保健食品卫生学理化检验规范征求意见稿.docx

1、保健食品卫生学理化检验规范征求意见稿保健食品卫生学理化检验规范（征求意见稿）Standards for Hygienic Physical and Chemical Examination of Health Food第一部分总则General Principles一、主题内容和适用范围Content and Scope of Application1.本规范规定了保健食品和原料的卫生学技术要求的检验项目及方法。2.本规范适用于保健食品的注册、复核和备案检验、监督抽验、风险监测及常规检验项目的确定和方法的选择。二、基本要求Basic Requirements1. 凡保健食品，应符合GB 167

2、40食品安全国家标准 保健食品的各项要求。附表1所列检测项目是对该标准的补充规定。 2. 保健食品中食品添加剂的使用应符合GB 2760的规定和（或）有关规定。检测机构可根据实际需要，按产品配方检测合成色素、防腐剂、甜味剂及抗氧化剂的含量。3. 保健食品的包装材料应符合GB 4806.1食品安全国家标准 食品接触材料及制品通用安全要求的要求。4. 进行辐照灭菌的产品，其辐照源、辐照剂量等均应符合相应的国家标准、行业标准或有关要求。5. 检验机构受理保健食品检测时，申报单位应提供该产品的配方、工艺、产品技术要求及功效成分/标志性成分检测方法研究验证等相关资料。 6. 申请单位在对产品进行功效成分

3、/标志性成分检测时，如国家标准中所提供的检测方法不适用于该产品检验时，可优先选择本规范第二部分提供的检测方法，并进行必要的方法学适用性研究；如规范中所提供的检测方法不适用于该产品检验时，申请单位可选择行业标准、国际上权威分析方法进行测定，并进行必要的方法适用性研究。注册检验机构对所附材料进行审核，必要时进行有关验证和方法确认，如申报单位提供的方法不适合送检的样品时，注册检验机构不得擅自修改，应将有关情况反馈申报单位，由其进行研究并提供方法后，再对送检样品进行试验，确保试验方法与送检产品技术要求中规定的方法一致。复核检验机构应按照申报单位提交的检验方法进行检验并出具复核检验报告。7. 保健食品中

4、原料和辅料应符合保健食品注册与备案管理办法中原、辅料质量要求的规定，并符合相应的食品国家标准。原料若为植物提取物或者原料及辅料加工过程中使用、间接引入有机溶剂时，涉及的有机溶剂应符合GB 2760食品安全国家标准 食品添加剂使用标准附录C中食品工业用加工助剂使用名单规定，或其他相关标准的要求。企业可根据产品质量控制需要，采用本规范中第三部分保健食品中十一种溶剂残留的测定方法将溶剂残留检测列入原料及产品的技术要求。8. 针对各类功效的保健食品，需参照本规范第四部分兴奋剂及违禁成分测定方法进行非法添加筛查。同时，需进行配方分析，如明确存在原料带入情况的指标，应检测相关项目，报出检测结果，但不作为非

5、法添加结果报送，除结果异常外。9. 不同剂型及特定原料类别产品的卫生学理化检验应包括本规范第五部分中规定的相应检测项目。10. 保健食品应具有与产品配方和申报的保健功能相适应的功效成分或标志性成分，申报时须提供配方中主要原料所含的功效成分或标志性成分的检测结果、检方法及方法学验证结果。第六部分列出了原料类型及相应检测项目，以所列原料为主的产品须检测表中规定的项目。 11. 普通食品形态产品应检测并制定净含量及允许负偏差指标，需要按照产品质量标准规定规格的最小包装确定检测依据，指标应符合定量包装商品净含量计量检验规则（JJF 1070）规定；中国药典“制剂通则”项下有相应要求的产品剂型，应检测并

6、制定装量差异或重量差异指标，指标应符合规定。装量或净含量只检测内容物，不包括隔离材料，如胶囊壳等。12. 最小服用单元含有惰性隔离材料填充的产品，如胶囊，其功效成分或者指标成分、农药残留、水分、灰分等指标以去除隔离材料（胶囊壳）的内容物为检测单元，对于非法添加药物、重金属、铬、色素（如材料带颜色）等则需要进行整体检测，或者检测结果明确标识相关检测部位。13. 标准规定不得检出的项目结果，方法定量限以上检测结果，按照具体检出值报送结果；方法检出限以下检测结果，注明“未检出，检出限值”；方法检出限以上、定量限以下检测结果，注明“检出且小于定量限，定量限值，检出限值”。14. 注册检验机构应按照国家

