培养基模拟灌装试验验证方案.docx

1、培养基模拟灌装试验验证方案培养基模拟灌装试验验证案(10ml)2011年08月培养基模拟灌装试验验证案(10ml)验证案的起草与审批验证小组成员部门人员职责粉针车间主任海龙负责验证案的起草、组织、实施及培训。生产管理部明华负责验证案的审核和实施的协调工作。设备部霍育生负责验证过程中设备设施的正常运行。QA部宋新莉负责安排验证过程中的监控和取样。QC部华负责安排验证过程中物料、环境及样品的检测。案起草部门起草人日期年 月 日验证委员会审阅会签审核人职 务日期年 月 日年 月 日年 月 日年 月 日年 月 日案批准批准人批准日期年 月 日10培养基的培养和检查141概述本次培养基模拟灌装试验验证是

2、以灭菌的乳糖粉末分装到10ml西林瓶中，整个过程模拟正常的粉针剂品种的分装状态，在盖塞前将胰蛋白胨大豆肉汤培养基灌入瓶，压塞轧盖后进展培养，确认无菌分装工艺的无菌可靠性。2.验证目的在各种干扰和最差条件下，评估灭菌工艺、人员更衣、行为习惯、A/B级气流模式、无菌环境的建立、消毒维持法和物料的传递控制等整个流程的无菌保证水平。3风险评估经历证小组人员共同对培养基模拟灌装试验验证进展风险评估，对存在的质量风险提出了预防和纠正措施建议，具体见下表：风险因素风险影响现有控制措施可能性P重性S检测性D风险优先数RPN风险级别建议采取措施人员未按更衣程序更衣及不规动作。污染无菌环境，使产品受到污染按相应S

3、OP进展培训。人员进展更衣试验。34224中人员定期进展相关培训并进展更衣确认。分装线生产前检查及准 备灭菌设备故障，人员操作不当。所灭菌部件灭菌不彻底，污染产品设备经过验证且定期维护，人员培训。34224中人员进展相关设备操作培训。灭菌设备定期验证。无菌生产中的正常干扰人员无菌操作不规。无菌操作失败，使产品受到污染进入无菌生产区的操作人员经培养基灌装试验确认。34448高人员无菌培训，人员经培养基灌装试验确认。A级区沉降菌采样无菌操作失败在A级区放置的沉降碟的操作平面低于产品的操作平面，防止对产品的影响。23318低取样人员进展相关SOP及无菌操作培训。原料进入A/B级区未按SOP要求清洁、

4、消毒污染无菌环境，间接污染到产品格执行SOP人员培训33212低定期监测，加强监控环境环境未得到控制环境对产品产生污染检查相关验证情况，控制关键操作区人数，定期监测23318低定期监测，定期消毒。时限性设备、器具、环境未及时清洁、未确定有效期微生物滋生，产品残留于设备中，导致穿插污染制定相应SOP，人员培训34336高SOP规定清洁时间、法和有效期，人员培训到位。评估人 年 月 日4.验证参考标准4.1 药品生产质量管理规2010年版4.2 药品生产质量管理规2010年版指南4.3 中国药典2010年版二部4.4 药品生产验证指南2003年版5.验证围本案适用粉针车间生产的全过程。包括：人员更

5、衣、各房间的清洁消毒、物料传递、容器工具的处理、包材的处理、中控取样、动态下环境监测、无菌分装、轧盖过程，并在分装过程中模拟正常与非正常干扰活动。案中还规定瓶子、胶塞和铝盖灭菌后存放有效期的 验证。6.验证职责6.1验证委员会6.1.1负责验证案的审批，质量副总进展批准。6.1.2负责验证的协调工作，以保证本验证案的顺利实施。6.1.3负责验证数据及结果的审核。6.1.4负责验证报告的审批。6.1.5验证证书由验证委员会主任批准后，由质量管理部发放，验证文件由质量管理部归档保存。6.1.6负责再验证期确实认。6.2验证小组6.2.1负责验证案的起草和验证实施。6.2.2负责验证数据、记录及结果

