1、微生物实习报告从化森林公园 (一)目的1.了解大型真菌生长的生态环境和习性。2.学会采集、记录、保存大型真菌标本的方法和一般大型真菌宏、微观特征绘图。3.学会标本切片和用显微镜观察标本的方法。4.初步了解和学习真菌分类系统。5.认真地实事求是地记录实验数据,正确地记录和处理实验记录与结果;(二)概述大型真菌(蕈菌)属于真菌界中肉眼可见的一大类群,从应用和危害上分,可分为食用菌、药用菌、毒菌、非食(药)用菌和不明用途类等几大类。目前,对食用菌需求的种类越来越多,数量也越来越大。初步识别大型真菌特别是食(药)用菌和毒菌的主要特征,对于进一步开拓大型真菌的应用,避免误食毒菌具有十分重要的意义。蕈菌资
2、源十分丰富,全世界可供食用的真菌有2000多种。常见栽培品种有双孢蘑菇、草菇、金针菇、平菇、香菇、猴头菌、木耳、银耳、灵芝、和茯苓等。 大型真菌主要依靠宏观特征和显微镜下微观特征来识别,其种类繁多,结构复杂,一般需要真菌分类专业人员才能有效识别。本实验在通过学习理论知识的基础上,只能大致了解大型真菌的部分典型宏观和微观特征,获得一定的感性认识。(一)大型真菌的主要大类群大型真菌主要可分为子囊菌和担子菌。1.子囊菌子囊菌的主要特征是具有子囊,是子囊菌有性生殖是产生的有性生殖孢子(子囊孢子)的囊状细胞。每个子囊通常有8个子囊孢子,少数只有4个或其它数目的子囊孢子。 图1. 子囊菌纲的无性繁殖图2.
3、 子囊菌纲的有性繁殖图3. 子囊菌纲的有性子实体的结构图4. 子囊菌中的盘菌剖面构造2.担子菌担子菌就是有性孢子在担子上产生的真菌。担子菌的繁殖器官(产孢结构)主要在菌褶上。菌褶表面具有担子和担孢子。(1)单核菌丝和双核菌丝 单核菌丝 由担孢子萌发形成的菌丝,其细胞内含有一个细胞核,也称为初生菌丝。它通常是不能结实的。双核菌丝 两条相同或不同的单核菌丝发生细胞质融合,而核不融合。细胞内含有两个核的称为双核菌丝。亦叫次生菌丝或二级菌丝。在大多数蕈菌中,双核菌丝的隔膜处有一个锁状突起叫锁状联合,它是双核菌丝所具有的结实性标志,即能产生子实体。 (2)子实体和担孢子的形成 子实体 具有锁状联合的双核
4、菌丝,发育到一定阶段,生理成熟时,可产生果实和种子,这种结构称为子实体。子实体就是常称为菇和耳的食用部分,是蕈菌的繁殖器官。担孢子 在蕈菌的有性繁殖过程中,双核菌丝的顶端细胞发育成担子,在担子上形成的有性孢子称为担孢子。 图5.担子的形成图6. 子囊菌纲的有性子实体的结构2大型真菌的生态习性大型真菌主要生长在草地上、阔叶林、针叶林、针叶阔叶混交林地上;或生于腐木、粪堆及其它基物上。分为单生类菌体单独生长;散生类菌体分散生长;群生多个菌体成群生长。群生又分为丛生、簇生和覆瓦状生长等。大型真菌一般多生长于具有稀疏阳光或有阳光处,好发于春、夏季,且有一定湿度的地方。图7. 菌类群生类型图3大型真菌的
5、宏微观特征大型真菌的形态特征个异,主要形态有1菌盖特征2子囊和担子特征3孢子特征4菌丝特征(三)材料与方法1.材料与仪器采集纪录纸、小刀、小铲、包装袋、标签、载玻片、盖玻片、蒸馏水滴瓶、5%KOH滴瓶、刮胡刀片、PDA培养基、PDA试管、无菌培养皿、酒精灯照相设备、烘箱、显微镜、2.方法(1)采集在春、夏季,且有一定湿度的地方,于雨后,选择具有稀疏阳光或有阳光处的针叶阔叶混交林地上,、腐木、粪堆及其它基物上。对于地上的菌类,选择连根采集,对于腐木上的菌类,须用小刀连树皮一齐采集,并按照纪录纸的要求纪录各项数据,并绑上相应标签。(2)烘干由于标本主要为肉质,容易腐烂和发霉,为避免蕈菌污染其他菌类
6、,影响以后的镜检、纪录和鉴定,须及时将标本及时置于60烘箱内烘二至数小时,直至标本完全烘干。如无烘箱,也可直接置于阳光下曝晒至初步晒干,回到实验室后在继续使用烘箱进行烘干,直至标本完全烘干为止。(3)绘图绘下标本宏观特征图镜检A.对于伞菌等,以刮胡刀片沿菌褶剖面切下一小薄片,置于载玻片上,滴加一滴5%KOH或蒸馏水,盖上盖玻片,置高倍镜下观察。B.对于其它非菌褶菌类,则以刀片沿其子实层(产孢结构)生长剖面切下一小薄片,置于载玻片上,滴加一滴5%KOH或蒸馏水,盖上盖玻片,置高倍镜下观察。C.找到孢子并绘下孢子特征和菌丝特征图。(4)识别和鉴定在野外采集过程中,在老师的指导下,按照采集表的内容,