7、相关规定和标准等要求，根据样品具体情况，合理地进行稳定性试验设计和研究。通过稳定性试验，考察样品在不同环境条件下（如温度、相对湿度等）的感官、化学、物理及生物学特征随时间增加其变化程度和规律，从而判断样品包装、贮存条件和保质期内的稳定性。产品稳定性重点考察指标，主要包括鉴别、感官、微生物、崩解时限（溶散时限、溶化性等）、水分、pH值、酸价、过氧化值、真菌毒素、列入理化指标中的功效成分/标志性成分等随储存条件和储存时间容易发生变化的指标。产品非稳定性重点考察指标，主要包括灰分、污染物（如铅、总砷、总汞等）、农残（如六六六、滴滴涕等）、国家相关标准及现行规定有用量限制的合成色素和甜味剂等随储存条件

8、和贮存时间不易发生变化的指标，以及国家相关标准及现行规定有用量限制的抗氧化剂指标。第二部分二十五种功效成分和标志性成分检验方法Testing Methods for 25 kinds of Functional and Iconic Components一、保健食品中红景天苷的测定Determination of salidroside in health food 1 范围本方法规定了以红景天为主要原料的保健食品中红景天苷的液相色谱测定方法。本方法适用于保健品食品中红景天苷的测定，也适用于保健食品中酪醇的测定。2 原理试样经甲醇超声提取，以0.01 mol/L 乙酸铵-甲醇为流动相（80+2

9、0），采用高效液相色谱法，紫外检测器检测，根据保留时间定性，外标法定量。3 试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为 GB/T6682 规定的一级水。3.1 试剂3.1.1 乙酸铵( CH3COONH4 )。 3.1.2 甲醇(CH3OH)：色谱纯。3.1.3 甲醇(CH3OH)。 3.2 试剂配制乙酸铵溶液 (0.01 mol/L)：称取0.77 g乙酸铵，加入适量水溶解，用水定容至1000 mL，经0.45 m水相微孔滤膜过滤后备用。3.3 标准品红景天苷(C14H20O7)：纯度98%。酪醇（C8H10O2)：纯度98%。3.4 标准溶液的配制3.4.1 红景天苷标准储

10、备液(2.0 mg/mL)： 准确称取红景天苷标准品0.02 g于 10 mL 容量瓶中，用甲醇（3.1.2）溶解并定容至刻度 ，摇匀。3.4.2 红景天苷标准工作液：将红景天苷标准储备液（3.4.1）用甲醇（3.1.2）稀释制备一系列标准溶液，标准系列浓度为0mg/mL、0.01 mg/mL、0.02 mg/mL、0.05mg/mL、0.20 mg/mL、0.50 mg/mL，临用时配制。3.4.3 酪醇标准储备液(2.0 mg/mL)：准确称取酪醇标准品0.02 g于 10 mL 容量瓶中，用甲醇（3.1.2）溶解并定容至刻度 ，摇匀。3.4.4 系统适用性溶液：准确吸取红景天苷标准储备液

11、（3.4.1）和酪醇标准储备液（3.4.3）各0.5mL于 10 mL 容量瓶中，用甲醇（3.1.2）稀释至刻度 ，摇匀。4 仪器设备4.1 高效液相色谱仪： 配有紫外检测器（UV）。4.2 超声波清洗器。4.3 分析天平：感量为0.01 mg，0.1 mg。5 分析步骤5.1 试样制备5.1.1 固体样品：取20粒以上片剂或胶囊试样进行粉碎、混匀，准确称取适量试样（约含红景天苷2.5mg）于 25 mL 容量瓶中，加入甲醇（3.1.3）约20mL，超声提取30 min，放冷至室温，用甲醇（3.1.3）定容至刻度。混匀后经0.45 m滤膜过滤，供液相色谱分析用。5.1.2 液体样品：准确吸取适

12、量摇匀后的试样（约含红景天苷2.5mg）于25 mL容量瓶中，用甲醇（3.1.3）定容至刻度。混匀后经0.45 m滤膜过滤，供液相色谱分析用。5.2 色谱参考条件5.2.1 色谱柱：C18柱，柱长250mm，内径4.6mm，填料粒径5 m，或同等性能色谱柱；5.2.2 流动相：乙酸铵溶液（0.01 mol/L）-甲醇（80+20）；5.2.3 流速：1.0 mL/min；5.2.4 柱温：25 ；5.2.5 检测波长：215 nm；5.2.6 进样量：10 mL。5.2.7 系统适用性试验：取系统适用性溶液（3.4.4）10 mL，注入液相色谱仪，记录色谱图，红景天苷峰与酪醇峰的分离度应大于1

