中科院分子生物学1996.docx

1、中科院分子生物学19962000年分子生物学真题一、 用中文解释下列名词（每题2分）1.Molecular chaperonin(分子伴侣) 2.Central dogma （中心法则）3.Isoelectric point (p I) 4.Promoter (启动子)5.Northern blotting （RNA印迹） 6. Retention time（Tr）7.a-Helix (a-螺旋) 8.Random coil (无规卷曲)9.Reverae transcriptase(反转录) 10.Ribozyme (核酶)二.写出下列物质的结构式（每个5分）1、尿嘧啶 2.ATP 3.维生

2、素C 4.鸟嘌呤三、问答题（共60分）1.说明乳糖操纵子模型及阻遏物是如何阻止转录的？（30分）2.说明真和基因转录的特点及tRNA、mRNA、tRNA基因转录与RNA聚合酶的关系（20分）3.说明什么是DNA甲基化作用及其与转录调控的关系。（10分）2002年分子生物学真题一、 名词解释（每题2分）1.Southern blotting 2. .Promoter (启动子)3.Helix-turn-Helix 4.Attenuation5. Reverae transcriptase(反转录) 6. Ribozyme (核酶)7.Splicing 8.IS Sequence9.Conjuga

3、tion 10.Recombination(重组)二、填空题（每空1分）1.真核生物的RNA聚合酶有（）种，各转录（）、（）、（）基因。2.反义RNA在（）水平上调节基因的表达，其机制是（）。3.基因有两条链，与mRNA序列相同的链叫做（）链，另外一条叫做（）链。4.遗传重组有以下（）、（）、（）、（）四种类型。5.终止子的结构位置在（）、（）位点。6.逆转录酶转录时以（）为模板、转录出（）。7.RNA编辑的含义是（）。8.逆转录转座子是指（）。9.内含子加工的生物化学机制是（）。10.热冲击蛋白有（）功能。三、问答题（每题10分）1.DNA带有哪些遗传信息？什么是DNA的变性和复性。2.原核

4、生物与真核生物染色体结构有什么不同。3.简述原核生物DNA的复制机制。4.什么事操纵子？以乳糖操纵子为例，说明操纵子的正负调控机制。5.真核生物基因表达为蛋白质的过程中，要经过哪些加工步骤。6.原核生物与真核生物的启动子结构有什么不同。中国科学院研究生院2007年招收攻读硕士学位研究生入学统一考试试题科目名称：分子生物学 考生须知： 1本试卷满分为150分，全部考试时间总计180分钟。2所有答案必须写在答题纸上，写在试题纸上或草稿纸上一律无效。一、填空题（15分, 每空1分） 1. 基因打靶技术是 的DNA序列和细胞内的同源的基因组序列(靶位)之间的 过程，是一种通过同源重组、按预期方式改变活

5、细胞乃至生命有机体的遗传信息的实验技术。 2. RNA指纹技术(RNA arbitrarily primed PCR, RAP-PCR)的原理与 -PCR非常类似。RAP-PCR先从样品中提取RNA，用随机引物逆转录合成cDNA的第一条链。再用同样的引物，PCR合成cDNA的第二条链，凝胶电泳可以显示全部的PCR产物，再回收差异表达的 片段，进行克隆、测序。 3. 与Southern杂交不同，Northern杂交的研究对象是 ，检测可以与探针 同源、杂交的mRNA分子的存在，因而可以研究细胞内特定mRNA的产生，也即特定基因的表达。 4. 真核生物基因的调控区包含有 区域和各种调控元件。调控元

