高考生物二轮精品练习学案专项2微生物的培养与应用Word下载.docx

1、在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个细胞繁殖而来的子细胞群体。方法：平板划线法、稀释涂布平板法。3菌种的保藏短期保存：将菌种接种到试管的固体斜面培养基上4保存，菌种易被污染或产生变异。长期保存：20甘油管在冷冻箱中保藏。【二】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1、分离的原理1土壤中的细菌之所以能够分解尿素，是因为它们体内能合成脲酶。这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。2实验室中微生物的筛选应用的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件包括营养、温度、pH等，同时抑制或阻止其他微生物生长。2、统计菌落数目的方法：稀释涂布平板法和显微镜直接计数。3、细

2、菌分离与计数的实验流程土壤取样样品稀释取样涂布微生物培养观察并记录结果细菌计数【三】分解纤维素的微生物的分离1、纤维素酶纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长提供营养。作用：2、纤维素分解菌的筛选方法及原理1方法：刚果红染色法。能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。2原理：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。纤维素被纤维素酶分解后，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌

3、为中心的透明圈。这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。3、土壤中纤维素分解菌的筛选【热点难点全析】【一】培养基的种类划分标准培养及种类特点用途物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产固体培养基加凝固剂，如琼脂微生物分离、鉴定等选择培养基培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；用尿素为唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的细菌鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物，如可用伊红美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌假设有，菌落成黑色【

4、二】细菌的分离与计数1.筛选菌株（1）原那么：人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长。（2）菌株筛选原理的比较2.统计菌落数目的方法（1）显微镜直接计数法利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。用计数板计数。缺点：不能区分死菌与活菌。（2）间接计数法（活菌计数法）当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。计算公式：每克样品中的菌株数=（CV）M，其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M

5、代表稀释倍数。操作：设置重复组，增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确，一般选择菌落数在30300的平板进行计数。3.设置对照（1）目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。（2）方法：证明培养基未被污染，用空白培养基作对照。证明选择培养基的选择作用，用基础培养基接种等量同种菌液作对照。【高考零距离】1、2018大纲高考关于细菌的表达中，正确的选项是A.不同种类细菌的生长均需要相同碳源B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落C.细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长的调整期D.培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选【解析】自养型细菌可以利用无机碳源，

6、异养型细菌只能利用有机碳源，A错误。分离细菌并获得单菌落需要固体培养基，B错误。芽孢是细菌为适应不利的环境而产生的休眠体，而调整期资源丰富，不会产生芽孢，C错误。金黄色葡萄球菌有耐高浓度盐的特点，D正确。【答案】D2、2018重庆高考以下有关细菌培养的表达，正确的选项是A.在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C.向液体培养基中通人氧气能促进破伤风杆菌的生长D.在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动【解析】菌落就是由单个细菌或同种细胞繁殖成的具有一定形态结构等特征的子细胞群体，一个菌落就是一个种群，所以单个菌落就只有一种细菌。青霉素只

7、能抑制细菌的细胞壁的形成从而抑制细菌的繁殖，破伤风杆菌是厌氧性的生物。半固体培养基中可以观察细菌的运动3、2018上海高考高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图。1过程称为_，过程是为了_。2号培养基称为_（按功能分）；该培养基中除了加入淀粉外，还需加入另一种重要的营养成分_。A、琼脂B、葡萄糖C、硝酸铵D、碳酸氢钠3一般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了_。【解析】1由图中显示，在前后试管中细菌数目减少，可推知此过程为稀释，过程后使用划线法对细菌进行固体培养基培养，可推知此过程为分离纯化嗜热菌。2由图示可知表示

