厦门大学生命科学学院实验教学中心生物安全管理制度模板.docx

1、厦门大学生命科学学院实验教学中心生物安全管理制度模板厦门大学生命科学学院实验教学中心生物安全管理制度厦门大学生命科学学院实验教学中心的生物安全管理制度用于指导和规范中心的运作方式以及工作人员的实验操作，目标是保证实验室的生物安全，以预防和避免意外事故的发生。本制度由厦门大学生命科学学院实验教学中心生物安全工作组修订。本制度参考了世界卫生组织（WHO）的实验室生物安全手册（第二版）和香港大学流感研究中心 (HKUIRC) 的安全操作手册，并依照本室的具体工作内容和实际情况进行了补充和完善。本制度将根据最新的研究和文献信息进行及时修改更新。由中心生物安全工作组负责定期组织对实验室全体成员进行生物安

2、全管理制度的学习培训。必须保证实验室全体成员充分意识到生物安全的重要性，熟悉中心生物安全管理制度的规定，严格按照制度规定进行实验工作。主要内容：一生物安全管理组织形式二生物危害评估规定三生物实验安全技术规范四日常维护的安全注意事项五工作人员的生物安全培训规定六紧急情况的处理预案七消毒和灭菌技术规范一、中心生物安全管理组织形式1中心生物安全工作组中心生物安全工作组由组长、副组长、委员组成。工作组的主要工作职责是组织进行生物危害评估，确定生物安全管理级别以及建立相应的规章制度，并保证这些规章制度获得严格的执行。这些规章制度包括实验管理、安全管理、技术操作手册等方面。工作组要定期进行工作回顾，根据需

3、要更新生物安全管理制度。工作组定期或不定期向各种相关领域的专家、地方或国家管理部门就相关生物安全问题进行咨询。工作组定期组织对实验室全体成员进行生物安全的学习培训，保证实验室全体成员充分意识到生物安全的重要性，熟悉生物安全管理制度的规定，并严格按照制度规定进行日常实验工作。中心生物安全工作组成员名单组 长： 宋思扬 （实验教学中心主任、教授）副组长： 周大旺（实验中心副主任、副院长、教授）石艳（实验中心副主任、副教授）陈祥仁（实验中心副主任、高级实验师）组 员： 陈林姣 高级实验师赵扬：高级实验师王忠安：高级实验师柯莉娜：高级实验师 吕良炬：高级实验师苟立新：实验师各成员在生物安全工作组中的职

4、责：组长：协调组织（1）根据需要组织并召开生物安全工作会议（全体工作组组员参加）；（2）根据需要组织并召开生物安全扩大会议（由实验室全体人员参加）；（3）协调工作组内的各项工作。副组长：日常管理（1）全面检查实验室工作场所以确保其符合安全规范标准；（2）定期汇总内部生物安全检查结果，包括实验室设计规划、实验技术方法、实验材料、各类药品及仪器设备等；（3）负责调查生物安全事故，应向安全工作组提交事故发现和处理的报告；（4）建立规范以记录感染物质的接受、移动及处理过程；（5）在地方性或国家性的视察团体代表到来时负责陪同及进行情况说明；（6）建立“on call”责任系统制度以应对正常实验时间以外发

5、生的紧急事件；（7）根据情况敦请组长召开生物安全工作会议或生物安全扩大会议。其他组员的职责：王忠安：菌种库的保藏，人员培训（1）负责对新进菌种进行安全审查，并将结果及时向生物安全工作组组长汇报；（2）保藏菌种；（3）负责编写菌种目录，并完成菌种背景资料。（4）协助调查研究所有事故及意外；（5）新进人员安全培训，确保所有相关人员都获得及时和充分的指导和培训，使其明白工作中潜在的危险，同时确保所有参加实验的人员都有处理感染性物品的能力；（6）协助生物安全工作组研究分析实验研究中的可能涉及的生物安全问题。陈林姣、柯莉娜：危险药品及材料（1）负责毒种及感染性材料的保藏及管理；（2）定期对各类药品及实验

