细胞培养基的项目可行性调研.docx

1、细胞培养基的项目可行性调研目 录重点提示： 2一、细胞培养基 31.1细胞培养基的组成 31.1.1基础培养基 31.1.2血清 41.1.3无血清培养基 41.1.4抗生素 61.1.5抗有丝分裂剂 61.1.6培养的保持 71.2培养基的分类及优缺点 7二、无血清培养基技术 82.1无血清培养基及分类 82.2无血清培养基的优缺点 92.3无血清培养基组成及主要添加因子 102.4无血清培养基的应用 112.5小结 12三、细胞培养基的市场 123.1无血清培养基的潜力 123.2国内无血清培养基的情况 13无血清细胞培养基的项目可行性调研重点提示：1、细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养

2、和促使细胞生殖增殖的基础物质，也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。细胞培养基分为天然培养基和合成培养基。目前，绝大多数人工合成培养基使用时还需添加血清。2、无血清培养基(Serum-Free Media)，通常以SFM表示，就是在细胞培养中不需要添加血清，但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。无血清培养基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等，能减少血清带来的不利因素，使细胞培养的条件更稳定。经历了天然培养基、合成培养基后，无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。3、无血清细胞培养基的使用保证了实验结果的准确性、可重复性和稳定性，减少了细胞污染

3、，简化了提纯和鉴定各种细胞产物的程序。向无血清培养液中加入能促进细胞生长的补加物都是独特的。适用于某种细胞株的培养液，很可能不适合另一种细胞株的生长，即使同源组织的不同细胞株，所需补加物也不同。无血清培养基尚处于研究阶段。4、在无血清培养条件下，某些细胞的生长量和抗体的产量甚至较有血清时高出数倍。 除生产生物制品外，无血清培养基也被广泛应用于细胞生物学、药理学、肿瘤学领域。另外，无血清培养基还广泛应用于干细胞和免疫细胞的研究和临床治疗中。且在此领域对无血清培养基的需求量最大而且最迫切。5、目前中国95%的细胞培养基是从美国三家公司购买细胞培养基主要应用于欧美生物制药市场，年销售额30-40亿美

4、金。细胞培养基市场主要由美国三大公司美国英杰、SAFC Bio、Hyclone垄断。SAFC Bio拥有每年600吨生产量的世界最大生产线。6、国内生产无血清培养基的较知名企业有广州赛业，北京清大众一等，但国内生产的无血清培养基无论从质量上还是从口碑上都与GIBCO和Hyclone的产品相去甚远，且产品线尚不完善。7、无血清培养基的市场巨大，潜力无限；但由于国产品的质量和信誉问题，使得多年来国内一直购买进口的无血清培养基；如何能够打破这种局面，占有市场，始终是个瓶颈。一、细胞培养基细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质，也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。1.1细胞培养

5、基的组成培养细胞的完全培养基由基础培养基（如MEM）和添加剂（如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子）组成，培养基的配方一直在改进，其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。1.1.1基础培养基 绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearles MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Hams F12也包括非必须氨基酸，维生素的范围亦很广，另外常规含有无机盐和代谢添加剂（例如核苷酸）。MEM/F12 这两种培养基各取1/2，形成神经生物学最通用的培养基。Dulbeccos改良培养基DME

6、M，现应用于快速生长的细胞，同MEM含有相同的营养成分，但浓度高出24倍。选择某种培养基，应仔细了解成分表，应知道大多数情形下培养基都有不足。例如，有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸，而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域，但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言，则并非最佳选择，特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有硫酸亚铁，据报道也有神经毒效应。在所有这些培养基中，谷氨酸比其他氨基酸有更高的浓度，这是因为它具有不稳定性以及在许多细胞培养中它常用作碳源。对于神经元的培养常常在基础培养基中增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸（若培养基中这两种物质缺乏时）。MEM

