复旦大学实验动物学实验报告.docx

1、复旦大学实验动物学实验报告复旦大学实验动物学实验报告实验报告一小鼠的一般技术操作一、实验目的和要求：通过实际操作，掌握小鼠实验的一般操作方法，包括动物的抓取和保定、性别鉴定、编号、给药、麻醉、采血、处死、解剖等方法。二、实验基本步骤：（一）抓取和保定先用右手将小鼠的尾巴提起，至于鼠笼或粗糙的平面上，当小鼠向前挣扎行进时，再用左手的拇指和示指捏住小鼠两耳后颈部皮肤，翻转小鼠至于掌心，拉直后肢。以小指拉住小鼠尾巴即可。在一些特殊的实验中，如进行尾静脉注射时，可使用专门的小鼠固定器进行保定。（二）性别鉴定将小鼠抓取后，观察其肛门及生殖器之间的距离，距离远的为雄性，距离近的为雌性。另外翻转小鼠观察生殖

2、器附近，性成熟的雄性小鼠的睾丸降至阴囊内，会有明显的突起；雌性小鼠的肛门至会阴处有一条无毛覆盖的细线。（三）编号方法常用的有染色法、耳缘打孔法、烙印法、挂牌法。此外还有断趾法、剪尾法、被毛剪号法、笼子编号法等。在本次实验中，我们小组使用的是染色法。（四）去毛方法 常用的有拔毛法、剪毛法、剃毛法、脱毛法。（五）给药方法 常用的有经口灌胃法、经呼吸道吸入、经皮肤吸收和注射给药法。1经口给药法（1）灌胃法：左手固定小鼠，右手持灌胃器，将灌胃针从小鼠的一侧犬齿缺失处插入口中，灌胃针竖起靠向口腔后壁，使小鼠消化道成直线，沿咽喉壁缓慢插入食管，使其前段到达膈肌位置，灌胃针插入时应无阻力，如有阻力或动物挣扎

3、则应退针或将针拔出，以免损伤、穿破食管或误入气管。（2）口服法 在本次实验中，我们小组使用的是灌胃法。 2.注射给药法（1）皮下注射（2）肌肉注射（3）腹腔注射（4）静脉注射 在本次实验中，我们使用的是皮下注射、腹腔注射、静脉注射。（六）采血方法1.断头取血2.眼眶后静脉丛穿刺采血3.尾静脉切割采血法4.摘眼球采血法5.心脏采血在本次实验中，我们小组使用的是眼眶后静脉丛穿刺采血、尾静脉切割采血、摘眼球采血法、心脏采血。（七）麻醉方法1.常用局部麻醉剂：普鲁卡因、利多卡因2.常用全身麻醉剂：乙醚、苯巴比妥钠、戊巴比妥钠、硫喷妥钠、巴比妥钠、氨基甲酸乙酯。在本次实验中，对小鼠采用腹腔注射麻醉，方法

4、与腹腔注射给药一样，麻醉剂是2%水合氯醛，剂量为400mg/kg，注射量为0.5ml/25g。（八）皮肤移植 在本次实验中，在小鼠尾巴上切取长8mm，宽3mm的皮肤，切取效果不好。（九）处死方法1.颈椎脱臼法2.断头法3.击打法4.急性大出血法5.药物致死法在本次实验中，我们小组采用的是颈椎脱臼法。（十）解剖方法 解剖步骤如下：动物尸体取仰卧位，将四肢固定，用水浸湿被毛。从下颌中央开始到耻骨联合正中垂直切口，用骨剪把左右肋骨剪断后，将胸骨向前下方翻开，即可暴露胸、腹腔。按胸腔、腹腔、颅腔的次序观察各脏器的位置、形状及彼此相互关系，然后分别取下。先在胸腔入口处切断食管和气管，将心和肺一起取出；再

