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1、掌握和学习生物分子基础实验的实验原理和实验方法、实验技能，可帮助学生更好地理解和掌握各基础学科的基本知识和实验操作技能。生物分子基础实验课程是医学类的各专业的基础实验课程，是一门实验技术性课程，该课程主要面向全校医学、生命科学及药学、生物医学工程等学科专业学生开设的基础医学公选课，是医学各专业（预防医学、临床医学、口腔医学、基础医学、法医学）学生的必修课，也是医学留学生的必修课。生物分子基础实验课程内容涉及医学生物化学、医学分子生物学、医学免疫学等三门学科的实践教学内容，在学科上，涵盖了细胞生物学、蛋白质生物化学、分子生物学、结构基因组学、功能基因组学、分子病毒学、免疫学等内容。根据教学计划和

2、培养目标的要求，结合基础医学实验教学的改革实际，我们编制了生物分子基础实验课程教学大纲。生物分子基础实验课程包括13个实验教学内容，课程的设置安排体现在实验操作技能及实验安全意识培养的基础内容、学生综合能力培养的综合性实验、创新能力培养的实验设计讨论课组成。学生通过课程教学内容学习能够达到实际运用和解决实际问题的能力、对实验采用的原理、方法、步骤清晰明确、具备一定的创新能力，杜绝“饭来张口、衣来伸手”式的实验学习方式。本课程实验以生物分子类型（蛋白质、基因及抗原、抗体等免疫分子）的实验项目为主线，从蛋白质的分离、纯化以及抗原抗体反应、免疫分子复合物形成的实验观察入手，训练学生的基本生物化学和医

3、学免疫学实验技能，从基因克隆、重组与鉴定、表达等方面入手，训练学生掌握分子生物学基本的实验方法和实验技能，使学生对分子生物学方法的应用和意义有具体而全面的理解，在可能的情况下，同时提供多种实验材料让学生自行设计和准备实验，培养其动手能力、独立科研能力和科学、严谨、实事求是的学风以及认真负责、严肃有序的科学态度。三、教学内容章节实验名称实验内容学时分配附注1实验常用仪器设备原理操作、实验室安全介绍1. 介绍实验室规章制度；2. 实验课程安排、实验的基本要求；3. 实验室的安全、卫生要求*；4. 掌握常用实验仪器设备的原理及操作*；5. 实验报告的书写要求*；6. 实验室仪器参观介绍。4*重点或*

4、难点2激素对血糖浓度的影响1. 熟悉不同激素的作用，了解认识对升、降血糖的不同影响，以及血糖代谢的一些基本途径；2. 掌握家兔实验禁食时间、抽取血液样品的操作、注射激素等方法*；3. 掌握血糖的测定（吴宪-Foling法）*，本实验的测定原理，影响测定的因素*，了解其它测定的方法；4. 掌握分光光度计操作、熟练运用浓度计算公式*。5*重点或*难点3血清蛋白质醋酸纤维素膜和聚丙烯酰胺凝胶电泳1. 掌握血清电泳的基本原理*；2. 掌握不同电泳介质的电泳方法和操作*；3. 掌握血清样品分离的蛋白质染色*；4. 明确区分条带的不同蛋白质名称及大致分子量*；5. 熟练聚丙烯酰胺凝胶电泳的制胶、点样、染色

5、、电泳过程*；6. 了解凝胶电泳的样品稀释液的作用。64免疫学实验：沉淀反应和凝集反应1. 掌握沉淀反应和凝集反应原理*；2. 能够区别沉淀反应和凝集反应*；3. 掌握沉淀反应的双向琼脂扩散试验、对流免疫电泳试验过程及操作*；4. 掌握凝集反应的直接凝集反应、试管凝集反应；5. 熟练琼脂糖凝胶铺板、打孔操作*；6. 学会凝集效价的确定。5碱性磷酸酶AKP的分离纯化及比活性与蛋白浓度测定1. 掌握蛋白质提取的基本方法及操作*；2. 掌握酶的活性测定、蛋白质浓度测定的方法及优缺点*；3. 熟悉酶的总单位、蛋白质总量及纯化倍数、得率的计算*；4. 熟悉酶、蛋白质的计算方法以及浓度公式的稀释倍数；5.

6、 熟悉酶的提取条件、碱性磷酸酶的低温提取；6. 熟悉配制有机溶剂浓度的计算；7. 掌握离心机的使用、分光光度计的使用*；6AKP酶促反应动力学实验（设计性实验）1. 学生自主设计pH、温度、底物浓度、抑制剂对酶促反应实验*；2. 学生PPT讲解所设计的实验*；3. 根据设计操作实验；4. 依据酶促反应绘制速度随底物浓度的变化曲线、速度倒数与底物浓度倒数曲线*。7肝细胞染色体DNA提取1. 了解认识DNA提取的材料选择，利用肝细胞提取的基本方法；2. 掌握核酸提取的基本步骤和方法，以及浓盐法提取的实验操作*；3. 掌握核酸的验证方法（二本胺法）*；4. 熟悉核酸大分子的特征和实验中所用化学试剂的

7、使用原理*。8酶联免疫吸附实验（ELISA）1. 掌握ELISA实验的基本原理，以及测定的方法*；2. 掌握酶标仪的工作原理；3. 掌握实验的操作步骤及每步操作的要领*；4. 熟悉包被、封闭、酶标记、酶标板*；5. 熟悉样品结果的计算公式含义*；9DNA限制性内切酶酶切酶谱分析1. 熟悉细菌等微生物的限制修饰系统，限制酶的命名、种类；2. 掌握限制性内切酶酶切体系及酶切条件与影响酶切反应的因素*；3. 熟悉酶切反应结果的检测方法、Marker、条带位置及分析*；4. 充分认识限制性内切酶在实验中的运用；5. 了解限制性内切酶在基因工程和基因治疗的应用；10质粒DNA的提取1. 了解大肠杆菌培养