7、与F12均要用5%的CO2来平衡，DMEM含更高浓度的NaCO3，要用10%的CO2来平衡，当然也可以在较低CO2浓度下使用。这些基础培养基的组成成分是建立在对不同细胞系生长的研究之上的，但通常在原代培养中使用也能有比较令人满意的结果。 原则上，HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度CO2培养环境的限制。实际操作中并非如此简单。显然，溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长是重要的。Leibovizs L15培养基可用来在大气环境中令神经细胞生长，该培养基采用了与众不同的BSS作基础，它含有高浓度的氨基酸来提高缓冲能力，培养基中使用半乳糖作碳源，以阻止培养基中乳酸形成，少量溶解

8、的CO2由丙酮酸代谢产生。这一培养基的优点是明显的，特别是在保持较高CO2有困难时，例如在长时间的显微操作及生理学研究中。L15培养基已用来成功的培养了外周神经元，但尚未在CNS神经元的发育研究中全面检测过。 (日水培养基 NISSUIMEM细胞培养 原代传递用组织(细胞)培养产品。1.1.2血清细胞在单纯的基础培养基中不能存活，在特殊类型的细胞培养中必须提供某些痕量营养物质及生长因子才能使细胞得以生长并维持生长状态。基础培养基常常要添加血清，血清终浓度多为520%。特殊用途的血清来源须用经验确定，广泛应用的血清种类有马血清与胎牛血清。胎牛血清中富含有丝分裂因子，常选其作增殖细胞用的血清，也用

9、于细胞系和原代培养。而马血清常常用来作有丝分裂后的神经元培养。然而，很多人也将胎牛血清用于神经元培养，也有人用马血清来培养胶质细胞。用大鼠进行神经元培养的某些研究者喜欢使用同型血清；人类的胎盘血清，亦曾用于神经组织的器官类型的培养，也用在一些特殊培养种类中。 血清的不同批号含有不同的成分，所以许多人发现，应该在使用前对血清进行测试。大多数试剂商提供样品，所满意的批号即可选用，这样可以一次得到足够一年用量的血清，血清在使用前通常在56加热30分钟，这一过程称为灭活。 1.1.3无血清培养基 1979年神经细胞培养出现了一个重要进展，用化学添加剂即可维持神经细胞存活与生长而不需要在培养基中添加血清

10、。其工作基础是用合适的激素、营养物和促贴壁的物质的组合置换培养基中的成分，最后找到了适合大多数细胞培养的试剂配方，该配方称为N2，专门用于神经细胞培养，最早是用在B104大鼠神经母细胞瘤细胞系的培养。它的基础培养基是1：1的DMEM与H12的混合液，添加了胰岛素、转铁蛋白、黄体酮、腐胺和硒。胰岛素和胰岛素样生长因子对于大多数类型细胞的存活和生长有重要作用，硒是谷胱甘肽产生的合作因子，可能有助于过氧化物和超氧化物的水解，有报道说还能防止细胞的光照损伤。随后的其他配方如N1N3则含有较低浓度的转铁蛋白。 未料到的是上述配方构成的培养基可以支持神经母细胞瘤细胞系快速增殖，随后又发展了能支持原代培养的

11、各种神经元生长的培养基，这种培养基在许多实验室里已取代了有血清培养。在某些培养方案中，细胞直接进入无血清培养，这样的培养基可以消除来自血清的不均一性。更为重要的是，它们可用来检测生长因子以及其他促进神经元存活或生长的因子，或者用来检测那些可保护神经元免遭环境毒物损伤的制剂。专用于神经元的培养基在某些培养环境中还可以减低非神经元细胞的增殖，故可使神经元纯化。 血清中含有的组分，例如血清蛋白，可作为代谢毒物清除剂使用并能聚集于培养基中。当缺乏这些成分时，如神经元在无血清培养基中生长时，特别容易为过氧化物及自由基伤害，这已被许多研究者注意到了。过氧化物酶以及超氧化物歧化酶可阻止培养基中过氧化物和超氧

