土壤实验测定方法 2.docx

1、土壤实验测定方法 2测土配方施肥测试项目1、有机质2、速效磷3、速效钾4、碱解氮5、缓效钾6、全氮7、电导与pH8、植物氮磷钾9、植物微量元素的测定(Fe、Mn、Cu、Zn、Ca、Mg)10、 土壤中的微量元素(Fe、Mn、Cu、Zn) 11、 水中铵态氮的测定(靛酚蓝比色法)12、 土壤有效S的测定13、 硝态氮的测定一、有机质的测定(重铬酸钾外加热法)试剂:1、0、2mol/L的FeSO4溶液:56、0gFeSO4(化学纯)溶于1L水,再加5ml浓硫酸。2、重铬酸钾-浓硫酸混合液:称39、23g(通常可直接称40g),加1L水溶解,在加1L浓硫酸。(为防止结晶,经验就是400ml水溶解重铬

2、酸钾,用600ml水稀释浓硫酸,在混合)。3、邻啡啰啉指示剂:1、485g邻啡啰啉+0、695g FeSO4溶于100ml水里,储存在棕色瓶中。4、Ag2SO4:防止氧化物(Cl-)的干扰,约加0、1g左右。(石灰土壤一般不用)5、重铬酸钾标准液的配制:39、2245g重铬酸钾(分析纯)加400ml水,加热溶解,定容1L。设备:消煮炉、消煮管、万分之一天平、2L大烧杯、大储存瓶、瓶口分液器(10ml)、酸式滴定管、三角瓶、洗瓶实验步骤:1、称0、1000-0、5000g(0、25mm)土样至消煮管,加入10ml重铬酸钾-浓硫酸混合液,摇匀。2、放入消煮炉(190)沸5min。3、完全转移至三角

3、瓶中,加入指示剂,用硫酸亚铁滴定。(橙黄蓝绿转红)注意:滴至快终点时用洗瓶洗壁,减少误差。 每批样3空白。 每天对FeSO4标定一次。(标定方法2:0、2000g重铬酸钾溶于5070ml水+5ml浓硫酸+邻啡啰啉指示剂)计算公式:方法1:C FeSO4=(标准重铬酸钾质量/M重铬酸钾)*6*5/消耗FeSO4体积 5表示每次吸重铬酸钾标准液5ml 方法2:C FeSO4=0、2000/(消耗FeSO4体积*0、04904)ppm 有机质(g/Kg)=C FeSO4*(V0-V)*10-3*3*1、1*1、724*1000/样重加Ag2SO4时,校正系数变为1、04。(1、1为氧化校正系数) 有

4、机质(g/Kg)=C FeSO4*(V0-V)*10-3*3*1、1*1、724*1000/样重 2重铬酸钾+3C重铬酸钾+ 6FeSO4滴定平行误差0、5g/kg二、速效磷(碳酸氢钠浸提硫酸钼锑抗比色法)试剂:1、4mol/L NaOH:4g NaOH+25ml水2、0、5mol/L NaHCO3浸提剂:42g NaHCO3+1L水,用4mol/L NaOH调pH8、53、稀硫酸溶液:153ml浓硫酸+400ml水,待其冷却4、5g/L酒石酸锑钾溶液:0、5g酒石酸锑钾+100ml水5、6、5mol/L钼锑抗存储液:10g钼酸铵+300ml水,水浴加热到60使其溶解,冷却后将配好的稀硫酸溶液

5、缓缓到入钼酸铵溶液,在冷却后,加入100ml 5g/L的酒石酸锑钾溶液,总体积定容1L,存储于棕色瓶中,可以长期保存。6、钼锑抗显色剂:称1、5g抗坏血酸+100ml钼锑抗存储液。(现配现用,24h以内)7、二硝基酚指示剂:0、2g 2,6二硝基酚溶于100ml水中8、无磷活性炭:用1:1的盐酸(1L水+1L浓盐酸)浸泡活性炭24h,用NaHCO3淋洗5次,再用水淋洗5次,检查至无磷为止。(AgNO3检查)9、1000ppm P标准储存液:取105烘干4h的纯磷酸二氢钾(优级纯)0、4390g+水200ml+5ml浓硫酸,定容1L10、P标准液:取磷标准储存液准确稀释20倍,其浓度为5mg/L

