1、常见肠道寄生虫的虫卵常见肠道寄生虫的虫卵鉴定及主要病原学检测鉴定及主要病原学检测连云港市疾病预防控制中心连云港市疾病预防控制中心一、粪便中常见的肠道寄虫卵一、粪便中常见的肠道寄虫卵线虫卵:线虫卵:钩虫卵、钩虫卵、蛔虫卵、蛔虫卵、鞭虫卵、蛲虫卵鞭虫卵、蛲虫卵吸吸虫虫卵卵:肝肝吸吸虫虫(华华支支睾睾吸吸虫虫)、肺肺吸吸虫虫(卫卫氏并殖吸虫)、姜片虫卵、日本血吸虫卵氏并殖吸虫)、姜片虫卵、日本血吸虫卵绦绦虫虫卵卵:猪猪带带绦绦虫虫卵卵、牛牛带带绦绦虫虫卵卵、长长膜膜壳壳绦绦虫卵、短膜壳绦虫卵、曼氏迭宫绦虫卵虫卵、短膜壳绦虫卵、曼氏迭宫绦虫卵棘头虫卵:棘头虫卵:猪巨吻棘头虫卵猪巨吻棘头虫卵二、肠道寄生
2、虫卵鉴别要点二、肠道寄生虫卵鉴别要点虫卵大小虫卵大小虫卵形状虫卵形状虫卵颜色虫卵颜色虫卵卵壳虫卵卵壳虫卵附属物虫卵附属物虫卵内容物虫卵内容物常用术语常用术语 虫虫卵卵形形状状:圆圆形形、椭椭圆圆形形、纺纺锤锤形、梨形、不对称形形、梨形、不对称形虫卵的形状虫卵的形状 虫虫卵卵大大小小:蠕蠕虫虫卵卵间间大大小小相相差差很很大大,从从最最小小长长径径19m到到最最大大可可达达240m,同同种种类类蠕蠕虫虫卵卵大大小小也也有有差差异异。(受受精精蛔虫卵:蛔虫卵:45753550m)有盖蠕虫卵大小比较有盖蠕虫卵大小比较无盖蠕虫卵大小比较无盖蠕虫卵大小比较虫虫卵卵颜颜色色:无无色色透透明明、淡淡黄黄色色、
3、黄黄褐褐色色或或棕棕 黄黄 色色、褐褐 色色、暗暗 褐褐 色色、金金 黄黄 色色虫虫卵卵卵卵壳壳:厚厚度度、均均匀匀度度、纹纹理理、凹凹陷陷虫卵附属物:虫卵附属物:有、无有、无 大小大小 如:透明栓、如:透明栓、小棘、卵盖小棘、卵盖 虫虫卵卵内内容容物物:单单卵卵细细胞胞、多多细细胞胞、一一卵卵细细胞胞及及多多个个卵卵黄黄细细胞胞、是是否否细细胞胞分分裂裂期、幼虫(线虫幼虫、毛蚴、六钩蚴)期、幼虫(线虫幼虫、毛蚴、六钩蚴)蠕虫卵与异物的区别蠕虫卵与异物的区别区区别点点虫卵虫卵异物异物外形外形有一定的形状有一定的形状形状不固定形状不固定大小大小有一定大小有一定大小大小不等大小不等颜色色少数无色透
4、明,大多有一定少数无色透明,大多有一定颜色色无固定无固定颜色色卵壳卵壳卵壳光滑整卵壳光滑整齐,同种卵壳厚薄一致,同种卵壳厚薄一致无卵壳无卵壳结构,构,边缘不整不整齐光光泽有固定的折光和光有固定的折光和光泽无无内容物内容物有固定的内部有固定的内部结构和特征构和特征(如卵如卵细胞、胞、幼虫、毛蚴等幼虫、毛蚴等)无固定的构造和特征无固定的构造和特征三、虫三、虫 卵卵 图图 像像 未未 受受 精精 蛔蛔 虫虫 卵卵 和和 受受 精精 蛔蛔 虫虫 卵卵(直(直 接接 涂涂 片片 中)中)(Kato-Katz 厚厚 涂涂 片片 中)中)(直(直 接接 涂涂 片片 中)中)(Kato-Katz 厚厚 涂涂
5、片片 中)中)受受 精精 蛔蛔 虫虫 卵卵脱脱 去去 蛋蛋 白白 膜膜 受受 精精 蛔蛔 虫虫 卵卵与与 有有 蛋蛋 白白 膜膜 受受 精精 蛔蛔 虫虫 卵卵正正 在在 发发 育育 的的 受受 精精 蛔蛔 虫虫 卵卵 感感 染染 性性 蛔蛔 虫虫 卵卵脱脱 去去 蛋蛋 白白 膜膜 受受 精精 蛔蛔 虫虫 卵卵 与与 未未 受精受精 蛔蛔 虫虫 卵卵 未受精蛔虫卵未受精蛔虫卵受精蛔虫卵受精蛔虫卵(直(直 接接 涂涂 片中)片中)钩钩 虫虫 卵卵变变 形形 钩钩虫虫 卵卵(Kato-Katz 厚厚 涂涂 片片 中)中)鞭鞭 虫虫 卵卵 (直(直 接接 涂涂 片片 中)中)(Kato-Katz 厚厚