8、过程是嗜热菌分离纯化的过程，号培养基为选择培养基。在培养微生物的培养基中，碳源和氮源必不可少，所以除淀粉外还应加入硝酸铵。3细菌芽孢是在极端环境中产生的，具有耐高温等特点，只有用高温高压，才能杀死细菌芽孢，防止培养基污染。【答案】1稀释单个菌落的筛选或筛选2选择培养基C3杀死培养基中的细菌芽孢4、2017山东高考研究发现柚皮精油和乳酸菌素小分子蛋白质均有抑菌作用，两者的提取及应用如下图。1柚皮易焦糊，宜采用法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过除去其中的固体杂质。2筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是。实验前需对超净工作台进行处理。3培养基中的尿素可为乳

9、酸菌A生长提供。电泳法纯化乳酸菌素时，假设分离带电荷相同的蛋白质，那么其分子量越大，电泳速度。4抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。【解析】1柚皮易焦糊，宜采用压榨法提取柚皮精油，不宜用蒸馏法，压榨所得糊状液体可通过过滤除去其中的固体杂质。2接种方法常用的为平板划线法和稀释涂布平板法，对培养基灭菌时所用的设备是高压蒸汽灭菌锅。实验前需对超净工作台进行紫外线消毒处理。3培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供碳源和氮源。电泳法纯化乳酸菌素时，假设分离带电荷相同的蛋白质，那么其分子量越大，电泳速度越慢。可通过测定透明圈的

10、大小来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果【答案】1压榨过滤2稀释涂布平板法高压蒸汽灭菌锅紫外线消毒3碳源和氮源越慢4大小5、（2017新课标全国卷）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答以下问题：1在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于培养基。2纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即和。3为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力。4通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求实验操作应在

11、酒精灯附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。【解析】1实验目的是为了筛选出可以分解原油的高效菌株，因此在筛选的时候选择性培养基的碳源为原油。2纯化分离微生物的方法有2种：平板划线法和稀释涂布平板法；灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。【答案】1原油选择2平板划线法稀释涂布平板法3强4干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰6、2017全国1高考以下是与微生物培养有关的问题，请回答：1某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是，碳源是，氮源是。只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于培养基。按照化学成分分类，该培养基

12、属于培养基。从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于。2将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中，适宜条件下培养，定时取样测定菌体数目，以时间为横坐标，以细菌数目的对数为纵坐标，可得到细菌的曲线。该曲线中以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是。实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在期取材；在生产中，常搜集培养至期的细菌用于次级代谢产物的提取。【解析】此题主要考查学生的理解能力，考查微生物的营养。第1小题，该培养基中，琼脂为凝固剂，葡萄糖为碳源，尿素为氮源；由于只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，可以用来选择出能够合成脲酶的细菌，在功能上称为选择培养基；由于其化学成分明确，故又

13、称为合成培养基；由于该培养基中存在着有机碳源葡萄糖，故可推测从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于异养型。第2小题，在恒定容积的液体培养基上培养微生物，定期取样，然后以时间为横坐标，以细菌数目的对数为纵坐标，所得的曲线称为微生物的群体生长曲线，之所以以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是菌体数目往往非常大，且变化率也很高，直接以菌体数目为纵坐标不利于作图。实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在对数期取材；在生产中，常搜集培养至稳定期的细菌用于次级代谢产物的提取。【答案】1琼脂葡萄糖尿素选择合成异养型2群体生长菌体数目往往非常大，且变化率也很高，以菌体数目的对数为纵坐标有利于作图

14、对数稳定7、2017全国高考某种细菌体内某氨基酸 的生物合成途径如图：这种细菌的野生型能在基本培养基满足野生型细菌生长 的简单培养基上生长，而由该种细菌野生型得到的两种突变型甲、乙都不能在基本培养基上生长；在基本培养基上假设添加中间产物 ，那么甲、乙都能生长；假设添加中间产物 ，那么乙能生长而甲不能生长。在基本培养基上添加少量的，甲能积累中间产物1,而乙不能积累。请回答：1根据上述资料可推论：甲中酶的功能丧失；乙中酶的功能丧失，甲和乙中酶的功能都正常。由野生型产生甲、乙这两种突变型的原因是野生型的同【一】不同菌体中的不同发生了突变，从而导致不同酶的功能丧失。如果想在基本培养基上添加少量的来生产