6、材料进行安全检查，并将结果及时向生物安全工作组组长汇报；（3）当引入新的药品及实验材料时，对其安全问题进行研究，并将结果及时向生物安全工作组组长汇报及负责保管相应资料；（4）确保有感染性的废物在丢弃前都经过有效的安全处理；（5）协助调查研究所有事故及意外；（6）协助生物安全工作组组长研究分析实验研究计划、流程和操作程序中的可能设计的生物安全问题。吕良炬：动物材料安全（1）对实验室要用到的动物源材料进行生物安全研究，并将结果及时向生物安全工作组组长汇报；（2）协助调查研究所有事故及意外；（3）协助生物安全工作组组长研究分析实验实验中的可能涉及的生物安全问题。苟立新：信息更新（1）随时关注国家及地

7、方的各项相关安全法规及其变更，及时汇报生物安全工作组组长；（2）在地方性或国家性的当局或法规制定团体代表到来前及时通知生物安全工作组组长；（3）协助调查研究所有事故及意外；（4）协助生物安全工作组组长研究分析实验研究计划、流程和操作程序中的可能设计的生物安全问题。赵扬：实验室及仪器设备的维护和检修2生物安全工作组工作会议对于讨论日常生物安全相关事宜的会议，由生物安全工作组组长提议并组织召开，全体工作组成员参加。会议召开至少需要半数以上成员参加。议题的表决采用简单多数原则。对于涉及重大生物安全问题的会议（包括生物安全事故处理、安全事件纠纷仲裁、建立新的安全措施、更改安全技术规范及一切与生物安全事

8、务相关的奖惩），由生物安全工作组组长提议，由生物安全工作组组长组织并召开，全体工作组成员参加。议题的表决采用绝对多数原则（全体成员2/3同意或否决）。对于工作组成员变更及各自职能的改变的会议，可由生物安全工作组组长或组员提议，由生物安全工作组组长组织召开，全体工作组成员参加。议题的表决采用绝对多数原则。3中心生物安全扩大会议由生物安全工作组组长组织召开，中心全体人员参加，主要用于通知重要安全事宜、宣布事故处理报告等，一般不做任何表决。4临时替代规定由于各种原因，生物安全工作组成员在一段时间内不在实验室或无法执行其相关职能，可由生物安全工作组组长或本人指定他人经生物安全工作组组长同意后暂代其执行

9、职责，一般情况下被指定的人也应该是生物安全工作组成员之一。如果生物安全工作组组长在一段时间内不在实验室或无法执行其相关职能，可由生物安全工作组副组长全权负责相关事务。如果生物安全工作组组长和副组长一段时间内都不在实验室或无法执行其相关职能，须指定一名组员为临时生物安全工作组组长。实验室所有的工作人员也同样要对实验室安全负起自己的责任。每一名工作人员都有义务为自己和同事的安全负责。实验室希望每名工作人员都能在安全的情况下进行工作，避免由于不安全不健康的环境或操作而导致自身或他人的危险。当出现不安全的操作或情况时，实验室工作人员必须立即向上级报告。二生物危害评估规定1生物危害评估组织体系厦门大学生

10、命科学学院实验教学中心的生物危害评估由中心生物安全工作组组长负责组织中心生物安全工作组成员、实验室其他专业技术人员共同参与进行。评估对象主要是目前中心内所操作或保存的微生物（包括菌种、毒种）和各种感染性材料等。根据评估结果确定实验室的生物安全等级及相应应采取的生物安全控制措施。在进行过生物危害评估后，应根据最新的研究数据和文献信息不定期地或定期进行重新评估和修订。注：使用者应预先提交有毒有害生物使用申请报告，交由中心生物安全工作组审核。具体组织形式和工作流程：组长：负责监督及时和全面地进行生物危害评估，按中心生物安全工作组组长的提议召开生物安全工作组会议。副组长：负责提出召开生物安全工作组生物

11、危害评估会议的要求，主持会议，并根据会议讨论结果形成评估报告和提出应采取的措施。生物安全工作组成员：参与会议讨论，进行生物危害评估。实验室其他专业技术人员：参与会议讨论，进行生物危害评估。2生物危害评估方法2.1 对实验中涉及的微生物进行分级微生物根据其危险程度可分为4个级别（表一）。根据表中的数据确认实验中涉及的微生物的危险程度。表一：微生物的危险级别分类危险度个体和群体危险性描述I类对个体或群体低或无危险该类微生物对人类和动物无致病性。II类中等个体危险，低群体危险该类微生物对人类和动物有致病性，但对实验室工作人员、群体、家畜和环境的危险度低。实验室内的泄漏可能会导致严重的感染，但具有有效

