选修3记忆提纲.docx

1、选修3记忆提纲生物选修3记忆材料一、基因工程1、基因工程的概念：是指在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞并使重组基因在受体细胞中表达，产生人类需要的基因产物的技术。基因工程是在DNA分子水平（基因）上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。基因工程的核心内容是实现不同生物间基因的转移和重组，目的是定向改造生物性状或产品。2、基因工程的原理：基因重组3、基因工程的基本工具：（1）“分子手术刀”限制性核酸内切酶（限制酶）a、来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。b、功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两

2、个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。c、切割方式与结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：错位切产生黏性末端和平切产生平口末端。（2）“分子缝合针”DNA连接酶作用：能缝合两个DNA分子片段间的磷酸二酯键，而不是氢键。DNA连接酶与DNA聚合酶的比较：项目DNA连接酶DNA聚合酶作用对象两个DNA分子片段单个核苷酸分子是否需要模板不需要需要作用实质都是形成磷酸二酯键化学本质都是蛋白质（3）“分子运输车”载体a、载体具备的条件：能在受体细胞中复制并稳定保存；具有一个或多个限制酶切点，供外源DNA片段插入；具有标记基因，供重组DNA的筛选与鉴定；对受体细胞无害。b、载体的种

3、类：最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、位于细胞质中，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子；此外还有噬菌体、动植物病毒。c、作用：将目的基因导入受体细胞，利用它在受体细胞中对目的基因进行大量复制。d、质粒的基本结构：作为载体的质粒至少具有复制原点、目的基因插入位点和标记基因等结构。4、基因工程的基本操作程序：第一步：获取目的基因:(1)获取目的基因的方法：通过基因文库获取目的基因（原核细胞中的基因大多采取此方法获得）；通过PCR技术扩增目的基因；通过化学方法人工合成（真核细胞的基因大多是人工合成，人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法）。（2）PCR技术扩增目的基因原理

4、：DNA复制过程：第一步：加热至9095DNA解链；第二步：冷却到5560，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至7075，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建（基因工程的核心）（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。（2）组成：目的基因启动子终止子标记基因启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段 ，位于基因的尾端,有终止转录的作用。标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有

5、目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。（3）步骤：用同一种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体，产生相同的黏性末端，再用DNA连接酶连接，形成重组DNA分子或质粒。第三步：将目的基因导入受体细胞_（1）转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。（2）受体细胞的种类：植物细胞、动物细胞和微生物细胞。（3）常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法，其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 显微注射技术。此方法的受体细胞大多是 受精卵。其次还有体细胞核移植技术和精子介导

6、技术。将目的基因导入微生物细胞：常用氯化钙溶液转化法，钙离子的作用是增加微生物细胞膜（壁）的通透性。第四步：目的基因的检测和表达（苏教版中包括筛选重组细胞和实现功能表达两步）重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达，常用的方法是插入灭活法。目的基因的检测和表达可以从分子水平和个体水平两个方面进行。分子水平的检测主要有以下3个层次：（1）首先要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术。（2）其次还要检测 目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用 用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。（3）最后检测 目的基因是否翻译成蛋

7、白质，方法是从转基因生物中提取 蛋白质，用相应的 抗体进行抗原抗体杂交。有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。培育抗软化番茄利用的目的基因是抗多聚半乳糖醛酸酶基因。5、基因工程的应用（1）植物基因工程：提高植物光合作用效率；提高植物次生代谢产物的产率；提高植物的抗性（抗虫、抗病、抗逆转基因植物）；延长果实的储藏期；利用转基因改良植物的品质。（2）动物基因工程：提高动物生长速度（产量）；改善畜产品品质；用转基因动物生产药物；提高动物的抗病力。（3）基因工程育种：原理是基因重组；优点是目的性强，育种周期短，能克服远缘杂交不亲和的障碍。（4）基因诊断：又称DNA诊断，

8、利用DNA分子杂交原理。生物芯片主要应用在疾病诊断、药物筛选、食品检测和司法鉴定等方面。（5）基因治疗：利用正常的外源基因置换或弥补缺陷基因的治疗方法，其步骤包括目的基因的转移、目的基因的表达和安全措施的实施。二、蛋白质工程1、概念：略2、蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质，这些蛋白质能满足物种自身的需要，但不一定能满足人类对生产和生活的需要。3、基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行。（注意：目的基因只能用人工合成的方法）4、蛋白质工程的

