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1、鞭毛最多的是杆菌。3.菌毛:多存在于革兰氏阴性菌致病菌中,参与菌体附着于宿主粘膜上皮细胞上,吸附功能。4.性菌毛:参与细菌结合作用,传递遗传物质。5.芽孢:某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成的圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性最强的休眠结构而非繁殖结构。抗逆性最强:肉毒梭菌的芽孢在沸水中5.09.5h才被杀死,121也要平均10分钟杀死。能产芽孢的主要是革兰氏阳性菌的两个属-芽孢杆菌属和厌氧性的梭菌属。能否产生芽孢是细菌种的特征。芽孢萌发的三个阶段:活化、出芽、生长。芽孢耐热机制:渗透调节皮层膨胀学说: DPA-Ca学说:芽孢皮层中含有营养细胞中所没有的DPA-Ca,它能稳定芽孢中的生物

2、大分子,从而增强了押宝的耐热性。(耐热性:芽孢孢子营养体)6.孢囊:固氮菌,抗干旱但不抗热的圆形休眠体伴孢晶体:内毒素,苏云金芽孢杆菌(7.)在形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形,方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体。制成生物农药(Bt细菌杀毒剂)。2、试图视肽聚糖单体的模式构造,并指出革兰氏阳性菌和阴性菌在肽聚糖的成分和结构上的差别阳性菌肽聚糖单体:甘氨酸五肽,肽桥变化甚多,由此形成了“肽聚糖的多样性”。阴性菌肽聚糖单体:四肽尾的第三个氨基酸分子不是L-Lys,而是内消旋二氨基庚二酸(m-Ala只存在于原核生物细胞壁上)所代替,没有特殊的肽桥。革兰氏阳性菌:厚,层次多,致密的网套,机械强度高

3、;革兰氏阴性菌:薄,一般单层,片层状,机械强度较差。3、试述革兰氏染色的机制革兰氏阳性菌由于细胞壁较厚,肽聚糖含量较高和交联紧密,用乙醇洗脱时,肽聚糖层网孔会因脱水而明显收缩,且革兰氏阳性菌细胞壁基本上不含类脂,故乙醇处理不能在壁上溶出缝隙,因此,结晶紫与碘复合物仍牢牢阻留在其细胞壁内,使其呈现蓝紫色。革兰氏阴性菌细胞壁薄,肽聚糖含量低,交联松散,乙醇脱色时,肽聚糖层网孔不易收缩,加之其类脂含量高,所以当乙醇脱色将类脂溶解后,在细胞壁上就会出现较大的缝,这样结晶紫与碘的复合物就极易被溶出细胞壁。因此,通过乙醇脱色,细胞又呈现无色。经番红等红色染料等复染,就使革兰氏阴性菌获得了新的颜色-红色,而

4、革兰氏阳性菌则仍呈蓝紫色(实为紫中带红)。4、何谓“拴菌”试验?他的创新思维在何处?“拴菌”试验:把单毛菌鞭毛的游离端用相应抗体牢固的“拴”在载玻片上,然后在光镜下观察该细胞的行为,结果发现,该菌只能在载玻片上不断打转而未做伸缩“挥动”,因而肯定了“旋转论”的正确性。通过“逆向思维”1、试列表比较真核生物和原核生物的10个主要区别比较项目真核生物原核生物 细胞大小较大(通常直径2um)较小(通常直径2um)(差10倍左右) 若有壁,其主要成分纤维素、几丁质等多数为肽聚糖 细胞膜中甾醇有无(除支原体外) 细胞器无 鞭毛结构如有,则粗而复杂(9+2型)如有,则细而简单 (细胞质)核糖体80S(指细