13、.5。5.3 标准曲线的制作 将标准系列工作液（3.4.2）分别注入高效液相色谱仪中，测定相应的色谱峰高或峰面积，以标准工作液的浓度为横坐标，以峰面积或峰高为纵坐标，绘制标准曲线（标准溶液液相色谱图见附录A中图A.1）。5.4 试样溶液的测定将试样待测液(5.1.1或5.1.2)注入液相色谱仪中，以保留时间定性，测得峰面积或峰高，根据标准曲线得到待测液红景天苷的浓度(样品溶液液相色谱图见附录A中图A.2)。6 分析结果的表述试样中红景天苷含量按式(1)计算: C VX = 100 .(1) m 式中： X 试样中红景天苷的含量，单位为毫克每百克或毫克每百毫升（mg/100g或mg/100mL）

14、； C由标准曲线查得待测样液中红景天苷的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）；V样品的定容体积，单位为毫升（mL）；m样品量，单位为克或毫升（g或mL）；100单位转换。计算结果以重复条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留三位有效数字。7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的 10% 。 8 其他 当称样量为 1 g，定容体积为 25 mL时，红景天苷的检出限为50m g/g。附录 A 标准溶液和试样溶液典型液相色谱图A.1 红景天苷和酪醇标准溶液色谱图，见图 A.1。图 A.1 红景天苷和酪醇标准溶液（0.1mg/mL）色谱图A.2 含有红景天苷

15、和酪醇的试样溶液色谱图，见图 A.2。 图 A.2 含有红景天苷和酪醇的试样溶液色谱图二、保健食品中大蒜素的测定Determination of allicin in health food 1 范围本方法规定了保健食品中大蒜素的测定方法。本方法适用于以大蒜及其加工品为主要原料制成的保健食品中大蒜素的测定。2 原理 试样经有机溶剂提取，通过气相色谱检测，以保留时间定性，外标法定量。3 试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯。3.1 试剂3.1.1 无水乙醇(C2H5OH)。3.1.2 正己烷(CH3(CH2)4CH3)。3.1.3 无水硫酸钠(Na2SO4)。3.2 标准品 大蒜

16、素(C6H10S3)：纯度99.0%。3.3 标准溶液配制3.3.1大蒜素标准储备液(10.0mg/mL)：称取100.0mg大蒜素标准物质于10mL 容量瓶中，用正己烷定容至刻度，摇匀。此溶液可在冰箱中保存七天。3.3.2大蒜素标准工作液(1.0mg/mL)：吸取大蒜素标准储备液 1.0mL于 10mL容量瓶中，用正己烷定容至刻度，摇匀，得浓度为1.0mg/mL的标准工作液，临用时配制。4 仪器4.1 气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器( FID)。 4.2 天平：感量为 0.1 mg 和 0.01 mg。 4.3 超声清洗器。 5 分析步骤5.1 试样制备5.1.1 固体试样称取已粉碎混合

17、均匀的固体待测试样适量（含待测组分约5mg，精确到 0.0001 g）于5mL容量瓶中，加无水乙醇2.5mL，密塞，超声20min，取出冷却至室温，加正己烷定容，摇匀，过0.45m微孔滤膜过滤，待上机测试用。5.1.2 油状试样称取已混合均匀的油状待测试样适量（含待测组分约5mg，精确到 0.0001 g）于5mL容量瓶中，加正己烷溶解并定容，摇匀，待上机测试用。5.1.3 含水液体试样精密吸取已混合均匀的待测试样适量（含待测组分约10mg），置于分液漏斗中，加5mL正己烷振摇提取1min，静置分层，取上层清液过无水硫酸钠，提取两次。用适量正己烷冲洗无水硫酸钠，合并至同一10mL容量瓶中，正己

18、烷定容，摇匀。待上机测试用。5.2 色谱参考条件5.2.1 色谱柱：（5%-苯基）-甲基聚硅氧烷固定相，柱长30m，内径0.25mm，膜厚0.25m或其他同等性能色谱柱。5.2.2柱温箱温度： 起始温度100保持3分钟， 10/min速度升至150，再以20/min速度升至200，保持20min。5.2.3 进样口温度：220；进样量1 L。 5.2.4 检测器温度：250。5.2.5 载气：高纯氮气，流量1.0mL/min。 5.2.6 氢气：40mL/min ；空气：400mL/min。 5.3 测定将 1 L 的标准溶液(3.3.2)和试样待测液(5. 1)注入气相色谱仪中，以保留时间定