6、的收集、整理。6.2.3负责起草验证报告，报验证委员会批准。6.3设备部6.3.1.负责组织所需仪器、设备的验证。6.3.2负责设备的维护保养。6.3.3.负责验证所需设备和HVAC系统、水系统及其他公用工程系统正常运行。6.3.4.负责生产辅助设施和公用工程系统的操作和清洁。6.4质量管理部6.4.1负责验证案的审核。6.4.2负责生产过程的监控和取样方案的制订。6.4.3负责取样及对样品的检验并发放检验报告。6.4.4负责收集验证记录，并加以分析。6.5粉针车间6.5.1负责组织验证案的实施。6.5.2负责合理安排验证生产人员。7验证前提条件7.1验证中使用的文件是最新版本并已生效(见下表

7、)。文件名称文件编号验证总方案管理规程SOP-0101-ZL-02501确认与验证管理规程SOP-0101-ZL-01901人员进出生产车间管理规程SOP-02-SC-01401生产区卫生管理规程SOP-02-SC-00101无菌生产干净区人员行为规标准操作规程SOP-02-SC-00一般区物料传递岗位标准操作规程 SOP-0203-PS-00101灭菌岗位标准操作规程 SOP-0203-PS-00201DMH-百级净化双扉干热灭菌柜标准操作规程SOP-0203-E-00101XG1.D型机动门脉动真空灭菌器标准操作规程SOP-0203-E-00201洗瓶岗位标准操作规程SOP-0203-PS

8、-00401KQCL60抗生素瓶立式超声波清洗机标准操作规程SOP-0203-E-00301KSZ620/60型隧道式灭菌枯燥机标准操作规程SOP-0203-E-00601胶塞清洗灭菌岗位标准操作规程 SOP-0203-PS-00501KJCS-10ES全自动湿法超声波胶塞清洗机标准操作规程SOP-0203-E-00501铝盖清洗灭菌岗位标准操作规程 SOP-0203-PS-00601KJSL-12ES全自动湿法铝盖清洗机标准操作规程SOP-0203-E-00401FILGUARD-212A型完整性测试仪操作规程SOP-0203-E-00201分装岗位标准操作规程 SOP-0203-PS-00

9、701KFG300D型抗生素瓶螺杆分装机标准操作规程SOP-0203-E-00701轧盖岗位标准操作规程 SOP-0203-PS-00801ZG300C型抗生素瓶轧盖机标准操作规程SOP-0203-E-00801中间产品传递岗位标准操作规程 SOP-0203-PS-00901灯检岗位标准操作规程SOP-0203-PS-01外表微生物监测操作规程SOP-0102-T-047/00沉降菌监测操作规程SOP-0102-T-006/01浮游菌监测操作规程SOP-0102-T-005/01悬浮粒子监测操作规程SOP-0102-T-007/01培养基适用性检查标准操作规程SOP -0102-T-009/0

10、1干净区监测管理规程SOP-0101-ZL-/01偏差处理管理规程SOP-0101-ZL-016/01变更管理规程SOP-0101-ZL-017/017.2参与验证实施人员都已承受相应的培训和本案的培训，并考核合格。7.3粉针车间干净空调净化系统、纯化水系统、注射用水系统、纯蒸汽系统、压缩空气、车间生产设备、称量衡器及培养室温度分布等已经过验证。7.4相关物料的准备。名 称规格编号生产厂家胰蛋白胨大豆肉汤培养基250g瓶陆桥技术XX无菌乳糖200目天润药业XX注射用无菌粉末用卤化丁基橡胶塞 20-B2江阴XX瓶塞XX抗生素瓶用铝塑组合盖207.1福山区誉兴制盖XX低硼硅管制注射剂瓶10ml潮华

11、玻璃制品XX白色念珠菌98 001省食品药品监视管理局检验研究院枯草芽孢杆菌63 501省食品药品监视管理局检验研究院铜绿假单孢菌10 104省食品药品监视管理局检验研究院金黄色葡萄球菌26 003省食品药品监视管理局检验研究院大肠埃希菌64 941省食品药品监视管理局检验研究院注：乳糖经过辐射灭菌。8验证批次和时间按本案连续进展三批培养基模拟灌装，每批灌装的数量大于5000瓶。序号批号模拟试验时间第1批20110901第2批20110902第3批201109039验证步骤9.1模拟灌装试验前确认9.1.1模拟灌装用无菌乳糖溶解性试验 称取模拟灌装用乳糖10g，于含胰蛋白胨大豆肉汤培养基为3的