12、化物的累积，有报道讲可以促进低密度培养细胞的存活。有学者发现细胞存活可为氧分压的下降而促进。因而，无血清培养基的配方常含有抗氧化剂的试剂。例如，维生素E和丙酮酸，可作为过氧化物清除剂使用。上述这些影响在高密度培养时变小，特别是神经元与胶质共培养时，它们可以吸收和代谢神经元毒性物质如谷氨酸。尽管无血清培养基是有化学限定性的，但在培养过程中它仍有变动，培养起始时可能有些物质缺乏，而后细胞的产物可能积累，从而使培养基的成分改变。这其实是有另一方面的好处，即条件培养基（已培养过细胞的培养基）的形成，条件培养基常常用来增加神经元和胶质细胞的发育。 生长因子对绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求，若不

13、能提供适宜的生长因子或合适的因子组分，将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路，一是让培养细胞提供自己的营养因子，二是在培养基中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长，所需的生长因子便会积累到可观的数值，尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求，可保持培养基在一段时间里不作任何变动，以使营养（生长）因子积累，而最后促使所需要的细胞类型能够生长。但是，这种对营养（生长）因子自身倚赖性亦有弊端，因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖，某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外，这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞

14、的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基（经过了高密度培养）进行，或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。 满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过，只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。 1.1.4抗生素 在细胞培养中最常用的抗生素是青霉素（常用浓度是25100ui/ml）与链霉素（25100g/ml）。这两种抗生素常混合使用。在一些实验室里，它们常规加入所有的培养基中。庆大霉素（10100g/ml）通常有广谱抗菌效应，并具有溶液稳定性，故也被一些实验室使用，特别是当有

15、低水平的污染存在时更是这样。以上这些试剂对霉菌与酵母菌的污染均无效。 尽管很多实验室在细胞系的培养基中常规加入抗生素作继代培养，但仍建议不要在原代培养中加入抗生素，其理由之一是获得的细胞是无菌的，原代培养时的细菌污染很少发生。其次，尽管认为抗生素对细胞代谢的影响可忽略，但最好避免使用它们，以免细胞生长环境的不稳定。最重要的是要意识到培养中主要污染物的类型，它们通常暗示了问题的来源。 1.1.5抗有丝分裂剂 某些DNA合成抑制剂对分裂细胞有毒，但对没有DNA合成的细胞仅有轻微影响。由于神经元通常缺乏DNA合成能力，因此对抗有丝分裂剂没有多大反应。这样的试剂常常用于神经元的培养，以消除或减少非神经

16、元群体。若要杀死所有的非神经元细胞，可以先加入血清或生长因子来保证有高比例的非神经元细胞进行DNA合成，此时再加入抗有丝分裂剂。但是，某些细胞在它的细胞周期的某些时相时对抗有丝分裂剂是不敏感的。不过，可以重复的将抗有丝分裂剂使用于增殖的细胞群体。在CNS神经元的培养中抗有丝分裂剂常常在星形细胞形成单层后加入，此时，星形细胞由于接触抑制而终止了DNA的合成（即细胞停止增殖），它们不会因抗有丝分裂剂的加入而死亡。原代培养中用这种方法阻止成纤维细胞的过度增殖是十分必要的。有两种抗有丝分裂剂常用于神经元的培养：Fluorodexyuridine，是胸苷合成酶抑制剂，一般使用浓度为10M。尿苷（10M）

17、也常使用，可阻止不分裂细胞的RNA合成。另外，阿糖胞苷也常被使用，其使用浓度为550M。使用任何一种抗有丝分裂剂，都必须考虑它的神经原毒性，应该确定最低效应的使用浓度。阿糖胞苷在很低的浓度下，也会对某些种类的神经元有毒性，可以造成特定神经原的死亡。其他的抗有丝分裂剂尚未表现出这种毒性。 1.1.6培养的保持培养物是应该保持在孵箱中的。孵箱可以自动将O2与CO2混合很快达到培养基的设计要求，空气中的氧浓度比血液和脑脊液中要高得多。对于某些细胞的生长，包括神经原，应使氧含量处在一个较低的水平。可以用孵箱达到这个标准，但这样的孵箱并未广泛使用。 高湿度可避免培养皿中培养基的蒸发，保持孵箱中的湿度通常

