完整版基因工程原理练习题及其答案Word文档格式.docx

1、列来自 ，最大的克隆片段达到 。26.野生型的 噬菌体DNA不宜作为基因工程载体，原因是： （1） （2）- （3）. 。27 .噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的，其中来自质粒的主要结构 是 ，而来自噬菌体的主要结构是 。28.噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源 DNA片段后，总的长度应在噬菌体基因组的 的范围内。29.在分离DNA时要使用金属离子螯合剂，如 EDTA和柠檬酸钠等，其目的是 30.用乙醇沉淀DNA时，通常要在 DNA溶液中加人单价的阳离子，如 NaCI和NaAc，其目的是 。31. 引物在基因工程中至少有 4个方面的用途： . . 。32.Clark发现用Taq DN

2、A聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端，而是有一个突出碱基末端的双链 DNA分子。根据这一发现设计了克隆 PCR产物的 。33.在cDNA的合成中要用到 S1核酸酶，其作用是切除在 34. 乙醇沉淀 DNA的原理是 。35.假定克隆一个编码某种蛋白质的基因，必须考虑其表达的三个基本条件： （3）。36.受体细胞的感受态是 。37.DNA重组连接的方法大致分为四种： （2） （3） （4） 。38.将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个 ，各种此类质粒的集合体称之为构建了一个 。39将含有一个 mRNA的DNA拷贝的克隆称作一个 ，源于同一批 RNA制备物的克隆群则构建了一个 。40.

3、 只要知道基因组中某一特定区域的部分核苷酸组成，用 可以将这段DNA 进行百万倍的扩增。41. 人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为 时吸附DNA, 时摄人DNA。42.目前，在重组体的筛选中，已经发展了许多构思巧妙、具有极高准确性的筛选方法。大致可以分为： 等。43. PCR扩增筛选重组体是比较简便的筛选方法， 它适合于 。44. 核酸杂交探针可分为两大类： DNA探针和 RNA探针。其中 DNA探针又分为 探针禾廿 探针。45. RNaseH的活性为 。46. 第一个用于基因克隆的天然质粒 。47. 噬菌粒载体的包装需要 的帮助下才能完成。48.cDNA 文库的特点： 、 、 、 。49 .用

4、 处理大肠杆菌，能增加膜的通透性。50. 在 技术中，DNA限制性片段经凝胶电泳分离后，被转移到硝酸纤维 素膜（或尼龙膜）上，然后与放射性的 DNA探针杂交。51. 可用T4 DNA聚合酶进行平末端的 DNA标记，因为这种酶具有 和 的活性。52. 根据外源片段提供的遗传表型筛选重组体，必需考虑三种因素：（2）（3） 。53.Northern印迹和Southern印迹有两点根本的区别： （2）。54. 外源基因导入植物细胞的方法有： 。答案1.702. （1）分子水平上的操作；（2）细胞水平上的表达3.克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择4增加溶液的粘度，维持渗透压，防止 DNA 受机械力（

5、震荡）的作用而降解 5超螺旋大于线性大于开环。6（1）减少酶量； （2）缩短反应时间； （3）增大反应体积7.EcoK；EcoRl8.GGCC;异源同工酶9.枯草杆菌蛋白酶； （1）5-3合成酶的活性； （2）3-5外切核酸酶10.碱性磷酸酶； 5端的磷酸基团11.Ca2+12.5合成； 3外切13.DNA聚合酶1 :一 3外切核酸酶；5一 3合成酶14.S1核酸酶切割；DNA聚合酶补平15.核酸水解酶 H；RNA16.质粒 DNA ；病毒 DNA ；质粒和病毒 DNA 杂合体17.复制区: 含有复制起点；选择标记: 主要是抗性基因；克隆位点:便于外源DNA 的插入18.正比19，星号（ *）

6、活性20.DNA 的纯度、 DNA 的甲基化程度 、温度、缓冲液 （Buffer）21.416 C22.PBR322 和 M13 ； pMBI ;转座子23.它在细菌中能够大量繁殖，这样有利于外源DNA 的扩增；对某些噬菌体 （如 噬菌的遗传结构和功能研究得比较清楚，其大肠杆菌宿主系统的遗传也研究得比较详尽24 没有合适的限制性内切核酸酶识别位点；选择标记25质粒； 噬菌体； 4526 （1）分子量大， （2）酶的多切点， （3）无选择标记27复制区； IG 区28.75%105%29 螯合 Mg 2+离子，抑制核酸酶的活性30.中和 DNA 分子的负电荷，增加 DNA 分子间的凝聚力31.合

