猪传染性胸膜肺炎的研究进展Word格式.docx

1、例如， Nielsenetal 1996 年鉴定 了一株K2: 07菌株，它的荚膜多糖与 APP2型一致，但脂多 糖却与 APP7 型一致，因而根据荚膜多糖和脂多糖的抗原差 异性，尚不能对此类菌株定型。生物 I 型 1-12 个血清型是 临床上常见的血清型，研究得比较清楚，本章无特殊说明， 均是指这 l2 个血清型。二、流行病学病猪和带菌猪是猪胸膜肺炎的主要传染源。 APP定居于感染猪的呼吸道，并有很强的宿主特异性。急性病例的整个呼 吸道粘膜含菌量达 106CFU/ml 以上，可随痰、鼻液和飞沫扩 散传播。慢性病例携带的病原主要存在于肺及扁桃体，而鼻 腔含量较少。当猪吸人带菌猪排出的带菌小液滴

2、后就容易引 发感染。胸膜肺炎放线杆菌非常脆弱，通常在外界坏境中只 能存在很短的时间，如果气温很低，空气中的湿度较大，细 菌表面又有粘液性的有机物作保护层时，它在外界存活的时 间就会延长。尽管 APP对消毒剂非常敏感，但借助人员、物 品和车辆仍然可以传播本病。当胸膜肺炎急性暴发时， APP 从一个猪场 （ 舍） 传到另一个猪场 （ 舍） 多是通过空气或来 往的人员和车辆进行的。 由于 APP 可以定居于猪体内而不表 现临床症状，故而从外地引进新猪也是该病传播的主要方 式。而且一次引进的新猪越多，该猪场暴发本病的可能性越 大。感染胸膜肺炎放线杆菌的母猪群表现典型的血清学阳 性反应，这些母猪通过初乳

3、传递高滴度的母源抗体给它们的 后代。仔猪大约在 4 周龄肘将失去母源抗体的保护， 到 9 周 龄时母源抗体消失， 此时仔猪就处于 APP 的威胁之下。 研究 表明，猪胸膜肺炎的发生与 APP的感染剂量有关，低剂量仅 可导致血清阳转，而不表现临床症状。较高水平的剂量则可 引起致死性感染。从理论上讲，在一个污染的环境中，胸膜 肺炎放线杆菌的感染剂量与阳性猪群中猪的年龄的关系呈 对数增加。当生长猪受到数倍于感染剂量的 APP攻击时，胸膜肺炎就会暴发，这就是临床上常见的猪胸膜肺炎多发于 12-l6 周龄育肥猪的原因。 丹麦的 J P Nielsen 等研究了 8 个 曾发生过肺炎的育肥猪群， 当猪在2

4、0-30kg时，采用PCR技术发现猪舍空气中存在胸膜肺炎放线杆菌，而同一批猪上市 （80 -90kg）时，猪舍空气中却没有发现 APR这表明，猪在 进人育肥舍后不久，经空气传播的胸膜肺炎会突然发生，其 后将逐惭减少，并可能恢复正常和获得免疫力。猪群感染胸膜肺炎放线杆菌的情况可根据临床症状的 有无和血清学状态依次划分为三个类型，即临床症状阳性血 清学阳性 （1 类 ）; 临床症状阴性血清学阳性 （2 类 ）; 临床症 状和血清学均为阴性 （3 类） 。就血清学检验而言，不存在临 床症状阳性而血清学阴性的猪群，如果出现这种情况，只能 说明所用的血清学诊断方法不敏感或不特异。根据经验，最 常见的类型

5、是 2 类，大约 80 的猪群属于这一类型，而 1 类和 3 类猪群占剩余的 20，在 2 类猪群中， 猪场的环境卫 生和管埋措施异常重要，否则可引起胸膜肺炎的暴发，结果 使 2 类猪群转化为 l 类。实质上，在一个连续生产的猪场中， 常存在这样一种情况，即种猪群和生长猪群分属于不同的类 型，例如，在采用早期断奶 （SEW） 和全进全出 （AIAO） 管理 制度的猪场中， 种猪群属于 2 类，而生长猪群可能属于 3 类 因此，良好的管理制度可保证生长猪不受 APP 的侵袭。自 1957 年 Pattison 等首次报道猪胸膜肺炎以来，许多 国家和地区相继发现本病。由于本病经空气和接触传播，以

