疏风通络。用于温病发热，热毒血痢，痈肿疮疡，风湿热痹，关节红肿热痛。 【用法与用量】 930g。 【贮藏】 置干燥

13、处。篇三：忍冬藤菇的成份测定与药理研究 忍冬藤菇的成份测定与药理研究 张 谦 （临沂市农业科学院，山东 临沂 276012） 摘要 目的：主要研究忍冬藤菇的有效成份和药理作用。方法：通过形态学鉴定、药理成份分析、药理和毒理实验等方面进行研究。结果：从该菌中测得微量元素23种，氨基酸16种和大量多糖，硅元素含童丰富。实验证实本菌有抗病毒、抗炎作用，对hela细胞有毒性，对s180瘤细胞有抑制作用，毒性低，ld50>200g/kg，未发现副作用。结论：忍冬藤菇具有抗炎、抗病毒、抗肿瘤以及免疫调节作用。 关键词 忍冬藤菇；化学成份；药理学 忍冬藤菇是生长在忍冬根部的一种子实体，属环棱褐孔菌，当

14、地俗称“银花蛾子”。民间常作验方治疗急性上呼吸道感染、扁桃体炎等疾病。迄今未见对该菌进行有效成份和药理的研究。我们自1994年1月-1996年6月对忍冬藤菇的一般性状、药理成份及作用机制、毒理试验等方面进行初步研究，现将有关研究报告如下。 1 一般性状研究 1.1 命名 该菌经鉴定，属多孔菌科，定名为环棱褐孔菌xanthochrous nilgheriensis（mont)teng，属真菌门，担子菌亚门，层担子菌纲，多孔菌目，多孔菌科，褐孔菌属。 1.2 形态 菌体外观呈半圆形，菌盖硬而韧，赤酱色或浅栗色，有同心环状棱纹及微细绒毛，大小约1.5-43-43-7cm。边缘薄，稍钝，深肉桂色。菌肉

15、深咖啡色，厚2-2.5mm。菌管与菌肉同色，菌管长l-2mm，管口浅肝褐色，圆形，每毫米7-8个。孢子呈广椭圆形，近球形，浅棕褐色，直径近3m。 1.3 生态习性及分布 2 有效成份分析 2.1 材料来源 检测所用环棱褐孔菌系当地忍冬根部采集的优质真菌子实体。 2.2 检测方法 2.2.1 徽量元素检测方法 微量元素检测采用美国pez-500型塞曼原子吸收分光光度计、日本岛津aa-610，aa-640型原子分光光度计、北京产xdy-l型双道原子荧光光度计、日本理光3080e型x荧光光谱仪和微型核反应堆-中子活化分析仪。以x荧光与中子活化采用固体样品直接分析和原子吸收分析样品处理，并利用干法和湿

16、法两种方法检测。(1)干法：首先取样品置于盐酸处理过的铂坩锅中，放入马福炉内，缓慢升温，在有充分氧气的情况下至550，保温两小时，取出冷却后加入10ml hf，lml hno3，加热蒸至白烟冒尽，补加lml hno3，加热水溶可溶性盐类，定量50ml待测。 分别采用火焰法、石墨炉法、冷原子法、氢化物法测定各元素。 2.2.2 氨基酸测定方法 氨基酸测试应用日本产835-50型氨基酸分析仪，取样品后以常规国标g-t/4965-94食物中氨基酸的测定方法进行分析测定。 2.2.3 多糖和其它物质的测定方法 多糖分析采用pe-7800红外光谱仪测定，分别测定药材的乙醚提取物、丁酮提取物、水提取物等。

17、 多糖提取采用sevage法(见附图)。 2.3 测定结果 2.3.1 微量元素测定结果 见表1。 表1 微量元素测定结果g/g 2.3.2 氨基酸含量 见表2。 表2 氨基酸含量分析结果(g/kg) 2.3.3 预测红外光谱结果解析显示 水提取物主要含有多糖、糖蛋白、氨基酸等，多糖得率1.13%；乙醚提取物主要含有萜类化合物(liebermannburehard反应阳性)、生物碱(dragendorff试剂反应阳性)；丁酮提取物主要含有甙类、多糖。 3 药理研究与毒性试验 3.1 抑制病毒试验 3.1.1 实验用病毒株 流感病毒(国家代表株)a3/京防/32/92；b/沪防/3/91；呼吸道