5、胞质中核糖体)线粒体等细胞器中核糖体为70S70S (细胞核)核膜(生理特性)氧化磷酸化部位线粒体细胞膜 鞭毛运动方式挥鞭式旋转式 繁殖方式有性、无性等多种一般为无性繁殖(二分裂)2、试对酵母菌的繁殖方式做一表解(1)无性繁殖1.芽殖:最常见的繁殖方式,在良好的营养和生长条件下,酵母菌生长迅速,几乎所有的细胞上都长出芽体(芽孢子)。藕节状的细胞串称为假菌丝,竹节状的细胞串称为真菌丝。形成过程:先在母细胞将要形成芽体的部位,通过水解酶的作用使细胞壁变薄,大量新细胞物质包括核物质在内的细胞质堆积在芽体的起始部位,待逐步长大后,就在母细胞的交界处形成一块由葡聚糖、甘露聚糖和几丁质组成的隔壁。成熟后,

6、两者分离,于是在母细胞上留下一个芽痕,而在子细胞上留下一个蒂痕。任何细胞上的蒂痕仅有一个,而芽痕有多个。2.裂殖:二分裂3.产生无性孢子:肾形的掷孢子,如果用倒置培养皿培养掷孢酵母,待其菌形成菌落后,可在皿盖上见到由射出的掷孢子组成的模糊菌落“镜像”。有厚垣孢子、节孢子(2)有性繁殖:形成子囊和子囊孢子,质配、核配、减数分裂3、试图示酿酒酵母的生活史,并对其中各主要过程做一简述子囊孢子在合适的条件下发芽产生单倍体营养细胞;单倍体营养细胞不断地进行出芽繁殖;两个性别不同的营养细胞彼此结合,在质配后即发生核配,形成二倍体营养细胞;二倍体营养细胞不进行核分裂,而是不断进行出芽繁殖;在以醋酸盐为唯一或

7、主要碳源,同时又缺乏氮源等特定条件下,二倍体营养细胞最易转变成子囊,这时细胞核才进行减数分裂,并随即形成4个子囊孢子;子囊经自然或人为破壁(蜗牛消化酶)后,可释放出其中的子囊孢子。特点:营养体既能以单倍体也能以二倍体形式存在。4、试以表解法介绍霉菌的营养菌丝和气生菌丝各可分化成哪些特化构造,并简要说明它们的功能特化的营养菌丝:吸取养料:假根:具有固着和吸取养料的功能吸器:专性寄生的真菌所产生。只在宿主细胞间隙间蔓延的营养菌丝上分化出来的短枝。吸取宿主细胞内的养料而不使其致死。附着:附着胞:借附着胞牢固的粘附在宿主的表面附着枝:休眠(或休眠及延伸):菌核:休眠菌丝组织,表面颜色黑或暗,颗粒状。贮

8、藏养料,抵抗逆境菌索:具有延伸和生长能力,能够吸收营养。延伸:匍匐枝:具有延伸功能,如有菌丝,就不会形成像在其它真菌中常见的那样有固定大小和形态的菌落。如:根霉捕食线虫:菌环、菌网特化的气生菌丝:(各种子实体)简单:无性:分生孢子头、孢子囊有性:担子。复杂:分生孢子器、分生孢子座有性(子囊果):闭囊壳、子囊壳、子囊盘5、试列表比较四大类微生物的细胞形态和菌落特征 微生物类型菌落特征单细胞微生物菌丝状微生物细菌酵母菌放线菌霉菌主 要 特 征菌落含水状态很湿或较湿较湿干燥或较干燥干燥外观形态小而凸起或大而平坦大而凸起小而紧密大而疏松或大而紧密细胞相互关系单个分散或有一定排列方式单个分散或假丝状丝状

9、交织形态特征小而均匀,个别有芽孢大而分化细而均匀粗而分化参 考 特 征菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明菌落与培养基结合程度不结合牢固结合较牢固结合菌落颜色多样单调,一般呈乳脂或矿烛色,少数红色或黑色十分多样细胞生长速度一般很快(37C,24h)较快(28/30 C,3天)慢一般较快(一星期)6、试列表比较细菌、放线菌、酵母菌、霉菌细胞壁成分的异同,并提出制备相应原生质体的酶或试剂细胞壁成分:细菌:主要成分是肽聚糖。细菌分为G+和G-,G+肽聚糖含量高,G-含量低;G+磷壁酸含量较高,而G-不含磷壁酸;G+类脂质一般无,而G-含量较高;G+不含蛋白质,G-含量较高,放线菌:G-,其细胞壁具有G

