1、检验医学医学分析前分析前质量控制量控制及及对策策潍坊市中医院坊市中医院检验科科魏魏红全面质量控制(全面质量控制(TQM)是指临床医师开单申请检验开始至实验室完成检测,以及登记、审核、发出报告和抱怨处理等全过程中一系列保证检验质量的方法和措施。分析前程序分析前程序按照时间的顺序,从临床医生开出医嘱开始,到分析检验程序启动时终止的步骤,包括检验申请、患者准备、原始样品的采集、标本运送到实验室并在实验室内进行传输。主要内容主要内容一一 血液血液标本的采集及本的采集及质量控制量控制二二 微生物微生物标本的采集及本的采集及质量控制量控制三、三、标本的保存和运本的保存和运输四、常四、常见不合格案例不合格案
2、例一一 血液血液标本的采集及本的采集及质量控制量控制1病人状态一般需在安静状态下采集标本,如患者处于高度紧张的状态时,可使血红蛋白、白细胞增高。由于劳累或受冷等刺激、也可见白细胞的增高。活动的影响可分暂时和持续性两类。暂时性影响如使血浆脂肪酸含量减少;丙氨酸、乳酸含量增高。持续性影响,如激烈运动后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的测定值升高,有些恢复较慢,如ALT在停止运动1h后测定,其值仍可偏高3050。因此,标本采集前绝对避免剧烈运动、上下楼梯、步行过快等,或嘱患者休息30min以上方可采集。一、病人准备一、病人准备2饮食多数试验要求在采血前禁食12h,因为饮食中的不同成分可直接影
3、响实验结果。(1)餐后血液中TG、ALT、GLU、BUN、Na等均可升高,进食高蛋白或高核酸食物,可以引起血中的尿素氮(BUN)和尿酸(UA)的增高。进食高脂肪食物后采集的血液样本,其血清会出现浑浊,可影响许多检验测定的正确性。患者空腹时间过长(超过16h)也会使血清白蛋白、补体、转铁蛋白、葡萄糖含量下降、而血清胆红素因清除率减少而升高。(2)食物如含有动物血液,可引起粪隐血假阳性。(3)高蛋白质饮食可使血浆尿素、血氨增加,但不影响肌酐含量。(4)高比例不饱脂肪酸食物,可减低胆固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。(5)含咖啡因饮料,可使血浆游离脂肪酸增加,并使肾上腺和脑组织释
4、放儿茶酚胺。喝咖啡可引起淀粉酶(AMS)、AST谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)等升高(6)饮酒后即刻导致血清乳酸、尿酸升高;连续饮酒导致AST、ALT上升,而GGT上升最为明显。长期饮酒者往往有高甘油三酯血症,GGT也会长期异常。(7)吸烟:烟草的有效成分一氧化碳结合血红蛋白的增多使血红蛋白检测结果增高。3药物药物对检验的影响非常复杂,在采样检查之前,以暂停各种药物为宜,如某种药物不可停用,则应了解可能对检验结果产生的影响。庆大霉素、氨芐青霉素可使谷丙转氨酶活性增高、咖啡因可使胆红素增加、维生素C可使血糖、胆固醇、甘油三脂、尿酸严重降低。4体位体位影响血液循环,由于血液和组织间液因
5、体位不同而平衡改变,则细胞成分和大分子物质的改变较为明显,例如由卧位改为站位,血浆ALB、TP、酶、Ca、胆红素、Tch及TG等浓度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于体位的因素,在确立参考值时,应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异,故采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。5时间病人准备还应考虑病人的生物钟规律,特别是激素水平分析,如女性生殖激素与月经周期密切相关;胆固醇则在经前期最高,排卵时最低;纤维蛋白原在经前期最高,血浆蛋白则在排卵时减少。生长激素于入睡后会出现短时高峰。胆红素、血清铁以清晨最高;血浆蛋白在夜间降低;血Ca往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进