6、致使养猪集约化程度高的国家和地区发病更为严重。据报 道，本病在欧洲、美国、加拿大、墨西哥、南美、韩国、日 本、中国台湾省、澳大利亚等都曾暴发过。虽然一些血清型 曾单独流行于某些国家和地区，如 APP2 型曾流行于瑞士、丹麦、瑞典 ;APP1 型和 53 曾流行于美国和加拿大，但仍存 在儿个血清型同时流行于同一个国家甚至同一个猪场的可能性。我国在上世纪 80 年代以前主要以分散饲养为主，猪胸 膜肺炎鲜有报道。进人上世纪 90 年代后，随着养猪业规模 的逐渐扩大，加上国家对外引种及地区之间引种工作的频 繁，猪胸膜肺炎的发病率和致死率大大高于以前。中国农业 科学院哈尔滨兽医研究所的杨旭夫等于 198

7、7 年发现临床病 例，并通过病原分离鉴定、血清分型、人工接种等，证明猪 胸膜肺炎在我国的存在和流行。 1998 年， 青岛动检所抽检猪 血清 754 份，阳性 l64 份，阳性率 21.2 。据吴家强等统计， 仅 2000 年，我国就有吉林、湖北、广西、江苏、湖南等地 区报道本病。目前该病在我国广泛存在，但不同地区存在的 血清型有所差异，其中甘肃、宁夏、青海主要流行 2, 3, 7型; 湖北、湖南流行 3, 7,12 型; 福建、海南以 1,7 型为主 ; 陕西则流行 3, 7 型。我国地域辽阔，各地的环境条件和饲 养管理水平差异较大，加上猪群的引人和调动缺乏严格的兽 医卫生管理制度的制约，所

8、以各地存在的血清型可能会有所 变化，这就增加了流行病学研究和预防控制的困难性。三，临床症状 因饲养条件、猪的免疫状态、不利应激因素及猪对病原 体的暴露程度的不同，临床症状存在很大差异，可分为最急 性型、急性型、亚急性型和慢性型。最急性型暴发时，个别猪往往突然发病，体温达到 41.5 C,倦怠，厌食，并能出现 短期腹泻或呕吐。早期病猪躺卧时无明显的呼吸症状，只是 脉率增加，后期则出现心力衰竭和循坏障碍，耳、鼻及后躯 皮肤发绀。晚期出现严重的呼吸困难和体温下降，临死前有 血性泡沫自嘴、 鼻流出。 最急性病猪可在出现临床症状后 24 一 36 小时内死亡。个别病例在没有出现任何临床症状下突 然死亡。

9、急性病例会在一个猪群中出现很多。病猪体温可升至40.5-41 C,皮肤发红，精神沉郁，厌食。当呼吸越来越困 难时，会导致血液循环障碍。 如果患病猪发病后能坚持 4 天， 它存活的可能性就比较大，但往往会发展成慢性胸膜肺炎。亚急性和慢性病例多在急性期之后出现，病猪轻度发 热或不发热， 有不同程度的自发性或间歇性咳嗽， 食欲下降， 肉料比降低，病猪不爱活动，驱赶猪群时常常掉队，仅在喂 食时勉强爬起。此类病猪在投服敏感抗生素的条件下，症状 可明显缓解，但不久后可能会使有症状的猪的比例增加。慢 性期的猪群症状表现不明显，有时也可能被其它呼吸病原感 染所掩盖，或与其它呼吸道病原相伴发，而仅在剖检或屠宰

10、时方可发现。慢性胸膜肺炎病猪往往会将其携带的病原传给 以前没有接触该病原的猪群，有时还会增加急性暴发的可能 性。四，病理变化 许多研究认为，猪感染胸膜肺炎放线杆菌后肺组织形 成的损伤是由胸膜肺炎放线杆菌产生的毒素引起的。 APP 对 肺泡上皮细胞有很强的亲嗜性，这种亲嗜性有利于诱导毒素 从 APP 进人宿主细胞， 进而导致靶细胞损伤， 甚至于在毒素 中和抗体存在时也可侵害细胞， a 亚型最早于人工感染 3 小 时后就可观察到由毒素引起的肺部病变，如肺泡壁水肿，毛 细血管堵塞，淋巴管由于充满水肿液、纤维及炎性细胞而扩 张。损伤的肺泡内可见血小板凝集及嗜中性白细胞积聚。在 感染后 4 天，肺泡界线