6、,不易长期保存。设备:液枪(1ml、5ml、10ml)、小试管、分光光度计、混匀器、瓶口分液器(50ml)、细口瓶、振荡器、万分之一、百分之一天平、滤纸、烘箱实验步骤:1、称2、50g(1mm)土样至细口瓶(必要时小半勺无磷活性炭)+50ml NaHCO3,振荡30min2、过滤,吸2ml待测液至小试管+1ml显色剂,摇匀(除CO2)+7ml水,摇匀,30min后在660nm下比色(预热30min左右)。722分光光度计就是880nm,721就是700nm。标准曲线的制作:5ppm标磷:标P00、20、40、60、811、2空白2222222显色剂1111111水76、86、66、46、26、

7、05、8对应浓度00、10、20、30、40、50、6注意:X比色值(在Excel中第一列) Y对应浓度(在Excel中第二列)计算公式:根据标准曲线算出对应P的浓度土壤中含磷量(mg/Kg)=C*100三、速效钾(乙酸铵提取法)试剂:1、1mol的乙酸铵溶液:取77、08g乙酸铵+水+用乙酸(氨水)用pH试纸调节pH至7、0,后定容至1L 方法二:用冰乙酸57ml与浓氨水69ml+水+用乙酸(氨水)用酸度计(试纸)调节pH至7、0,后定容至1L3、钾标准溶液的配制(浓度为100ppm)取110烘干2h的纯氯化钾0、1907g+水定容1L,可长期保存 设备:试管、液枪(1ml、5ml、10ml

8、)、火焰光度计、混匀器、瓶口分液器(50ml)、振荡器、细口瓶、万分之一天平、百分之一天平、滤纸、烘箱、100ml的容量瓶、1L的容量瓶 步骤:1、浸提液的制备:称1mm土样5g于细口瓶中,用瓶口分液器加50ml乙酸铵,恒温震荡(170转速)30min,过滤到试管里,做空白2、浸提液的测定:用火焰光度计直接测定(预热30min左右)标准曲线的绘制:k 100ppm标K(100ppm)00、51、01、52、02、53、0乙酸铵定容10ml定容10ml定容10ml定容10ml定容10ml定容10ml定容10ml对应浓度0注意:X火焰光度值(在Excel第一列) Y对应浓度(在Excel第二列)计

9、算公式: 钾含量(mg/Kg)=C*10注意:此法只适用于石灰性土壤=四、碱解氮(扩散法)试剂:1、1N的NaOH:40、0gNaOH+水 定容至1L2、混合指示剂:0、099g溴甲酚绿+0、066g甲基红溶于100ml乙醇3、硼酸指示剂:20g硼酸溶于950ml热蒸馏水,冷却后+20ml混合指示剂,混匀,+1N NaOH至溶液呈紫红色(pH4、5),稀释至1L4、0、005mol/L硫酸标准溶液:0、128ml浓硫酸稀释至1L,用Na2CO3标定5、1甲基橙指示剂:0、1g甲基橙+水至100ml6、Na2CO3标定溶液:0、2077g无水Na2CO3+水至1L7、碱性胶:40g阿拉伯胶+60

10、ml水(70-80)冷却后+20ml甘油+20ml饱与碳酸钾溶液8、硫酸亚铁粉末:粉碎后密闭阴凉保存设备:橡皮筋、扩散皿、液枪(2ml)、注射器(10ml)、半微量滴定管、烘箱步骤:1、称(1mm)土样2、00g+1、00g硫酸亚铁于外室2、加硼酸指示剂2、0ml于内室3、涂胶4、加盖,加10mlNaOH(1N)于外室5、401烘24h0、5h6、取出后用稀硫酸滴定。(蓝色微红色)标准酸的标定:用硫酸标准液滴定Na2CO3标定溶液+1d甲基橙(终点为橙红色)清洗扩散皿时应用稀盐酸浸泡20min计算结果:碱解氮含量(mg/Kg)=(V-V0)*CH+*14*1000/2、00 两次平行误差小于5

11、mg/Kg五、缓效钾试剂:1、1N HNO3:62、5ml浓硝酸+水稀释至1L2、1000ppmK标准溶液:1、9070g/百分含量定容至一升设备:消煮炉、消煮管、瓶口分液器(50ml)、小试管、试管架、滤纸、液枪(1ml、10ml)、火焰光度计、混匀器步骤:1、称2、500g(1mm)至消煮管+25、0ml 1N 硝酸,在210沸10min2、冷却后,过滤3、吸1ml至小试管+9、0ml水,火焰光度计测定(预热30min左右)标准曲线的制作:标钾(100ppm)01N HNO35、0ml5、0ml5、0ml5、0ml5、0ml5、0ml5、0ml对应浓度、0定容100ml注意:X火焰光度值(

