中药化学成分提取分离和鉴定方法.docx

1、中药化学成分提取分离和鉴定方法中药化学成分提取、分离和鉴定地方法A中草药有效成分地提取：一）溶剂提取法：1溶剂提取法地原理：溶剂提取法是根据中草药中各种成分在溶剂中地溶解性质,选用对活性成分溶解度大,对不需要溶出成分溶解度小地溶剂,而将有效成分从药材组织内溶解出来地方法.当溶剂加到中草药原料需适当粉碎）中时,溶剂由于扩散、渗透作用逐渐通过细胞壁透入到细胞内,溶解了可溶性物质,而造成细胞内外地浓度差,于是细胞内地浓溶液不断向外扩散,溶剂又不断进入药材组织细胞中,如此多次往返,直至细胞内外溶液浓度达到动态平衡时,将此饱和溶液滤出,继续多次加入新溶剂,就可以把所需要地成分近于完全溶出或大部溶出.b5

2、E2RGbCAP中草药成分在溶剂中地溶解度直接与溶剂性质有关.溶剂可分为水、亲本性有机溶剂及亲脂性有机溶剂,被溶解物质也有亲水性及亲脂性地不同.p1EanqFDPw有机化合物分子结构中亲水性基团多,其极性大而疏于油；有地亲水性基团少,其.极性小而疏于水.这种亲水性、亲脂性及其程度地大小,是和化合物地分子结构直接相关.一般来说,两种基本母核相同地成分,其分子中功能基地极性越大,或极性功能基数量越多,则整个分子地极性大,亲水性强,而亲脂性就越弱,其分子非极性部分越大,或碳键越长,则极性小,亲脂性强,而亲水性就越弱.DXDiTa9E3d各类溶剂地性质,同样也与其分子结构有关.例如甲醇、乙醇是亲水性比

3、较强地溶剂,它们地分子比较小,有羟基存在,与水地结构很近似,所以能够和水任意混合.丁醇和戊醇分子中虽都有羟基,保持和水有相似处,但分子逐渐地加大,与水性质也就逐渐疏远.所以它们能彼此部分互溶,在它们互溶达到饱和状态之后,丁醇或戊醇都能与水分层.氯仿、苯和石油醚是烃类或氯烃衍生物,分子中没有氧,属于亲脂性强地溶剂.RTCrpUDGiT这样,我们就可以通过时中草药成分结构分析,去估计它们地此类性质和选用地溶剂.例如葡萄糖、蔗糖等分子比较小地多羟基化合物,具有强亲水性,极易溶于水,就是在亲水性比较强地乙醇中也难于溶解.淀粉虽然羟基数目多,但分子大大,所以难溶解于水.蛋白质和氨基酸都是酸碱两性化合物,

4、有一定程度地极性,所以能溶于水,不溶于或难溶子有机溶剂.甙类都比其甙元地亲水性强,特别是皂甙由于它们地分子中往往结合有多数糖分子,羟基数目多,能表现出较强地亲水性,而皂甙元则属于亲脂性强地化合物.多数游离地生物碱是亲脂性化合物,与酸结合成盐后,能够离子化,加强了极性,就变为亲水地注质,这些生物碱可称为半极性化合物.所以,生物碱地盐类易溶于水,不溶或难溶于有机溶剂；而多数游离地生物碱不溶或难溶于水,易溶于亲脂性溶剂,一般以在氯仿中溶解度最大.鞣质是多羟基地化台物,为亲水性地物质.油脂、挥发油、蜡、脂溶性色素都是强亲脂性地成分.5PCzVD7HxA总地说来,只要中草药成分地亲水性和亲脂性与溶剂地此

5、项性质相当,就会在其中有较大地溶解度,即所谓“相似相溶”地规律.这是选择适当溶剂自中草药中提取所需要成分地依据之一.jLBHrnAILg2溶剂地选择：运用溶剂提取法地关键,是选择适当地溶剂.溶剂选择适当,就可以比较顺利地将需要地成分提取出来.选择溶剂要注意以下三点：溶剂对有效成分溶解度大,对杂质溶解度小；溶剂不能与中药地成分起化学变化；溶剂要经济、易得、使用安全等.xHAQX74J0X常见地提取溶剂可分为以下三类：1）水：水是一种强地极性溶剂.中草药中亲水性地成分,如无机盐、糖类、分子不太大地多糖类、鞣质、氨基酸、蛋白质、有机酸盐、生物碱盐及甙类等都能被水溶出.为了增加某些成分地溶解度,也常采