18、合胞病毒、腺病毒标准株。 3.1.2 实验方法 采用固定药液稀释病毒法。 抑制流感病毒：采用鸡胚囊体内法，根据羊水血凝情况判断抑制效果。 抑制合胞病毒、腺病毒：分别接种于敏感细胞，根据细胞病变情况判定抑制效果。 3.1.3 结果 抗病毒试验显示忍冬藤菇水提液对甲、乙两型流感病毒均有轻抑制效果。 药物毒性试验显示72h内鸡胚可生存，对hela细胞有毒性。 3.2 抗炎作用及急性毒性研究 3.2.1 材料 药品 忍冬藤菇水提液(lg生药/ml)；仪器 722光栅分光光度计、电子天平、游标卡尺。动物 昆明种小白鼠，兼用，体重18-22g(山医大实验动物中心提供)。 3.2.2 方法 对小鼠毛细血管通

19、透性的影响。小鼠随机分为5组，忍冬藤菇水提液20ml、l0ml、5ml/kg、地塞米松0.15mg/kg及等容量生理盐水组。连续灌胃给药3d，末次给药lh，各鼠iv伊文氏蓝溶液0.lml/kg，15min后，在各鼠腹部脱毛区涂二甲苯0.02ml/只，再15min后，将小鼠脱颈处死，剥开腹部皮肤，测蓝染面积的长短径，求出平均值为直径，计算蓝染面积。并将蓝染部位剪下，剪碎后置4ml丙酮生理盐水混合液(7：3)浸泡20h，测浸泡液的吸光度值(=620nm)，详细结果见表3。 表3 忍冬藤菇水提液对小鼠毛细血管通透性的影响(s) 药物 n.s 忍冬藤菇 剂量(g/kg) 动物数 蓝柒面积（mm） -

20、20(ml/kg) 10(ml/kg) 5(ml/kg) 地塞米松 0.15(mg/kg) 12 10 12 10 11 213.133.8 175.935.5 205.437.6 181.544.0 *2 吸光度 0.1460.055 0.0970.031 0.1080.044 0.1050.052 * 170.030.87 0.0970.047 与n.s组对比，*p<0.05，*p<0.001 急性毒性试验。取体重2g的昆明种小白鼠20只，各半，禁食8h后每鼠灌药给予忍冬藤菇水提液100ml/kg，24h连续灌药2次，观察7d内各鼠的变化。 3.2.3 结果 对小鼠毛细血管通透

21、性影响试验结果显示，与生理盐水组相比，忍冬藤菇20ml/kg组和地塞米松组缩小二甲苯致小鼠腹部炎症的蓝染面积明显，p值分别小于0.05和0.01，且吸光度值明显降低，p值均<0.05。 急性毒性试验结果显示小鼠体重增加，未发现动物死亡及行为活动的改变，表明该药毒性很低。ld50>200g/kg，相当于人药用量(1g/kg)的200倍以上。 3.3 抑瘤试验 3.3.1 材料和方法 动物：昆明种小鼠50只，体重18-22g(由山东省动物中心提供)。小鼠s180瘤种。忍冬藤菇水提液(1g/ml，相当于生药量)；呋喃氟脲嘧啶(ft-20)作为阳性对照物。方法 抽取s180瘤种腹水+生理盐

22、水稀释成每毫升含瘤细胞2.5107，无菌条件下注入小鼠右腋皮下0.2ml瘤液，次日将50只小白鼠分为4组。阴性对照组20只，给5%淀粉液，每鼠0.8ml。其余各组为10只。阳性对照组给ft-20混悬于5%淀粉液中，每鼠0.8ml(相当于2.8mg)。试验组于接种瘤细胞后次日给药，两组剂量分别为0.8ml、0.4ml。给药途径为灌胃，每日一次，连续11天。停药后次日处死小鼠，解剖瘤组织，称瘤重，计算抑瘤率，用t检验评价疗效。 3.3.2 结果 抑瘤结果见表4。结果显示忍冬藤菇水提液对s180瘤细胞有一定抑制作用，抑瘤率49.3%，低剂量组为40.7%，与阴性对照组相比有显著性差异。 表4 忍冬藤