7、初步纪录该菌可能的名称,并绑上相应标签,照相纪录。根据野外纪录结果,在老师的指导下,采用目前比较流行的分类系统如Ainsworth(1973)的真菌分类系统,并对照有关地方大型菌类志,初步确认该菌的种类。(5)必要时,采用沉降法计算采集环境中的空气、土壤、水中的微生物数量。()如该菌具有一定经济价值,可进行菌种的无菌分离工作,将分离的菌种置于菌种库保存以备进行进一步的研究。附:采集纪录表 广州大学大型真菌采集纪录表表号:1实物照片或宏观绘图微观绘图学名:Marasmiellus candidus(Bolt.) Sing中文名:微皮伞产地:珠江边树木丛中编号:1002海拔:约11m生境:茂密树丛
8、中生态:良好基物:半干木土壤:无直径:约3.0cm高度:约0.3cm采集者: 拍照者:鉴定者: 采集时间:2012.4.10其它: 广州大学大型真菌采集纪录表表号:2实物照片或宏观绘图微观绘图学名:Pleurotus albellus (Pat.) Pegler中文名:白侧耳产地:珠江边树木丛中编号:1003海拔:约9m生境:枯朽的断木生态:潮湿,腐烂枝叶多基物:枯朽的断木土壤:无直径:约4.0cm高度:约0.2cm采集者: 拍照者:鉴定者: 采集时间:2012.4.10其它: 广州大学大型真菌采集纪录表表号:3实物照片或宏观绘图微观绘图学名:Amanita sychnopyramisf. s
9、ubannulata Hongo中文名:残托鹅膏有环变型产地:大学城湿地公园内编号:1004海拔:约15m生境:有杂草的土壤生态:潮湿,旁边有杂草基物:有杂草的土壤土壤:潮湿,为腐殖质直径:约3.0cm高度:约4.0cm采集者: 拍照者:鉴定者: 采集时间:2012.4.10其它: 广州大学大型真菌采集纪录表表号:4实物照片或宏观绘图微观绘图学名:Auricularia polytricha (Mont.) Sacc.中文名:毛木耳产地:生化楼外马路旁编号:1005海拔:约20m生境:良好生态:柳树,洋槐、桑树等多种树干上或腐木上,丛生基物:树木土壤:无直径:约5.0cm高度:约2.5cm采集
10、拍照者: 鉴定者: 采集时间:2012.4.10 广州大学大型真菌采集纪录表表号:5实物照片或宏观绘图微观绘图学名:Wild Mushroom中文名: 野生蘑菇产地:科学中心的草坪里编号:1006海拔:50m生境:有杂草的土壤生态:良好基物:土壤土壤:长有杂草直径:约4.0cm高度:约5.0cm采集者: 拍照者: 鉴定者:采集时间:2012.4.10其它: 广州大学大型真菌采集纪录表表号:6实物照片或宏观绘图微观绘图学名:Pycnoporus 中文名:密孔菌产地:从化石门国家森林公园内编号:1007海拔:约700m生境:潮湿,枯枝落叶多生态:较恶劣基物:腐朽的树木土壤:无直径:约7cm高度:约
11、0.3cm采集者: 拍照者: 鉴定者:采集时间:2012.4.13其它: 广州大学大型真菌采集纪录表表号:7实物照片或宏观绘图微观绘图学名:Marasmius maximus Hongo中文名:小皮伞产地:从化石门国家森林公园内编号:1008海拔:约700m生境:潮湿,枯枝落叶多生态:良好基物:土壤土壤:湿润的腐殖质直径:约3.1cm高度:约4.7cm采集者: 拍照者: 鉴定者:采集时间:2012.4.13其它: 广州大学大型真菌采集纪录表表号:8实物照片或宏观绘图微观绘图学名:Coltricia oblectans中文名:集毛菌产地:从化石门国家森林公园内编号:1009海拔:约700m生境:
12、潮湿,枯枝落叶多生态:良好基物:土壤土壤:潮湿,肥沃直径:约5.0cm高度:约4.0cm采集者:赖老师拍照者:曾老师鉴定者:赖老师采集时间:2012.4.13 广州大学大型真菌采集纪录表表号:9实物照片或宏观绘图微观绘图学名:Calocera morchelloides Liu et Fan中文名:角耳菌产地:从化石门国家森林公园内编号:1010海拔:约700m生境:潮湿, 苔藓类植物较多生态:良好基物:腐朽的树木,有少许土壤土壤:少许湿润的腐殖质,长有苔藓直径:约1.5cm高度:约2.8cm采集者:拍照者:曾老师鉴定者:赖老师采集时间:2012.4.13其它: 广州大学大型真菌采集纪录表表号:10实物照片或宏观绘图微观绘图学名:Ramaria botrytoides中文名:珊瑚菌产地:从化石门国家森林公园内编号:1011海拔:约700m生境:潮湿, 苔藓类植物较多生态:良好基物:腐朽的树木,有少许土壤土壤:少许湿润的腐殖质,长有苔藓直径:约3.2cm高度:约3.9cm采集者: 拍照者:曾老师鉴定者:赖老师采集时间:2012.4.13其它:
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