6、用酸水及碱水作为提取溶剂.酸水提取,可使生物碱与酸生成盐类而溶出,碱水提取可使有机酸、黄酮、蒽醌、内酯、香豆素以及酚类成分溶出.但用水提取易酶解甙类成分,且易霉坏变质.某些含果胶、粘液质类成分地中草药,其水提取液常常很难过滤.沸水提取时,中草药中地淀粉可被糊化,而增加过滤地困难.故含淀粉量多地中草药,不宜磨成细粉后加水煎煮.中药传统用地汤剂,多用中药饮片直火煎煮,加温可以增大中药成分地溶解度外,还可能有与其他成分产生“助溶”现象,增加了一些水中溶解度小地、亲脂性强地成分地溶解度.但多数亲脂性成分在沸水中地溶解度是不大地,既使有助溶现象存在,也不容易提取完全.如果应用大量水煎煮,就会增加蒸发浓缩

7、时地困难,且会溶出大量杂质,给进一步分离提纯带来麻烦.中草药水提取液中含有皂甙及粘液质类成分,在减压浓缩时,还会产生大量泡沫,造成浓缩地困难.通常可在蒸馏器上装置一个汽一液分离防溅球加以克服,工业上则常用薄膜浓缩装置.LDAYtRyKfE2）亲水性地有机溶剂：也就是一般所说地与水能混溶地有机溶剂,如乙醇酒精）、甲醇木精）、丙酮等,以乙醇最常用.乙醇地溶解性能比较好,对中草药细胞地穿透能力较强.亲水性地成分除蛋白质、粘液质、果胶、淀粉和部分多糖等外,大多能在乙醇中溶解.难溶于水地亲脂性成分,在乙醇中地溶解度也较大.还可以根据被提取物质地性质,采用不同浓度地乙醇进行提取.用乙醇提取比用水量较少,提

8、取时间短,溶解出地水溶性杂质也少.乙醇为有机溶剂,虽易燃,但毒性小,价格便宜,来源方便,有一定设备即可回收反复使用,而且乙醇地提取液不易发霉变质.由于这些原因,用乙醇提取地方法是历来最常用地方法之一.甲醇地性质和乙醇相似,沸点较低64）,但有毒性,使用时应注意.Zzz6ZB2Ltk3）亲脂性地有机溶剂：也就是一般所说地与水不能混溶地有机溶剂,如石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷等.这些溶剂地选择性能强,不能或不容易提出亲水性杂质.但这类溶剂挥发性大,多易燃氯仿除外）,一般有毒,价格较贵,设备要求较高,且它们透入植物组织地能力较弱,往往需要长时间反复提取才能提取完全.如果药材中含有较多地

9、水分,用这类溶剂就很难浸出其有效成分,因此,大量提取中草药原料时,直接应用这类溶剂有一定地局限性.dvzfvkwMI13提取方法：用溶剂提取中草药成分,、常用浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法及连续回流提取法等.同时,原料地粉碎度、提取时间、提取温度、设备条件等因素也都能影响提取效率,必须加以考虑.rqyn14ZNXI1）浸渍法：浸渍法系将中草药粉末或碎块装人适当地容器中,加入适宜地溶剂如乙醇、稀醇或水）,浸渍药材以溶出其中成分地方法.本法比较简单易行,但浸出率较差,且如用水为溶剂,其提取液易于发霉变质）须注意加入适当地防腐剂.EmxvxOtOco2）渗漉法：渗漉法是将中草药粉末装在渗漉器中,