10、-所具有的特点,含有丙氨酸、谷氨酸、氨基葡萄糖、胞壁酸,酵母菌和霉菌为真菌,酵母菌:细胞壁主要成分是多糖,由外到内为:甘露聚糖,蛋白质,葡聚糖。霉菌:细胞壁成分为几丁质、纤维素。制备原生质体的酶或试剂:G+:青霉素、溶菌酶;G-:EDTA鳌合剂,溶菌酶,放线菌:青霉素,溶菌酶。酵母菌:蜗牛消化酶,霉菌:纤维素酶。1、病毒粒有哪几种对称体制?各种对称体制又有几种特殊外形?试各举一例2、什么是烈性噬菌体?试简述其裂解性增值周期定义:能在宿主细菌细胞内增殖,产生大量子代噬菌体,并通过裂解细菌细胞而释放出来的噬菌体,被称为烈性噬菌体。大肠杆菌的T偶数噬菌体是典型的烈性噬菌体,裂解性增值周期:吸附、侵入

11、、增殖、成熟(装配)、裂解(释放)吸附:尾丝与特异性受体接触后,吸附在受体上,通过刺突、基板固定于细胞表面;(宿主细胞表面的特异性受体:G+磷壁酸,G-脂多糖)侵入:尾管所携带的溶菌酶把细胞壁上的肽聚糖水解,将核酸注入宿主细胞内;增殖:包括核酸的复制和蛋白质的合成;成熟:把合成好的“部件”进行自我装配;裂解:在脂肪酶和溶菌酶的作用下,促使细胞裂解。3、简述用双层琼脂平板法测定噬菌体效价的基本原理和主要操作步骤原理:噬菌体的效价即1mL样品中所含侵染性噬菌体的粒子数。效价的测定一般采用双层琼脂平板法。由于在含有特异宿主细菌的琼脂平板上,一般一个噬菌体产生一个噬菌斑,故可根据一定体积的噬菌体培养液

12、所出现的噬菌斑数,计算出噬菌体的效价。此法所形成的噬菌斑的形态、大小较一致,且清晰度高,故计数比较准确,因而被广泛使用。主要操作步骤:预先分别配制含2%和1%琼脂的底层培养基和上层培养基。先用底层培养基(2%)在培养皿上浇一层平板(7-8mL),待凝固后,再把预先融化并冷却到45C以下,加有较浓的敏感宿主(指数期的宿主菌悬液0.2mL)和一定体积待测噬菌体样品(0.1mL)的上层培养基,在试管中摇匀后,立即倒在底层培养基(1%,3mL)上铺平待凝,然后在37C下保温。一般经十余小时后即可对噬菌斑计数。优点:加了底层培养后,可弥补培养皿底部不平的缺陷;可使所有的噬菌斑都位于近乎同一平面上,因而,

13、大小一致,边缘清晰且无重叠现象;因上层培养基中琼脂较稀,故可形成形态较大、特征较明显以及便于观察和计数的噬菌斑。注意:用双层平板法计算出来的噬菌斑效价总是比电镜直接计数得到的效价低。4、何谓一步生长曲线?它分几期,各期有何特点?定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线,称作一步生长曲线。分为:潜伏期、裂解期、平稳期潜伏期:噬菌体的核酸侵入宿主细胞后至第一个成熟噬菌体粒子释放前的一段时间。分为隐晦期(人为地裂解宿主细胞后,裂解液无侵染性)和胞内累积期(人为地裂解细胞后,其裂解液已呈现侵染性)。裂解期:宿主细胞迅速裂解,溶液中噬菌体粒子急剧增多的一段时间。由于宿主群体中各个细胞的裂解不可能是同步的,因