11、分明，支气管内充满粘稠分泌物，随 着病变时间延长，中心部位出现坏死并有纤维化现象。肉眼可见的病变主要存在于呼吸道。肺炎多是双侧性 的，并多在肺的心叶、尖叶和脯叶出现病灶，与正常的组织 界线分明。在迅速死亡的病猪的气管、支气管中充满泡沫状 的血性液体。在最急性型的后期，肺炎病灶变暗、变硬，但 无纤维素性胸膜肺炎出现。纤维素性胸膜肺炎发生于发病后 至少 24 小时，并随着病程的发展，纤维素性胸膜肺炎蔓延 至整个肺脏，使肺与胸膜粘连，以至于尸检时难以将肺与胸 膜分离。急性期形成的病灶可随着病程的延长而逐渐变小， 形成结节， 外面被结缔组织包裹而形成硬壳， 并与胸膜粘连。 多数情况下，肺部病灶会逐渐溶

12、解，仅剩下与纤维素性胸膜 炎粘连的部位。但这些病变很难与其它病原形成的损伤相区 别。五，血清学检测技术根据流行病学资料、临床症状和典型的病理变化可对猪 胸膜肺炎做出初步诊断。但引起猪呼吸系统的病原较多，有 些胸膜肺炎病例还可能继发或伴发其它病原如巴氏杆菌、副 猪嗜血杆菌、猪放线杆菌的感染，这给临床诊断和预防控制 带来很大困难。 因此，如果要全面确定和评价 APP 在猪群发 病过程中的作用地位，必须依靠恰当的实验室诊断技术。（一） 血清学检测技术及其评价 自上世纪 70 年代以来，国内外己建立了有关猪胸膜肺 炎诊断和菌株分型的多种血清学方法。 APP 血清型较多，不同血清型有着各自的型特异性抗原

13、 （主要是CP和LPS），但某些血清型之间，其 cp 相 Lps 非常相似，所以交叉反应时有 发生。另外，由于 APP 型特异性抗原的差异性，使得很难建 立一种对所有血清型部能做出诊断和鉴定的通用的诊断和 监测方法。（二） 血清学检测方法1、 间接血凝试验 :1983年，Mittal等建立了 APP的间接血凝试验（IHA）, 用于APP的检测和分型。其基本步骤为，菌体用 0.8596的 盐水悬浮过夜后离心，上清液即为盐水抽提物。将盐水抽提 物与绵羊红细胞 （SRBCS） 一起温育 1 小时，待菌体抗原被 吸附到SRBCS的表面后就可以进行试验。反应之前，待检血 清用未致敏的SRBCs吸附以消除

14、非特异性反应。 在微量血凝板上，将待枪血清进行倍比稀释，然后加大致敏的 SRBCS。阳性反应出现光滑的片状沉淀，而阴性反应则出现点状沉 淀。华中农业大学动物医学院的陈焕春等于 1999 年报道， 经戊二醛 - 鞣酸化处埋的绵羊红细胞用猪胸膜肺炎放线杆菌 致敏，以间接血凝试验检测 pcp 病猪的血清抗体，致敏红细 胞的最佳浓度为 100 -150 ug/ml ，超免血清的抗体效价达 1:512-1:1024 ，对人工感染 4 天的猪血清抗体的检出率达 80，与猪瘟、猪肺疫、喘气病、猪萎缩性鼻炎的阳性血清无 交叉反应。为防止漏检，作者将三种血睛型的抗原混合致敏 绵羊红细胞，具有特异性的综合反应。王

15、春来等于 1985 年 报道， IHA 在血清型 6 和 8 之间有交叉反应，但能将 4 型和 7 型分开，其它许多检测方法却不能将这两种血清型分开。 IHA 试验因敏感、特异、操作简便，且可早期诊断和检侧， 适用于推广应用。2、 补体结合试验 :补体结合试验（CFT）是用来检测APP的最早的血清学方 法，CFT需要用不同的方法自菌体中获得抗原，另外，还需 用补体、小牛血清、绵羊红细胞 （SRBCs） 被检血清被灭活 后，加入补体、小牛血清，最后加大抗原，反应过夜后，第 二天加入SRBCS如果待检血清中含有特异性抗体，则抗原 抗体复合物结合补体而不出现溶血，呈阳性反应 ; 反之，则出现溶血，呈

