遗传筛查-周丽丽_精品文档.ppt

1、遗传筛查,温州市中心医院 周丽丽,我国出生缺陷现状,每年因神经管畸形造成的直接经济损失超过2亿元先天愚型的治疗费超过20亿元先天性心脏病的治疗费高达120亿元出生缺陷严重的公共卫生问题出生缺陷影响我国经济发展和人们正常生活的社会问题,遗传筛查是在人群中对某种特定的基因型进行检测，以确定携带此基因型的个体，这种基因型可能是致病基因或疾病易感基因，或者是能往下传递造成后代患病的基因。,遗传筛查项目开展的原则和标准,疾病定义明确，但只用有参考诊断标准，临床表现和体征通常难以对疾病做出及时准确的诊断。疾病严重危害人体健康，甚至可以危机生命。疾病的流行率相对较高，而且患病者和非患病者在人群中的分布情况明

2、确。对疾病有明确的治疗效果。如果缺乏有效治疗，可以通过筛查进行选择性流产。筛查的成本低，具有经济价值和社会效益。,遗传筛查的方法,一、生化分析 简单、快速、有效，用于大部分遗传代谢性疾病和血红蛋白病二、超声波筛查 简便、无痛无损伤、应用最广泛 用于对胎儿生长、器官发育、羊水、胎盘的检测和评价三、分子遗传筛查 比生化分析要求高，可以检出疾病相关突变基因,遗传筛查的应用,一、产前筛查二、新生儿筛查三、杂合子筛查四、症状前筛查五、配子供体筛查,一、产前筛查 产前筛查是指通过使用无创性方法对孕早、中期孕妇进行检查从而发现高风险胎儿的检测。目前开展的产前筛查主要方法是通过测定孕妇血清标志物如PAPP-A

3、、B-hcG、甲胎蛋白等，结合遗传学超声检查，对21-三体、18-三体、开放性神经管缺损等进行风险评估。,结果判断：筛查截断值,筛查截断值（CUT OFF）：用以区分高风险和低风险人群的一个风险率数值风险率（Risk）是以1：n的可能几率表示21三体综合征截断值为1：27018三体综合征截断值为1：350NTD截断值为1：250,筛查风险率与相关因素,人种年龄孕龄多胞胎,体重吸烟糖尿病体外受精,计算风险率最应注意的因素：孕妇年龄、孕周的准确性,唐氏综合症的风险率 与孕妇年龄的关系,图注：第一胎为21三体型患儿，第二胎经产前诊断为正常胎儿后出生的正常男婴,二、新生儿筛查 新生儿筛查是指对新生儿某

4、些遗传性疾病或先天性畸形的筛查。新生儿筛查的疾病主要是那些对机体危害大、出生时临床症状不明显、早治早防瘦小明显的疾病，如先天性甲状腺功能低下、苯丙酮尿症等,甲减的新生儿筛查,甲减的诊断和治疗时间与患儿的智商极限呈直接关联，如果能在患儿出生后3-4周内补充适量的甲状腺素，患儿的体格和精神发育可以趋向正常。定量检测新生儿滤纸血斑上甲状腺素T4 促甲状腺激素TSH 如TSH升高，须做一系列其他检测确诊，如测量T4浓度，甲状腺闪烁扫描，骨骼X线检查等等,苯丙酮尿症的新生儿筛查,苯丙酮尿症PKU是因苯丙氨酸羟化反应障碍所致的一种较常见的遗传性代谢疾病。高浓度的的苯丙氨酸Phe及其旁路代谢产物的神经毒性作

5、用会使新生儿有严重的只能发育障碍，约1/4患儿合并继发性癫痫。如能早期给予低苯丙氨酸饮食，使患儿血中苯丙氨酸浓度维持在理想范围内，可防止智能障碍的发生。,PKU筛查技术,1.细菌抑制法BIA 枯草杆菌变异菌株的生长需要Phe，若在培养基中加入Phe的抑制物，细菌的生长受到抑制。这种抑制可因外源性Phe的加入而得以解除。BIA法是半定量法，具有灵敏、简便、重复性好、经济、不需要特别设备，适合于大规模的群体筛查等优点。,2.荧光分析法 从滤纸血片中先提取出Phe，与茚三酮形成一种荧光化合物，在一定波长下测定荧光强度。是测定Phe的定量法，具有可信度高，检出率高，假阳性率低等优点。,3.串联质谱法在

6、2min内，该技术可以从3mm的滤纸血斑中同时筛检出20余种可以治疗的遗传代谢疾病，包括氨基酸代谢异常症、有机酸血症、脂肪酸氧化障碍以及肉碱循环紊乱等。,三、杂合子筛查 又称携带者筛查，是指在人群中的非患病者群体进行某些隐性遗传病杂合子的筛查。符合杂合子筛查的标准通常是发病率高、危害大、对家庭和社会造成严重的经济负担和社会负担，如我国南方地区的地中海贫血和G6PD缺乏症，黑人中的镰状细胞病、犹太人中的Tay-Sache病以及欧美白种人的囊性纤维变性。,和地中海贫血筛查方法,(1)、一般方法a、血常规测定 小细胞低色素 MCV=80fl，MCH=25.0pgb、变性血红蛋白包涵体检查 阳性c、异

7、丙醇试验 在5min时出现阳性，20min时呈絮状沉淀d、红细胞渗透脆性试验 阳性,（2）、血红蛋白组分的定性和定量分析a、血红蛋白电泳 同一电场中，由于各种血红蛋白组分带电荷数不同，故在一定时间内即可区分出各种区带，从电泳图谱中科初步鉴别出各种异常血红蛋白，以便进一步鉴定或定量测定。b、HbA2测定 是地贫筛查的主要阳性标志物 正常参考值2.5%-3.5%，轻型地贫4%-10%，异常 HbE10%以上c、抗碱血红蛋白测定 是判断HbF的重要标志,G6PD缺乏症筛查方法,1.荧光斑点法 G6PD在葡萄糖代谢生成还原性辅酶（NADPH）中起催化作用，NADPH在长波紫外光照下能发出荧光，G6PD

8、缺乏时由于NADPH生成减少，故荧光微弱或不显。2.改良四氮唑蓝（NBT）法 NADPH通过1-甲基吩嗪二甲硫酸盐递氢作用，能使黄色的NBT还原成紫色。3.高铁血红蛋白还原试验 正常血红蛋白在亚硝酸钠的氧化作用下变成高铁血红蛋白，而红细胞内的NADPH在亚甲蓝的作用下可使高铁血红蛋白还原成正常血红蛋白，使溶液成红色。,四、症状前筛查 症状前筛查是一种预测性遗传检测，是对迟发显性遗传病在症状出现前进行筛查，做出预测性诊断。对于检测一些常见病相关基因，如乳腺癌的BRCA1和BRCA2基因、老年性痴呆的APO4e2基因型等尤为重要，这对疾病的防治和人类寿命的延长及生命质量的提高具有重要意义。,五、配子供体筛查 配子供体筛查是指在辅助生育技术时对配子（精子或卵子）捐赠者进行遗传筛查。,谢谢！,