12、的治疗手段和预防措施可对其进行有效控制。III类高个体危险，低群体危险该类微生物对人类和动物有严重的致病性，但不易从感染个体再扩散。具有有效的预防和治疗措施。IV类对个体和群体有高危险性该类微生物对人类和动物有严重的致病性，并且可通过直接或间接方式快速传播。尚无有效的治疗和预防措施。2.2 对实验中涉及的微生物进行全面的评估进行微生物危险评估时由于部分微生物的文献资料尚不充足可能无法进行全面的危险评估，因此还必须考虑以下因素：病原体致病性和感染剂量；危害发生后的后果；天然的感染途径；其他的可能感染途径，如来自于一些实验操作（肠胃外进入、空气传播、吞入）；在环境中的稳定性；浓度和操作时高浓度样品

13、的体积；是否存在合适的宿主（人或动物）；关于实验动物的研究和关于实验室来源感染的报告或临床报告；所安排的相关实验（浓缩、超声处理、烟雾化、离心等）；对已知的可进行有效治疗的微生物进行任何的扩展其宿主范围或改变药物敏感性的遗传操作；本地的预防和治疗能力。2.3 对不明生物样品的评估在有足够信息的情况用上述的方法进行危险评估是十分有效的。然而，在一些情况下所获得的信息不足于进行准确的风险评估，例如在处理一些临床样品或野外收集的疫情标本时。在这些情况下，对样品进行操作时应谨慎地采用一些保守的措施。目前已经采用的通用的主要生物安全事项，采用保护性的装备，如手套、工作服、眼罩等。在对样品进行操作时最低应

14、采用生物安全2级的保护措施。样品的运送应符合国家或国际的规定。了解以下信息有助于确定操作这些样品的风险： 关于相关患者的医疗数据； 流行病学数据（发病率和死亡率，可能的传播途径，其他疫病爆发的调查数据）； 样品来源地的地理学信息。 2.4 对遗传修饰微生物的危险评估对遗传修饰微生物（genetically modified microorganisms,GMMOs）进行危险度评估时，必须注意评估时要包括潜在危害的程度和危害结果的严重性，以及危害发生的可能性或频率。如果操作对象是一种低危害性且已被充分认识的微生物（如大肠杆菌），可以很快得出评估结果，并可以以一种简单的方式描述，例如“很显然风险程

15、度是低的”或者“所采取的控制措施是十分足够的”。而对于一种具有较大危险性且有许多方面尚不清楚的微生物，这种评估就必须广泛且全面，并十分注意要获得和掌握最新的研究数据。评估时应注意以下事项:A宿主/受体相关的危害宿主的易感性宿主的致病性，包括毒性、传染性、毒素产生和宿主范围的变化受体的免疫程度和免疫系统的状态结果的严重性B插入基因导致的危害假如插入的外源基因的表达产物具有可能带来危害的生物活性，就必须进行危险评估。毒素细胞因子激素基因表达调控因子毒性因子或增强子抗性基因过敏原考虑这些情况时应该注意表达水平的高低与生物活性的关系。C致病性状的改变带来的危害许多情况下并没有对某些可产生危害因子的基因

16、进行修改，但仍可引起非致病或致病性状的改变，如对正常基因的修饰可能会改变致病性。在鉴定这些危害时，需注意以下几点。（此处所列尚不全面，需要补充）是否增加了感染性或致病性？插入外源基因是否会导致受体中沉默基因的恢复表达？外源基因的编码产物是否是来源于其他机体的致病性决定因子（细菌毒素、整合因子、膜糖蛋白和脂多糖的表面结构）？假如外源基因包含致病决定因子，其给受体微生物带来的致病性是否能被预知？是否有治疗手段?遗传修饰后的微生物对抗生素或其他治疗性药物的敏感性是否发生了变化？是否具有可消灭修饰后微生物的手段?其他需要考虑的因素还包括是否存在潜在的致癌基因，以及所使用的相关细胞株的潜在危害性如某些未