5、依次摘除腹部脏器脾、肝、肾上腺、肾、胃、肠和盆腔器官，分别进行各脏器的检查。 在本次实验中，我们小组解剖了一只雄性小鼠和一只雌性小鼠。在观察各个脏器之后，着重又观察了胸腺（在胸腔入口处，乳白色，由左右2叶组成）、胰腺（分散在十二指肠、胃底和脾门处，色淡红，不规则，似脂肪组织）、肾上腺（位于肾脏上级，白色，周围有较多脂肪组织包绕）、雌性小鼠的子宫（呈“Y”型，为双角子宫，分为子宫角、子宫体、子宫颈）、卵巢（位于双侧肾脏下缘附近，粉红色，为系膜包绕，不与子宫想通）、雄性小鼠的睾丸（椭圆形白色物质）、凝固腺（附着于精液腺内侧，呈半透明的半月形器官）。实验报告二兔的一般操作技术一、目的和要求通过实际操

6、作，基本掌握兔的抓取和保定、性别鉴定、灌胃、耳缘静脉采血注射、解剖、处死等操作技术。二、实验基本步骤：（一）抓取和保定1.抓取：轻轻打开笼门，勿使兔受惊，当兔安静下来时，用手伸入笼内，从头前部阻。它跑动，用右手把两耳轻轻压于手心内，抓住颈背部皮肤提起兔，然后用左手托住臀部，兔身的重量大部分落在左手掌上。2.保定：将兔置于实验台上，待兔安静后。双手各抓一侧兔前肢，肘部夹住兔后肢后向胸腹部靠拢，展开兔前肢，暴露兔雄部。（二）性别鉴定使兔下腹部朝向观察者，将生殖器周围的皮肤拨开，可见一圆孔，里面暴露出阴茎，则为雄性，反之为雌性。（三） 给药方法1.灌胃2.耳缘静脉注射在本次实验中，我们小组采用的是灌

7、胃给药法，由于没有固定器和开口器，灌胃给药由三人完成：第一人固定兔，将兔放于桌面，双手抓住兔的两前肢，前臂与兔身平行，用肘部夹住兔的身体；第二人用止血钳从兔嘴的一侧插入兔嘴中，并压住舌头，将嘴撑开；第三人取12号导尿管插入食管。（四）采血方法1.耳静脉采血2.耳中央动脉采血3.心脏取血4.后肢颈部皮下静脉取血在本次实验中，我们小组采用的是耳缘静脉采血和心脏取血。（五）处死方法 常用的是空气栓塞法（六）解剖方法 腹部朝上置于解剖盘中，将腹中线处的毛湿润，自生殖器开口稍前方提起皮肤，沿腹中线剪至颌底。然后从颈部向左、向右横剪至耳廓基部。以左手持镊子夹起颈部剪开的皮肤边缘，右手解剖刀小心的清楚皮下结

8、缔组织。按实验指导上的顺序观察：腺体、消化系统、呼吸系统、循环系统、生殖系统。 在本次实验中，我们小组解剖的是一只雄性兔，在观察各个脏器后，又着重观察了门齿（3对）、胸腔（与其他动物不同，中部纵膈将胸腔分为左右两室，互不相通，开胸后打开心包暴露心脏进行实验操作时动物不需作人工呼吸）、圆小囊（较黄、壁厚、在回肠和盲肠连接处）。观察其他小组雌性兔的子宫（双子宫，2个子宫开口于单一的阴道）。实验报告三豚鼠的一般技术操作一、实验目的 通过实际操作，基本掌握豚鼠的抓取和保定、性别鉴定、心脏采血、处死、解剖等操作技术。二、实验基本步骤 （一）抓取和保定先用右手示指和中指轻轻夹住豚鼠颈部，拇指和示指抓住豚鼠

