肠球菌生物学特性_精品文档.ppt

1、肠球菌肠球菌梁文星梁文星1.简介简介D。肠球菌通常从食品、植物、水和土壤中分离，。肠球菌通常从食品、植物、水和土壤中分离，在牛奶和奶酪制品中通常会找到粪肠球菌、屎肠在牛奶和奶酪制品中通常会找到粪肠球菌、屎肠球菌和少量的坚忍肠球菌，偶然也会发现小肠肠球菌和少量的坚忍肠球菌，偶然也会发现小肠肠球菌和铅黄肠球菌；球菌和铅黄肠球菌；C。粪肠球菌和屎肠球菌都是人类消化道微生物自然存在的。粪肠球菌和屎肠球菌都是人类消化道微生物自然存在的菌种，在胃肠道中因为个体差异其含量差异变化很大（在每菌种，在胃肠道中因为个体差异其含量差异变化很大（在每克消化系统内容物中含有克消化系统内容物中含有102和和108）；）；

2、A。肠球菌最初列为。肠球菌最初列为D群链球菌，群链球菌，1984年经过年经过DNA-DNA和和DNA-RNA杂交才被列为肠球菌属，到目前为止杂交才被列为肠球菌属，到目前为止32种菌已种菌已被列入肠球菌属；被列入肠球菌属；B。肠球菌种适宜在。肠球菌种适宜在6.5氯化钠，氯化钠，40胆汁盐且胆汁盐且pH值在值在9.6，并可以在，并可以在60C的环境下生存的环境下生存30分钟，大多数品种也可以分钟，大多数品种也可以在在10至至45之间生长；之间生长；1.简介简介E。不同于其他乳酸菌，肠球菌不能被认为是。不同于其他乳酸菌，肠球菌不能被认为是“一般认为安全一般认为安全”（GRAS），并且它在水中），并且

3、它在水中检测是作为粪便污染物的指标的；检测是作为粪便污染物的指标的；F。对于肠球菌的安全评价程序是一个不太确定的状况。对于肠球菌的安全评价程序是一个不太确定的状况一方面一方面，肠球菌在作为奶酪技术中作为发酵剂培养物被认为，肠球菌在作为奶酪技术中作为发酵剂培养物被认为是有积极作用的是有积极作用的另一方面另一方面，它们被认为是新兴的人类病原体；，它们被认为是新兴的人类病原体；G。这篇综述主要是根据现有知识总结了肠球菌的积极和消极。这篇综述主要是根据现有知识总结了肠球菌的积极和消极的性状特点，来描述这种菌属的争议性的性状特点，来描述这种菌属的争议性食品安全准则着重强调了对抗生素耐药性和毒力的因素，因

4、此食品安全准则着重强调了对抗生素耐药性和毒力的因素，因此我们建议在发酵食品中使用肠球菌前应对这几项进行研究。我们建议在发酵食品中使用肠球菌前应对这几项进行研究。2.分类和鉴定分类和鉴定*由于由于肠球菌的表型多球菌的表型多样性，性，这使得使得肠球菌种的生理球菌种的生理测试鉴定定一直存在一直存在问题。此外，物种。此外，物种鉴定的常定的常规实验往往需要很往往需要很长的的培养培养时间*使用使用16S和和23S rDNA基因的基因型基因的基因型鉴定方法更加的准确，定方法更加的准确，虽然它然它们还不能区分所有不能区分所有肠球菌的物种（例如球菌的物种（例如鹑鸡肠球菌和球菌和铅黄黄肠球菌有球菌有99.8%的的

5、16S rDNA的同源性）。的同源性）。*这种方法已种方法已经成功的在成功的在应用：用：1）rRNA基因基因间隔区的特异隔区的特异PCR扩增技增技术，ddl和和van基因，基因，ace 基因，基因，sodA 基因，基因，2）转录调控基因控基因Ef0027的的扩增，增，3）ddl 基因，基因，cpn60 基因基因和和atpA 基因的基因的测序，序，4）利用）利用5端引物（端引物（GTG）的）的细菌基因菌基因组重复序列重复序列PCR技技术。2.分类和鉴定分类和鉴定*有有许多人多人试图区分从人分离的菌株和从食物分离的菌株区分从人分离的菌株和从食物分离的菌株,大大部分主要关注的部分主要关注的DNA指指

6、纹图谱。*这些研究使用了多种分子分型方法，如些研究使用了多种分子分型方法，如扩增增rDNA限制性分限制性分析，脉冲析，脉冲场凝胶凝胶电泳（泳（PFGE）的）的DNA宏宏观限制模式，随机限制模式，随机扩增多增多态性性DNA（RAPD）-PCR检测和和扩增片段增片段长度多度多态性性（AFLP）技）技术。*脉冲脉冲场凝胶凝胶电泳泳（PFGE）已成功地用于区分）已成功地用于区分临床和食品床和食品菌株之菌株之间的差异，以及从家禽和住院患者分离的菌株的差的差异，以及从家禽和住院患者分离的菌株的差异。异。虽然然电泳是区分泳是区分肠球菌属菌株的黄金球菌属菌株的黄金标准方法，但是准方法，但是它比它比较昂昂贵且耗