17、知因子的存在。三中心生物实验安全技术规范1实验样品的安全操作在实验室内以不合适的方式收集、传递、接收样本，对操作者本人会带来很大的危险。A样品的容器：样品的容器可用玻璃或塑料制成。必须十分结实，当正确地盖上盖子或塞子后不会发生泄漏。在容器外壁不能有样品残留。容器必须正确地标记以便于辨认。容器内样品的说明书不得包裹于容器上，而应放置在一个独立分离的可防水的地方。B利用工具传送样品：为了避免意外的泄漏和溢出，应使用二级容器例如盒子，和合适的架子保证样品容器正立。二级容器可用金属和塑料制成，能够被高压消毒及抗化学消毒。二级容器必须经常性地消毒。C样品的接收：指定一个固定的房间用于样品接收。D包装的打

18、开：接收和打开样品包装的工作人员必须注意相关的潜在危险因素，必须接受充分的训练，采纳全部注意事项，特别在处理破损或泄漏的容器时。样品必须在生物安全柜中打开包装。要准备好消毒剂以备随时使用。 2移液器的使用和移液操作（1）严格禁止用嘴进行移液操作；（2）所有的移液器都带有棉花塞以减少移液操作的污染；（3）不能在有感染物的液体上吹气；（4）感染性物质不能通过用移液器反复吹吸进行混合；（5）不能用力用移液器排放液体；（6）被污染的移液器必须完全浸泡在合适的消毒液中，该消毒液放置于一个坚固的容器中。在做任何处理前必须在消毒液中浸泡18-24小时；（7）废弃枪头的收集容器必须放有消毒液；（8）注射器不能

19、被当作移液器使用。（9）9为避免偶然发生的感染物质的滴漏事故，在工作区需准备消毒液浸湿的布片或吸水纸，在使用后必须消毒或作为感染性废物处理。 3避免感染物的扩散（1）为避免微生物转接环中转接物的脱落，环的直径应2-3mm且完全闭合，环柄长度不应超过6cm以减小振动；（2）要进行高压灭菌和/或处理的、丢弃的样品和培养物应放于防漏容器中，例如实验室垃圾袋。（3）每次工作后工作区域必须用合适的方法净化。4生物安全柜的使用（1）参阅国家标准和相关文献，生物安全柜的使用和限制应该解释给所有可能的使用人员。应给工作人员分发文字形式的操作方法或安全或操作手册。特别要申明，安全柜不能保护操作者免受溢出、破损或

20、差的试验技能所造成的风险。（2）安全柜如果工作不正常一定不要使用。（3）安全柜在使用中玻璃观察面板一定不要打开。（4）安全柜中的仪器和材料一定要保持最少，不要阻塞柜中的空气循环。材料在放入柜中的工作区域之前要进行表面净化。（5）所有的工作都必须在工作面的中间和后部进行，应通过观察面板可看到。（6）操作者后面的走动应尽量减少。（7）操作者不应该胳膊频繁进出而干扰空气流动。（8）前面的透气孔不要用短笺、吸管或其他材料堵塞，因为这会破坏气流，可能引起材料污染和操作者的暴露。（9）工作完成和每天结束时应该用适当的消毒剂擦拭生物安全柜表面。（10）工作开始前和结束后柜的风扇至少应运行5分钟。5避免吞入感

21、染物及接触到皮肤和眼睛（1）微生物操作中产生的大颗粒和液滴会快速沉积于工作台表面和操作者的手上，应戴上一次性手套。实验室工作人员应避免接触到嘴、眼睛和脸。（2）在实验室一定不能消费或储存食物和饮料。（3）实验室不应咀嚼口香糖。（4）实验室里不应使用化妆品。（5）在任何可能引起有潜在感染能力的物质飞溅的操作中，应遮挡住或保护脸、眼睛和嘴。6避免被注射入感染物（1）细心地进行操作，避免用破损或者有缺口的玻璃器具进行接种，尽量应用塑料器具；（2）注射可能来自皮下注射针头、玻璃巴斯德吸管和破玻璃的意外事件；（3）针头不要翻新使用。用过的针头应丢弃到有盖的防刺穿的容器中。7血清分离（1）只有经过正规系统