23、菇水提液对5180瘤细胞的抑制效果 组别 剂量 动物数 平均体重(g) 治疗 瘤重 (s) 1.400.68 0.870.32 0.690.75 0.830.48 抑瘤率 p值 (%) 37.8 49.3 40.7 <0.01 <0.05 <0.05 (ml/只) 开始 结束 开始 结束 天数 阴性对照 阳性对照 治疗组 治疗组 0.8 2.8mg 0.8 0.4 20 10 10 10 18 10 10 10 20.5 21.8 20.5 25.0 20.5 22.5 20.5 22.2 11 11 11 11 4 讨论 4.1 药物成份分析显示，忍冬藤菇含有氨基酸16种，

24、有8种为人体必需氨基酸，有较高营养价值。测得微量元素23种，其中si含量丰富，达18000g/g，有较高的药用开发和保健品开发价值。本品含多糖丰富，sevage法多糖得率为1.13%，可能是其抗病毒和发挥免疫调节作用的药理基础。 4.2 药理试验证实，本品有抗病毒、抗炎作用，对甲、乙两型流感病毒有抑制效果，对hela细胞有毒性。其水提液具有缩小二甲苯致小鼠腹部皮肤炎症的蓝染面积，降低浸泡液的吸光度值，可降低毛细血管的通透性。 4.3 抑瘤试验结果显示，本品水提液对s180瘤细胞有抑制作用，推测对其它肿篇四：忍冬藤 133 忍 冬 藤 rendongteng caulis lonicerae j

25、aponicae 本品为忍冬科植物忍冬lonicera japonica thunb的干燥茎枝。秋、冬二季采割，晒干。 【性状】 本品呈长圆柱形，多分枝，常缠绕成束，直径1.56mm。表面棕红色至暗棕色，有的灰绿色，光滑或被茸毛；外皮易剥落。枝上多节，节问长69cm，有残叶及叶痕。质脆，易折断，断面黄白色，中空。气微，老枝味微苦，嫩枝味淡。 【检查】 水分 照水分测定法(附录 h第一法)测定，不得过12.0。 总灰分 不得过4.0(附录 k)。 酸不溶性灰分 不得过1.0(附录 k)。 【含量测定】 照高效液相色谱法(附录 d)测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

26、以乙腈-0.4磷酸溶液(10：90)为流动相；检测波长为327nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于1000。 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量，加50甲醇制成每1ml 含40g的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率250w，频率30khz)30分钟，放冷，再称定重量，用50甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液10l与供试品溶液510l，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含绿原酸(c16h18o9)不得少于0.10。 【炮制】

27、除去杂质，洗净，闷润，切段，干燥。 【性味与归经】 甘，寒。归肺、胃经。 【功能与主治】 清热解毒，疏风通络。用于温病发热，热毒血痢，痈肿疮疡，风湿热痹，关节红肿热痛。 【用法与用量】 930g。 【贮藏】 置干燥处。 性状鉴别 商品常将茎枝扎捆成束或卷成团。茎枝呈细长圆柱形，直径1.56mm， 节上有明显的对生叶痕或分枝痕。表面红棕色或暗棕色，有细纵纹，老枝光 滑，细枝有淡黄色毛茸，有的毛茸较密；外皮易剥落而露出灰白色内皮，剥 落的外皮常纵裂成纤维状。质硬脆，易折断，断面黄白色，纤维性，中心有 空洞。气无，老枝味微苦，嫩枝味淡。 显微鉴别 嫩枝（直径约3mm）横切面：表皮细胞1列；非腺毛单细胞，壁厚，有壁疣，腺毛柄较长。皮层较宽，外侧为数列压缩状薄壁细胞，壁黄棕色；其下为12列皮层纤维，纤维形大，多径向延长，壁薄，有的弯曲。韧皮部细胞排列较整齐；韧皮射线细胞含草酸钙簇晶；较粗茎枝韧皮部有少数纤维。形成层成环。木质部导管类长圆多角形或类圆形，散列，其余几乎全为木纤维；木射线宽1（2）细胞，有纹孔。髓大，髓周细胞壁木化，中央呈空洞。 忍冬藤横切面简图（12） 1. 嫩枝 2. 老枝