7、成探针；合成cDNA ; （3）用于PCR反应；进行序列分析32.T载体33.第二链合成时形成的发夹环?34.乙醇使 DNA 分子脱水35. （1）保持正确的可读框 （2）能够使其转录的启动子 （3）具有翻译的起始和终止信号36.接受外源 DNA 的生理状态3 7 . （ 1 ）黏性末端连接； （2 ）平末端连接； （3）同聚物接尾连接； （4）接头连接法38.基因组 DNA 克隆； 基因组 DNA 文库39.cDNA 克隆； cDNA 文库40.聚合酶链式反应 （PCR）41.0 C；42 C42. （1）遗传学方法； （2 ）物理筛选法； （3）核酸杂交法； （4）表达产物分析法43.插入

8、外源片段的种类较多，大小又极为相似的重组体的筛选44.基因组 DNA ；cDNA45.5或 3方向特异地水解 RNA-DNA 杂交双链中的 RNA 链46.pSC10147.辅助噬菌体48 . （ 1 ）不含内含子序列。 （2）可以在细菌中直接表达。 （ 3）包含了所有编码蛋白质的基因。 （4）比 DNA 文库小的多，容易构建49.CaCl250.Southern 印迹51.5合成酶；52 （1）克隆的是完整的基因； （2）使用的是表达载体； （3）不含内含子53 （1）印迹的对象不同： Northern 是 RNA ，Southern 是 DNA ；（2）电泳条件不同，前者是变 性条件，后者

9、是非变性条件54叶盘法、电击法、基因枪法二、选择题 （单选或多选 ）1 因研究重组 DNA 技术而获得诺贝尔奖的科学家是 （ ）（a）A Kornberg （b）W Gilbert （c）P Berg （d）B McClintock2 第一个作为重组 DNA 载体的质粒是 （ ）（a）pBR322 （b）ColEl （c）pSCl01 （d）pUCl83 关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有 （ ）不太恰当。（a）由作用于同一 DNA序列的两种酶构成（b）这一系统中的核酸酶都是n类限制性内切核酸酶（c）这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对 DNA进行修饰（d）不同的宿主系统具有

10、不同的限制 -修饰系统4. n型限制性内切核酸酶： （ ）（a）有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列（b）仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供（c）限制性识别非甲基化的核苷酸序列 （d）有外切核酸酶和甲基化酶活性（e）仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供5. 下面有关限制酶的叙述哪些是正确的 ?（ ）（a）限制酶是外切酶而不是内切酶（b）限制酶在特异序列（识别位点）对DNA进行切割（c）同一种限制酶切割 DNA时留下的末端序列总是相同的（d）一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链 DNA，产生黏末端（e）些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链 DNA，产生平

11、末端6第一个被分离的n类酶是：（a）EcoK （b）Hind 川 （c）Hind n （d）EcoB7.在下列进行 DNA 部分酶切的条件中，控制那一项最好 ?端 （e） 以上都不是可识别并切割特异 DNA序列的酶是 （）（e） DNA 酶克隆所依赖的DNA载体的最基本性质是 （）（c） 自我复制能力 （d） 自我表达能力（e） 自我转录能力13下列哪种克隆载体对外源 DNA 的容载量最大 ?（a） 质粒 （b） .黏粒 （c） 酵母人工染色体 （YAC） （d） . 噬菌体 （e） cDNA 表达载体 14关于 cDNA 的最正确的说法是：（a） 同 mRNA 互补的单链 DNA （b） 同

12、 mRNA 互补的双链 DNA （c） .以 mRNA 为模 板合成的双链 DNA （d） 以上都正确 15关于感受态细胞性质的描述，下面哪一种说法不正确 ?（a） 功具有可诱导性 （b） 细菌生长的任何时期都可以出现 （c） 具有可转移性 （d） 不 同细菌出现感受态的比例是不同的16 Southem 印迹的 DNA 探针（ ）杂交。（a） 只与完全相同的片段 （b） 可与任何含有相同序列的 DNA 片段 （c） 可与任何含 有互补序列的 DNA 片段 （d） 可与用某些限制性内切核酸酶切成的 DNA 片段 （e） .以上 都是17在利用 lacZ 失活的显色反应筛选法中， IPTG 的作用

13、是（ ）（a）诱导宿主的a肽的合成 （b）诱导宿主的3肽的合成（c） 作为酶的作用底物 （d） 作为显色反应的指示剂18用免疫化学法筛选重组体的原理是19.在基因工程中，DNAt组体是指20. 重组 DNA 的筛选与鉴定不包括哪一方法（e） 抗药筛选（a） 仅位于质粒载体中 （b） 具有多种酶的识别序列 （c） 不同酶的识别序列可以有重叠（d） 一般是人工合成后添加到载体中22. 在 cDNA 技术中，所形成的发夹环可用（ ）（a） 限制性内切核酸酶切除 （b） 用 31 外切核酸酶切除 （c） 用 S1 核酸酶切除（d）用 51 外切核酸酶切除23.下列对逆转录酶描述正确的是：（a） 依赖于