14、而出现了较长的裂解期。平稳期:指感染后的宿主细胞以全部裂解,溶液中噬菌体效价达到最高点的时期。5、什么是溶源菌,有何特点?如何检出溶源菌?溶源菌:是一类被温和噬菌体感染后能相互长期共存,一般不会出现迅速裂解的宿主细胞。溶源性的特点:稳定性:溶源菌通常很稳定;溶源性转变:噬菌体DNA整合到宿主核基因组中而改变了宿主的基因型,使宿主某些性状发生改变,称溶源性改变;免疫作用:前噬菌体基因还导致溶源性细菌对同类型噬菌体的侵染具有免疫作用,阻止携带与溶源性菌体所含的前噬菌体DNA相同的噬菌体的吸附和生物合成;溶源菌中少数前噬菌体自发脱离宿主细胞染色体进行增殖,导致细胞裂解。这种现象称为溶源菌的自发裂解;

15、复愈:溶源性是可逆的,前噬菌体可以自发的或在外界刺激诱导下被激活,裂解宿主细胞,进入裂解途径。检出溶源菌:将少量溶源菌与大量的敏感性指示菌(遇溶源菌裂解后所释放的温和噬菌体会发生裂解循环者)相混合,然后与琼脂培养基混匀后倒一个平板,经培养后,溶源菌就一一长成菌落。由于溶源菌在细胞分裂过程中有极少数个体会引起自发裂解,其释放的噬菌体可不断侵染溶源菌菌落周围的指示菌菌苔,于是就形成了一个个中央有溶源菌的小菌落,四周有透明圈围着的这种独特噬菌斑。6、某微生物发酵厂的发酵液和发酵状态出现疑似感染有噬菌体的异常情况,试讨论这些异常现象有哪些?并设计一个简便易行的方法去证明现象:轻则引起发酵周期延长、发酵

16、液变清和发酵产物难以形成等事故,重则造成倒罐、停产甚至危及共厂命运。证明:用发酵的纯菌做两组平板(长成菌苔的),其中一组加入合适溶度的发酵液,另一组加入同溶度的新鲜培养基或未染噬菌体的发酵液,培养一段时间后观察,若出现空白斑,则为有噬菌体。7、如何防止噬菌体对发酵工业的危害确立防重于治的观念,例如绝不使用可疑菌种(避免使用溶源菌),严格保持环境卫生,决不任意丢弃和排放有生产菌种的菌液,注意通气质量,加强发酵罐和管道灭菌,不断筛选抗噬菌体菌种,经常轮换生产菌种,以及严格会客制度等。1、试对能源为主、碳源为辅对微生物的营养方式进行分类,并举例说明之。 有机物:化能异养微生物(绝大多数原核 化学物质

17、(化能营养性) 生物,全部真菌和原生生物) 无机物:化能自养微生物(硝化细菌、能源 硫化细菌、氢细菌) 光能自养微生物(蓝细菌、紫硫细菌、藻类) 辐射能(光能营养型)光能异样微生物(红螺菌科的细菌)2、试述通过基团转移运送营养物质的机制基团移位指一类既需特异性载体蛋白的参与,又需耗能的一种物质运送方式,其特点是溶质在运送前后会发生分子结构的改变。广泛存在于原核生物中。主要用于运送各种糖类、核苷酸、丁酸、腺嘌呤等物质,特点是每输入一份子葡萄糖分子就需要消耗一个ATP的能量。机制:在大肠杆菌中,主要靠磷酸转移酶系统(PTS)即磷酸烯醇式丙酮酸-己糖磷酸转移酶系统。(1)热稳载体蛋白(HPr)的激活

18、:细胞内的高能化合物磷酸烯醇式丙酮酸的磷酸基团通过酶的作用把HPr激活;(2)糖经磷酸化而进入细胞内:膜外环境中的糖分子先与细胞膜外表面上的底物特异蛋白酶c结合,接着糖分子被由PHPr酶a酶b逐级传递来的磷酸基团激活,最后通过酶c再把这一磷酸糖释放到细胞质中。3、什么是选择性培养基?试举一例并分析其中为何有选择功能根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。加富性选择培养基投其所好;抑制性选择培养基取其所抗甘露醇可富集自生固氮菌,纤维素可富集纤维分解菌;石蜡油可富集分解石油的微生物,较浓的糖液可用来富集酵母菌;酵母菌富集培养基;Ashby无氮培养基(富集好氧性自生固