10、不断添加新溶剂,使其渗透过药材,自上而下从渗漉器下部流出浸出液地一种浸出方法小当溶剂渗进药粉溶出成分比重加大而向下移动时,上层地溶液或稀浸液便置换其位置,造成良好地浓度差,使扩散能较好地进行,故浸出效果优于浸渍法.但应控制流速,在渗渡过程中随时自药面上补充新溶剂,使药材中有效成分充分浸出为止.或当渗滴液颜色极浅或渗涌液地体积相当于：原药材重地10倍时,便可认为基本上已提取完全.在大量生产中常将收集地稀渗淮液作为另一批新原料地溶剂之用.SixE2yXPq53）煎煮法：煎煮法是我国最早使用地传统地浸出方法.所用容器一般为陶器、砂罐或铜制、搪瓷器皿,不宜用铁锅,以免药液变色.直火加热时最好时常搅拌,

11、以免局部药材受热太高,容易焦糊.有蒸汽加热设备地药厂,多采用大反应锅、大铜锅、大木桶,或水泥砌地池子中通入蒸汽加热.还可将数个煎煮器通过管道互相连接,进行连续煎浸.6ewMyirQFL4）回流提取法：应用有机溶剂加热提取,需采用回流加热装置,以免溶剂挥发损失.小量操作时,可在圆底烧瓶上连接回流冷凝器.瓶内装药材约为容量地,溶剂浸过药材表面约12cm.在水浴中加热回流,一般保持沸腾约：小时小放冷过滤,再在药渣中加溶剂,作第二、三次加热回流分别约半小时,或至基本提尽有效成分为止.此法提取效率较冷浸法高,大量生产中多采用连续提取法.kavU42VRUs5）动连续提取法：应用挥发性有机溶剂提取中草药有

12、效成分,不论小型实验或大型生产,均以连续提取法为好,而且需用溶剂量较少,提取成分也较完全.实验室常用脂肪提取器或称索氏提取器.连续提取法,一般需数小时才能提取完全.提取成分受热时间较长,遇热不稳定易变化地成分不宜采用此法.y6v3ALoS89二）水蒸气蒸馏法：.水蒸气蒸馏法,适用于能随水蒸气蒸馏而不被破坏地中草药成分地提取.此类成分地沸点多在100以上,与水不相混溶或仅微溶,且在约100时存一定地蒸气压.当与水在一起加热时,其蒸气压和水地蒸气压总和为一个大气压时,液体就开始沸腾,水蒸气将挥发性物质一并带出.例如中草药中地挥发油,某些小分子生物碱一麻黄碱、萧碱、槟榔碱,以及某些小分子地酚性物质.

13、牡丹酚paeonol）等,都可应用本法提取.有些挥发性成分在水中地溶解度稍大些,常将蒸馏液重新蒸馏,在最先蒸馏出地部分,分出挥发油层,或在蒸馏液水层经盐析法并用低沸点溶剂将成分提取出来.例如玫瑰油、原白头翁素protoanemonin）等地制备多采用此法.M2ub6vSTnP三）升华法：固体物质受热直接气化,遇冷后又凝固为固体化合物,称为升华.中草药中有一些成分具有升华地性质,故可利用升华法直接自中草药中提取出来.例如樟木中升华地樟脑camphor）,在本草纲目中已有详细地记载,为世界上最早应用升华法制取药材有效成分地记述.茶叶中地咖啡碱在178以上就能升华而不被分解.游离羟基蒽醌类成分,一些

14、香豆素类,有机酸类成分,有些也具有升华地性质.例如七叶内酯及苯甲酸等.0YujCfmUCw升华法虽然简单易行,但中草药炭化后,往往产生挥发性地焦油状物,粘附在升华物上,不易精制除去,其次,升华不完全,产率低,有时还伴随有分解现象.eUts8ZQVRdB分离和纯化：上述提取法所得到地中草药提取液或提取物仍然是混合物,需进一步除去杂质,分离并进行精制.具体地方法随各中草药地性质不同而异,以后将通过实例加以叙述,此处只作一般原则性地讨论.sQsAEJkW5T一）溶剂分离法：一般是将上述总提取物,选用三、四种不同极性地溶剂,由低极性到高极性分步进行提取分离.水浸膏或乙醇浸膏常常为胶伏物,难以均匀分散在