7、且耗时和比和比较复复杂。2.分类和鉴定分类和鉴定*最近，有两种方法被证明比最近，有两种方法被证明比PFGE更有辨识力，一种是基于管更有辨识力，一种是基于管家基因的核苷酸序列的多位点序列分型（家基因的核苷酸序列的多位点序列分型（MLST），另有一种），另有一种是基于可变数目串联重复序列的多位变量分析（是基于可变数目串联重复序列的多位变量分析（MLVA）*MLSA是屎肠球菌株的流行病学分析的一种极好的方法，它是屎肠球菌株的流行病学分析的一种极好的方法，它与与MLVA都能很好的替代都能很好的替代PFGE。尽管肠球菌的分子分型方法。尽管肠球菌的分子分型方法在很大范围内都有效，并且在很大范围内都有效，并

8、且MLST的流行病学分析方法都是很的流行病学分析方法都是很有效的方法，但它们仍然难以明确区分有效的方法，但它们仍然难以明确区分食品株系食品株系和和临床株系临床株系。3.肠球菌在乳制品中的作用肠球菌在乳制品中的作用*奶酪中奶酪中肠球菌的使用球菌的使用备受争受争议。在南欧国家中。在南欧国家中肠球菌球菌对于奶酪于奶酪风味的影响是必要的因素（表味的影响是必要的因素（表1），但在北欧大多数国家中），但在北欧大多数国家中对这持否定的持否定的态度。度。这些不同的些不同的观点可能点可能仅仅是由于文化差异；是由于文化差异；*肠球菌球菌污染牛奶要么是染牛奶要么是直接直接来自于来自于动物物粪便，要么是便，要么是间接

9、接的的来自来自污染的水源，染的水源，挤奶奶设备或者是散装的或者是散装的储存罐；存罐；*在地中海式奶酪凝乳中在地中海式奶酪凝乳中肠球菌的范球菌的范围从从104到到106CFU/g，而，而在完全成熟的奶酪菌落数达到在完全成熟的奶酪菌落数达到105到到107CFU/g。3.肠球菌在乳制品中的作用肠球菌在乳制品中的作用表表1 与肠球菌有关的奶酪产品（表中不太详尽）与肠球菌有关的奶酪产品（表中不太详尽）3.肠球菌在乳制品中的作用肠球菌在乳制品中的作用积极作用极作用1）乳品株）乳品株肠球菌球菌对于于传统奶酪成熟具有奶酪成熟具有积极的作用；极的作用；2）肠球菌球菌对于奶酪的于奶酪的成熟和香气的形成成熟和香气

10、的形成都有很大的帮助，都有很大的帮助，例如切达干酪、羊乳酪、例如切达干酪、羊乳酪、Water-buffalo、Mozarella、Cebreiro、Venaco和和 Hispanico都是由于他都是由于他们蛋白水解和蛋白水解和酯水水解和他解和他们通通过柠檬酸檬酸盐的新的新陈代代谢产生的双乙生的双乙酰产品；品；3）除了他）除了他们的工的工艺性能，性能，许多的多的肠球菌株（主要是球菌株（主要是粪肠球菌球菌和屎和屎肠球菌）生球菌）生产的的细菌素能菌素能够抑制李斯特菌、金黄色葡萄抑制李斯特菌、金黄色葡萄球菌、肉毒梭菌、球菌、肉毒梭菌、产气气荚膜梭菌和霍乱弧菌。膜梭菌和霍乱弧菌。*由于他由于他们在在奶酪

11、成熟奶酪成熟、风味形成味形成和和细菌素的生菌素的生产的作用的作用，表，表明了明了这个具有理想的技个具有理想的技术和代和代谢特点的特点的肠球菌可以用做各种球菌可以用做各种奶酪的奶酪的发酵酵剂培养物培养物3.肠球菌在乳制品中的作用肠球菌在乳制品中的作用消极作用消极作用对于肠球菌在奶酪的消极作用可能是由于它们能够生产生物胺。对于肠球菌在奶酪的消极作用可能是由于它们能够生产生物胺。在生产奶酪和发酵香肠时产生的在生产奶酪和发酵香肠时产生的生物胺生物胺中一些肠球菌株被定义中一些肠球菌株被定义为有害的。为有害的。鉴于其共生的状态，肠球菌也被用来作为人或家畜的益生鉴于其共生的状态，肠球菌也被用来作为人或家畜的