9、基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，本质上是通过改造基因实现的，又称为第二代的基因工程。蛋白质工程是对自然界中的蛋白质进行改造或生产出自然界中不存在的蛋白质。5、蛋白质改造分为“大改”、“中改”和“小改”。“小改”常用基因定点诱变技术，有目的地改造蛋白质结构，以改善蛋白质的性质和功能。基因定点诱变技术是改变蛋白质结构的核心技术。6、蛋白质工程的应用：在工业、农业、医药和环境保护等方面发挥重要作用。（1）医药：胰岛素进入血液速度慢的主要原因是胰岛素分子会聚合成二聚体或多聚体。将胰岛素B链中的28和29号氨基酸位置换一下就不会形成聚合体，以便提高效率和及时发挥作用。在基因水平上对抗体进

10、行重组生产出效果良好的人鼠嵌合抗体和将纤维蛋白溶解酶原激活因子中天门冬酰胺替换成谷氨酰胺后，使其在血液循环中的停留时间就会大大延长。（2）工业：通过改造酶的结构，有目的地提高酶的热稳定性。提高酶的热稳定性有两种方法。一是将酶分子中的天门冬酰胺和谷氨酰胺转变为其他氨基酸可提高酶的热稳定性；二是在蛋白质分子引入二硫键也可提高蛋白质的热稳定性。三、细胞工程（一）细胞工程概述1、细胞工程的概念：细胞工程是指以细胞为基本单位，在体外无菌条件下，进行培养、繁殖或利用细胞融合、核移植等技术，使细胞某些生物学特性按照人们的意愿发生改变，从而改良生物品种、创造新品种和加速繁育生物个体，以及获得某些有用的细胞代谢

11、产物的技术。2、细胞工程的种类：细胞工程根据研究对象不同可分为植物细胞工程、动物细胞工程和微生物细胞工程；根据使用技术不同可分为植物细胞和组织培养、细胞融合、细胞核移植和染色体工程等。3、细胞融合的方法：物理法（振动、离心和电刺激诱导法等）；化学法（聚乙二醇诱导法等）；生物法（灭活病毒诱导法）。其中物理法效率最高，对细胞无毒害作用。（二）植物细胞工程 1.理论基础（原理）：细胞全能性（1）细胞全能性的概念：生物体内几乎每一个细胞内都含有该物种的全套遗传物质，具有发育为完整个体所必需的全部基因，因此，这些细胞都具有发育为一个新的生物个体的潜能。细胞的这种特性称为细胞的全能性。（2）细胞具有全能性

12、的原因:生物形成体细胞是受精卵经有丝分裂形成的，有丝分裂过程中遗传物质不变，因此每个体细胞中都含有发育为完整个体所必需的全部基因。（3）全能性大小的判断受精卵配子体细胞；植物细胞动物细胞；分化程度低的细胞分化程度高的细胞。（4）实现全能性的条件离体；适宜的环境条件（如营养物质、激素、温度和PH等）。（5）体细胞未表现出全能性的原因 基因的表达具有选择性。即未离体细胞只能在机体的调控下定向分化，不能表达其全能性。2.植物组织培养技术植物细胞工程的最基本技术（1）、概念：是指依据细胞全能性的原理，在无菌条件下，分离植物的器官、组织、细胞或原生质体（称为外植体），并在培养基上培养，在适宜的条件下使其

13、长成部分或完整植株的技术。（2）、理论基础：植物细胞的全能性。（3）、过程：再分化胚状体试管苗植物体离体的器官、组织、细胞脱分化附：相关概念愈伤组织：是一团没有特定结构和功能并处于旺盛分裂状态的薄壁细胞。脱分化：由已分化的植物细胞形成愈伤组织的过程。再分化：愈伤组织生长一段时间后再移植到新的培养基（人教版：分化培养基）上继续培养，重新诱导分化形成根、芽等器官的过程。（4）、条件：离体、无菌无毒；适宜的温度和PH；全面的营养物质；植物激素；适时的光照等。（5）、植物培养基的成分水 分；无机营养：包括大量元素和微量元素；有机营养：主要有糖、维生素、氨基酸；生长物质：指植物激素，常用的有生长素和细胞