16、阴性反应。 CFT特异性高，但敏感性低，而且 有时产生假阳性结果， 加上操作复杂， 只适合于实验室应用， 难以进行田间推广。3、 凝集和协同凝集试验 : 凝集试验一种简单快速确定胸膜肺炎放线杆菌和进行 血清分型的方法。凝集试验包括常规试管凝集、 2- 琉基乙醇（2-ME） 试管凝集和快速玻片凝集。凝集试验中使用的抗血 清采自于 APP 抗原免疫的兔子。如果是用 2-ME 试管凝集试 验，抗血清用盐水或 0.1mol/ L 的 2- 琉基乙醇连续稀释。 将细菌悬浮于甲醛溶液中，并将其煮沸，以得到试验所用的 抗原。用稀释的抗血清与抗原等量混合，观察凝集反应。试 管凝集需要反应 l8 小时，而玻片凝

17、集试验仅需要 2-3 分钟。 协同凝集试验和 2-琉基乙醇 （2-ME） 试管凝集试验的特异性 与敏感性均优于快速玻片凝集和试管凝集试验，但上述方法 均不能将APP3型与6型及8型区别开来。尽管快速平板凝 集和协同凝集试验的敏感性不及 ELISA,但它们快速、简便， 因而也成为实验室区分 APP 血清型的常规方法。4、 乳胶凝集试验 :乳胶凝集试验 （LAT） 是一种简便快速的检测方法，已用 于多种疾病的快速检测。 LAT不仅可用于 APP的检侧，也可用于分型。但这种方法在应用过程中也出现了不同血清型之 间的交叉反应。为了解决这一问题， Inzana T J （1985） 研 究改进了 LAT

18、检侧方法。他建议在LAT中使用不同的方法来 消除交叉反应，试验中，将经荚膜免疫的家兔血清用同型的 无荚膜的胸膜肺炎放线杆菌突变株进行吸附，以除去非荚膜 抗原的抗体，然后用处理过的仅含荚膜抗体的血清致敏乳 胶，用于APP抗原的检测。该方法特异性好，不与异型血清 反应，也不与多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌和猪放线杆菌 反应。而且致敏的乳胶可以从肺组织、鼻拭子以及浓缩的尿 中直接检侧到 APP荚膜。LAT不仅敏感、特异，而且简便， 如果能很好地解决交叉反应的问题，将具有良好的开发和应 用前景。5、 酶联免疫吸附试验：以酶联免疫吸附试验 （ELISA） 技术进行 APP 的血清学 诊断，大致包括两个类型

19、，即型特异性 ELISA 和种特异性 ELISA。型特异性ELISA是指只能对某一血清型的 APP做出 检侧的 ELISA 方法。 Nicolet 等（1981） 首次推荐以 ELISA 替 代CFT用于APP的血清分型。与CFT相比，ELISA的敏感性 高，特异性稍低，有时会产生假阳性结果，其特异性的提高 在于对抗原的纯化。UV, LPS和IMA都分别被作为 APP型的 特异性抗原。 长链脂多糖 （LC-LPS） 也被作为 APP 型血清学 诊断的特异性抗原， 但这一方法运用于 APPI 型检测时， 9 型 和 11 型的抗血清能与 LC- LPS 抗原发生交叉反应。尽管如 此，人们认为 L

20、C-LPS 比 CP 易于大量纯化，这一方法仍然 有很大的推广价值。 荚膜抗原是常用的用于 ELISA 的诊断抗 原，但荚膜抗原与酶标板的结合依赖的是亲水作用。而荚膜 是疏水的，因而其与酶标板的结合力很低，这在很大程度上 会影响反应的敏感性和特异性。种特异性 ELISA 是指能对所有血清型的 APP 做出检测 的ELISA方法。JiannenM等建立了种特异性的间接 ELISA方 法，以 APP5 型的培养物上清 （ 主要成分是 Apx I 和 Apx II） 浓缩后免疫兔子， 制备的抗血清经亲和纯化后包被 ELISA 酶 标板。该方法的稳定性和重复性好，虽然对不同血清型检测 结果的反应强弱不