6、 涂涂 片片 中)中)鞭鞭 虫虫 卵卵 蛲蛲 虫虫 卵卵(直(直 接接 涂片涂片 中)中)(Kato-Katz 厚厚 涂涂 片片 中)中)(透(透 明明 胶胶 带带 纸纸 下)下)蛲蛲 虫虫 卵卵蛲蛲 虫虫 卵卵肝吸虫卵(华支睾吸虫卵)肝吸虫卵(华支睾吸虫卵)(Kato-Katz厚厚 涂涂 片片 中中)(直(直 接接 涂涂 片中)片中)肝吸虫卵(华支睾吸虫卵)肝吸虫卵(华支睾吸虫卵)肝吸虫卵肝吸虫卵肺肺 吸吸 虫虫 卵(并卵(并 殖殖 吸吸 虫虫 卵)卵)肺肺 吸吸 虫虫 卵卵血血 吸吸 虫虫 卵卵血血 吸吸 虫虫 卵卵(直(直 接接 涂涂 片片 中)中)Kato-Katz 厚厚 涂涂 片片
7、中)中)姜姜 片片 虫虫 卵卵姜姜 片片 虫虫 卵卵曼曼 氏氏 迭迭 宫宫 绦绦 虫虫 卵卵曼曼 氏氏 迭迭 宫宫 绦绦 虫虫 卵卵 长长 膜膜 壳壳 绦绦 虫虫 卵卵 短短 膜膜 壳壳 绦绦 虫虫 卵卵长、短长、短 膜膜 壳壳 绦绦 虫虫 卵卵 带带 绦绦 虫虫 卵卵带带 绦绦 虫虫 卵卵 长长 膜膜 壳壳 绦绦 虫虫 卵卵带带 绦绦 虫虫 卵卵长长 膜膜 壳壳 绦绦 虫虫 卵卵镜镜 下下 易易 混混 淆淆 的的 几几 种种 虫虫 卵卵未未 受受 精精 蛔蛔 虫虫 卵卵曼曼 氏氏 迭迭 宫宫 绦绦 虫虫 卵卵 肺肺 吸吸 虫虫 卵卵 血血 吸吸 虫虫 卵卵蛲蛲 虫虫 卵卵植植 物物 种种 子
8、子易易 误误 认认 为为 虫虫 卵卵 的的 物物 质质灵灵 芝芝 孢孢 子子其其 它它 杂杂 质质四、改良加藤厚涂片法(四、改良加藤厚涂片法(Kato-KatzKato-Katz法)法)适用范围:用于粪便中各种寄生虫虫卵的检查。适用范围:用于粪便中各种寄生虫虫卵的检查。器材及试剂的准备:器材及试剂的准备:1 1、塑塑料料定定量量模模板板:规规格格为为30mm30mm40mm40mm1mm1mm的的聚聚苯苯乙乙烯烯模模板板,中中央央孔孔为为圆圆台台形形,其其短短径径3mm3mm,长长径径4mm4mm,高高1mm1mm,容积为,容积为38.75mm38.75mm3 3。2 2、软性塑料刮片:两头刮
9、片型。、软性塑料刮片:两头刮片型。3 3、尼龙绢片、尼龙绢片:规格为规格为80-10080-100目目,裁剪成裁剪成8cm8cm8cm8cm大小。大小。4 4、透透明明液液的的配配制制:取取100ml100ml蒸蒸馏馏水水、100ml100ml纯纯甘甘油、油、3%3%的孔雀绿(或亚甲蓝)的孔雀绿(或亚甲蓝)1ml1ml,混匀。,混匀。5 5、亲亲水水性性透透明明玻玻璃璃纸纸:规规格格为为30mm30mm25mm25mm、厚厚4040 m m,使用前需在透明液中浸泡,使用前需在透明液中浸泡2424小时以上。小时以上。6 6、载载玻玻片片:规规格格为为75mm75mm25.5mm25.5mm,厚厚