8、、细菌的收集；2. 掌握不同提取质粒DNA的原理，小量提取质粒DNA的实验方法*；3. 掌握提取液溶液I、溶液II、溶液III的作用*;4. 充分认识操作中注意事项等因素对提取的影响*。11质粒克隆DNA片段的PCR扩增1. 掌握PCR扩增的原理、反应体系、影响因素*；2. 熟悉PCR仪的工作原理、梯度PCR仪*；3. 熟悉扩增后产物的电泳检测方法、步骤*；4. 熟悉PCR扩增的应用范围。12学生实验设计讨论课（考核）1. 培养学生的自主学习能力和解决问题的能力、团队协作的能力*；2. PPT讲解、讨论，提高学生在实验动手操作基础上的思辨能力和相互协作分析解决实际问题的能力*；3. 查阅和整理

9、实验原理、实验方法和实验仪器与器材的资料、撰写一份完整的实验报告*；4. 设计的实验运用范围讨论。13实验理论考试及血清无机磷测定（实验考试）1实验理论闭卷考试，占考试成绩50%*；2. 血清无机磷含量测定实验报告书写，20%*；3. 血清无机磷含量测定结果计算与表述（mg/dL），5%*；4. 实验操作，主要包括移液、过滤、比色杯、分光光度计等过程或仪器操作，25%*；5. 本次实验考试完全按照每个学期期末考试的规格和要求进行，实验理论考试和血清无机磷测定的实验报告均写在答题纸上，除实验操作每23人/组外，均独立完成实验理论考试和实验报告撰写。四、教 材1. 实验指导书名称：生物化学与分子生

10、物学实验教程，主编：刘戟、曾凡才，出版单位：科学出版社，出版日期：2017年1月；2. 实验参考书名称：生物分子实验教材第三版，主编：翟朝阳，杨鲁川，出版单位：四川大学出版社，出版日期：2015年1月。五、主要参考资料1. 分子克隆实验指南第二版，萨母布鲁克（Sambrook, J.）著，黄培堂等译，科学出版社， 2002；2. 现代分子生物学实验技术，中国协和医科大学出版社（第二版），卢圣栋主编，1999；3. Current protocols in molecular Biology，Wiley Interscience, Ausudel FM, et al.，1988。六、成绩评定 本

11、课程为考核。成绩评定（100分）由两部分构成，即平时成绩（占70%）和考试成绩（占30%）构成。平时成绩即每次实验课程结束后，学生撰写实验报告成绩，每次实验课程的实验报告以100分计算，生物分子基础实验I课程除第一次实验仪器原理课程不撰写实验报告外，其余12次实验课程每次实验结束后，均要求撰写一份书写工整、格式规范、表达准确完整的实验报告（最后一次实验考试单独作为考试成绩计算），12次实验课程的实验报告平均分即为本课程平时成绩（占期末成绩70%）；考试成绩即实验理论考试与实验操作考试两部分构成（各占50%），以100分计算，实验理论考试（闭卷）占50分，实验操作考试（血清无机磷测定的实验操作与

12、实验报告）占50分，合计100分，并占期末成绩30%，期末成绩总分100分。生物分子基础实验IIBiomolecular Basic Experiment Course-II501079035 （02/04），501079035 （03/05）56 学分：3.5生物分子基础实验课程包括11个实验教学内容，课程的设置安排体现在实验操作技能及实验安全意识培养的基础内容、学生综合能力培养的综合性实验、创新能力培养的实验设计讨论课组成。1 熟悉不同激素的作用，了解认识对升、降血糖的不同影响，以及血糖代谢的一些基本途径；2 掌握家兔实验禁食时间、抽取血液样品的操作、注射激素等方法*；3 掌握血糖的测定（

13、吴宪-Foling法）*，本实验的测定原理，影响测定的因素*，了解其它测定的方法；4 掌握分光光度计操作、熟练运用浓度计算公式*。四、教材翟朝阳 杨鲁川，出版单位：2015年1月；3. Current protocols in molecular Biology，Wiley Interscience,Ausudel FM, et al.，1988。本课程为考核。平时成绩即每次实验课程结束后，学生撰写实验报告成绩，每次实验课程的实验报告以100分计算，生物分子基础实验I课程除第一次实验仪器原理课程不撰写实验报告外，其余12次实验课程每次实验结束后，均要求撰写一份书写工整、格式规范、表达准确完整的

14、实验报告（最后一次实验考试单独作为考试成绩计算），12次实验课程的实验报告平均分即为本课程平时成绩（占期末成绩70&）；生物分子基础实验IIIBiomolecular Basic Experiment Course-III501080030 （01/02）48 学分：3.0生物分子基础实验课程包括10个实验教学内容，课程的设置安排体现在实验操作技能及实验安全意识培养的基础内容、学生综合能力培养的综合性实验、创新能力培养的实验设计讨论课组成。5 熟悉不同激素的作用，了解认识对升、降血糖的不同影响，以及血糖代谢的一些基本途径；6 掌握家兔实验禁食时间、抽取血液样品的操作、注射激素等方法*；7 掌握血糖的测定（吴宪-Foling法）*，本实验的测定原理，影响测定的因素*，了解其它测定的方法；8 掌握分光光度计操作、熟练运用浓度计算公式*。