12、100ml溶液中，在2025的温度条件下，经轻微地振摇应全部溶解。9.1.2模拟灌装用乳糖微生物生长性试验确实认。9.1.3胰蛋白胨大豆肉汤培养基的无菌试验确实认。9.1. 4胰蛋白胨大豆肉汤培养基的灵敏度试验确实认。9.2灌装前准备9.2.1培养基灌装试验生产操作流程培养基、乳糖包材相应传递间脱外包层流传递窗铝塑盖、培养基、乳糖 胶塞、管制瓶物料暂存间瓶塞清洗间脱包洗瓶 乳糖 胶塞清洗、灭菌 瓶灭菌 铝塑盖清洗、灭菌 原料复核间瓶塞清洗间隧道烘箱铝塑盖清洗间生产用具、分装机组件清洗、培养基配制原料搽消间器具清洗间生产用具、分装机组件灭菌、培养基灭菌层流传递窗灭菌间分装间先分装乳糖，再灌装培养

13、基轧盖间制品传出9.2.2 工衣清洗灭菌，瓶子、胶塞、铝盖、分装机部件和器具按相应岗位SOP的要求进展清洗灭菌后进入分装间。9.2.3培养基配制：培养基由操作人员按?一般区物料传递岗位标准操作规程?(SOP -0203-ps-001/01)传至器具清洗间，取胰蛋白胨大豆肉汤培养基5瓶250g/瓶，分成两桶配制，先量取10000ml的注射用水约70参加干净的密封桶65L，缓慢参加培养基1000g，搅拌10分钟，再量取15000ml的注射用水约70参加密封桶中，再搅拌10分钟。取第二只干净的密封桶65L，先参加6700ml的注射用水约70，缓慢参加培养基750g，搅拌10分钟，再量取10000ml

14、的注射用水约70搅拌10分钟。配制后培养基pH值应在7.30.2之间。将胰蛋白胨大豆肉汤培养基溶解完全稀释至浓度为30g/L溶液。按?XG1.D脉动真空灭菌器标准操作规程?(sop-0203-E-002/01)操作，121、20分钟灭菌后，传入分装间A级区。9.3模拟灌装过程9.3.1培养基冷却至室温后，按?分装岗位标准操作规程?(SOP -0203-ps-007/01)和?KFG300D抗生素瓶螺杆分装机标准操作规程?(SOP -0203-E-007/01)进展操作，将无菌乳糖按每支0.5g分装于10ml西林瓶中，按?BT300-1F蠕动泵标准操作规程?(SOP -0203-E-/01)进展

15、操作，将灭菌的胰蛋白胨大豆肉汤培养基按每支灌装7ml，扣好胶塞后按?ZG300C型抗生素瓶轧盖机标准操作规程?(SOP -0203-E-008/01)轧盖密封，在轧盖后缓冲间收集到不锈钢盘中每个收集盘装载200支左右。按分装时间对每个盛装培养基小瓶的托盘编号，并记录每盘的分装时间。9.3.2模拟最差生产条件：人数最多，时间最长。分装人数为8人，轧盖4人；为加大操作人员疲劳程度和考察对产品的影响，模拟灌装超过工艺规程规定时限，时间为8小时，正常生产中午休息1小时。9.3.3培养基模拟灌装试验操作过程9.3.3.1 7：30至8：30装机。9.3.3.2 灌装量：每支西林瓶分装无菌乳糖0.5g，灌

16、装培养基7ml。9.3.3.3 8：30装机后装原粉桶，按照?分装岗位标准操作规程?和?BT300-1F蠕动泵标准操作规程?调节装量0.5小时。9.3.3.49：00开场以2000支/小时速度分装无菌乳糖和灌装培养基30分钟。9.3.3.5 轧盖爆瓶停机15分钟。9.3.3.6 中间模拟运行1小时。9.3.3.7 以2000支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基30分钟。9.3.3.8 拆装原粉桶0.5小时。9.3.3.9 以2000支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基30分钟。9.3.3.10 12：15至13：15操作人员出来吃饭。9.3.3.11 模拟设备维修1小时，之后用消毒剂对分装机台面上各部

17、件进展擦拭10分钟，调整装量5分钟，自净15分钟，继续分装。9.3.3.12 以2000支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基30分钟。9.3.3.13 分装机拨瓶盘错位调整15分钟。9.3.3.14 模拟运行0.5小时。9.3.3.15 以3000支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基至完毕。9.3.4灌装培养基的过程中进展各种正常干扰和非正常干扰的模拟。9.3.4.1正常干扰因素序号因素次数具体实施1装机1分装机分装部件的组装2胶塞转移3胶塞清洗机出料，转移至分装机旁的隔离器3装原粉桶，调装量2装原粉桶和换原粉桶4灌装速度42000支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基5灌装速度13000支/小时分装无菌乳