10、1.0mm1.0mm1.2mm1.2mm。7 7、其其它它:原原始始登登记记表表、镊镊子子、剪剪刀刀、记记号号笔笔、标本盒、吸水纸、光学显微镜和一次性手套等。标本盒、吸水纸、光学显微镜和一次性手套等。操作步骤操作步骤:1 1、编编号号:每每份份粪粪样样取取3 3张张载载玻玻片片进进行行编编号号(与与待待检检粪样编号相同)。粪样编号相同)。2 2、打打开开待待检检粪粪样样的的包包装装,将将尼尼龙龙绢绢片片置置于于待待检检粪粪样样上上,用用塑塑料料刮刮片片轻轻压压尼尼龙龙绢绢片片并并在在其其上上轻轻刮刮,使使细粪渣透过尼龙绢片的微孔滤出至绢片表面。细粪渣透过尼龙绢片的微孔滤出至绢片表面。3 3、将
11、将定定量量板板放放在在载载玻玻片片中中部部,然然后后用用刮刮片片将将绢绢片片表表面面细细粪粪渣渣填填入入定定量量板板中中央央孔孔内内,使使填填满满全全孔孔并并抹抹平。平。4 4、小心移去定量板,使粪样留在载玻片上。、小心移去定量板,使粪样留在载玻片上。5 5、取取一一张张浸浸泡泡好好的的亲亲水水玻玻璃璃纸纸,抖抖掉掉多多余余的的浸浸泡泡液液,盖盖在在粪粪样样上上,用用另另一一块块载载玻玻片片覆覆于于玻玻璃璃纸纸上上垂垂直直均均匀匀用用力力压压制制,使使粪粪便便均均匀匀地地展展开开至至玻玻璃璃纸边缘。纸边缘。6 6、待待粪粪便便透透明明后后及及时时镜镜检检。镜镜检检时时要要仔仔细细检检查查每每一
12、一视视野野,并并特特别别注注意意受受精精蛔蛔虫虫卵卵与与未未受受精精蛔蛔虫虫卵卵的的鉴鉴别别。一一旦旦发发现现蛔蛔虫虫卵卵、鞭鞭虫虫卵卵、钩钩虫虫卵卵及及其他吸虫卵,都要计数,以便计算感染度。其他吸虫卵,都要计数,以便计算感染度。7 7、结结果果登登记记:要要将将镜镜检检结结果果即即时时记记录录在在原原始始登登记记表表上上,在在记记录录每每克克粪粪便便虫虫卵卵数数时时要要将将观观察察到到的的数数乘乘以以2424,再再乘乘以以粪粪便便系系数数(成成形形便便1 1、半半成成形形便便1.51.5、软便、软便2 2、粥样便、粥样便3 3、水泻便、水泻便4 4)。)。注意事项注意事项:1 1、亲亲水水性
13、性透透明明玻玻璃璃纸纸在在使使用用前前需需全全部部浸浸入入透透明液中,浸泡明液中,浸泡2424小时以上。小时以上。2 2、把把刮刮片片上上的的细细粪粪渣渣填填入入定定量量板板时时,必必须须填填满满中中央央孔孔全全孔孔并并抹抹平平;压压制制涂涂片片时时尽尽量量使使粪粪便便均匀展开至玻璃纸边缘,但应避免粪渣溢出。均匀展开至玻璃纸边缘,但应避免粪渣溢出。3 3、粪样要新鲜,量要满足三检的要求。、粪样要新鲜,量要满足三检的要求。4 4、涂涂片片放放置置时时间间长长短短是是确确保保镜镜检检质质量量的的关关键键。一一般般室室温温2525、75%75%湿湿度度以以下下,涂涂片片放放置置时时间间不不宜宜超超过
14、过2 2小小时时;若若温温度度低低,空空气气湿湿度度大大,涂涂片片放放置置时时间间可可适适当当延延长长。总总之之,涂涂片片放放置置时时间间取取决决于于粪粪样样透透明明度度,只只要要透透明明了了,就就应应及及时时镜镜检检,否否则则透透明明过过度度,薄薄壳壳虫虫卵卵易易变变形形看看不不清清楚楚,会造成漏检或误判。会造成漏检或误判。5 5、用用椭椭圆圆孔孔塑塑料料定定量量板板,每每孔孔所所容容粪粪便便重重量量平平均均41.7mg41.7mg,每每片片所所得得虫虫卵卵数数乘乘以以2424,再再乘乘粪粪便系数,即得每克粪便的虫卵数。便系数,即得每克粪便的虫卵数。改良加藤厚涂片法操作图示改良加藤厚涂片法操作图示
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