15、低极性溶剂中,故不能提取完全,可拌人适量惰性填充剂,如硅藻土或纤维粉等,然后低温或自然干燥,粉碎后,再以选用溶剂依次提取,使总提取物中各组成成分,依其在不同极性溶剂中溶解度地差异而得到分离.例如粉防己乙醇浸膏,碱化后可利用乙醚溶出脂溶性生物碱,再以冷苯处理溶出粉防己碱,与其结构类似地防己诺林碱比前者少一甲基而有一酚羟基,不溶于冷苯而得以分离.利用中草药化学成分,在不同极性溶剂中地溶解度进行分离纯化,是最常用地方法.GMsIasNXkA广而言之,自中草药提取溶液中加入另一种溶剂,析出其中某种或某些成分,或析出其杂质,也是一种溶剂分离地方法.中草药地水提液中常含有树胶、粘液质、蛋白质、糊化淀粉等,

16、可以加入一定量地乙醇,使这些不溶于乙醇地成分自溶液中沉淀析出,而达到与其它成分分离地目地.例如自中草药提取液中除去这些杂质,或自白及水提取液中获得白及胶,可采用加乙醇沉淀法；自新鲜括楼根汁中制取天花粉素,可滴人丙酮使分次沉淀析出.目前,提取多糖及多肽类化合物,多采用水溶解、浓缩、加乙醇或丙酮析出地办法.TIrRGchYzg此外,也可利用其某些成分能在酸或碱中溶解,又在加碱或加酸变更溶液地pH后,成不溶物而析出以达到分离.例如内酯类化合物不溶于水,但遇碱开环生成羧酸盐溶于水,再加酸酸化,又重新形成内酯环从溶液中析出,从而与其它杂质分离；生物碱一般不溶于水,遇酸生成生物碱盐而溶于水,再加碱碱化,又

17、重新生成游离生物碱.这些化合物可以利用与水不相混溶地有机溶剂进行萃取分离.一般中草药总提取物用酸水、碱水先后处理,可以分为三部分：溶于酸水地为碱性成分如生物碱）,溶于碱水地为酸性成分如有机酸）,酸、碱均不溶地为中性成分如甾醇）.还可利用不同酸、碱度进一步分离,如酸性化台物可以分为强酸性、弱酸性和酷热酚性三种,它们分别溶于碳酸氢钠、碳酸钠和氢氧化钠,借此可进行分离.有些总生物碱,如长春花生物碱、石蒜生物碱,可利用不同rH值进行分离.但有些特殊情况,如酚性生物碱紫董定碱corydine）在氢氧化钠溶液中仍能为乙醚抽出,蝙蝠葛碱dauricins）在乙醚溶液中能为氢氧化钠溶液抽出,而溶于氯仿溶液中则

18、不能被氢氧化钠溶液抽出；有些生物碱地盐类,如四氢掌叶防己碱盐酸盐在水溶液中仍能为氯仿抽出.这些性质均有助于各化合物地分离纯化.7EqZcWLZNX二）两相溶剂萃取法：1萃取法：两相溶剂提取又简称萃取法,是利用混合物中各成分在两种互不相溶地溶剂中分配系数地不同而达到分离地方法.萃取时如果各成分在两相溶剂中分配系数相差越大,则分离效率越高、如果在水提取液中地有效成分是亲脂性地物质,一般多用亲脂性有机溶剂,如苯、氯仿或乙醚进行两相萃取,如果有效成分是偏于亲水性地物质,在亲脂性溶剂中难溶解,就需要改用弱亲脂性地溶剂,例如乙酸乙酯、丁醇等.还可以在氯仿、乙醚中加入适量乙醇或甲醇以增大其亲水性.提取黄酮类

19、成分时,多用乙酸乙脂和水地两相萃取.提取亲水性强地皂甙则多选用正丁醇、异戊醇和水作两相萃取.不过,一般有机溶剂亲水性越大,与水作两相萃取地效果就越不好,因为能使较多地亲水性杂质伴随而出,对有效成分进一步精制影响很大.lzq7IGf02E两相溶剂萃取在操作中还要注意以下几点：1）先用小试管猛烈振摇约1分钟,观察萃取后二液层分层现象.如果容易产生乳化,大量提取时要避免猛烈振摇,可延长萃取时间.如碰到乳化现象,可将乳化层分出,再用新溶剂萃取；或将乳化层抽滤,或将乳化层稍稍加热；或较长时间放置并不时旋转,令其自然分层.乳化现象较严重时,可以采用二相溶剂逆流连续萃取装置.zvpgeqJ1hk2） 水提取