6、行。1标本采集注意事项:(1)采血时间:最佳采血时间清晨采血前病人禁食12h(受饮食影响的项目)采血尽可能安排在其他检查和治疗前进行。血液标本血液标本特殊时间药物:药物监测室要根据药物浓度峰值期和标定期采血,要注明采血时间。地高辛药物浓度6-8h,输脂肪乳(尽可能在用药后4h后)高血压四项:先抽卧位,需平躺两小时后采血,后直立行走或靠墙站立1-2小时后采立位标本。每个标本需要采集2管抗凝血(紫帽管各2ml),共4管。病房患者也可早上醒来先采卧位,活动一小时后再采立位。血清促肾上腺皮质激素(ACTH):(8点、16点、0点)糖耐量检测、胰岛素测定、C-肽测定:橘红帽管2ml(根据不同时间要求采集
7、)(如:空腹、半、1、2、3小时)。(2)采静脉血时止血带结扎过久,可引起误差。如以结扎1min的样品结果为基数,则结扎3min,可使血浆总蛋白增加5,胆固醇增加5,铁增加6,胆红素增加8,乳酸则不能使用止血带。引起血流淤带或血管受损可能引起组织因子进入血液,造成部分凝血因子测定结果降低(3)溶血:当溶血发生时,红细胞内容物进入血浆,引起血浆成分的改变,对一些细胞内外浓度差较大的检测项目(如谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、钾)的测定结果造成较大的影响。(4)抗凝比例不当,血量过少引起抗凝剂比例不当或混匀不彻底使得抗凝剂不充分,导致凝血过程激活和凝血因子的消耗。这种情况可能引起内源性、外源性凝血时间的延
8、长以及部分凝血因子测定结果的偏低。错误的抗凝剂如EDTA、肝素,尤其是肝素会造成PT、APTT时间的延长;不同抗凝比例的血凝测定结果(不同抗凝比例的血凝测定结果(XsXs)抗凝剂:血液抗凝剂:血液PT(S)PT-INRAPTT(s)TT(s)TT(s)Fib(g/L-1)Fib(g/L-1)1:91:912.90.712.90.71.080.101.080.1032.22.532.22.516.91.016.91.03.100.463.100.461:71:713.30.713.30.7*1.110.111.110.11*33.32.533.32.5*17.41.017.41.0*2.930.
9、452.930.45*1:61:614.30.914.30.9#1.190.141.190.14#36.53.136.53.1#18.91.318.91.3#2.780.382.780.38#1:51:516.11.216.11.2#1.340.151.340.15#40.83.240.83.2#22.31.322.31.3#2.580.372.580.37#1:41:423.82.123.82.1#1.980.191.980.19#58.25.358.25.3#29.12.429.12.4#2.260.352.260.35#1:31:338.63.838.63.8#3.220.373.220
10、.37#87.810.187.810.1#46.15.646.15.61.770.271.770.27#枸橼酸钠是钙离子的快速螯合剂,可与钙离子形成可溶性螯合物而阻止血液凝固,枸橼酸钠是钙离子的快速螯合剂,可与钙离子形成可溶性螯合物而阻止血液凝固,枸橼酸钠是钙离子的快速螯合剂,可与钙离子形成可溶性螯合物而阻止血液凝固,枸橼酸钠是钙离子的快速螯合剂,可与钙离子形成可溶性螯合物而阻止血液凝固,能有效阻止凝血因子降解,并能稀释血液。能有效阻止凝血因子降解,并能稀释血液。能有效阻止凝血因子降解,并能稀释血液。能有效阻止凝血因子降解,并能稀释血液。注:注:注:注:1 1、与、与、与、与1:91:9比较,
11、比较,比较,比较,*P0.05P0.05,#P0.01P36Kg1327Kg2736Kg新生儿813Kg单抽1儿童瓶:0.51.5ml单抽1儿童瓶:35ml单抽2儿童瓶:5ml/瓶单抽2成人瓶:8ml/瓶双抽4瓶成人瓶:8-10ml/瓶左侧右侧问:采集血培养的时机是什么?问:采集血培养的时机是什么?答:尽可能在抗菌药物使用前采血尽可能在抗菌药物使用前采血培养培养。问:血培养每瓶采血量为多少?问:血培养每瓶采血量为多少?答:成人:成人:8-10ml,勿低于,勿低于5ml,也不,也不要高于要高于12ml。真菌培养请使用下图中左。真菌培养请使用下图中左侧的培养瓶,抽血量为侧的培养瓶,抽血量为5mL。