18、是在箱底部放上一大盆水，这水应该经常换，乘水容器应经常消毒以防霉菌生长。若孵箱曾被霉菌孢子严重污染过，那么要想完全去除污染则会非常困难。当培养物必须要长期保持在孵箱中时，应采用较少培养基的瓶、皿，且将盖子盖紧以避免蒸发，或采用相应的按比例供空气的孵箱。 温度的精确调节应定期检查，孵箱温度常设置为37或较低温度。细胞在低温时可有较长时间的忍耐限度，但当温度升至39时，几小时内即死亡。 维持培养物的最佳方案常常改变。例如培养胶质细胞时，要经常换液以使其增殖达到最大。而在培养某些神经原时，则要求尽可能少的换液，神经原在两次换液之间的条件下长的最好。大脑皮质的培养要求在不换液的情形下维持一个月以上。另

19、一方面，象海马神经原那样的细胞，倚赖于条件培养基，若换液太频繁细胞就会衰退，此时，可采用1/3或1/2换液的方式。 1.2培养基的分类及优缺点培养是既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质，也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。培养基的种类很多，按其物质状态分为半固体培养基和液体培养基两类；按其来源分为合成培养基和天然培养基。 天然培养基：使用最普遍的天然培养基是血清，基本以小牛血清最普遍。血清由于含有多种细胞生长因子、促贴附因子及其多活性物质。与合志培养基合用，能使细胞硕利增殖生长。常见使用最为 5-20%。天然培养基有血清、血浆和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。优点：营养成分丰富

20、，培养效果好缺点：来源受限；成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析；易发生支原体污染。合成培养基：合成培养基是根据细胞所需物质的种类和数量严格配制而成的。内含碳水化合物、氨基酸、脂类、无机盐、维生素、微量无素和细胞生长因子等。单独使用细胞虽有生存但不能很好的生长增殖。优点：标准化生产，组分和含量相对固定；成本低。缺点：缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细胞生长和繁殖，还需补充一定量的天然培养基（如血清）。二、无血清培养基技术通常，动物细胞的生长均有赖于血清的存在，在普通培养基中，如不加血清，绝大部分细胞不能增殖。目前，血清培养基中通常

21、添加的比较好的血清是牛血清。经研究发现细胞培养中使用牛血清存在污染外源病毒和致病因子的风险：由于不同批次牛血清间的生物活性和因子的不一致，导致产品和实验结果的重现性差：制品中残留的牛血清易引起接种者对血清的过敏反应。无血清培养基(Serum-Free Media)，通常以SFM表示，就是在细胞培养中不需要添加血清，但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。无血清培养基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等，能减少血清带来的不利因素，使细胞培养的条件更 稳定。经历了天然培养基、合成培养基后，无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可简

22、化纯化和鉴定各种细胞产物的程序，避免病毒污染造成的危害。 2.1无血清培养基及分类 无血清培养基是继天然培养基，合成培养基之后的第三类培养基。与传统的培养基相比较，无血清培养基是不含动物血清或其他生物提取液，但仍可以维持细胞在体外较长时间生长、繁殖的一种培养基。 无血清培养基由于其组成成分相对清楚，制备过程简单，在现代生物技术学领域得到广泛应用。无血清培养技术也是阐明细胞生长，增殖，分化及基因表达调控的基础研究问题的有力工具。目前，无血清培养基的研究有两个方向：一是培养基中不含有任何动物来源的添加组分；二是培养基中不含有不明确的添加组分。依此可以将当前应用较多的无血清培养基归纳为以下四种：1.