14、 RNA 的 DNA 聚合酶或称为 RNA 指导的 DNA 聚合酶（b）依赖于 cDNA 的 DNA 聚合酶或称为 cDNA 指导的 DNA 聚合酶（c）依赖于 DNA 的 DNA 聚合酶或称为 DNA 指导的 DNA 聚合酶（d）依赖于 RNA 的 RNA 聚合酶或称为 rNA 指导的 RNA 聚合酶24.T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其底物的关键 基团是（ ）（a） 2 -OH 和 5 - （b） 2 -OH 和 3 -P （c） 3 -OH 和 2 -P （d） 3 -OH 和 5 -P25.下列哪一种酶作用时需要引物 ?（a） 限制酶 （b

15、） 末端转移酶 （c） 反转录酶 （d） DNA 连接酶26. 用下列方法进行重组体的筛选，只有（ ）说明外源基因进行了表达。（a）Southem 印迹杂交（b） Northem 印迹杂交（c）Western 印迹（d） 原位菌落杂交27. Klenow酶与 DNA 聚合酶相比，前者丧失了（ ）的活性。5， -3 ，合成酶，（b） 3， -5，外切酶（c） 5， -3，外切酶（d） 转移酶28. 在下列进行 DNA 部分酶切的条件中，控制那一项最好 ?（a） 反应时间 （b） 酶量 （c） 反应体积 （d） 酶反应的温度29.黏性末端连接法，不仅操作方便，而且（ ）（a） 产生新切点 （b）

16、易于回收外源片段 （c） 载体不易环化 （d） 影响外源基 因的表达30能够用来克隆 32kb 以下大小的外源片段的质粒载体是 （ ）（a）charomid （b）plasmid （C）cosmid （d）phagemid31第一个作为重组 DNA 载体的质粒是 （ ）32.Ti 质粒：（a）可从农杆菌转到植物细胞中 （b）作为双链DNA被转移（c）在植物中导致肿瘤 （d）介导冠瘿碱的合成，作为细菌的营养物和植物的生长激素（e）需要细菌的vir基因帮助转移 （f）在植物细胞中作为染色体外质粒33. 黏粒（cosmid）是一种人工建造的载体，（ ）（a）它具有COS位点，因而可进行体外包装 （b

17、）它具有质粒DNA的复制特性（c）进入受体细胞后，可引起裂解反应 （d）进入受体细胞后，可引起溶源化反应34. 有两种确定核酸中核苷酸序列的方法：化学序列分析法 （Maxam-Glbert） 和酶学序列分析法（Sa nger）。酶学测序法的基本原理/优点是：（a）碱基与特殊染料间不同的相互作用（b）一个合成引物的延伸和 DNA修复合成的可靠终止（c）限制性位点与DNA末端标记的相关性（d）可同时对DNA双螺旋的两条链进行测序（e）反应是DNA特异的，RNA不会带来干扰。这样既减少纯化步骤， 也节约了开支。35.关于 cDNA 的最正确的说法是：（a）同mRNA互补的单链 DNA （b）同mRN

18、A互补的双链 DNA（c）以mRNA为模板合成的双链 DNA （d）以上都正确36.用碱法分离质粒 DNA 时，染色体 DNA 之所以可以被除去，是因为：（a）染色体DNA断成了碎片 （b）染色体DNA分子量大，而不能释放（c）染色体变性后来不及复性 （d）染色体未同蛋白质分开而沉淀37.关于碱解法分离质粒 DNA，下面哪一种说法不正确 ?（a）溶液I的作用是悬浮菌体 （b）溶液H的作用是使 DNA变性（c）溶液川的作用是使 DNA复性（d）质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性Clark 做了一个有趣的实验，发现 TaqDNA 聚合酶可以不需要模板，在双链 DNA 的 末端加一

19、个碱基，主要是加 （ ） （a）dGTP （b）dATP （c）dCTP （d）dTTP 根据构建方法的不同，基因文库分为基因组文库、 cDNA 文库等。在下列文库中，（ ）属 cDNA 文库（a） YAC 文库 （b） MAC 文库 （c） 扣减文库 （d） BAC 文库 下面关于多克隆位点 （multiple clone site,MCS） 的描述，不正确的句是 （ ）（a）仅位于质粒载体中 （b）具有多种酶的识别序列（c）不同酶的识别序列可以有重叠 （d）般是人工合成后添加到载体中在 cDNA 技术中，所形成的发夹环可用 （ ）（a）限制性内切核酸酶切除 （b）用31外切核酸酶切除（c）

