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1、培养基制备技术6实验二细菌培养及形态学检查技术实验三球菌检验实验四肠道杆菌常用培养基的制备2实验五肠道杆菌检验实验六非发酵革兰阴性菌检验5实验七真菌检验3实验八半自动细菌鉴定及结核分枝杆菌检验实验九细菌对药物的敏感试验4实验十细菌耐药性检验实验十一临床标本的细菌学检验19实验十二临床微生物室见习医学检验系临床微生物学和微生物检验高等医学院校医学检验专业（五年制）临床微生物学和微生物检验实验指导（第二版）洪秀华主编人民卫生出版社适用五年制医学检验本科教学实验一 培养基制备技术【目的要求】1.掌握细菌培养基制备的基本过程。2.熟悉常用培养基的原理、种类及其用途。3.熟悉高压蒸汽灭菌法的使用方法及注

2、意要点。4.了解常用玻璃器材的处理。【实验内容】1.介绍细菌常用培养基的种类及用途。2.掌握培养基制备的基本过程。3.配制几种常用的培养基。1）肉膏汤的制备2）半固体培养基的制备3）琼脂斜面的制备4）普通琼脂平板的制备5）血琼脂平板的制备（含血液的采集-采集兔血）6）巧克力平板的制备4.高压蒸汽灭菌器的结构和使用方法【学时】 6学时实验二 细菌培养及形态学检查技术1.掌握细菌的分离和接种的常用方法。2.培养无菌观念，掌握无菌操作技术。3.掌握细菌涂片的制备和革兰染色法的原理和操作步骤。4.熟悉细菌常用的需氧培养方法和培养结果的观察与记录。5.熟悉细菌芽胞和荚膜染色法。6.熟悉接种细菌用具。7.

3、了解细菌不染色标本的观察方法与用途。8.了解拉丝试验的方法与应用。1.细菌接种与分离技术：平板划线分离接种、琼脂斜面接种、半固体穿刺接种与液体培养基的接种。 2.细菌的需氧培养和细菌生长现象的观察（固体、半固体、液体）。3.细菌涂片标本的制作。4.细菌不染色标本检查法。5.革兰染色技术（改良快速法）。6.细菌的基本形态观察7.芽胞染色法（示教）。8.荚膜染色法、鞭毛染色法（示教）。9.拉丝试验实验三 球菌检验1.掌握葡萄球菌、链球菌、肠球菌的分离培养技术。2.掌握葡萄球菌、链球菌、肠球菌的鉴定技术。3.掌握葡萄球菌微量生化管编码鉴定技术。4.熟悉常见病原性球菌的形态特征和染色性。1.球菌属、链

4、球菌属及肠球菌属的形态染色及培养特性1）形态观察2）菌落观察2.球菌属、链球菌属及肠球菌属的鉴定试验1）触酶试验2）血浆凝固酶试验3）胆汁溶菌试验4）Optochin敏感试验5）杆菌肽敏感试验6）胆汁七叶苷试验3.葡萄球菌微量生化管编码鉴定技术。4.奈瑟菌的形态染色特性（男性生殖道分泌物革兰染色示教片）实验四 肠道杆菌常用培养基的制备1.掌握肠道杆菌常用选择和鉴别培养基的原理与应用。2.熟悉肠道杆菌常用培养基的制备方法。1.SS平板的制备2.麦康凯琼脂平板的制备3.KIA的制备4.MIU的制备（示教）【学时】 2学时实验五 肠道杆菌检验1.掌握肠杆菌科常见菌属的主要生物学特征和鉴定方法。2.掌