23、一般意义上的无血清培养基，用各类可代替血清功能的生物材料配制细胞培养基，如牛血清白蛋白（BSA），转铁蛋白，胰岛素等生物大分子物质，以及从血清中提取的去除蛋白质的混合脂类以及水解蛋白等。其特点是培养基中的蛋白含量较高，添加物质的化学成分不明确，其中含有大量的动物来源蛋白。 2.无动物来源培养基：许多商业公司开发的无动物来源培养基是基于生产重组药物的安全考虑，培养基中的添加组分无动物来源，需要的蛋白来源于重组蛋白或者蛋白水解物，这些组分可以保障细 胞生长及增殖的需要。3.无动物蛋白培养基：培养基完全不用动物来源的蛋白，但仍有部分添加物是来源于植物蛋白的水解片段或合成多肽片段等其他衍生物。此类培养

24、基组分相对稳定，但必须添加类固醇激素和脂类前体，并且对培养的细胞是高度特异性的。 4.化学组分限定培养基，此类培养基是目前最安全的，最为理想的培养基，首先可以保证培养基 批次间的一致性，其中所添加的少量动物来源的蛋白水解物、蛋白都是成分明确的组分。其特点是培 养基的性质确定，配起培养基来也比较方便。 2.2无血清培养基的优缺点 无血清培养基的优点： 可避免血清批次间的质量变动，提高细胞培养和实验结果的重复性。 避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染。 避免血清组分对实验研究的影响。 有利于体外培养细胞的分化。 可提高产品的表达水平并使细胞产品易于纯化。 组分稳定，可大量生产。 不含有丝分裂原抑

25、制剂，可以促进细胞增殖。 无血清培养基的缺点： 细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响，培养基的保存和应用不如传统的合成培养基方便。 成本较高。 针对性很强，一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养。 处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方，对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。而且在去除血清的同时，也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用，因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。 2.3无血清培养基组成及主要添加因子 无血清培养基由营养完全的基础培养基添加激素，生长因子，贴壁因子和结合蛋白而组成。 （一） 基础培养基 早期用于细胞培养的基础培

26、养基有血浆凝块，淋巴液，大豆蛋白胨和胚胎浸膏等天然培养基。1950年Morgan等在前人的研究基础上研究出199培养基，是动物细胞培养基发展到一个崭新的阶段，及合成培养基阶段。合成培养基是按细胞生长需要将一定比例的氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖等组合 成的基础培养基。目前市场上已经有上百种的合成培养基商品。在众多的合成培养基中，MEM、DMEM、RPMI 1640、F12、和TC100的使用最为广泛。基础培养基的成分是完全已知的，因此在对不同的细胞株进行培养时可以对基础培养基的某些组 分进行相应的调整，以更好的符合细胞株的营养要求或提高目的蛋白的表达量。 （二）主要添加因子 又称补充因子，是代

27、替血清的各种因子的总称。多数无血清培养液必须补加38种因子，任何单一因子都不能取代血清。已知有100多种此类因子，其中有些是必须补充因子，如胰岛素、亚硒酸钠 和转铁蛋白，其他多数为辅助作用的因子。 按其功能不同，我们可将补充因子分为四类： 激素和生长因子很多细胞用无血清培养时需要加入激素，如胰岛素、生长激素、胰高糖素等。几乎所有的细胞系都需要胰岛素，它是一种多肽，能与细胞上的胰岛素受体结合形成复合物，促RNA、蛋白质和脂肪酸的合成，一致细胞凋亡，是重要的细胞存活因子。结合蛋白 结合蛋白有两种，一种是转铁蛋白，另一种是白蛋白。大多数哺乳动物细胞上存在特定的转铁蛋白受体，受体与转铁蛋白与铁离子的复

28、合物结合是细胞 获取必需的微量元素铁的主要来源，此外转铁蛋白还具有生长因子的性质并能与其他微量元素如钒等 结合。不同细胞对转铁蛋白的需要量也不同。白蛋白也是无血清培养基中常用的添加因子。它通过与维生素、脂类、激素、金属离子和生长因子的结合而稳定和调节上述物质在无血清培养基中活性的作用，此外还有结合毒素和减轻蛋白酶对细胞影响的作用。 贴壁因子 绝大多数的真核细胞在体外生长时需要固着在适宜的基底上。细胞固着作用是一个复杂的过程，包括贴壁因子吸附于器皿或载体的表面。细胞与贴壁因子的结合等。 无血清培养中常用的贴壁因子有细胞间质和血清中的成分，如纤粘连蛋白、胶原、昆布氨酸和多聚赖氨酸等。 其他添加因子