19、性，测得峰面积或峰高，外标峰面积或峰高法定量。(标准溶液图谱及试样图谱见附录A)6 分析结果的表述试样中大蒜素含量按式(1)计算 .(1)式中：W大蒜素的含量，单位为克每百克或克每百毫升(g/100g或g/100mL)；A1试样使用液色谱峰面积或峰高；A2标准使用液峰面积或峰高；C标准使用液浓度，单位为毫克每毫升( mg/mL)；V试样定容体积，单位为毫升( mL)；m试样的质量或体积，单位为克或毫升( g或mL)；100单位转换；1000单位转换。计算结果以重复条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留三位有效数字。7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平

20、均值的 10% 。8 其他当固体试样和油状试样称样量为0.1g，定容体积为5.0mL时，大蒜素的检出限为0.20g/100g。当液体取样量为0.2mL，定容体积为10mL时，大蒜素的检出限为0.22g/100mL。附录A标准溶液和试样溶液典型气相色谱图A.1大蒜素标准溶液色谱图，见图A.1。大蒜素图A.1大蒜素标准溶液色谱图A.2含有大蒜素的试样溶液色谱图，见图A.2。大蒜素图A.2含有大蒜素的试样溶液色谱图三、保健食品中芦荟苷的测定Determination of aloin in health food1 范围本标准规定了保健食品中芦荟苷的液相色谱测定方法。本标准适用于以芦荟及其加工品为原

21、料的保健食品中芦荟苷含量的测定。2 原理样品用甲醇+水（55+45）作为溶剂，提取试样中的芦荟苷，经液相色谱仪C18 柱分离，在293 nm波长处检测，以芦荟苷保留时间定性，峰面积定量。3 试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为 GB/T6682 规定的一级水。3.1 试剂3.1.1 甲醇(CH3OH)：色谱纯。3.1.2 石油醚：沸程3060。3.2 标准品芦荟苷标准品(C21H22O9)。3.3 标准溶液的配制3.3.1 芦荟苷标准储备溶液：称取10.00 mg芦荟苷标准品于25 mL 容量瓶中，加流动相溶解并定容至刻度，摇匀。3.3.2 芦荟苷标准工作液：分别吸取芦荟

22、苷标准储备溶液0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL、6.0 mL至10 mL容量瓶中，用流动相定容，得浓度为20 g/mL、40 g/mL、80 g/mL、160 g/mL、240 g/mL的标准工作液。4 仪器设备4.1 高效液相色谱仪：配紫外检测器或二极管阵列检测器。4.2 超声波清洗器。4.3 分析天平：感量1 mg，0.1 mg。4.4 离心机：转速3000 r/min。4.5 微孔滤膜：0.45 m。5 分析步骤5.1 试样制备 5.1.1 固体试样 称取已粉碎混合均匀的待测试样1 g(精确到 0.001 g)，置具塞锥形瓶中，加入50.0 mL流动相，称重，超声处

23、理10 min，放冷，用流动相补足减失的重量，摇匀，经0.45 m微孔滤膜过滤，滤液待测。必要时可进行适当稀释。5.1.2含油基质试样 称取混合均匀的待测试样1 g(精确到 0.001 g)，置具塞锥形瓶中，加入25.0 mL石油醚，涡旋使充分混匀，过滤，弃去石油醚液，再用少量石油醚洗涤锥形瓶及滤纸，挥干，将滤纸和残渣置于原具塞锥形瓶中，加入50.0 mL流动相，称重，超声处理10 min，放冷，用流动相补足减失的重量，摇匀，经0.45 m微孔滤膜过滤，滤液待测。必要时可进行适当稀释。5.1.3 水性液体试样吸取待测试样，必要时以流动相适当稀释，离心，取上清液经0.45 m微孔滤膜过滤。5.2

24、色谱参考条件5.2.1 色谱柱：C18柱，柱长250 mm，内径4.6 mm，粒径5 m，或同等性能的色谱柱。5.2.2流动相：甲醇+水=55+45。5.2.3流速：1 mL/min。5.2.4柱温：40。5.2.5检测波长：293 nm。5.2.6进样量：10 L。5.3 标准曲线的制作 将标准系列各浓度溶液(3.3.2)，注入液相色谱仪中，测得相应的峰面积，以标准工作液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线(标准溶液液相色谱图见附录A中图A.1 )。 5.4 试样溶液的测定将试样溶液(5.1.1、5.1.2、5.1.3)注入液相色谱仪中，以保留时间定性，同时记录峰面积，根据标准曲线