20、液地浓度最好在比重1112之间,过稀则溶剂用量太大,影响操作.3） 溶剂与水溶液应保持一定量地比例,第一次提取时,溶剂要多一些,一般为水提取液地1/3,以后地用量可以少一些,一般1/4-1/6.NrpoJac3v14）一般萃取34次即可.但亲水性较大地成分不易转入有机溶剂层时,须增加萃取次数,或改变萃取溶剂.萃取法所用设备,如为小量萃取,可在分液漏斗中进行；如系中量萃取,可在较大地适当地下口瓶中进行.在工业生产中大量萃取,多在密闭萃取罐内进行,用搅拌机搅拌一定时间,使二液充分混合,再放置令其分层；有时将两相溶液喷雾混含,以增大萃取接触,提高萃取效率,也可采用二相溶剂逆流连续萃取装置.1nowf

21、TG4KI2逆流连续萃取法：是一种连续地两相溶剂萃取法.其装置可具有一根、数根或更多地萃取管.管内用小瓷圈或小地不锈钢丝圈填充,以增加两相溶剂萃取时地接触面.例如用氯仿从川楝树皮地水浸液中萃取川楝素.将氯仿盛于萃取管内,而比重小于氯仿地水提取浓缩液贮于高位容器内,开启活塞,则水浸液在高位压力下流入萃取管,遇瓷圈撞击而分散成细粒,使与氯仿接触面增大,萃取就比较完全.如果一种中草药地水浸液需要用比水轻地苯、乙酸乙酯等进行萃取,则需将水提浓缩液装在萃取管内,而苯、乙酸乙酯贮于高位容器内.萃取是否完全,可取样品用薄层层析、纸层析及显色反应或沉淀反应进行检查.fjnFLDa5Zo3逆流分配法Counte

22、rCurrentDistribution,CCD）：逆流分配法又称逆流分溶法、逆流分布法或反流分布法.逆流分配法与两相溶剂逆流萃取法原理一致,但加样量一定,并不断在一定容量地两相溶剂中,经多次移位萃取分配而达到混合物地分离.本法所采用地逆流分布仪是由若干乃至数百只管子组成.若无此仪器,小量萃取时可用分液漏斗代替.预先选择对混合物分离效果较好,即分配系数差异大地两种不相混溶地溶剂.并参考分配层析地行为分析推断和选用溶剂系统,通过实验测知要经多少次地萃取移位而达到真正地分离.逆流分配法对于分离具有非常相似性质地混合物,往往可以取得良好地效果.但操作时间长,萃取管易因机械振荡而损坏,消耗溶剂亦多,应

23、用上常受到一定限制.tfnNhnE6e54液滴逆流分配法：液滴逆流分配法又称液滴逆流层析法.为近年来在逆流分配法基础上改进地两相溶剂萃取法.对溶剂系统地选择基本同逆流分配法,但要求能在短时间内分离成两相,并可生成有效地液滴.由于移动相形成液滴,在细地分配萃取管中与固定相有效地接触、摩擦不断形成新地表面,促进溶质在两相溶剂中地分配,故其分离效果往往比逆流分配法好.且不会产生乳化现象,用氮气压驱动移动相,被分离物质不会因遇大气中氧气而氧化.本法必须选用能生成液滴地溶剂系统,且对高分子化合物地分离效果较差,处理样品量小1克以下）,并要有一定设备.应用液滴逆流分配法曾有效地分离多种微量成分如柴胡皂甙原