21、同，但仍然可以出现阳性反应。 Leiner G 以原核表达的Apx 的重组蛋白作为抗原， 建立了种特异性 的 ELISA 诊断方法，以 2, 3, 5, 7 相 9 型 APP 感染猪群 为检侧对象， 共检测 400 份血清，其中 243 份为阳性， 157 份 为阴性，其检测结果CFT的相关性很高，但敏感性较CFT高。 这一方法敏感、廉价，对实验室检侧以及对规模化猪场猪胸 膜肺炎的诊断和监控非常适用。因为 Apx II 在除 10 型外的 所有 APP 血清型申都可以产生和分泌， 所以只要能够建立起 敏感性良好的种特异性 ELISA 方法，埋论上可以对儿乎所有 的APP感染做出检侧。近年来，

22、由于 Apx W毒素的发现，使得人们更有希望建立针对所有血清型的血清学诊断方法， 因为 Apx N 是目前发现的血清型均可产生的毒素。由于在自然状况下，猪感染胸膜肺炎放线杆菌后 10 -14 天才能检测到循环抗体，所以抗体检测对刚暴发的疾病的诊断意义不大，但对 PCP流行病学的调查十分重要。在决定对一个猪群采用哪一种血清学诊断方法之前，需要评价所用试 验的优点和不足。如果同一个猪群存在多种血清型，可能需 要采用儿种血清学诊断方法，或者一种血清学诊断抗原中应 包含有当地存在的血清型。诊断结果终点的判定是对猪群而 言，而对于个别动物进行判定可能不是特别有效。采集样品 的数量和采样时间对正确评价猪群

23、的血清学状态十分重要。 目前国内巳开发出针对我国流行的血清型的胸膜肺炎 ELISA 诊断盒和 IHA 诊断抗原。 ELISA 敏感性高， 但操作条件要求 较，诊断成本较高， 不利于商业操作。 lHA 虽然不如 ELISA 敏 感、特异，但操作简单，诊断成本低 ; 不需要特殊仪器和试 剂，结果易于判定，对操作者的技术素质要求低，更适用于 田间推广。六，预防和控制 猪胸膜肺炎和传染性萎缩性鼻炎 （PAR） 及猪气喘病（MPS）同被认为是当今大型猪场的三大呼吸道疾病。和后 两者相比，猪胸膜肺炎的危害性在于能够造成患猪死亡，尤 其是在刚引进的猪群会呈急性暴发。慢性病例则会影响生长 速度，提高猪群的养殖

24、成本。由于 APP血清型众多，影响流行的因素较为复杂，因此控制本病必须采取包括药物控制、 免疫预防和加强饲养管埋在内的综合性措施，任何一种单一 措施均难以收到良好的效果。为了降低本病的发病率，减少 经济损失，不同猪场应依据自身的经济实力以及本场胸膜肺 炎的流行情况而选择恰当的控制模式。（ 一 ） 药物预防和控制由于APP易产生耐药性，且部分敏感猪在感染后短时间 内发生不可逆转的肺组织病变，所以临床控制有相当的难 度。因此，猪场兽医应对本场 APP 的感染情况有亢分的认识， 必要时可定期分离病原进行体外药敏试验，以便选择具有最 低 MIC 的抗菌药物进行早期预防。在疾病流行初期使用敏感 抗菌药物

25、可有效降低死亡率，若延误治疗时机，则会对呼吸 道造成一定的损伤而造成死亡或转为慢性病例。一般情况 下，猪群一旦有病例出现，应全面检查猪群感染状况，采取 分而治之的方案进行全群用药。对不能采食或饮水的病猪， 应采用非肠道给药，为保证有效的血药浓度，还应按药物的 动力学特性进行反复给药。而对采食量基本正常的猪可拌料 或饮水水给药。抗菌药物的治疗尽管能在临床上取得成功， 但并不能在猪群中消除感染。肺部有脓肿的慢性病例在症状 消失后生长缓慢，并因菌体外排而对共余未感染猪构成威 胁，应及时隔离或淘汰。目前，用于防治猪传染性胸膜肺炎的抗菌药物较多，如 头孢噻呋、 阿莫西林、 氨卡青霉素、 土霉素、金霉素、