6、件包括各种 、 和基因座位控制区等，是各种调控因子识别、结合的位点。它们调节着转录前起始复合物的装配、表达特异性和转录速度。 5. 亮氨酸拉链结构可以形成同源或 二聚体，因而可以组合得到各种新功能特性，构成复杂的 网络。 6. 产生单个碱基变化的突变叫 突变，如果碱基的改变产生一个并不改变氨基酸残基编码的 ，并不会造成什么影响，这就是 突变。如果改变了氨基酸残基的密码，这就是 突变。 二、判断对错题 (45分，每小题3分，正确的画0，错误的画X) 1.DNA的变性指的是DNA双链间氢键的断裂 （ ） 2,C0t1/2与基因组复杂性相关，而与基因组大小无关 （ ） 3.A. Kornberg 因

7、发现DNA合成中负责复制的主酶而获得1959年诺贝尔奖( ) 4.由于DNA是由两条反平行的链组成, 所以在DNA复制时一条新生链是沿53方向合成, 而另一条新生链则是沿35方向合成 ( ) 5.转录和翻译耦联是所有生物为适应外界环境的变化所进化出加速基因表达效率的手段 ( ) 6.增强子(enhancer)是真核细胞所特有的基因表达调控的顺式作用元件 ( ) 7.E. coli RNA 聚合酶是E. coli 乳糖操纵子的一个重要组成部分, 其功能是启始多顺反子转录 ( ) 8.如果剪接发生在一个内含子的GU 序列与相邻内含子的AG 序列间, 会造成位于两个内含子之间的外显子缺失 ( ) 9

8、.原核细胞mRNA含有启动子、转录起始位点、前导序列、有顺反子间序列隔开的SD 序列和ORF、尾部序列等几个其功能所必需的特征区段 ( ) 10.tRNA 参与蛋白质的翻译和反转录过程 ( ) 11.一个复制的染色体中, 两个染色质必须在有丝分裂和减数分裂I期间彼此分开 ( ) 12.复制完整染色体时,如果没有引物存在,DNA聚合酶将不能起始5端的复制 ( ) 13.分子来完成的, 所以为蛋白质编码区以外的突变不会导致细胞或生物体表型的改变 ( ) 14.拓扑异构酶可使DNA产生正向超螺旋 ( ) 15.可变剪接的存在说明剪接并不是一个精确的过程 ( ) 三、名词解释（15分， 每题3分） 1

9、. 顺反子mRNA 2. 染色质重塑（chromatin remodeling） 3. 外显子 4. 锌指结构 5. 多聚酶链式反应(PCR) 四、简答题（50分，每题10分） 1. 简述如何以噬菌体为载体构建基因组文库？ 2. 什么是DNA的甲基化作用？简述如何鉴定DNA片段有无甲基化？ 3. 试述如何对外源基因在大肠杆菌中表达产物进行检测与鉴定？ 4. 何谓DNA的变性和复性？举出至少5种以上的用途。 5. cDNA克隆和基因组克隆有何不同？真核基因组克隆是否可在E. coli细胞中表达? 为什么? 五、论述题 (25分) 蛋白质生物合成有几步，每步各需要什么因子？根据蛋白质生物合成过程的

10、原理，设计一个蛋白质合成的 in vitro 体系，并说明该体系中国科学院研究生院2012 年招收攻读硕士学位研究生入学统一考试试题科目名称：分子生物学考生须知：1本试卷满分为150 分，全部考试时间总计180 分钟。2所有答案必须写在答题纸上，写在试题纸上或草稿纸上一律无效。注意：附表中提供了遗传密码和对应氨基酸的关系，考生在答题过程中有可能会使用到。一、填空题（每空1 分，共30 分）1、染色体由DNA、组蛋白、_以及部分RNA 组成；在真核细胞分裂间期，染色体以_形式存在于_中，比较细且松散。2、核糖体存在于每个进行蛋白质合成的细胞中，它可化分为多个功能活性中心，即_、_（A 位）、结合