9、左前肢，中指和无名指抓住豚鼠的右前肢，手掌抓住背部，拿起豚鼠，左手托住豚鼠臀部，并固定其后肢。（二）性别鉴定 抓取豚鼠后，翻转观察生殖器附近，雄性豚鼠的睾丸降至阴囊内，会有明显突起。（三）采血的方法 1.耳缘剪口采血 2.心脏采血 3.股动脉采血 4.背中足静脉取血在本次实验中，我们小组采用的是心脏采血。（四）处死方法 心脏大量采血，造成豚鼠急性失血而死亡。（五）解剖方法 解剖操作：将豚鼠处死后，将其仰卧固定于解剖板上，用剪刀沿腹中线剪开腹部皮肤、腹肌和腹膜，暴露豚鼠腹部的内脏器官，先找到豚鼠的结肠，沿着结肠带寻找盲肠。在本次实验中，我们小组解剖的是雄性豚鼠，在观察胸腔器官、腹腔器官、大脑、生

10、殖系统、豚鼠颞骨后，又着重观察了胸腺（在颈部皮下气管两侧，于下颌骨角到胸腔入口中间，2个光亮淡黄色、细长成椭圆形、充分分叶的腺体）、睾丸（椭圆形、纵行稍向背外侧排列于阴囊）。实验报告四大鼠的一般操作技术一、实验目的和要求 通过实际操作，掌握大鼠实验的一般操作步骤，包括动物的抓取和保定、性别鉴定、给药、麻醉、采血、处死、解剖等方法。大鼠急性肺水肿模型的复制；观察阴道涂片阴道涂片的制作及性周期观察。二、实验基本步骤：（一）抓取和保定 将大鼠放置于桌面，右手抓住其尾部，牵制大鼠的活动，左手放在大鼠背部，并迅速向前推移，从其颈部保定；迅速将大鼠翻转过来，同时左手作半握状，大拇指用力顶住大鼠下颌骨，并适

11、当的压住大鼠前肢，力度要适当，以头不能抬、前肢不能挣扎为宜，其余四指在下顶住枕骨。右手也做半握状，保定其后肢和大鼠尾巴，防止其挣扎，左右两手用力将大鼠身体拉直，力度适宜。 注意：大鼠尾巴覆有短毛和环状角质鳞片，大鼠尾巴表皮角质程度高于小鼠，抓取时应注意避免力度、抓取位置及不要让大鼠尾巴转圈，以免尾巴断裂。 （二）性别鉴定将大鼠抓取后，观察其肛门及生殖器之间的距离，距离远的为雄性，距离近的为雌性。另外翻转大鼠观察生殖器附近，成年雄性大鼠的睾丸降至阴囊内，会有明显的突起；成年雌性大鼠有6个乳头。（三）给药方法 根据我们的实验目的和要求，对于实验的大鼠采取以下4种给药方法。 1.灌胃法 2.腹腔注射

12、 3.肌内注射 4.静脉注射 在本次实验中，我们小组使用的是灌胃法、腹腔注射、静脉注射。（四）采血方法1.腹主动脉采血法2.眼眶后静脉丛穿刺采血3.尾尖采血法4.颈静脉采血法5.心脏采血6.舌下静脉采血在本次实验中，我们小组使用的是尾尖采血法、心脏采血、舌下静脉采血法。 （五）麻醉方法一般采用腹腔注射麻醉，方法与腹腔注射给药一样，麻醉剂是10%水合氯醛，剂量为400mg/kg，用量为1ml/250g。（六）处死方法 大鼠处死方法可以采用引颈法，此法快速而痛苦小，对一般实验结果无影响。在本次实验中，我们小组有1只雌性大鼠采用的是引颈法，1只雄性大鼠建立肺水肿模型后，采用引颈法处死。（七）解剖方法

13、 固定大鼠，以下腹部最低点起始，V字开口，沿中线剪开皮肤至剑突，再剪开腹膜，暴露腹部盆腔器官。腹腔内器官包括肝脏（无胆囊），脾脏，胰腺（位于中部与脾脏相连的分散的脂肪样结构），胃，肠道，肾脏（推开肠管可见），输尿管，膀胱，生殖器官（雌性：子宫和卵巢；雄性：将睾丸挤入盆腔内，即可见两个椭圆形白色睾丸）等，与人类器官位置相近。继续剪开胸部皮肤和肋骨，见两侧肺脏（左1、右4）和心脏，向上有器官。 在本次实验中，我们小组解剖了一只雄性小鼠和一只雌性小鼠。未剪开头部，没有观察大鼠的头部。在了解大鼠的基本解剖结构、器官形态和特点，除了观察一般脏器如心脏、肺脏、脾脏等外，主要寻找并观察了胸腺（在胸腔入口处，