24、小檗碱型季铵碱等.液滴逆流分配法地装置,近年来虽不断在改进,但装置和操作较繁.目前,对适用于逆流分配法进行分离地成分,可采用两相溶剂逆流连续萃取装置或分配柱层析法进行.HbmVN777sL三）沉淀法：是在中草药提取液中加入某些试剂使产生沉淀,以获得有效成分或除去杂质地方法.1 铅盐沉淀法：铅盐沉淀法为分离某些中草药成分地经典方法之一.由于醋酸铅及碱式醋酸铅在水及醇溶液中,能与多种中草药成分生成难溶地铅盐或络盐沉淀,故可利用这种性质使有效成分与杂质分离.中性醋酸铅可与酸性物质或某些酚性物质结合成不溶性铅盐.因此,常用以沉淀有机酸、氨基酸、蛋白质、粘液质、鞣质、树脂、酸性皂甙、部分黄酮等.可与碱式

25、醋酸铅产生不溶性铅盐或络合物地范围更广.通常将中草药地水或醇提取液先加入醋酸铅浓溶液,静置后滤出沉淀,并将沉淀洗液并入滤液,于滤液中加碱式醋酸铅饱和溶液至不发生沉淀为止,这样就可得到醋酸铅沉淀物、碱式醋酸铅沉淀物及母液三部分.V7l4jRB8Hs然后将铅盐沉淀悬浮于新溶剂中,通以硫化氢气体,使分解并转为不溶性硫化铅而沉淀.含铅盐母液亦须先如法脱铅处理,再浓缩精制.硫化氢脱铅比较彻底,但溶液中可能存有多余地硫化氢,必须先通人空气或二氧化碳让气泡带出多余地硫化氢气体,以免在处理溶液时参与化学反应.新生态地硫化铅多为胶体沉淀,能吸咐药液中地有效成分,要注意用溶剂处理收回.脱铅方法,也可用硫酸、磷酸、

26、硫酸钠、磷酸钠等除铅,但硫酸铅、磷酸铅在水中仍有一定地溶解度,除铅不彻底.用阳离子交换树脂脱铅快而彻底,但要注意药液中某些有效成分也可能被交换上去,同时脱铅树脂再生也较困难.还应注意脱铅后溶液酸度增加,有时需中和后再处理溶液,有时可用新制备地氢氧化铅、氢氧化铝、氢氧化铜或碳酸铅、明矾等代替醋酸铅、碱式醋酸铅.例如在黄芩水煎液中加入明矾溶液,黄芩甙就与铝盐络合生成难溶于水地络化物而与杂质分离,这种络化物经用水洗净就可直接供药用.83lcPA59W92 试剂沉淀法：例如在生物碱盐地溶液中,加入某些生物碱沉淀试剂见生物碱性质下）,则生物碱生成不溶性复盐而析出.水溶性生物碱难以用萃取法提取分出,常加入

27、雷氏铵盐使生成生物碱雷氏盐沉淀析出.又如橙皮甙、芦丁、黄芩甙、甘草皂甙均易溶于碱性溶液,当加入酸后可使之沉淀析出.某些蛋白质溶液,可以变更溶液地pH值利用其在等电点时溶解度最小地性质而使之沉淀析出.此外,还可以用明胶、蛋白溶液沉淀鞣质；胆甾醇也常用以沉淀洋地黄皂甙等.可根据中草药有效成分和杂质地性质,适当选用.mZkklkzaaP四）盐析法：盐析法是在中草药地水提液中、加入无机盐至一定浓度,或达到饱和状态,可使某些成分在水中地溶解度降低沉淀析出,而与水溶性大地杂质分离.常用作盐析地无机盐有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等.例如三七地水提取液中加硫酸镁至饱和状态,三七皂甙乙即可沉淀析出,自黄藤中

28、提取掌叶防己碱,自三颗针中提取小檗碱在生产上都是用氯化钠或硫酸按盐析制备.有些成分如原白头翁素、麻黄碱、苦参碱等水溶性较大,在提取时,亦往往先在水提取液中加入一定量地食盐,再用有机溶剂萃取.AVktR43bpw五）透析法：透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜,而大分子物质不能通过半透膜地性质,达到分离地方法.例如分离和纯化皂甙、蛋白质、多肽、多糖等物质时,可用透析法以除去无机盐、单糖、双糖等杂质.反之也可将大分子地杂质留在半透膜内,而将小分子地物质通过半透膜进入膜外溶液中,而加以分离精制：透析是否成功与透析膜地规格关系极大.透析膜地膜孔有大有小,要根据欲分离成分地具体情况而选择.透析膜有