26、 SMM:TMP （3:1） 、泰妙灵、壮观霉素、替米考星、氟苯尼考、环丙沙 星、单诺沙星、恩诺沙星等。这些药物对猪胸膜肺炎放线杆菌表现出不同的体外抗菌活性。 Bargazzi 等 （1996） 报道了 lO8 株胸膜放线杆菌对 17 种抗药物的体外作用效果， 发现头 孢噻呋、恩诺沙星、单诺沙星及 SMZ/TMP对APP表现出较高的抗菌活性， MlC0.l2 ug/M ，而头抱氨卡、氟苯尼考、 泰妙灵、替米考星等则表现中等的抗菌活性泰乐菌素、土霉 素、阿莫西林及氨卡青霉素等则敏感性差。 Ueda 等 （1995） 对 1989 -1993 年间在日本分离的 90 株 APP （49 株血清 1

27、 型 和 4l 株血清 2 型 ） 做了氟苯尼考和其它儿种药物的体外敏感 性试验，发现氟苯尼考的 MIC为0.2-1.56 ug/m ，敏感菌株 数比例最高的为 0.39 ug/m ，对耐甲讽霉素的菌株仍显示出 较高的抗菌活性。（ 二 ） 兔疫控制由于APP血清型众多，彼此间缺乏有效的交叉免疫保护， 因此迄今为止尚未出现全球通用的疫苗。为了预防猪传染性 胸膜肺炎，人们研制了多种疫苗，包括灭活苗、亚单位苗和 弱毒苗， 并进行了许多免疫试验， 取得了不同的效果。 其中， 灭活苗的安全性最好，但由于灭活时部分抗原遭到破坏，免 疫效果较差。同时，用灭活苗免疫，机体主要是针对菌体抗 原如 CP, LPS

28、, OlmA 产生抗体，其免疫保护具有型特异性。 另外由于灭活苗中不含有 APP的主要毒力因子 Apx毒素，所 以不能诱导机体产生抗毒素抗体，其保护力有限，仅能降低 死亡率，不能避免临床症状出现和肺的损伤。以 Apx 毒素为 主要成分的亚单位苗，保护效果好于灭活苗，但由于亚单位 苗制作工艺复杂，成本较高，难以推广应用。弱毒苗保护效 果较好， 成本也很低， 但安全性差， 存在毒力返强的危险性。 虽然国际上己有商品化的亚单位苗出售，但国内市场仍以单 价和多价灭活苗为主，而且多处于中试阶段。目前，现有的商品化疫苗不能保护猪不成隐性带菌者， 也不能完全预防感染，只能减少发病率相死亡率。（ 三 ） 加强

29、饲养管理 几未发生本病的猪场应制定严格的预防措施，尤其是在 引种时应保证引人猪无胸膜肺炎放线杆菌感染，并定期对猪 群进行血清抗体枪测。本病在猪场一旦发生则很难清除，必 须依据胸膜肺炎的流行病学特点制定周密的防制计划。首先 应考虑经济损失，然后再考虑如何控制或消除感染。对病猪 进行早期隔离治疗，防止将病原传给其它猪。如不能做到， 则应控制好猪舍坏境，并全群投药预防。几有 APP感染的猪场，引人血清学阴性的猪应提前接种有效的疫苗。清空猪场 是一种最彻底的消除疾病的方法。将某个胸膜肺炎流行严重 的猪场全部淘汰，并对猪场彻底消毒，再从一个无特定病原 （SPF） 的猪场引进所需猪群，重新用于生产，这可能

30、是唯一 有效的方法。但这种做法代价很高，且不实用，一方面会造 成珍贵品种的丢失 ; 另一方面也无法阻止空气传播病原，尤 其是在养殖场比较密集的区域，不同猪场不可能都采取一致 的防控办法。对一个猪场而言，比较恰当的办法是采用合适 的血清学方法进行检侧，及时淘汰阳性母猪，并对仔猪采取 早期 断 奶 技 术 （SEW） 和加药技术进行预防。泰国的 T Damrongwatanapokn 和 WNeramtmansook 采用早期断奶 （14 日龄 ） ，结合饲料申添加金霉素与泰乐菌素，成功地从污染 猪场清除了 APR以血清学技术作为净化猪场的手段是非常 困难的事情，因为疫苗的使用使得己经很复杂的流行病学状 况变得更加混乱。如果能开发出具有遗传标记的疫苗，井且 配合有相应的检测方法，将更加有利于检验疫苗的效果，并 为真正净化猪群提供技术保证。七、存在的问题及展望