12、在Excel第一列) Y对应浓度(在Excel第二列)计算公式:钾含量(mg/kg)=C*200 六、全氮的测定试剂:1、催化剂:硫酸钾100g+硫酸铜10g+硒1g2、浓硫酸(化学纯)3、10mol/L NaOH 溶液:400g NaOH +500ml 无CO2蒸馏水,定容至1L4、混合指示剂:0、099g溴甲酚绿+0、066g甲基红+100ml(95%)乙醇5、硼酸指示剂:20g硼酸+950ml蒸馏水+20ml混合指示剂+0、1N NaOH至紫红色6、0、02mol/L硫酸标准液:0、1mol/L硫酸,再稀释5倍设备:消煮管、半微量定氮蒸馏器、半微量滴定管(10ml)消煮步骤:1、称0、5

13、000-1、0000g至消煮管+1、1g催化剂+5-10ml浓硫酸2、小火加热,泡沫消失提温,至灰白带绿后再煮1h(硫酸高度在试管1/3处)蒸馏法测定步骤:(200)1、将所有消煮液转入蒸馏室中2、蒸馏液达到40-50ml时停止蒸馏3、用0、02N硫酸滴定计算: N(g/kg)=(V-V0)*CH+*14*(V总/V吸)/m允许误差0、005%土壤全N 消煮与全K、P一样。称取0、4g左右土样,放入消煮馆。加入少许水润湿,再加入5mlH2SO4(浓)在260左右消煮50min。然后再加入1滴高氯酸,半小时后再加1滴高氯酸,半小时后再加1滴高氯酸。消煮馆内接近白色在消煮1h后取出,若不就是白色继

14、续加高氯酸。 取出后冷却,加水定容至50ml,将上澄清液倒入白色塑料瓶中,保存。吸取样液1ml,再加入2滴中性红溶液(0、5g溶于100ml水),溶液成紫色或紫红色然后再用NaOH溶液调制棕黄色。继续在样液中加入次氯酸钠碱性溶液1ml+1ml苯酚溶液。摇匀,在40下放半小时后,加入1ml掩蔽剂,以溶解可能产生的沉淀物定容10ml。最后用分光光度计,波长为625nm。试剂:1、称取苯酚10g与亚硝基铁氰化钠100mg稀释至1L。此试剂不稳定,须储存于棕色瓶中,在4冰箱中保存。2、次氯酸钠碱性溶液:称取10gNaOH、7、06g磷酸氢二钠、31、8g磷酸钠、10ml次氯酸钠溶于水,定容至1L。存于

15、棕色瓶中,在4冰箱中保存。3、掩蔽剂:将400g/L的酒石酸钾钠与100g/L的EDTA二钠盐(乙二胺四乙酸钠)溶液等体积混合。每100ml混合液中加入10mol/LNaOH溶液0、5ml。4、标液:称取干燥的0、4717g硫酸铵溶于水,定容1L,制备成100ug/ml的储存液。使用前再用水稀释40倍,即配成2、5ug/ml的标准溶液备用。标曲:标液0ml0、4ml0、8ml1、2ml1、6ml2、0ml次氯酸钠碱性溶液1ml1ml1ml1ml1ml1ml苯酚溶液1ml1ml1ml1ml1ml1ml0、5小时掩蔽剂1ml1ml1ml1ml1ml1ml定容10ml七、电导与pH的测定试剂:1、水

16、步骤:1、称20、00(1mm)土样至细口瓶2、加50、0ml水振荡(手震)3min3、在酸度计与电导仪测定八、植物氮磷钾的测定(浓硫酸、双氧水消煮法,奈氏比色法,钒钼黄比色法、火焰光度计法)消煮试剂试剂:1、浓硫酸2、双氧水(30)消煮设备:消煮管、消煮炉消煮步骤:1、称植物样品(0、250、5mm)0、20000、4000g(部位不同则称的量不同)(茎0、35-0、4000、籽 0、2500-0、3000,叶0、2500-0、3000,根0、3500-0、4000壳0、3500-0、4000絮0、4000-0、4500)于消煮管中+浓硫酸5ml,最好放置过夜2、先加双氧水2ml,置于消煮炉