11、或接受肽基tRNA 的部位、_（P 位）及形成肽键的部位（转肽酶中心）。3、 蛋白质生物合成中的终止密码有_ 、_ 和_。4、 在蛋白质的前体加工过程可以对特定的氨基酸的侧链进行修饰， 主要包括_、_、甲基化、_、_和羧基化等，其中甲基化主要是由N-甲基转移酶催化的，该酶主要存在于细胞质内。5、 在转录过程中， RNA 的合成方向为_ ， 合成的RNA 带有与DNA_链相同的序列；在转录完成后，RNA 主要以_链形式存在于生物体内。6、 大肠杆菌转录起始过程需要RNA 聚合酶全酶，其中_因子辨认起始点，而亚基和_亚基组成了催化中心。转录的终止反映在_。7、 生物体内DNA 双链的复制大都是以_

12、 方式进行的； 复制时，_通过水解ATP 获得能量解开DNA 双链，而_消除解链造成的正超螺旋的堆积，使复制得以延伸。8、 RNA 的选择性剪接是指用不同的剪接方式从一个mRNA 前体产生不同的mRNA 剪接异构体的过程一般将选择性剪接分为几类：_、_、_、_、及_。9、 从mRNA 5端起始密码子AUG 到3端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链，称为_。10、质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为_，不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为_。二、单项选择题（每题2 分，共20 分）1. 真核生物DNA 复制过程中，下面哪一种是不需要的？

13、_。（A）端粒酶（B）RNA 引物（C）RNA 聚合酶III（D）DNA 聚合酶（E）DNA 聚合酶2. 真核细胞中，基因转录激活通常与下列哪个相关？_。（A）染色质凝聚（B）常染色质（C）异染色质（D）DNA 甲基化（E）端粒3. 真核与原核细胞蛋白质合成的相同点是：_。（A）翻译与转录偶联进行（B）模板都是多顺反子（C）都需要GTP（D）甲酰蛋氨酸是第一个氨基酸（E）mRNA 的5端帽子结构和3端polyA 都参与形成翻译起始复合物4. 下列关于遗传密码的描述哪一个是不正确的？_。（A）20 种氨基酸共有64 个密码子（B）碱基缺失、插入可致框移突变（C）AUG 是起始密码（D）UAA 是

14、终止密码（E）一个氨基酸可有多达6 个密码子5. 葡萄糖（Glucose）在代谢物阻遏系统中的功能是：_。（A）增强cAMP 活性（通过抑制乳糖操纵子）（B）抑制腺苷酸环化酶 （Adenyl Cyclase）活性，从而导致细胞内cAMP 水平下降（C）增强腺苷酸环化酶 （Adenyl Cyclase）活性，从而导致细胞内cAMP 水平升高（D）抑制Lac 操纵子活性， 导致细胞内cAMP 水平下降（E）增强Lac 操纵子活性， 导致细胞内cAMP 水平升高6. 下列那类因子直接介导RNA 聚合酶II 结合到启动子区域，从而使转录起始？_。（A） 转录因子IIH（B） 转录因子IIS（C） 转录

15、因子 IID（D） 转录因子 IIE（E） 转录因子p537. 有一个蛋白质的最后一个氨基酸是异亮氨酸，在它的合成中需要下面哪一个tRNA?_。8. 在人体内，由于紫外线照射形成的DNA 损伤主要通过什么方式进行修复？_。（A）错配修复（B）碱基切除修复（C）核苷酸切除修复（D）直接修复（E）重组修复9. 端粒酶: _。（A）可以延伸新合成的DNA 的3端（B）在原核生物DNA 的复制中起到解开DNA 双链的作用（C）具有逆（反）转录酶活性（D）载有属于自己的DNA 模板（E）在实现其功能过程中需要RNA 引物10. 下列哪个现象与染色质结构无关? _。（A）组蛋白的泛素化（B）组蛋白N 末端