12、益生菌。益生菌发酵乳商业上称为菌。益生菌发酵乳商业上称为Gaio，这里面包含有是肠球菌，这里面包含有是肠球菌菌株，在丹麦已经商业化。菌株，在丹麦已经商业化。肠球菌肠球菌SF68已被用来治疗腹泻，并可以替代抗生素的治已被用来治疗腹泻，并可以替代抗生素的治疗。另一种肠球菌的益生菌的使用是疗。另一种肠球菌的益生菌的使用是CausidoR培养，它包括培养，它包括嗜热链球菌和粪肠球菌两种菌株。嗜热链球菌和粪肠球菌两种菌株。然而，作为一种益生菌肠球菌或作为奶酪的起始发酵的使然而，作为一种益生菌肠球菌或作为奶酪的起始发酵的使用仍存在争议，这是因为它的用仍存在争议，这是因为它的耐药性耐药性和和毒力基因毒力基因

13、对人类仍有对人类仍有风险。风险。2004年，加拿大禁止了益生菌肠球菌的使用。年，加拿大禁止了益生菌肠球菌的使用。4.肠球菌和人类的健康肠球菌和人类的健康4.1肠球菌为条件致病菌肠球菌为条件致病菌 虽然肠球菌已经使用了几个世纪，并没有明确地把它作为虽然肠球菌已经使用了几个世纪，并没有明确地把它作为剧毒的有机体，他们现在已经成为全球剧毒的有机体，他们现在已经成为全球院内感染院内感染的重要原因；的重要原因；在美国肠球菌是引起医院在美国肠球菌是引起医院血液感染血液感染的第三大最常见原因，的第三大最常见原因，在欧洲排第四；在欧洲排第四；肠球菌的感染肠球菌的感染主要是粪肠球菌和屎肠球菌引起的，其中主要是粪

14、肠球菌和屎肠球菌引起的，其中临床菌株分别高达临床菌株分别高达80%和和20。最近的研究表明，屎肠球菌。最近的研究表明，屎肠球菌感染的比例有所增加，主要是由于对抗生素有耐药性的肠感染的比例有所增加，主要是由于对抗生素有耐药性的肠球菌株越来越多；球菌株越来越多；其他的肠球菌菌种例如坚忍肠球菌、鹑鸡肠球菌、铅黄肠其他的肠球菌菌种例如坚忍肠球菌、鹑鸡肠球菌、铅黄肠球菌、棉子糖肠球菌较少的与肠球菌感染有牵连。球菌、棉子糖肠球菌较少的与肠球菌感染有牵连。4.肠球菌和人类的健康肠球菌和人类的健康 肠球菌对于健康个体是无害的，肠球菌临床菌株主要使肠球菌对于健康个体是无害的，肠球菌临床菌株主要使重重症监护病房患

15、者症监护病房患者及及严重基础疾病严重基础疾病的病人或的病人或免疫系统受损免疫系统受损病人，病人，或者是或者是老人病院老人病院的病人致病。的病人致病。肠球菌常与其他病原体的多种肠球菌常与其他病原体的多种微生物腹内感染微生物腹内感染有关系，因有关系，因此很难确定它在感染中的作用。此很难确定它在感染中的作用。肠球菌是肠球菌是泌尿道感染，菌血症，心内膜炎泌尿道感染，菌血症，心内膜炎和和后发性白内障后发性白内障手术术后并发症手术术后并发症有关，这点已经很明确。有关，这点已经很明确。在欧洲和美国肠球菌导致在欧洲和美国肠球菌导致尿道感染尿道感染（UTIs）排名第二）排名第二4.肠球菌和人类的健康肠球菌和人类

16、的健康 肠球菌易位穿过整个肠道粘膜屏障会导致菌血症。其他可肠球菌易位穿过整个肠道粘膜屏障会导致菌血症。其他可以确认的肠球菌菌血症的来源包括以确认的肠球菌菌血症的来源包括静脉注射管、脓肿静脉注射管、脓肿和和尿道尿道感染感染。肠球菌菌血症的死亡率的危险因素包括肠球菌菌血症的死亡率的危险因素包括疾病的严重程度疾病的严重程度，年龄年龄和和广谱抗生素的使用广谱抗生素的使用。肠球菌菌血症可导致心内膜炎，这对于治疗肠球菌感染血肠球菌菌血症可导致心内膜炎，这对于治疗肠球菌感染血液来说是最大的挑战，并且它一直与死亡率的增加有关。液来说是最大的挑战，并且它一直与死亡率的增加有关。在链球菌和金黄色葡萄球菌之后，肠球菌（主要是粪肠球在链球菌和金黄色葡萄球菌之后，肠球菌（主要是粪肠球菌）是引起心内膜炎的第三大原因，菌）是引起心内膜炎的第三大原因，5-20%的心内膜炎症都的心内膜炎症都是由它引起的。是由它引起的。4.肠球菌和人类的健康肠球菌和人类的健康 虽然对于肠球菌感染的主要危险因素仍有争论，但对于虽然对于肠球菌感染的主要危险因素仍有争论，但对于未能采取卫生保护措施，预先的抗生素治疗，长时间的住未能采取卫生保护