20、用S1核酸酶切除 （d）用51外切核酸酶切除在 DNA 的酶切反应系统中，通常：（a）用SSC缓冲液 （b）加入Mg2+作辅助因子（c）加入BSA等保护剂 （d）上述说法中，有两项是正确的黏性末端连接法，不仅操作方便，而且 （ ）（a）产生新切点 （b）易于回收外源片段 （c）载体不易环化在下列表型中， （ ）是基因工程上理想的受体菌表型（a）r+m+rec* （b）r-m-rec- （C）r-m-rec+ （d）r+m+rec-关于 DNA 接头在基因工程中的作用，下列说法中哪一项不正确（a）给外源DNA添加适当的切点 （b）人工构建载体（c）调整外源基因的可读框 （d）增加调控元件cDNA

21、 文库包括该种生物的 （ ）（a）某些蛋白质的结构基因 （b）所有蛋白质的结构基因（c）所有结构基因 （d）内含子和调控区下列关于建立 cDNA 文库的叙述中，哪一项是错误的 ?（a）从特定组织或细胞中提取 DNA或RNA（b）用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA（c）以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA（d）新合成的双链 DNA甲基化下列对黏性末端连接法的评价中，哪一项是不正确的 ? （a）操作方便 （b）易于回收片段（c）易于定向重组 （d）载体易于自身环化，降低重组率关于感受态细胞性质的描述，下面哪一种说法不正确 ?38.394041424344454647484950515253

22、（d）影响外源基因的表达?）（功具有可诱导性 （b）具有可转移性面关于用 T4 多核苷酸激酶标记 5 端制备探针的描述中 （ ）是不正确的。（a）既能标记DNA，又能标记 RNA （b）既能标记双链 DNA又能标记单链 DNA（c）只能标记突出的5端不能标记其他类型末端DNA 或 RNA 必须有 5-OH 的存在（d）可与用某些限制性内切核酸酶切成的 DNA片段 （e）以上都是用下列方法进行重组体的筛选，只有 （ ）说明外源基因进行了表达。（a）Southem 印迹杂交 （b）Northem 印迹杂交（c）Western印迹 （d）原位菌落杂交列哪一个不是 Southern 印迹法的步骤 ?（

23、a）用限制酶消化DNA DNA与载体的连接（c）用凝胶电泳分离 DNA片段 （d）DNA片段转移至硝酸纤维素膜上（e）用一个标记的探针与膜杂交54 报告基因 （ ）（a）以其易于分析的编码序列代替感兴趣基因的编码序列（b）以其易于分析的启动子区代替感兴趣基因的启动子区（c）能用于检测启动子的活性 （d）能用于确定启动子何时何处有活性55 在利用 lacZ 失活的显色反应筛选法中， IPTG 的作用是 （ ）（c）作为酶的作用底物 （d）作为显色反应的指示剂56. 切口移位是指在 （ ）作用下，使 （ ）带上放射性标记。（a）DNA 聚合酶 I，RNA （b）DNA 聚合酶 I， DNA（c）D

24、NA聚合酶川，RNA （d）DNA 聚合酶川，DNA57用于核酸分子杂交的探针可以是放射性标记的 （ ）60随机引物标记探针，下列各项中哪一项是不正确的 ?（a）双链DNA、单链DNA、RNA都是可以标记的 （b）不需要用Dnase I预处理（c）反应时可用Klenow酶 （d）反应时可用DNA聚合酶161在切口移位标记 DNA 探针时只能使用 （ ）（d）DNA聚合酶川（d）T7DNA 聚合酶（a）Klenow 酶 （b）DNA 聚合酶 I （c）DNA 聚合酶 n62要对一双链的 DNA 分子进行 31末端标记，可用 （ ）（a）Klenow 酶 （b）DNA 聚合酶 I （c）T4DNA

25、 聚合酶1 . c； 2. c； 3 .b； 4.b5.b， c， d，e；6. c； 7. b；8. d；9. d； 10.a；11 . b；12. c；13 . c；14. c16. c；18. a；19. b；20. c；21 . a；c；23 . a；24. d；25. c；26. c；27.28. a；29.30. a； 31 32. a,c,d,e，33.a， b，34. 35.36.37. d； 38. b；39. c；40. a；41. c； 42. a， b，43. b；44. b；45. d；46. a；47.48. c；49.50. b；51 . 52. c； 53. b；54. a,c,d；55. a；56. b 57. a，58. c； 59. a；60. d；61. b 62. c；三、简答题1说明 Sanger DNA 测序法的原理。2某学生在用 EcoRI 切割外源 DNA 片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因 ?3.在序列5-CGAACATATGGAGT-3中含有一个6bp的n类限制性内切核酸酶的识别序列, 该位点的序列可能是什么 ?4下面几种序列中你认为哪一个 （哪些）最有可能是n类酶的识别序列：GAATC