15、中间产物1，那么应选用野生型、甲、乙。2将甲、乙混合接种于基本培养基上能长出少量菌落，再将这些菌落单个挑出分别接种在基本培养基上都不能生长。上述混合培养时乙首先形成菌落，其原因是 3在发酵过程中，菌体中含量过高时，其合成速率下降。假设要保持其合成速率，可采取的措施是改变菌体细胞膜的，使排出菌体外。【解析】1由题干“而甲不能生长。”可知：乙中酶a的功能丧失，甲中酶b功能丧失。产生甲、乙两种突变的原因是野生型的不同菌体的不同基因发生了突变。因为“在基本培养基上添加少量的X，甲能积累中间产物1”，所以要想生产中间产物1，应选用甲2由题干“假设添加中间产物1乙能生长”，而“甲能积累中间产物1”所以将甲

16、、乙混合培养时甲产生的中间产物1能使乙合成X，使乙首先形成菌落。3在发酵过程中，可以采取一定的手段改变细胞膜的通透性，使X排除细胞外。【答案】1bac不同基因甲每空1分，共2分2甲产生的中间产物1供给乙，使乙能够合成X，保证自身生长产生菌落其他合理答案也给分3通透性 8、2017安徽高考大肠杆菌可以直接利用葡萄糖，也可以通过合成-半乳糖苷酶将乳糖分解为葡萄糖和半乳糖加以利用。将大肠杆菌培养在含葡萄糖和乳糖的培养基中，测定其细胞总数及细胞内-半乳糖苷酶的活性变化如图。据图分析，以下表达合理的是A、050min，细胞内无-半乳糖苷酶基因B、50100min，细胞内无分解葡萄糖的酶C、培养基中葡萄糖

17、和乳糖同时存在时，-半乳糖苷酶基因开始表达D、培养基中葡萄糖缺乏时，【解析】此题考查有关微生物相关知识，作为微生物的代谢调节有酶的合成和酶的活性调节两种，此题考点是酶的合成调节，在有葡萄糖存在时，大肠杆菌直接利用现有的葡萄糖，当没有葡萄糖时才合成分解乳糖的半乳糖苷酶，才利用乳糖作为能源物质，所以D选项正确。9、2017江苏高考根据以下相关实验操作、预期结果合理的是实验8、实验C、实验D、实验【解析】此题考查了考生对教材实验的理解能力和分析能力。实验1中结果应是0.3%溶液中质壁分离明显，实验2中毛霉应在20环境中生长最好，实验4中，如果此时2，4-D浓度低于最适浓度，那么浓度再低的话促进生根效

18、果那么较差了，所以预期最合理的应是实验3即C项正确。【答案】C【考点提升训练】【一】选择题1、以下常用的无菌操作中错误的选项是（）A、无菌操作的目的是防止杂菌污染B、用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒C、实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行D、玻璃器皿（吸管、培养皿）可用酒精擦拭【解析】对操作者应用较温和的方法进行消毒。实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行，防止瓶口的微生物污染培养基。对无菌操作用到的玻璃器皿要用干热灭菌的方法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭不能达到目的。2、（2018赤峰质检）下表为某培养基的配方，有关表达正确的选项是（）A、能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因

19、B、此培养基是天然鉴别培养基C、此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准D、此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中【解析】此表表示鉴定大肠杆菌的合成培养基。抗性基因一般位于大肠杆菌的质粒上，而不是拟核上；此培养基只能用来检测自来水中大肠杆菌含量是否符合饮用水标准。3、用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时（）可以用相同的培养基都需要使用接种针进行接种都需要在火焰旁进行接种都可以用来计数活菌A、B、C、 D、【解析】平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故错误；纯化时，要进行无