14、乳白色，由左右2叶组成）、甲状腺（在颈部环状软骨高度，位于器官两侧，白色脂肪样物质，0.5-1mm，很小，不细分辨别很容易找不到或当成脂肪丢弃）、肾上腺（位于肾脏上级，距离肾脏大约0.3cm，为白色米粒样物质）。（八）大鼠急性肺水肿模型的复制在本次实验中，我们小组雄性大鼠体重350g,注射8%的氯化铵3.5ml。观察大鼠出现：口唇紫绀、眼睛突出、四肢无力、头向胸部弯曲及四肢抽搐。采用引颈法处死，解剖观察，取出双肺称重2.1g，由于实验器材有限，在本次实验中并未计算肺重量系数。 （九）阴道涂片的制作及性周期观察保定大鼠，充分暴露阴道，用滴管吸生理盐水1ml，然后插入大鼠阴道深部反复冲洗4-5次，

15、确保有吸到阴道分泌物。将1滴冲洗液涂于载玻片上，用酒精灯烘干。用姬姆萨染液染色20min，流水冲洗，在显微镜下观察。常见3种细胞：角化上皮细胞的体积较大，呈片状，多变形；有核上皮细胞体积中等，圆形或椭圆形；白细胞体积较小、圆形、透亮。采用阴道涂片法判断大鼠性周期，具有准确、简便、实用等优点。实验报告五Beagle犬的常用操作技术的示教实验一、实验目的和要求通过示教和实际操作初步掌握Beagle犬的主要采血和注射给药等操作技术。二、实验基本步骤 （一）Beagle犬年龄的判断判断犬的年龄，主要依靠犬牙齿的磨损和脱落情况。出生10几天即生乳牙，2个月后开始由门齿、犬齿、臼齿逐渐换为恒牙，8-10个

16、月恒牙换齐，但需要1年半以后牙齿才能生长坚实。年龄越大磨损越严重。 （二）Beagle犬的保定1.保定架固定2.采用犬固定床3.徒手保定法：此法方便，可用于前肢采血、经口给药等。但注意对那些比较狂躁、性情较不温顺的犬不能采用。在本次示教中，犬已被麻醉，未被保定。 （三）Beagle犬的采血方法1.后肢外侧小隐静脉采血2.前肢背侧皮下静脉采血3.颈静脉采血4.股动脉采血在本次实验中,我们采用的是后肢外侧小隐静脉采血、.前肢背侧皮下静脉采血。实验报告六小鼠无菌剖腹取胎术实验一、实验目的和要求通过实际操作，了解通过剖腹取胎术得到幼鼠的基本原理、操作和用途。二、实验原理由于胎盘屏障的作用，因体内的正常

17、微生物菌群及大多数病原微生物（除个别例外）不能通过胎盘感染胎仔，因此胎仔处于“无菌”状态通过无菌剖腹获得的胎鼠由无菌母鼠代乳，并维持仔鼠在无菌隔离器中，这是获得无菌动物的唯一途径。但由于条件所限，本实验仅用于熟悉剖腹获得幼仔的过程，对无菌操作并无严格要求，故实验在实验台上进行。三、实验步骤 （1）颈椎脱臼法处死孕鼠，仰卧位固定于动物板上，暴露腹部手术部位进行乙醇消毒。 （2）沿腹中线剪开腹部皮肤、腹肌、腹膜，暴露子宫，用止血钳分别夹住子宫颈部和两侧卵巢，剪断取出子宫。取出子宫后用生理盐水洗一下，尽快将胎鼠连胎盘一起取出。 （3）用棉球擦拭幼鼠，轻轻按摩胸腔及腹部促使新生鼠呼吸，待呼吸、循环正常后用止血钳扎断脐带。四、实验结果 总胎数：16只，体长大约：17mm。