22、训练的人员才可以进行此项工作。（2）操作时应戴上手套，以及保护眼睛和粘膜的保护装置。（3）好的操作技术可以避免飞溅和气溶胶或使其降到最低。血液和血清应该用吸管吸取而不是倒，绝对禁止用嘴吸吸管。（4）使用后，吸管应完全浸没于次氯酸盐或其他消毒剂中。处理或清洗灭菌以便再使用之前吸管应泡在消毒液中至少18小时。（5）含有血凝块等要丢弃的标本管应放于适当的防漏容器中进行高压灭菌或焚烧。（6）消毒剂应该可随手拿到以清理飞溅和溢出。8离心机的使用（1）离心机应按照生产厂家的指导操作。（2）离心机应放置合适的高度，使得低于平均高度的工作人员也可以看到离心腔，以正确放置转头。（3）离心管和在离心机中使用的标本

23、容器应用厚壁玻璃或更合适的塑料制成，用前要检查有无缺损。（4）管子和样品容器应安全地盖上盖子（可能的话用螺口盖）进行离心。（5）离心管一定要在生物安全柜中加样、平衡、密封和打开。（6）离心管和转子应通过重量配对，与管子正确地平衡。（7）应该按照生产厂家地指导留液面和离心管边缘的空间。（8）平衡空转子使用蒸馏水。（9）危险达到3和4的微生物一定要使用可密封的安全杯。（10）应每天检查看是否有腐蚀和小裂缝的迹象。（11）每次使用后都应清洁转子、转头和离心机内腔。（12）使用后，转子应倒置存放，以排出平衡液体。（13）感染性的、空气传播的颗粒使用离心机可能会被吹出来。如果离心机放在传统的前方开放的一

24、级或二级生物安全柜中，这些颗粒飞行的速度太快不会被安全柜的空气流束缚。三级安全柜中的封闭离心机防止放出的气溶胶四处扩散，但是好的离心机技术和盖好盖子的离心管提供了足够保护，避免接触感染性的气溶胶和分散的颗粒。9均质器、摇床、混合器的使用（1）家用（厨房）匀浆器不能用于实验室，因为可能会泄漏或释放气溶胶。用实验室混合器和匀浆机更安全。（2）盖子和杯子或瓶子应良好，没有裂缝和变形。盖子应合适并且垫圈应良好。（3）在操作匀浆器、振荡器和超声波仪过程中导管内会压力上升，含有感染性物质的气溶胶可能从帽子和导管间放出。推荐使用塑料的特别是使用聚四氟乙烯（PTFE）导管，因为玻璃导管可能破裂，放出感染性物质

25、并且可能伤到操作者。（4）在使用中，匀浆器、振荡器和超声波仪应该用结实的透明塑料套盖上，用后塑料套应消毒。只要有可能，这些机器就应该置于生物安全柜中覆盖在塑料套下操作。（5）操作结束后容器应该在生物安全柜中打开。10冰箱和制冷机的使用与注意事项（1）冰箱、低温制冷机应该定期除霜和清洁，清除在储存中破损的安培瓶、试管等，清理中应该戴面罩和厚的手套。清理后，内表面应消毒；（2）所有保存于冰箱中的容器都应清楚地标明其内容物名字、保存日期和保存人的名字。没有标签和过时的材料应高温灭菌后丢弃；（3）保存的物品一定要有详细目录；（4）不能防爆的易燃溶液不能保存在冰箱中，这样的提示应置于冰箱门上。11装有冻

26、干感染物的安瓿的打开打开装有冻干物质的安瓿时要小心，因为安瓿中的物质可能在较低的压力下，突然进入的空气可能将部分物质吹入大气中。安瓿应该在生物安全柜中打开。推荐用以下的程序打开安瓿。（1）首先净化安安瓿的外表面。（2）如果有棉花或纤维塞，靠近其中部的管上做一个文件标记。（3）在手上垫上一块酒精浸过的棉花后拿住安瓿，从标记处断开安瓿。（4）轻轻移去上部，将其作为受污染的物质处理。（5）如果塞子依然在安瓿中的物质的顶部，用无菌镊子将其移去。（6）向安瓿缓慢加入液体重悬，避免起泡。12装有感染物的安瓿的保存装有感染性物质的安瓿千万不要浸入液氮，因为将有裂缝和未密封好的安瓿取出时可能会发生破裂和爆炸。