12、否则会直接影响阳性率。儿童:除外新生儿,不建议只进行单套血标本的培养,新生儿12套。血培养血量要求如下:28痰标本采集痰标本采集尽可能在抗菌药物使用前采集自然咳痰:晨痰,清水漱口清洁口腔。用力深 咳,标本量1ml诱导痰:3%10%无菌盐水25ml雾化吸入采集后立即送至微生物室,并于1h内接种。咳痰标本可用于细菌、分枝杆菌和真菌培养,不可用于病毒培养。组织标本的采集组织标本的采集组织标本的采集组织标本的采集应在无菌条件下采集标本,包括从病变及正常边缘采集应在无菌条件下采集标本,包括从病变及正常边缘采集室温下室温下1h内送达,采用厌氧转运容器,确保厌氧菌能复活增殖内送达,采用厌氧转运容器,确保厌氧
13、菌能复活增殖不要将标本置于福尔马林中不要将标本置于福尔马林中无菌纱布用灭菌的且不含抑菌剂的盐水润湿,将标本置于该纱布上,放无菌纱布用灭菌的且不含抑菌剂的盐水润湿,将标本置于该纱布上,放在无菌容器中,在无菌容器中,保持组织湿润保持组织湿润革兰染色涂片是所有厌氧培养的标准革兰染色涂片是所有厌氧培养的标准Johns Hopkins specimen collection guideline 2013,CID 2013:57(4)外科组织标本研磨处理脓液的采集脓液的采集脓液的采集脓液的采集注射器抽吸法注射器抽吸法将将5-10ml吸取物置于厌氧转运培养基立即送检吸取物置于厌氧转运培养基立即送检AFB培养
14、:将至少培养:将至少1ml抽吸物置于无菌容器中转运,厌氧转运培养基抽吸物置于无菌容器中转运,厌氧转运培养基不能用于不能用于AFB培养培养 当怀疑是厌氧菌感染时,可通知微生物室床旁接种。当怀疑是厌氧菌感染时,可通知微生物室床旁接种。拭子采集法拭子采集法由于标本易干,切获得量有限,由于标本易干,切获得量有限,应避免使用拭子应避免使用拭子不被接受的情况:分枝杆菌培养、肛周脓肿、口腔脓肿不被接受的情况:分枝杆菌培养、肛周脓肿、口腔脓肿非最佳选择的情况:真菌、厌氧菌培养、褥疮非最佳选择的情况:真菌、厌氧菌培养、褥疮Johns Hopkins specimen collection guideline 2
15、013脑脊液的采集脑脊液的采集脑脊液的采集脑脊液的采集尽可能在抗菌药物使用前采集尽可能在抗菌药物使用前采集首瓶标本由于极易被皮肤定植菌污染,不应送往实验室做直接涂首瓶标本由于极易被皮肤定植菌污染,不应送往实验室做直接涂片、培养和分子研究片、培养和分子研究标本置于无菌防漏管内,共采集标本置于无菌防漏管内,共采集3瓶。对疑似细菌性脑膜炎的患者,瓶。对疑似细菌性脑膜炎的患者,应取应取24瓶脑脊液瓶脑脊液如怀疑诺卡菌属、真菌或分枝杆菌等不常见细菌感染,应通知微如怀疑诺卡菌属、真菌或分枝杆菌等不常见细菌感染,应通知微生物室做特殊操作生物室做特殊操作不要冷冻脑脊液标本不要冷冻脑脊液标本Johns Hopk
16、ins specimen collection guideline 2013,CID 2013:57(4)足量的脑脊液标本能够增加培养的敏感性足量的脑脊液标本能够增加培养的敏感性至少取至少取1ml,置于无菌容器中。,置于无菌容器中。尽可能采集足量标本,推荐如下:尽可能采集足量标本,推荐如下:细菌培养细菌培养1毫升毫升真菌培养真菌培养2-5毫升毫升分子生物学检查分子生物学检查1毫升毫升结核菌培养结核菌培养5-10毫升毫升病毒培养病毒培养1毫升毫升中枢神经系统感染中枢神经系统感染疑似疑似细菌性菌性脑膜炎,膜炎,应配套配套送送检2-4套血培养套血培养通通过腰椎穿刺采集腰椎穿刺采集脑脊液,第脊液,第1管不管不应进行微生物学行微生物学检查CSF不能冷藏!不能冷藏!革革兰染色前染色前应进行离心行离心黏膜屏障黏膜屏障血流血流血血脑屏障屏障CNS尿标本采集尿标本采集1、清、清洁中段尿:中段尿:晨起第一次尿液为最佳标本,应连续排尿女性采样前用肥皂水或0.1%的高锰酸钾溶液冲洗外阴,用手指将阴唇分开排尿,弃其前段尿,不终止排尿,留取中段尿10ml于灭菌容器内。男性用肥皂水清洗尿道口,或0.1%的碘伏溶液消
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