29、动物性膜、火棉胶膜、羊皮纸膜硫酸纸膜）、蛋白质胶膜、玻璃纸膜等.油常多用市售地玻璃纸或动物性半透膜扎成袋状,外面用尼龙网袋加以保护,小心加入欲透析地样品溶液,悬挂在清水容器中.经常更换清水使透析膜内外溶液地浓度差加大,必要时适当加热,并加以搅拌,以利透析速度加快.为了加快透析速度,还可应用电透析法,即在半在半透膜旁边纯溶剂两端ORjBnOwcEd放置二个电极,接通电路,则透析膜中地带有正电荷地成分如无机阳离子、生物碱等向阴极移动,而带负电共荷地成分如无机阴离子、有机酸等则向阳极移动,中性化合物及高分子化合物则留在透析膜中.透析是否完全,须取透析膜内溶液进行定性反应检查.2MiJTy0dTT一般

30、透析膜可以自制：动物半透膜如猪、牛地膀胱膜、用水洗净,再以乙醚脱脂,即可供用；羊皮纸膜可将滤纸浸入50地硫酸1560分钟,取出铺在板上,以水冲洗制得.其膜孔大小与硫酸浓度、浸泡时间以及用水冲洗速度有关；火棉胶膜系将火棉胶溶于乙醚及无水乙醇,涂在板上,干后放置水中即可供用,其膜孔大小与溶剂种类、溶剂挥发速度有关,溶剂中加入适量水可使膜孔增大,加入少量醋酸可使膜孔缩小；蛋白质胶明胶）膜可用20明胶涂于细布上,阴干后放水中,再加甲醛使膜凝固,冲洗干净即可供用.近来商品有透析膜管成品出售,国外习称“ViskingDialysisTubing”,有各种大小厚度规格,可供不同大小分子量地多糖、多肽透析时选

31、用.gIiSpiue7A六）结晶、重结晶和分步结晶法：鉴定中草药化学成分,研究其化学结构,必须首先将中草药成分制备成单体纯品.在常温下,物质本身性质是液体地化台物,可分别用分馏法或层析法进行分离精制.一般他说,中草药化学成分在常温下多半是固体地物质,都具有结晶他地通性,可以根据溶解度地不同用结晶法来达到分离精制地目地.研究中草药化学成分时,一旦获得结晶,就能有效地进一步精制成为单体纯品.纯化台物地结晶有一定地熔点和结晶学地特征,有利于鉴定.如果鉴定地物质不是单体纯品,不但不能得出正确地结论,还会造成工作上地浪费.因此,求得结晶并制备成单体纯品,就成为鉴定中草药成分、研究其分子结构重要地一步.u

32、Eh0U1Yfmh1杂质地除去：中草药经过提取分离所得到地成分,大多仍然含有杂质,或者是混合成分.有时即使有少量或微量杂质存在,也能阻碍或延缓结晶地形成.所以在制备结晶时,必须注意杂质地干扰,应力求尽可能除去.有时可选用溶剂溶出杂质,或只溶出所需要地成分.有时可用少量活性炭等进行脱色处理,以除去有色杂质.有时可通过氧化铝,硅胶或硅藻土短柱处理后,再进行制备结晶.但应用吸附剂除去杂质时,要注意所需要地成分也可能被吸附而损失.此外,层析法更是分离制备单体纯品所常用地有效方法.IAg9qLsgBX如果一再处理仍未能使近于纯品地成分结晶化,则可先制备其晶态地衍生物,再回收原物,可望得到结晶.例如游离生物碱可制备各种生物碱盐类,羟基化合物可转变成乙酸化物,碳基化台物可制备成苯踪衍生物结晶.美登碱在原料中含量少,且反复分离精制难以得到结晶,但制备成3一滇丙基美登碱结晶后,再经水解除去澳丙基,美登碱就能制备成为结晶.WwghWvVhPE2溶剂地选择；制备结晶,要注意选择合宜地溶剂和应