16、上亮氨酸（Leu）的乙酰化（C）高等动物基因组DNA 上的CpG 上的甲基化（D）转录机器组分的有序招募，比如TFD 招募到启动子区域（E）转录因子与启动子的特异性结合三、名词解释（每题5 分，共30 分）1. 免疫共沉淀技术2. 等位基因3. 转录前起始复合物（PIC，preinitiation complex）4. 感受态细胞（competent cells）5. 凝胶阻滞试验（electrophoretic mobility shift assay, EMSA）6. 无义突变和错义突变四、简答题（每题6 分，共30 分）1真核基因转录因子存在代表性的DNA 结合域以及转录激活结构域，各举

17、三例。2RNA 干扰的发现和原理。3请简述遗传密码的性质。4什么是RNA 的编辑过程，它有哪些机制？5所有DNA 的复制都是从一个固定起始点开始的，在复制过程中打开的双链根据其不同特征和性质分为前导链和后随链，请简述原核生物DNA 复制过程中后随链的复制过程。五、 综合分析题（第一题15 分，第二题25 分，共40 分）1在体外研究蛋白质间的相互作用的方法有那些？请例举三种当前最为常用的方法并简述其基本原理。（15 分）2毕业后，你决定在一个大的Agrotechfirm 实验室工作。你发现如果赖氨酸生产细菌的产出量仅仅增加1，每年就可以为公司多盈利$ 10,000,000。你的指导老师已发现了

18、一种新的细菌K. expressus，有希望作为一个高赖氨酸表达菌株。你的工作是确定这些细菌赖氨酸合成操纵子调控方式。（25 分，共5 个问题）你第一个任务是确定往培养基里添加氨基酸如何影响操纵子的表达。你可以同时执行Lys 操纵子mRNA 的Northern 杂交，和使用抗两个不同的蛋白质（LysA和LysC） 的抗体进行免疫印迹。你获得的结果如下：问题（1）: 根据这些观察结果，你可以得出结论K. expressus 赖氨酸生物合成基因的表达是如何被调节的？（4 分）然后，你需要确定整个表达基因的序列，发现在三个赖氨酸生物合成基因上游有一个短的开放阅读框，mRNA 的结构和短开放阅读框序列

19、如下所示。问题（2）你最初兴奋地认为短的开放阅读框可以充当转录衰减子（transcriptionalattenuator），但是，基于上述数据你发现最初的想法不对。什么样的数据让你排除这一假说？为什么呢？（5 分）前导肽中的三个赖氨酸密码子的存在似乎仍然不是十分确定。虽然在短开放阅读框的附近没有潜在的发夹结构，你发现LysA 的核糖体结合位点(ribosome bindingsite, RBS) 非常靠近前导肽的终止密码子。为了确定前导肽是否具有调节赖氨酸生物合成基因的功能，你构建了一个杂化操纵子（hybrid operon）： 用lacZ 的开放阅读框（ORF）完全取代LysA 的ORF（见

20、下图）。然后，你在前导肽编码区引入3 个突变。最后，你把上述突变体引入K. expressus，分别使用-galactocidase 来检测在培养基中添加和不添加氨基酸的情况下，LacZ 杂交基因的表达水平，结果如下：问题（3）根据-Gal 的检测结果和你对翻译过程调控的知识，提出一个模型来解释上述结果。（分）虽然你的指导老师喜欢你的模型，但是他觉得引导肽编码序列外的基因突变体对于验证你的假设是必要的。问题（4）你打算构建什么样的基因突变体来研究前导肽和LacZ 基因/ LysA 表达之间的相关性？如果你的上述模型是正确的，会得到什么样的实验结果？（提示：你可以构建插入，删除或替换突变体）。(4 分)为进一步验证你的假设，你突变了前导肽的终止密码子，UGA 到UAA。你发现，在氨基酸存在条件下- Gal 的表达水平升高了2 倍（从20-25 到50-60 个单位）。问题（5）如何用你的假设来解释这个实验结果？如果你在带有没有突变的LacZ基因融合构建体的细胞中过度表达RF- 1，你认为LacZ 基因的表达将会受到怎样的影响？ 如果过度表达RF- 2，情况又怎样？（6 分）