19、氮菌);Martin培养基(富集土壤真菌用);含糖酵母膏培养基4、什么叫鉴别性培养基?试以EMB为例分析其具有鉴别性功能的原因一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只需用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。最常见的鉴别性培养基是伊红美蓝乳糖培养基,即EMB培养基。EMB培养基中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制G+细菌和一些难培养的G-细菌。在低酸度下,这两种染料会结合并形成沉淀,起着产酸指示剂的作用。因此,试样中多种肠道细菌会在EMB培养基平板上产生易于用肉眼识别的多种特征性菌落,尤其是E.coli,因其能强烈分解乳糖而产生大量混合酸,菌体表

20、面带H+,故可染上酸性染料伊红,又因伊红与美蓝结合,故使菌落染上深紫色,且从菌落表面看到绿色金属闪光(似金龟子色)。产酸弱的菌株的菌落呈棕色,不发酵乳糖的菌落无色透明。第五章生物氧化的形式包括某物质与氧结合、脱氢和失去电子3种;生物氧化的过程可分为脱氢(或电子)、递氢(或电子)和受氢(或电子)3个阶段;生物氧化的功能有产能(ATP)、产还原力H和产小分子中间代谢物3种;而生物化的类型则包括呼吸、无氧呼吸和发酵3种。1、在化能异养微生物的生物氧化化过程中,其基质的脱氢和产能的途径主要有几条?试列表比较各途径的主要特点特点EMP途径(糖酵解途径、己糖二磷酸途径)产生ATP和NADH2形式的还原力;

21、通过逆向反应可进行多糖合成;与乙醇、乳酸、甘油、丙酮、和丁酸的发酵生产有关。基本代谢途径,厌氧条件下进行,产能效率低,提供多种中间代谢产物HMP途径(己糖一磷酸途径、戊糖磷酸途径、磷酸葡萄糖酸途径)不经EMP途径和TCA循环而得到彻底氧化,无ATP生成;产生大量的还原力NADPH2;产生各种长度不同的中间代谢物(37糖);单独HMP途径少,一般与EMP途径共存;是戊糖代谢的主要途径ED途径(2-酮-3-脱氧-6磷酸葡糖酸(KDPG)途径)可不依赖于EMP途径和HMP途径单独存在,是少数缺乏完整EMP途径的微生物的一种替代途径;关键中间代谢物2-酮-3-脱氧-6磷酸葡糖酸(KDPG)裂解为丙酮酸

22、和3-磷酸甘油醛;特征酶:KDPG醛缩酶;一分子葡萄糖经4步反应生成2分子的丙酮酸,一分子来源于KDPG裂解直接产生,另一分子由3-磷酸甘油醛经EMP途径转化而来;步骤简单,产能效率低,只产生1分子的ATP;好氧时,与TCA循环相连,厌氧时进行乙醇发酵。TCA循环(三羧酸循环、Krebs循环、柠檬酸循环)必须在有氧条件下进行;产能效率极高;为糖、脂、蛋白质三大物质转化中心枢纽2、试述EMP途径在微生物生命活动中的重要性极其与人类生产实践的关系生理功能:(1)供应ATP和NADH2形式的还原力;(2)是连接TCA循环、HMP、EMP途径的桥梁;(3)为生物合成提供多种中间代谢物;(4)通过逆向反

23、映可进行多糖合成;人类生产实践:与乙醇、乳酸、甘油、丙酮和丁酸等的发酵密切相关3、试述HMP途径在微生物生命活动中的重要性,并说出它与人类生产实践的关系答:(1)供应原料:为核酸、核苷酸等提供戊糖磷酸;赤藓糖-4-磷酸是合成芳香族、杂环族氨基酸的原料;(2)产还原力:NADPH2,;(3)作为固定CO2的中介;(4)扩大碳源利用范围C3-C7;(5)连接EMP途径;(6)提供多种重要的发酵产物;(7)在总的能量代谢中占一定比例。4、试述ED途径在微生物生命活动中的重要性,并说出它与人类生产实践的关系答:替代EMP途径,可与EMP、HMP、TCA连接,可进行细菌酒精发酵以产生酒精;关系:用ED途