18、糖和灌装培养基6模拟运行21次1小时、1次0.5小时7装量检查10每次分装无菌乳糖和灌装培养基检查2次8处理胶塞轨道堵塞5每次分装无菌乳糖和灌装培养基处理一次9处理掉塞5每次分装无菌乳糖和灌装培养基处理一次10空瓶扶瓶5每次分装无菌乳糖和灌装培养基扶瓶一次11轧盖爆瓶1停机15分钟12中间休息1中午休息、吃饭13胶塞上料25每次分装无菌乳糖和灌装培养基上料5次14环境监测1分装过程中15分装机操作工穿越轨道8生产过程中分装机操作工穿越轨道次数为8次。16人员外表微生物2中午休息出去时、使用完毕时9.3.4.1非正常干扰因素序号因素次数具体实施1出轨后倒瓶5每次分装无菌乳糖和灌装培养基倒瓶一次2

19、设备维修1第三次灌装完毕后，停顿灌装60分钟，翻开分装机台面下控制箱，模拟检查维修。维修时间约60分钟，之后用消毒剂对分装机台面上各部件进展擦拭，调整装量，继续灌装3分装爆瓶1爆瓶，停机处理4拨瓶盘调整1挤瓶导致拨瓶盘错位9.4试验过程监测9.4.1西林瓶的无菌检查及有效期验证西林瓶按?KQCL60抗生素瓶立式超声波清洗机标准操作规程?(SOP -0203-E-003/01)进展清洗，按?KSZ620/60型隧道式灭菌枯燥机标准操作规程?(SOP -0203-E-006/01)进展灭菌后进入分装间。9.4.1.1测试法：每次取6只西林瓶按直接接种法，其中3支放入300ml硫乙醇酸盐流体培养基中

20、、3支放入300ml改进马丁培养基中，同时做阴性对照，分别在23-28 C和30-35 C培养14天；逐日观察并记录。9.4.1.2.判定标准：全部样品和阴性对照管培养14天后液体澄清，不得有菌生长。9.4.1.3取样时间：试验前9点取样，存放8h、试验中12点取样，存放6h、试验后16点取样，存放4h。9.4.2.胶塞的无菌检查及有效期验证胶塞按?KJCS-10ES全自动湿法超声波胶塞清洗机标准操作规程?(SOP -0203-E-005/01)清洗、灭菌后出料存放于分装间A级区。9.4.2.1.测试法：每次取20只胶塞按直接接种法，其中10只放入100ml硫乙醇酸盐流体培养基中、10只放入1

21、00ml改进马丁培养基中，同时做阴性对照，分别在23-28 C和30-35 C培养14天；逐日观察并记录。9.4.2.2.判定标准：全部样品和阴性对照管培养14天后液体澄清，不得有菌生长。9.4.2.3取样时间为：试验前8点取样，存放36h、试验中11点取样，存放40h、试验后15点取样，存放44h。9.4.3铝塑盖的无菌检查及有效期验证铝塑盖按?KJSL-12ES全自动湿法铝盖清洗机标准操作规程?(SOP -0203-E-004/01)清洗、灭菌后出料存放于轧盖间A级区。9.4.3.1.测试法：每次取20只铝塑盖按直接接种法，其中10支放入300ml硫乙醇酸盐流体培养基中、10支放入300m

22、l改进马丁培养基中，同时做阴性对照，分别在23-28 C和30-35 C培养14天；逐日观察并记录。9.4.3.2.判定标准：全部样品和阴性对照管培养14天后液体澄清，不得有菌生长。9.4.3.3取样时间为：试验前8点半取样，存放36h、试验中11点半取样，存放40h、试验后15点半取样，存放44h。9.4.4生产过程环境监测及外表微生物监测9.4.4.1测试法：参见?浮游菌测试标准操作规程?SOP-0102-T-005/01、?沉降菌测试标准操作规程?SOP-0102-T-006/01、?悬浮粒子测试标准操作规程?SOP-0102-T-007/01、?外表微生物监测标准操作规程?SOP-01