27、如果需要特别低的温度，安瓿应只能保存在液氮的气相中。另外，感染性物质应保存于低温冷冻箱或干冰上。在将安瓿从冷藏处拿出时，实验室工作人员应戴眼罩和手套。 用这些方式保存的安瓿取出时应对外表面进行消毒。13处理血液、体液、组织或排泄物时的特别注意事项下面列出的注意事项用于保护实验室工作人员免受血液中病原体的感染。收集、标记和运输标本1应遵照通用的注意事项，所有的步骤都应该戴手套。2应该由受过训练的人员从病人和动物收集血液。3对于静脉切开术，应该用一次性的真空装置(可以使得血液直接收集到有塞子的运输和/或培养管，使用后自动报废针头)代替传统的针头和注射器。4管子应放在适当的容器中运到实验室和实验室的

28、工具中。要求表格应放在分开的防水袋子或封套中。5接收人员不应打开这些袋子。实验室密封1诊断工作可以在基本实验室（生物安全2级）完成，最好在专门用于此目的的实验室完成。2涉及感染性微生物大体积或高浓度传播的研究和开发工作可能需要生物安全3级或密封水平更高密封实验室。打开标本管和样品物1标本管应在一级或二级生物安全柜打开。2必须戴手套，也推荐进行眼睛和粘膜保护（护目镜或隔离罩）。3防护服外应加塑料围裙。4应垫一张纸或纱布去拿塞子以防喷洒。玻璃和锐器1尽量用塑料代替玻璃。只有实验室级（硼硅酸盐）玻璃可以使用，任何有缺口和裂缝的器具都应该丢弃。2皮下注射针头一定不要作为移液管，可以使用钝的套管。用于显

29、微检查的薄膜和涂片显微检查中对血液、痰液和粪便样品进行的固定和染色不一定杀死涂片上所有的生物体和病毒。这些物品应用镊子操作，适当储存，处理前要消毒和/或高压灭菌。自动装置（超声波仪，涡旋混合器）1装置应该是封闭型的，以防液滴和气溶胶的扩散。2废水应收集在封闭的导管里以进一步高压灭菌和/或处理。3每次使用后装置都应该按照生产厂家的说明消毒。组织1应该使用福尔马林固定液。小的标本例如来自针头活组织检查的标本在几个小时内就可以固定和净化，而大的标本可能需要几天。2应避免冰冻切片，如果实在需要进行冰冻切片，应遮盖低温箱并且操作者应戴安全罩。要清除污染，仪器的温度应升到20度。清除污染推荐用次氯酸盐和高

30、浓度的消毒剂清除污染。用于一般使用时，新鲜配制的次氯酸盐溶液中氯含量应达到1g/L，用于清除血液溢出时应达到10g/L。也可以使用戊二醛净化表面。四中心日常维护的安全注意事项1实验室和仪器设备维护对实验室及仪器设备的维护和检修，是安全程序中十分重要的一环。对于日常维护，出于方便同时也考虑到安全因素，由赵扬统一负责，安排实验室内部人员完成。当需要实验室外的工程人员进行特定工作时，最好能让他们对实验工作性质有一定了解。当他们在实验室内工作时，需要实验室工作人员做更为严格的监督，具体负责的人员由赵扬直接指定。为了应对将来可能的各种突发事件，该与当地的工程建筑商建立良好的联系，并使他们尽可能熟悉实验室的建筑设备与工作。大型设备的相关使用管理人员需要接受专门的相关安全培训。2实验室清洁维护 实验室清洁维护由各实验室安全责任人直接管理，相关人事变动须及时通知生物安全工作组组长。所有清洁维护人员都必须接受相应的安全培训并遵守下述“中心清洁维护安全准则”。中心清洁维护安全准则（1）要经常洗手，特别是在离开实验区或进入卫生间或进入值班室；（2）严禁在实验室内饮食或上（卸）妆。以上事宜请于非实验区房间内完成；（3）未经实验人员许可严禁清洁任何工作台；（4）如果在清洁过程中发生任何意外，或者弄倒或打破任何瓶子、管子、罐子或设备部件，应立即告知生物安全工作组组长