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1、药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证刘同欣lICH指导原则相关要求l中国药典2015年版四部通则相关要求l分析方法验证方案及可接受标准 ICHICH指导原则相关要求指导原则相关要求指导原则相关要求指导原则相关要求Type of analytical procedurecharacterristicsIDENTIFICATIONTESTING FOR IMPURITIES quantitat limitASSAYdissolutioncontent/potencyAccuracy-+-+Precision Repeatability-+-+Interm.Precision-+-+（1

2、）Specificity（2）+Detection Limit-（3）+-Quantitation Limit-+-Linearity-+-+Range-+-+注释：“-”signifie sthat this characterristics is not normally evaluated“+”signifie sthat this characterristics is normally evaluated（1）in cases where reproducibility has been performed,intermediate precision is not needed（2

3、）lack of specificity of one analytical procedure could be compensated by other supporting analitical procedure(s)（3）may be needed in some casesICHICH指导原则相关要求指导原则相关要求指导原则相关要求指导原则相关要求 20152015年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求 项目项目内容内容鉴别鉴别杂质测定杂质测定杂质测定杂质测定含量测定及含量测定及溶出量测定溶出量测定校正因子校

4、正因子定量定量定量定量限度限度准确度准确度-+-+精密度精密度 重复性重复性-+-+中间精密度中间精密度 -+-+专属性专属性+检测限检测限-+-定量限定量限-+-+线性线性-+-+范围范围-+-+耐用性耐用性+注释：已有重现性验证，不需要验证中间精密度。如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充。视具体情况予以验证。20152015年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求准确度准确度 准确度系指采用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（%）表示。准确度应在规定的范围测定。原料药采用对照品进行测定，或

5、用本方法所得结果与已知准确度的另一种方法测定的结果进行比较。制剂可在处方量空白辅料中，加入已知量被测物对照品进行测定。如不能得到制剂辅料的全部组分，可向待测制剂中加入已知量被测物对照品进行测定。20152015年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求精密度精密度 精密度系指在规定的条件下，同一份均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。精密度一般用偏差、标准偏差和相对标准偏差表示。包括重复性、中间精密度和重现性。重复性：在相同条件下，有同一个分析人员测定所得结果的精密度称为重复性；中间精密度：在同一个实验室，不同时

6、间由不同分析人员用不同设备测定结果之间的精密度，称为中间精密度；重现性：在不同实验室由不同分析人员测定结果之间的精密度，称为重现性。20152015年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求专属性专属性 专属性系指在其他成分（如杂质、降解产物、辅料等）存在下，采用的分析方法能正确测定被测物的能力。鉴别反应、杂质检查和含量测定方法，均应考察其专属性。检测限检测限 检测限系指试样中被测物能被检测出的最低量。定量限定量限 定量限系指试样中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应符合准确度和精密度要求。对微量或痕量药物分析、定量测定

7、药物杂质和降解产物时，应确定方法的定量限。20152015年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求线性线性 线性系指在设计的范围内，测定响应值与试样中被测物浓度成比例关系的程度。范围范围 范围系指分析方法能达到一定精密度、准确度和线性要求时的高低限浓度。耐用性耐用性 耐用性系指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度。20152015年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求年版药典四部指导原则相关要求准确度准确度 方案（以化药制剂为例）在规定范围内，取同一浓度（相当于1

8、00%浓度水平）的供试品，用至少6份样品的结果进行评价；或设计3种不同浓度（通常是80%、100%和120%），对于要测定含量均匀度的项目，浓度通常是70%、100%和130%），每种浓度分别制备3份供试品溶液进行测定，用9份样品的测定结果进行评价。分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准准确度准确度 可接受标准 分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准待测定成分含量待测定成分含量回收率限度（回收率限度（%）RSD（%）100%981012.010%9

9、51021%921050.1%901080.01%8511010g/g（ppm）801151g/kg7512010g/kg(ppb)70125精密度精密度 精密度包括重复性、中间精密度和重现性 重复性 在规定范围内，取同一浓度（相当于100%浓度水平）的供试品，用至少6份样品的结果进行评价；或设计3种不同浓度（通常是80%、100%和120%），每种浓度分别制备3份供试品溶液进行测定，用9份样品的测定结果进行评价。中间精密度 实验方案同重复性，由不同的实验人员用不同的仪器测定，并将结果与重复性试验结果一起进行评价。重现性 国家药品标准采用的分析方法，应进行重现性试验，如通过不同实验室检验获得重