23、02-T-047/00。9.4.4.2.判定标准9.4.4.2.1悬浮粒子干净度级别静态动态0.5um5.0um0.5um5.0umA级352020352020B级3520293520002900C级35200029003520000290009.4.4.2.2微生物动态监测标准干净度级别浮游菌cfu/m3沉降菌cfu/4小时90mm外表微生物接触55mmcfu/碟5指手套cfu/手套A级1111B级10555C级1005025-9.4.4.3取样方案及取样点取样点见下表。取样操作参见?干净区监测管理规程?SOP-0101-ZL-/01。 分装流程图：进瓶转盘处理倒瓶 分装上料、装量检查、添加

24、胶塞、卡瓶、堵塞、停机维修、人员进出、环境监测 轧盖添加铝塑盖、堵盖、环境监测风险因素取样位置级别监测工程取样法取样频率1.人员操作及数量、着装更换。2.装量检查。3.物料转运操作。4.各种无菌操作。人员五指手套、手肘、胸部、腹部、头部、口罩、护目镜A/B级外表微生物55mm接触碟中途更衣前试验完毕后进瓶转盘A级悬浮粒子沉降菌浮游菌粒子传感器90mm平皿浮游菌采集器在线监测实时监控试验完毕后分装头A级悬浮粒子沉降菌浮游菌粒子传感器90mm平皿浮游菌采集器在线监测实时监控试验完毕后胶塞振荡器A级悬浮粒子沉降菌浮游菌粒子传感器90mm平皿浮游菌采集器在线监测实时监控试验完毕后分装机隔离器外表、隔离

25、器手套A级外表微生物55mm接触碟试验完毕后分装间墙面、门把手、地面B级外表微生物55mm接触碟试验完毕后轧盖机操作台面A级悬浮粒子沉降菌浮游菌粒子传感器90mm平皿浮游菌采集器在线监测实时监控试验完毕后轧盖机隔离器外表、隔离器手套A级外表微生物55mm接触碟试验完毕后轧盖间墙面、地面B级外表微生物55mm接触碟试验完毕后10.试验样品的培养和检查10.1将试验正常样品和不良样品先置2328培养7天，再置3035培养7天，培养时一半正立，另一半倒置，第7天后交换；第7天观察培养基灌装品的微生物生长情况，并对污染的瓶中的微生物进展总结其特点。假设发现污染应明确记录样品灌装时间及数量，假设有破损情

26、况应记录并检查其破损原因。对于微生物污染的样品应进展鉴别试验。10.2如果培养基灌装产品存在污染，将污染瓶中的污染菌在营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基上划线和别离培养，挑取单个菌落形态进展形态学观察、革兰染色等初步鉴别。11.试验结果评价11.1样品可承受标准11.1.1所有样品均进展培养，全部样品无浑浊出现，那么为阴性，合格。11.1.2假设有1支出现浑浊现象需进展调查，并记录污染产生的原因。11.1.3有2支污染那么视为验证失败。需进展调查，填写异常情况报告，根据调查所确定的或可能发生的原因制定纠正或改进案并实施，在调查完毕并采用相应的措施后重复进展无菌模拟分装试验。11.1.4出现阳性

27、的样品应进展密封性检查，剔除所有渗漏的样品。11.1.5物料平衡的统计培养基灌装记录物料平衡局部应包括完整的数据统计和对该批丢弃的数量的描述。此外，根据无菌灌装验证的具体情况，采用分灌装瓶数进展物料平衡计算。合格标准为100。11.2最终判断标准：11.2.1无菌灌装验证判定为合格必须满足以下三条：所有样品均为阴性无浑浊现象样品的促生长试验合格都有浑浊物料平衡结果符合要求为10011.2.2如果其中的任一项不合格那么说明无菌模拟灌装试验不合格。12.验证结果分析验证小组负责对验证数据、记录及验证结果的收集、整理，做验证总结，包括对验证过程的 12.1 验证试验是否有遗漏。12.2验证实施过程中对验证案有无修改，修改原因、依据以及是否经过批准。12.3验证记录是否符合标准要求。12.4验证试验结果是否符合标准要求，偏差及对偏差的说明是否合理，是否需要进一步补充试验。13风险的评估与承受通过对培养基模拟灌装试验结果的分析和判断，对关键性风险和非关键性风险所采取的初步风险控制措施进展评估，确认风险是否降至为可承受风险。14验证结果评审和结论验证委员会负责对验证结果进展综合评审，做出验证结论，验证委员会主任批准后由质量管理部发放验证证书，确认再验证期。对验证结果的评审应包括：(1) 验证试验是否有遗漏？验证记录是否完整？(2) 验证过程中验证