5、握沙门菌属细菌的血清学鉴定方法。3.熟悉肠杆菌科细菌编码鉴定方法。4.熟悉肠杆菌科细菌编码鉴定实验注意事项。1.大肠埃希菌的生物学特性与鉴定方法2.志贺菌属的生物学特性与鉴定方法3.沙门菌属的生物学特性与鉴定方法4.变形杆菌属的生物学特性与鉴定方法5.肠杆菌科编码鉴定6.沙门菌属细菌血清学鉴定实验实验六 非发酵革兰阴性菌检验1.掌握临床常见非发酵菌的形态、培养特性及鉴定方法。2.熟悉非发酵菌的编码鉴定方法。1.铜绿假单胞菌的生物学特性与鉴定方法2.嗜麦芽窄食单胞菌的生物学特性与鉴定方法3.不动杆菌的生物学特性与鉴定方法【学时】 5学时实验七 真菌检验1.掌握白色念珠菌和新型隐球菌的鉴定。2.熟

6、悉真菌的菌丝、孢子和菌落特点。3.熟悉真菌标本的直接镜检和培养方法。4.了解浅部真菌和深部真菌感染的检验原则。1.真菌的培养特性及菌落观察2.真菌形态结构的观察3.厚膜孢子试验、芽管形成试验、革兰染色形态。4.新生隐球菌的墨汁负染色法5.曲霉菌的基本形态（示教）。6.丝状真菌的基本形态（幻灯片）。【学时】 3学时实验八 半自动细菌鉴定及结核分枝杆菌检验1.掌握细菌的半自动鉴定方法。2.掌握结核分枝杆菌的形态、培养特性及常用鉴定方法。3.熟悉半自动细菌鉴定仪鉴定细菌的原理。1.半自动细菌鉴定1）半自动细菌鉴定仪鉴定细菌的原理2）API 20 NE的简单操作、判读结果、结果的解释3）API AUX

7、20C的简单操作、判读结果、结果的解释2.结核分枝杆菌1）肺结核患者痰标本抗酸染色检查2）痰标本金胺“O”荧光染色检查3）菌落观察实验九 细菌对药物的敏感试验（纸片扩散法和肉汤稀释法）1.熟悉细菌对抗菌药物敏感性试验的基本原理。2.掌握纸片琼脂扩散法（KB法）的试验方法、影响因素、结果判读和临床意义。3.掌握药敏试验的质量控制方法。4.了解联合药敏试验的方法与应用。5.了解肉汤稀释法抗生素敏感性试验的原理、操作方法、结果判读、临床意义及其质量控制。1.纸片扩散法的操作方法、结果判读、临床意义和质量控制。2.肉汤稀释法抗生素敏感性试验的操作方法、结果判读、临床意义和质量控制。3.联合药敏试验（纸

8、片搭桥法）【学时】 4学时实验十 细菌耐药性检验1.掌握MRSA和ESBL双纸片确认法。2.熟悉HLAR的检测。3.了解AmpC酶的检测。1.MRSA的筛检。2.ESBL双纸片确认法。3.三维法AmpC酶的检测（示教）。4.HLAR的检测（示教）。实验十一 临床标本的细菌学检验【目的要求】 1.掌握各种临床标本的采集方法。2.掌握临床标本细菌学检验的一般程序及检验方法。3.熟悉各种临床标本中的常见病原菌及其鉴定方法。1.各种临床标本的分区划线法、菌落观察。2.复习各种临床标本培养菌落的革兰染色法。3.血液标本的细菌学检验4.尿液标本的细菌学检验5.脓汁标本的细菌学检验6.粪便标本的细菌学检验7.痰液标本的细菌学检验【学时】 19学时实验十二 临床微生物室见习1.了解临床微生物室实验室布局。2.了解标本检验基流程。3.了解临床微生物室各种检测细菌仪器。4.了解临床微生物室SOP文件、制定的规章制度和各种日常记录。由临床微生物室老师从标本的接收、标本的处理、致病菌的自动化鉴定和药敏、各种自动化仪器、常见耐药性筛检、院内感染检测、S0P文件的制定、细菌室各种日常记录等方面进行概括性的介绍。临床微生物学和微生物检验教学组 2007-01-01