25、得到待测液中芦荟苷的浓度(样品溶液液相色谱图见附录A中图A.2)。6 结果计算试样中芦荟苷含量按式(1)计算： CiV 100Xi = .(1) m1000式中：Xi 试样中芦荟苷的含量，单位为克每百克（g/100 g）或克每百毫升（g/100 mL）；Ci由标准曲线查得测定样液中芦荟苷的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）；V 被测定样液的最终定容体积，单位为毫升（mL）；m 试样的称样质量，单位为克（g）或毫升（mL）；100单位转换；1000单位转换。 计算结果以重复条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留三位有效数字。 7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值

26、不超过算术平均值的 10% 。 8 其他 当称样量为1 g，定容体积为50 mL时，芦荟苷的定量限为0.0046g/100g。附录 A 标准溶液和试样溶液典型液相色谱图A.1 芦荟苷标准溶液色谱图，见图 A.1。 图 A.1 芦荟苷标准溶液色谱图A.2 含有芦荟苷的试样溶液色谱图，见图 A.2。 图 A.2 含有芦荟苷的试样溶液色谱图四、保健食品中肉碱的测定Determination of carnitine in health food1范围本方法规定了保健食品中肉碱的液相色谱测定方法。本方法适用于以肉碱为主要原料的保健食品中肉碱的测定。2原理试样中的肉碱以0.5mmol/L的盐酸溶液经超声

27、提取，反相色谱分离，以标准品的保留时间定性，外标法定量。3试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。3.1 试剂3.1.1 磷酸氢二钾(K2HPO4)。3.1.2 辛烷磺酸钠(C8H19NaO3S)。3.1.3 盐酸(HCl)。3.1.4 磷酸(H3PO4)。3.1.5硅藻土(SiO2)：化学纯。3.1.6乙腈(C2H3N)：色谱纯。3.2 试剂配制3.2.1 盐酸溶液(0.50 mmol/L)：吸取4.2mL盐酸，用水稀释并定容至100mL。再吸取上述溶液1mL，用水稀释并定容至1L。3.2.2 缓冲盐溶液：分别称取8.7g磷酸氢二钾和0.43

28、25g辛烷磺酸钠，用水溶解并稀释至1L，用磷酸调至pH2.5。3.3 标准品肉碱(C7H15NO3)：纯度98%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。3.4 标准溶液配制3.4.1 肉碱标准储备液(1.0mg/mL)：精密称取肉碱标准品25 mg（精确到0.1mg）于25 mL容量瓶中，用盐酸溶液溶解并定容至刻度，摇匀。3.4.2 肉碱标准工作液：分别准确吸取肉碱标准储备液0.50 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL于5 mL容量瓶中，用盐酸溶液稀释至刻度，得浓度为0.10 mg/mL、0.20 mg/mL、0.40 mg/mL、0.60 mg/m

29、L、0.80 mg/mL、1.0 mg/mL的标准工作液。4仪器4.1 高效液相色谱仪：配有紫外（UV）检测器或二极管阵列（DAD）检测器。4.2 天平：感量 0.1mg和0.01mg4.3 超声波提取器。5分析步骤5.1 试样制备5.1.1 试样处理5.1.1.1 固体试样称取粉碎并混合均匀的试样0.1 g2 g (精确到0.001g)(含待测组分约5 mg50 mg)，于50mL容量瓶中，加入盐酸溶液约35mL，超声提取10min，放冷，用盐酸溶液稀释至刻度，混匀，过滤，弃初滤液数毫升，收集滤液，过0.45m水相滤膜，取续滤液待测。5.1.1.2 软胶囊试样取试样剪开，挤出内容物并混匀，称

30、取0.1 g2 g(精确到0.001g)，加入等量硅藻土，研至分散均匀，称取其中部分(精确到0.001g，含待测组分约5 mg50 mg)，转移至250 mL具塞三角瓶中，并吸取盐酸溶液50mL，并入三角瓶中，称重，加塞超声提取10 min，放冷，用盐酸溶液补足重量，混匀，过滤，弃初滤液数毫升，收集滤液，过0.45 m水相滤膜，取续滤液待测。5.1.1.3 液体试样精密量取混匀后的试样1.0 mL5.0 mL (含待测组分约5 mg50 mg)，于50 mL容量瓶中，加入盐酸溶液约35 mL，超声提取10 min，放冷，用盐酸溶液稀释至刻度，混匀，过滤，弃初滤液数毫升，收集滤液，过0.45 m水相滤膜，取续滤液待测。5.1.2 稀释根据试样中肉碱含量用盐酸溶液进行适当的稀释（F），使待测溶液中肉碱的浓度在0.10 mg/mL 1.0 mg/mL。5.2 色谱参考条件5.2.1 色谱柱：C18柱：4.6250mm，5m或同等性能的色谱柱。5.2.2 流动相：缓冲盐溶液+乙睛=90+10。