10、现性结果。分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准精密度精密度 可接受标准 分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准待测定成分含量待测定成分含量重复性（重复性（RSD%）中间精密度（中间精密度（RSD%）100%1210%1.531%240.1%360.01%4810g/g（ppm）6111g/kg81610g/kg(ppb)1532专属性专属性 鉴别 鉴别试验要考察专属性。含量测定 验证空白和杂质对主成分测定有没有干扰。有关物质 对于原料药，可根据其

11、合成工艺，采用各步反应的中间体（尤其是后几步反应的中间体）、立体异构体、粗品、重结晶母液等作为测试品进行系统适用性研究，考察产品中各杂质峰及主成分峰相互间的分离度是否符合要求，从而验证分析方法对工艺杂质的分离能力。同时通过强制降解试验来考察降解杂质。分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准专属性专属性 对于制剂，根据原料药的化学特性，结合制剂的处方工艺和储存条件等选用合适的强制降解试验来验证分析方法的专属性。进行酸、碱、高温、光、氧化等强制降解试验时，降解程度要适度，对于敏感条件，通常要求降解10%左右，一般不超过20%。

12、如样品在某些条件下很稳定，则无必要过度提高降解条件的剧烈程度。重点考察空白溶剂和空白辅料有没有干扰，各峰之间的分离情况（通常要求主峰与相邻杂质峰的分离度不小1.5，特定杂质峰与相邻峰的分离度不小于1.5），峰纯度和物料平衡（95%105%）。分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准检测限 直观法 用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓 度或量。信噪比法 一般以信噪比为3:1或2:1时相应的浓度或注入仪器的量确定检测限。基于响应值标准偏差和标准曲线斜率法 该方法通常适用于光谱测定，计算公式：检测限=3.3 响应值

13、标准偏差/标准曲线斜率分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准定量限 直观法 用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地定量测定的最低浓度或量。信噪比法 一般以信噪比为10:1时相应的浓度或注入仪器的量确定定量限。进样6次，主峰保留时间的相对标准差应不大于2.0%，峰面积的相对标准差应不大于5.0%。基于响应值标准偏差和标准曲线斜率法 该方法通常适用于光谱测定，计算公式：检测限=10响应值标准偏差/标准曲线斜率分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准线性 应

14、在规定的范围内测定线性关系。可用同一对照品贮备液经精密稀释，或分别精密称取对照品，制备一系列对照品溶液的方法进行测定，至少制备5份不同浓度的对照品溶液。以测得的响应信号对被测物的浓度作图，用最小二乘法进行线性回归。对于含量测定，线性相关系数不低于0.999，Y轴截距应在100%相应值得2.0%；对于杂质，线性相关系数不低于0.995。分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准范围范围 范围系指分析方法能达到一定精密度、准确度和线性要求时的高低限浓度。原料药和制剂含量测定，范围一般为测定浓度的80%120%;制剂含量均匀度检查

15、，范围一般为测定浓度的70%130%；溶出度或释放度中溶出量的测定，范围一般为限度的30%，如规定了限度范围，则应为下限的-20%至上限的+20%；杂质测定，范围应根据初步实际测定数据，拟定为规定限度的20%。分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准耐用性耐用性 以HPLC法为例，分别考察流动相比例变化5、流动相pH值变化0.2、柱温变化5、检测波长变化5nm、流速相对值变化20以及采用3根不同品牌的色谱柱进行测定时，仪器色谱行为的变化。杂质检查可接受标准：系统适用性试验符合要求；各条件下的杂质的数量和含量应基本一致，杂质

16、含量的绝对值在0.1以内。含量测定可接受标准：系统适用性试验符合要求；平行配制2份供试品溶液，每个条件下测定的6个含量结果的RSD应不大于2.0%。分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准溶液稳定性溶液稳定性 供试品溶液室温放置24小时，分别于0、1、2、4、6、8、12和24小时分别进样。有关物质检查可接受标准：主成分峰面积的RSD应不大于2.0%，杂质含量的绝对值在0.1以内，并不得出现新的大于报告限度的杂质。含量测定可接受标准：主成分峰面积的RSD应不大于2.0%，不得出现规律性的降低或升高趋势。分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准分析方法验证方案及可接受标准 感谢大家的参与！感谢大家的参与！Thank youThank you！