29、 一些细胞系的无血清培养还需要补充某些低分子量的化学物质，如微量元素、维生素、脂类等，维生素B主要以辅酶的形式参与细胞代谢，维生素C和维生素E具有抗氧化作用。 丁二胺和亚油酸等提 供细胞膜合成所需的脂质和细胞生长所需的水溶性脂质。 2.4无血清培养基的应用目前在大规模动物细胞的培养中已经普遍适用于无血清培养基。在疫苗生长、单抗和各种生物活性、蛋白等生物制品的应用领域中，优化无血清培养基的成分可使不同的细胞在最有利于细胞生长和表达目的产物的环境中维持高密度培养，降低生产成本。在人类细胞培养中，应用无血清培养基还能有选择性地控制及避免成纤维细胞的过度生长。 在无血清培养条件下，某些细胞的生长量和抗

30、体的产量甚至较有血清时高出数倍。 除生产生物制品外，无血清培养基也被广泛应用于细胞生物学、药理学、肿瘤学领域： （1）研究细胞的分化条件：无血清培养基其组成可以是完全确知的化学物质，因而可根据研究的需要增减具有重要生物活性物质的种类和数量。这就为研究细胞分化的条件提供了有效的手段。 （2）用于激素、生长因子和药物等与细胞相互作用的研究。 （3）用于从多种细胞混杂的培养中选择目的细胞：通过对无血清培养中的某些成分的取舍，可抑制原代组织培养物中非目的细胞的过度生长，达到选择目的细胞的目的。（4）肿瘤病理学和病因学的研究：如用于研究致癌因子对细胞的影响，研究肿瘤细胞对可能触 发正常细胞终末分化的外周

31、信号的反应能力，或用于研究正常细胞与肿瘤细胞的生长和移行与基底膜信号的关系等。 （5）无血清培养基在生物制品生产中的得到广泛应用，国内外的很多生产单位都在致力于如何将无血清培养基与发酵罐培养技术更好的结合应用。另外，无血清培养基还广泛应用于干细胞和免疫细胞的研究和临床治疗中。且在此领域对无血清培养基的需求量最大而且最迫切。2.5小结无血清培养基由基础培养基和替代血清的补充成分组成。无血清细胞培养基的使用保证了实验结果的准确性、可重复性和稳定性，减少了细胞污染，简化了提纯和鉴定各种细胞产物的程序。向无血清培养液中加入能促进细胞生长的补加物都是独特的。适用于某种细胞株的培养液，很可能不适合另一种细

32、胞株的生长，即使同源组织的不同细胞株，所需补加物也不同。无血清培养基尚处于研究阶段；目前，绝大多数人工合成培养基使用时还需添加血清。三、细胞培养基的市场3.1无血清培养基的潜力无血清培养基主要用于生命科学领域，所有需要进行细胞或组织培养的机构均需使用。目前国内外生产厂家规模小，产量低，尤其是国内厂家，尚没有进行大规模生产的厂家。随着实验技术的进步，对无血清培养基的需求越来越大。无血清培养基在进行干细胞培养方面具有巨大的市场潜力，市场容量和市场需求量都不可估量。 在各国政策的鼓励下，目前国内外从事干细胞研究和治疗的机构众多。有报道称：2009年，全国的干细胞实验室有50个。而到今年，这个数字应该是以几何指数增长。目前，全球有229家公司从事干细胞治疗心脏病的研究。预计干细胞治疗心脏病的市场总额在2012年将达到35亿美元。在美国，组织工程产品正以每年市值增加22.5%的速度成为国民经济的支柱产业之一。同