14、分裂素，离体培养物的根芽分化取决于激素间的比例，生长素主要诱导根的分化，细胞分裂素主要诱导芽的分化。此外，赤霉素对刺激细胞的伸长也有一定的作用；天然附加物：如椰子乳、酵母提取物等，有利于愈伤组织的诱导和再分化。（6）、应用A、微型繁殖（快速培养花卉及濒危植物）：不仅可以保持优良品种的遗传特性，还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。B、获得无病毒作物：植物分生区附近，如茎尖、根尖，很少被病毒感染，甚至无病毒，因而被用来培育无病毒植株。C、制备人工种子概念：是指在植物组织培养中得到的体细胞胚状体，包埋在含有营养物质和保护物质的包被中，在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。优点： 不受环境因素的制约，一年

15、四季都可以进行工厂化生产； 繁殖速度快，可在短时间内提供大量种苗； 不发生性状分离，有利于保存该种系的优良性状。3、植物细胞培养（1）概念：略（2）原理：细胞增殖（3）与植物组织培养的区别：植物组织培养植物细胞培养原理不同植物细胞的全能性细胞增殖目的不同新的植物体植物细胞次生代谢产物培养基不同固体培养基液体培养基（4）应用：利用植物细胞培养可生产药用原料、食品添加剂和保健食品等。4、植物体细胞杂交（1）、概念：就是将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。（2）、理论基础：植物细胞的全能性。（3）、过程附：原生质体：是指去除植物细胞壁后获得的裸露的植

16、物细胞结构等。诱导植物细胞融合的方法：物理法：离心、振动、电激等。化学法：一般用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。相关说明：除去植物细胞壁用纤维素酶和果胶酶（酶的专一性），因为细胞壁阻碍了原生质体的融合；细胞融合的原理是细胞膜的流动性；植物细胞融合成功的标志是再生出细胞壁，可以用植物细胞的质壁分离实验进行验证；杂种植物因为有同源染色体，所以是可育的；需要用选择性培养基筛选杂种细胞。所用技术：原生质体的制备技术；植物细胞融合技术；植物组织培养技术。（4）、意义：克服远源杂交不亲和的障碍。（5）、植物细胞工程育种之一植物体细胞杂交育种方法：去掉细胞壁诱导原生质体融合植物组织培养 植物体 原理：植物细胞

17、的全能性 （变异原理：染色体变异；融合原理：细胞膜具有一定的流动性）优点：克服远源杂交不亲和的障碍，培育出作物新品种。缺点：技术复杂，不一定能按人们的需要表现出亲代的优良性状。实例：番茄马铃薯的培育（6）植物细胞工程育种之二单倍体育种：a过程：植株（AaBb）通过减数分裂得到花粉（AB、Ab、aB、ab四种类型）；对花粉进行花药离体培养（技术是植物组织培养）；得到单倍体植株；对其幼苗时期进行秋水仙素处理；得到了正常的纯合二倍体植株（AABB、AAbb、aaBB、aabb四种类型）。b 优点：明显缩短育种年限（二）动物细胞工程动物细胞工程包括动物细胞与组织培养、细胞核移植、体细胞克隆、细胞融合和

18、单克隆抗体制备等技术。其中动物细胞和组织培养是动物细胞工程的基础。 1. 动物细胞与组织培养（1）概念：动物细胞与组织培养是指在体外模拟动物体内环境，将动物细胞或组织在无菌、温度适宜和营养充足的条件下培养，使其继续生长、增殖并维持原有结构和功能的技术。（2）原理：细胞增殖（3）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）剪碎用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养瓶中进行原代培养贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养（细胞株：1050代，细胞中遗传物质不变；细胞系：50代后，细胞中遗传物质改变）。（4）细胞贴壁和接触抑制

19、：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。（5）动物细胞培养与动物组织培养的区别：动物细胞培养过程中需要用胰蛋白酶处理使组织离散成单个细胞，而动物组织培养过程中不需要使用胰蛋白酶等。（6）动物细胞培养需要满足以下条件无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。适宜的温度与