24、径发酵生产乙醇,代谢速率高,产能转化率高,菌体生成少,代谢副产物少,发酵温度较高,不必定期供氧;缺点:PH较高(约5),较易染菌,细菌对乙醇耐受力低。5、试列表比较呼吸、无氧呼吸和发酵的特点呼吸无氧呼吸发酵递氢体呼吸链(电子传递链)氢受体O2无机或有机氧化物(NO3-,SO4 2-,或琥珀酸)中间代谢物(乙醛,丙酮酸等)终产物H2O还原后的无机或有机氧化物还原后的中间代谢物(乙醇,乳酸等)产能机制氧化磷酸化底物水平磷酸化产能效率高中低6、试列表比较同型乳酸发酵和异型乳酸发酵的差别类型途径产物/1葡萄糖产能/1葡萄糖菌种代表同型EMP2乳糖2ATP德氏乳杆菌异型HMP1乳糖1乙醇1CO21ATP

25、肠膜明串珠菌发酵乳杆菌1乳酸1乙酸短乳杆菌1.5乙酸2.5ATP两歧双歧杆菌7、试列表比较细菌酒精发酵和酵母菌酒精发酵的特点和优缺点 种类项目酵母菌酒精发酵细菌酒精发酵同型酒精发酵异性酒精发酵EMP途径ED途径HMP途径的PK途径代表菌酿酒酵母假单胞菌反应式G+2ADP+2Pi2乙醇+2CO2+2ATPG+ADP+Pi2乙醇+2CO2+ATPG+ADP+Pi乳酸+乙醇+CO2+ATP优点产能较高适宜高浓度的葡萄糖,吸收葡萄糖速度较酵母菌快,生长过程完全不要氧气产生酒精的同时产生乳酸缺点不适宜高浓度的葡萄糖发酵底物局限于葡萄糖、果糖、蔗糖该途径不能单独存在8、在化能自养细菌中,亚硝化细菌和硝化细

26、菌是如何获得其生命活动所需的ATP和H的?亚硝化细菌是通过氧化无机底物氨根离子获得ATP和还原力H的,氨的氧化必须有氧气参与,氧化作用的第一步是由氨单加酶催化成羟氨,接着由羟氢氧化还原酶将羟氨氧化为亚硝酸。ATP是第二步中通过细胞色素系统进行的电子转移磷酸化形成的。硝化细菌是通过亚硝酸氧化酶系统催化氧化亚硝酸得能量的,亚硝酸根离子氧化为硝酸根离子的过程中,氧来自水分子而非空气,产生的质子和电子从与其氧化还原电位相当细胞色素进入呼吸链,顺着呼吸链传递给氧,产生ATP,而还原力H则是通过质子和电子的逆呼吸。9、能进行循环光合磷酸化的光合细菌有哪几个代表属?其分类地位如何?具有循环光合磷酸化的生物,

27、分别属于原核生物细菌域不同门中的光合细菌。他们都是厌氧菌,被分在绿屈挠菌门(绿屈挠菌属)、绿菌门(绿菌属)和变形细菌门(红螺菌属、红假单胞菌属、着色菌属、外硫红螺菌属)中。特点是进行不产氧光合作用,即不能利用H2O作为还原CO2时的氢供体,而能利用还原态无机物(H2S,H2)或有机物作还原CO2的氢供体。10、 试图示不产氧光合细菌所特有的循环光合磷酸化反应途径特点:a.光驱试下,电子自菌绿素上逐出后,经过类似呼吸链的循环又回到菌绿素;b.AT和还原力H分别进行;c.还原力来自H2S等无机物;d.不产氧(O2)11、试图示产氧光合细菌和其它绿色植物所特有的非循环光合磷酸化的生化途径A.电子传递非循环式;B.在有氧条件下进行;C.存在两个光合系统(PS和PS);D.ATP(产自PS)、还原力(产自PS)、 O2(产自PS)同时产生;E. 还原力中的H

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