17、上(300),以后每30min滴加10d双氧水,至消煮液清亮后在加热30min3、冷却后,定容50ml,转移到塑料瓶中备用,做空白（一）氮的测定 试剂:1、100g/L酒石酸钠溶液:称100g酒石酸钠+水定容至1L 2、100g/L KOH溶液:称100gKOH+水定容至1L 3、奈氏试剂:45、0g HgI2 +35、0g KI+少量水+112、0g KOH定容至1L,放置数日后过滤,将上清液放入棕色瓶中备用 4、100ppm的氮储存液:称0、3817g(纯) NH4Cl(分析纯)+水定容1L,此溶液为储备液,用时吸取此液50ml,稀释至500ml即为10ppm的工作标准液设备:液枪(1ml

18、、5ml、10ml)、分光光度计、混匀器步骤:1、KOH量的确定:吸稀释十倍空白待测液1ml+酚酞指示剂,用KOH滴定至刚出现红色记录所用的体积数。(为了方便一般我们将koH的浓度调到刚好加lml的KOH)2、吸稀释十倍待测液1ml+酒石酸钠0、5ml+充分摇匀+确定的1mlKOH的+奈氏试剂0、5ml+水7ml(最后体积为10ml)3、15min后开始比色,420nm(预热30min左右)标准曲线的绘制:N标液10ppm00、51、01、52、02、53、0空白1111111酒石酸钠0、50、50、50、50、50、50、5KOH(1)(1)(1)(1)(1)(1)(1)奈氏试剂0、50、5

19、0、50、50、50、50、5补水7、06、56、05、55、04、54、0对应浓度00、51、01、52、02、53、0注意:X火焰光度值(在Excel第一列) Y对应浓度(在Excel第二列)计算:氮含量(g/kg)=C*10*50*10*10-3/样重(二)磷的测定(钒钼黄比色法)试剂:1、钒钼酸铵试剂:称12、5g钼酸铵+200ml水,0、625g偏钒酸铵+150ml沸水+125ml浓硝酸,将钼酸铵溶液缓缓加入钒酸铵溶液+水稀释至500ml2、6N NaOH溶液:24gNaOH溶于水,稀释至100ml3、2,6-二硝基酚指示剂:0、25g2,6-二硝基酚+100ml水(变色范围:2、4

20、,无色;4、0,黄色)4、50ppmP标溶液:称105烘干的(纯)KH2PO40、2195g+水至1000ml容量瓶,+水约400ml,+5ml浓硫酸,用水定容步骤:1、NaOH量的确定:吸空白/待测液2ml+2,6-二硝基酚指示剂,用NaOH滴定至刚出现黄色记录所用体积(为了方便一般我们将NaoH的浓度调到刚好加lml的NaoH) 吸待测液2、0ml至小试管+1mlNaOH的量+钒钼酸铵试剂2ml+水5ml(最后体积为10ml)2、30min后450nm比色(预热30min左右)标曲的制作:P标50ppm00、40、81、21、62、02、4空白2222222NaOH1111111显色剂22

21、22222水54、64、2383、432、6对应浓度02、04、06、08、010、012、0计算:磷含量(g/kg)= C*V*稀释倍数*10-3/样重（三）钾的测定(火焰光度计法)试剂:1、100ppm K的标准液:0、1907g(纯)KCl(110烘干)+水定容1L步骤:1、吸1ml待测液至小试管+9ml水2、火焰光度计测量(预热30min左右)标准曲线的制作:K100ppm0水(加10ml空白消煮液) 然后定容至100ml对应浓度(ppm)0计算:钾含量(g/kg)=C*V*稀释倍数*10-3/样重九、植物微量元素的测定消煮试剂试剂:1、浓硝酸(优级纯)2、高氯酸(优级纯)消煮步骤:1

22、、按比例称取植物样(各个部分),总计1、0000g2、加浓硝酸10、0ml,消煮,近干时加5、0ml高氯酸,至清亮为止(经验消煮24h)3、煮好后定容至50、0ml,塑料瓶中存储试剂:1、1000ppm Fe:称1、000gFe(光谱纯)+60ml HCl(1:1)+少许硝酸氧化+水 稀释至1L(CHCl=0、3mol/L)2、1000ppm Mn:称1、0000g纯Mn+硫酸(可使其全溶即可)+水定容至1L3、1000ppm Cu:称1、0000g纯铜(用CuSO4)+1:1 HNO3 50ml+水定容至1L4、1000ppm Zn:称1、0000g纯锌+1:1 HCl 50ml+水定容至1