20、PH：哺乳动物多是36.50.5；pH：7.27.4，不能用胃蛋白酶。气体环境：95%空气5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。（7）动物细胞培养技术的应用：制备疫苗、肿瘤防治、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞等。附：培养基的的种类（按来源分）天然培养基：主要取自动物血清、动物组织提取液和鸡胚汁等，具有营养价值高、成分复杂的特点。合成培养基：是人工配制的，具有成分明确、便于控制实验条件的特点。2.动物体细胞核移植技术和克隆动物（1）细胞核移植：是一种利用显微操作技术将某种动物细胞的细胞核移入同种或异种动物的去除细胞核的成熟卵细胞内的技术。哺

21、乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞比较大，容易操作；卵(母)细胞细胞质多，营养丰富。（2）动物体细胞克隆、概念：将供体体细胞的细胞核与受体去核卵细胞的细胞质进行人工组合，借助于卵细胞的发育能力，经过培养发育成胚胎，进而形成个体的技术。（关键：细胞核移植）、克隆羊“多利”的产生过程：、动物体细胞克隆成功说明高度分化的动物细胞核也具有全能性。、动物体细胞克隆过程中运用到动物细胞培养技术、动物细胞核移植技术、动物细胞融合技术和胚胎移植技术等。（3）体细胞核移植和体细胞克隆技术的应用：加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；保

22、护濒危物种，增大存活数量；克隆实验动物，减少实验误差；用于组织器官的移植等。（4）、细胞工程育种之三动物细胞核移植育种方法：细胞核移植重组细胞培养成早期胚胎胚胎移植 原理：动物细胞核的全能性 优点：快速繁殖优良品种，保存濒危物种，有选择地繁殖某性别的动物。 附：现代生物技术育种小结 基因工程育种细胞工程育种植物组织培养育种植物体细胞杂交育种动物细胞核移植育种原理基因重组植物细胞的全能性植物细胞的全能性（染色体变异；细胞膜具有一定的流动性）动物细胞核的全能性过程提取目的基因装入载体导入受体细胞基因表达筛选出符合要求的新品种离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织根、芽植物体去掉细胞壁诱导原生质体融合组

23、织培养细胞核移植重组细胞培养成早期胚胎胚胎移植优点目的性强，可以按照人们的意愿定向改造生物；育种周期短。快速繁殖、培育无病毒植株等克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出作物新品种。快速繁殖优良品种，保存濒危物种，有选择地繁殖某性别的动物。举例抗软化番茄、转基因鲤鱼等。制备人工种子、培养转基因植物白菜甘蓝的培育、“番茄马铃薯”的培育。“多利”羊等克隆动物的培育。3.动物细胞融合（1）概念：动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。（2）动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：细胞工程植物体细胞杂交动物细胞融合

24、理论基础细胞的全能性、细胞膜的流动性细胞增殖、细胞膜的流动性融合前处理酶解法去除细胞壁（纤维素酶、果胶酶）注射特定抗原，免疫处理正常小鼠诱导手段物理法:离心、振动、电激化学法：聚乙二醇（PEG）物理法:离心、振动、电激化学法：聚乙二醇生物法：灭活的病毒（灭活的仙台病毒）诱导过程第一步：原生质体的制备（酶解法）第二步：原生质体融合第三步：杂种细胞的筛选和培养第四步：杂种植株的诱导与鉴定正常小鼠免疫处理动物细胞的融合杂交瘤细胞的筛选与培养特异性抗体检测和细胞克隆化培养单克隆抗体的提纯应用克服远缘杂交的不亲和障碍，大大扩展杂交的亲本组合范围制备单克隆抗体4.单克隆抗体（1）抗体：一个B淋巴细胞只分泌

25、一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。（2）单克隆抗体的制备过程：对正常小鼠注射特定的抗原蛋白（目的使小鼠产生效应B细胞）；提取B淋巴细胞；同时用动物细胞培养的方法培养骨髓瘤细胞并提取；促使它们细胞融合注：融合的结果是有很多不符合要求的；如有2个B淋巴细胞融合的细胞等，所以要进行筛选；在特定的选择培养基上筛选出融合的杂交瘤细胞特点是能无限增殖，又能产生特异性抗体；然后对它进行克隆化培养和抗体检测筛选出能够分泌所需抗体的杂交瘤细胞；最后将杂交瘤细胞在体外做大规模培养或注射入小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中可得到大量的单克隆抗体。单克隆抗体的制备过程有两次筛选 ，第