20、菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故错误。4、消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。以下哪些事物适用于消毒处理（）皮肤饮用水牛奶注射器培养皿接种环培养基果汁酱油手术刀A、B、C、D、以上全部【解析】消毒指用比较温和的方法杀死微生物的营养细胞，适用于那些不耐高温的液体。如牛奶、果汁、酱油，这样可以使其中的营养成分不被破坏。另外对要求不是很严格的皮肤、饮用水也用消毒的方法处理。而对于严格要求的接种环、手术刀等必须进行灭菌处理。【答案】

21、A5、可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（）A、以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B、以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C、以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹试剂D、以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂【解析】在以尿素为唯一氮源的培养基中，不能分解尿素获得氮源的细菌不能生长，而分解尿素的细菌能利用尿素作氮源，将尿素分解为氨，使pH升高。假设培养基中加入酚红指示剂，指示剂将变红。此培养基既属于选择培养基，又属于鉴别培养基。6、不同的微生物对营养物质的需要各不相同。以下有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的选项是（）A、氮源物质为该微生物提供必要的氮素B、碳源物

22、质也是该微生物的能源物质C、无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D、水是该微生物的营养要素之一【解析】该微生物以CO2为唯一碳源，但CO2不能为微生物提供能量，不属于能源物质。【答案】B7、（2018西城模拟）以下关于微生物培养和利用的表达不正确的选项是（）A、利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数B、接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落C、以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D、用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少【解析】接种划线可以将菌体分散，最后得到单个菌体细胞，经过培养可以得到单个菌落；用稀释涂布平板法可以分离微生物也可以

23、对微生物进行计数；在泡菜的腌制过程中，开始亚硝酸盐含量增加，10天后含量开始下降；以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌。8、如右图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为12345。以下操作方法正确的选项是（）A、操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B、划线操作须在火焰上进行C、在5区域中才可以得到所需菌落D、在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌【解析】此题考查平板划线操作方法。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰边进行。在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落。9、在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生

24、长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出（）A、乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌B、固氮细菌、大肠杆菌、放线菌C、固氮细菌、霉菌、放线菌D、固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌【解析】综合分析可知选择培养基依次选择的是：固氮细菌、霉菌和放线菌。10、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称做（）A、鉴别培养基 B、加富培养基C、选择培养基 D、基础培养基【解析】基础培养基是含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基，例如牛肉膏蛋白胨培养基；加富培养基一般

25、用来培养营养要求比较苛刻的异养型微生物；鉴别培养基是在培养基中加入某种特殊化学物质，微生物的代谢产物与特殊化学物质发生特定化学反应，产生明显特征变化；选择培养基是在培养基中加入特殊营养物质或化学物质，抑制不需要微生物的生长，促进所需微生物的生长。11、细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌A、接种环、手、培养基B、高压锅、手、接种环C、培养基、手、接种环D、接种环、手、高压锅【解析】高压蒸汽灭菌锅是灭菌设备，通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。12、分

26、离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是（）加尿素不加尿素加琼脂糖不加琼脂糖加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸盐不加硝酸盐A、 B、C、 D、【解析】分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中要有尿素、琼脂糖、葡萄糖，尿素给分解尿素的细菌提供氮源，不加硝酸盐。【二】非选择题13、（2018南昌模拟）尿素是一种重要的农业肥料，但假设不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如下图所示。请分析回答以下问题。（1）此培养基能否用于植物组织培养？_，

27、理由是_。（2）培养基中加入尿素的目的是_，这种培养基属于_培养基。（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的_和_，实验需要振荡培养，原因是_。（4）转为固体培养时，常采用_（方法）接种，获得单菌落后继续筛选。（5）以下材料或用具中：培养细菌用的培养基与培养皿；玻棒、试管、锥形瓶和吸管；实验操作者的双手。需要灭菌的是：_；需要消毒的是：_。（填序号）（6）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有_（填序号）。由于土样不同由于培养基污染由于操作失误没有设置对照（7）在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_，细菌合成的_将尿素分解为氨，pH增高，使指示剂变红色。【解析】（1）微生物与植物生长所需的营养不完全相同，培养微生物的培养基不能用