23、L5、1000ppm Ca:称2、4972 g 纯(CaCO3)+HCl(可使其全溶即可)加热排气+水定容至1L6、1000ppm Mg:称1、0000g纯镁+HCl(可使其全溶即可)加热排气+水定容至1L7、5%LaCl3:称50、00gLaCl3+水定容至1L步骤:1、吸1ml待测液于小试管+0、5ml LaCl3+8、5ml水2、Cu、Mn、Zn稀释1次3、Fe稀释2次4、Ca、Mg稀释3次5、在原子吸收上测定(预热30min左右)注意:每次稀释都需要加0、5ml LaCl3标准曲线的制作:1、Fe: 100ppm标Fe02、55、010、015、0水定容至100ml对应浓度02、55、

24、010、015、02、Mn:100ppm标Mn01、02、03、04、05、0水定容至100ml对应浓度0123453、Cu:100ppm标Cu00、51、01、52、0水定容至100ml对应浓度00、51、01、52、04、Zn:100ppm标Zn00、40、81、21、6水定容至100ml对应浓度00、40、81、21、65、Ca:100ppm标Ca01、02、03、04、05、0水定容至100mlLaCl3555555对应浓度01、02、03、04、05、06、Mg:100ppm标Mg00、10、20、30、40、5水定容至100mlLaCl3555555对应浓度00、10、20、30、

25、40、5计算:含量(mg/Kg)=C*V*稀释倍数/样重十 土壤微量元素测定(原子吸收)试剂:1、dtpa:称1、967gDTPA溶于13、3ml TEA(三乙醇胺)+少许水+1、47gCaCl2定容至一升(用6N的HCl与6N NaOH的)调节PH=7、3 2、标液同上,全就是100ppm,用DPTA稀释设备:原子吸收仪、 细口瓶、摇床、滤纸、塑料瓶(50ml)、塞子步骤1、称20、00g 1mm 至细口瓶+40ml dpta 振荡(170转速)2h 2、过滤至塑料瓶3、测定(预热30min左右)十一、土壤有效S的测定:氯化钙浸提-硫酸钡比浊法(只适合碱性土) (1) 浸提剂:氯化钙浸提剂:

26、称取氯化钙(CacL2,分析纯)1、5g溶于水,稀释至1L、(2) 过氧化氢。(w(H2O2)=30%),化学纯。 (3)HCL 1:4溶液。一份浓盐酸(HCL,P=1、19g/ml,化学纯)与四分水混合。(4)氯化钡晶粒。(BaCL*2H2O,分析纯)(5)100ug/ml硫(S)标准液。称硫酸钾(K2SO4,分析纯)0、5636g溶于水,定容1L。步骤:称取10、00g土样至细口瓶中,加浸提剂50ml震荡1小时,过滤,吸取10ml至大试管中,加热,加23滴双氧水,继续加热待双氧水分解完去下,加1ml 1:4 HCL, 再加入2ml 阿拉伯胶液定容至50ml,加入0、5g BaCL2摇匀,5

27、30分钟内测定。 标曲线:10ppm标准液。标准S(10ppm)00、41、223、244、8Hcl(ml)0、20、20、20、20、20、20、2阿拉伯胶(ml)0、40、40、40、40、40、40、4水(ml)9、498、27、46、25、44、6氯化钡(g)0、10、10、10、10、10、10、1十二、水中铵态氮的测定(靛酚蓝比色法)药品1.酚液 10g苯酚(分析纯)与100mg硝普钠(剧毒)溶于少量水稀释至1升,置于棕色瓶中 4摄氏度冰箱中保存。2.次氯酸钠碱性溶液 10g氢氧化钠(分析纯),7、06g磷酸氢二钠(分析纯)31、8g磷酸三钠(分析纯)与10ml次氯酸钠(含次氯酸钠5%的漂白剂溶液)溶于一升,保存方法同酚溶液。3.掩蔽剂 酒石酸钾钠溶液(400g/l)与EDTA二钠盐 100g/L)等体积混合,每100ml混合液中加0、5ml氢氧化钠溶液(10mol/L),既得清亮的掩蔽剂溶液。4.0、4717硫酸铵分析纯(烘干)定容至一升,100mg/L。步骤 1、吸取水样2ml到小试管。2、加5、8mlH2O。3、依次+1ml酚溶液+1ml次氯酸钠碱性溶液,摇匀,在室温20摄氏度下放置1h。 4、再加掩蔽剂0、2ml ,摇匀,625nm波长处比色,空白调零。表准曲线制作(NH4)2SO4(5pp