26、一次是筛选出杂交瘤细胞，第二次是筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。（3）杂交瘤细胞的特点：既能无限增殖，又能产生特异性抗体。（4）单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、纯度高、并能大量制备等。（5）单克隆抗体的作用：作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点。用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症治疗，可制成“生物导弹”，也有少量用于治疗其它疾病。四、胚胎工程1、动物胚胎发育的基本过程（1）精子的发生：精原细胞先进行有丝分裂后进行减数分裂（两次分裂连续且在同一场所）；变形过程中，细胞核为精子头的主要部分，高尔基体发育为顶体，中心

27、体演变为精子的尾，线粒体在尾基部形成线粒体鞘膜，其他物质浓缩为原生质滴直至脱落。线粒体为精子运动提供能量（2）卵子的发生：在胎儿时期，卵原细胞进行有丝分裂后演变成初级卵母细胞被卵泡细胞包围，减一分裂在排卵前后完成（场所是卵巢），形成次级卵母细胞和第一极体进入输卵管准备受精；减二分裂是在受精过程中完成的（场所是输卵管）。（3）受精：精子获能（在雌性动物生殖道内）；卵子的准备（排出的卵子要在输卵管中进一步成熟到减二中期才具备受精能力）；受精阶段卵子周围的结构由外到内：放射冠、透明带、卵黄膜，a顶体反应：精子释放顶体酶溶解卵丘细胞之间的物质，穿越放射冠。b透明带反应：顶体酶可将透明带溶出孔道，精子穿

28、入，在精子触及卵黄膜的瞬间阻止后来精子进入透明带的生理反应它是防止多精子入卵受精的第一道屏障；c卵黄膜的封闭作用：精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程它是防止多精子入卵受精的第二道屏障；精子尾部脱落，原有核膜破裂形成雄原核，同时卵子完成减数第二次分裂，形成雌原核注意：受精标志是在卵黄膜与透明带之间有2个极体；受精完成标志是雌雄原核融合成合子。（4）动物胚胎发育的基本过程A、受精场所是母体的输卵管。B、卵裂期：特点：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积并不增加，或略有减小。 C、桑椹胚：特点：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑

29、椹。是全能细胞。D、囊 胚：特点：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为囊胚腔。E、原肠胚：特点：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。细胞分化在胚胎期达到最大限度2、 胚胎工程的理论基础（1）胚胎工程的概念及技术手段：对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。胚胎工程的操作对象主要是生殖细胞、受精卵和早期胚胎。胚胎工程的理论基础是胚胎发育学。（2）体外受精属有性生殖过程：a卵母细胞的采集和培养：对体型小的动物用促性腺激素处理，从输卵管冲取

30、卵子（可直接受精）；对体型大的动物从卵巢中采集卵母细胞（要在体外培养成熟才能受精）b精子的采集与获能；c在特定环境中完成体外受精。（3）胚胎移植：a概念：将雌性动物的早期胚胎移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程，通过转基因、核移植、体外受精获得的胚胎必须移植给受体才能获得后代。b优势：可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，缩短供体本身的繁殖周期。c胚胎移植必需让同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的对供体和受体进行同期发情处理。d胚胎移植的程序：对供、受体母牛进行选择，用孕激素等进行同期发情处理；对供体母牛用促性腺激素做超数排卵处理；选择同种优秀公牛配种有性生殖过程；对胚胎进行收集此时胚胎处于游离状态；对胚胎进行质量检查此时胚胎应发育到桑椹胚或囊胚；胚胎移植或冷冻保存；检查受体母牛是否受孕；产下胚胎移植的犊牛。（3）胚胎分割：a概念：用机械方法将早期胚胎切割成2、4、8等分等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术可看作是动物无性繁殖或克隆b操作对象：发育良好的桑椹胚或囊胚 注意：桑椹胚至囊胚的发育过程中，细胞开始分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割。内细胞团要均等分割，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育（4）胚胎冷冻保存技术A