1、嗜酸性分叶核粒cell(eosinophilic segmented granulocyte):1116m,核多分2叶,核染色质结构与中性分叶核相似;胞浆内充满粗大均匀一致的橘红色嗜酸性颗粒。嗜碱性分叶核粒cell(basophilic segmented granulocyte):1012m,核可分34叶或分叶不明显;胞浆分布有少量大小不等的紫黑色嗜碱性颗粒。(二)红cell系统原始红cell(pronormoblast):1520m,呈圆形或椭圆形,边缘常呈钝角状或瘤状突起,核呈圆形,居中或偏位,约占cell体的4/5左右,核染色质呈颗粒状较原粒cell粗而密集,核仁13个不等,且大小不一
2、,形状不规则,呈浅蓝色或暗蓝色;胞浆量少,染深蓝色、不透明,有油画蓝感,无颗粒。早幼红cell(earlynormoblast):1018m,核圆形或椭圆形,约占cell的2/3以上,核染色质颗粒有浓集现象,较原红cell粗糙,核仁模糊或消失;胞浆量增多,染不透明蓝色或深蓝色,边缘可见瘤状突起。中幼红cell(polychromatic normoblast):815m,核圆形,约占cell的1/2,核染色质凝聚呈条索状或块状,中间有明显空隙,如压碎饼干样或打碎墨砚感,无核仁;胞浆量相对较多,浆内由于已合成不等量的血红蛋白,可染呈不同程度的嗜多色性。晚幼红cell(orthochromatic
3、 normoblast):710m,核圆形居中或偏位,占cell的1/2以下,核染色质致密聚集成结构不清的紫黑色团块状,无核仁;胞浆量较多,因已合成大量血红蛋白,常染浅灰红色或浅红色。网织红cell(reticulocyte):7.27.5m,为晚幼红cell刚脱核而成,是尚未完全成熟的红cell,瑞氏染色为多嗜性红cell,用煌焦油蓝活体染色后在cell内可见蓝色细颗粒或呈线状或网状结构。红cell(erythrocyte):正常红cell平均为7.2m,呈双面微凹之圆盘状,中央较薄,染色浅,边缘较厚,染色深,呈粉红色,无核。(三)单核cell系统原始单核cell(monoblast):15
4、20m,胞体圆形或椭圆形,核较大圆形或类圆形,核染色质纤细,呈疏松网状结构,核仁13个;胞浆量较其它原始cell丰富,灰蓝色,不透明,边缘不规则或有伪足状突起。幼稚单核cell(promonocyte):1525m,核圆形或不规则形,易见扭曲、凹陷、切迹等改变,核染色质较原始单核cell粗糙疏松,核仁可有可无;胞浆浅灰蓝色,不透明,可见细小颗粒。单核cell(monocyte):1220m,核形态常不规则,有肾形,马蹄形,“S”形,分叶状,笔架形等,核染色质疏松呈丝网状或条纹状结构,无核仁;胞浆量较多,染不透明的灰蓝色,可见细小红色颗粒。(四)淋巴cell系统1原始淋巴cell(lymphob
5、last):1018m,胞体圆形或椭圆形,核呈圆形或椭圆形,核染色质呈细颗粒状,核仁12个;胞浆量少,呈淡蓝色,透明,无颗粒。2幼稚淋巴cell(prolymphocyte):1016m,核圆形或椭圆形,核染色质仍较细致,核仁可有可无;胞浆量较少,淡蓝色,偶见有少许红色颗粒。3淋巴cell(lymphocyte)大淋巴cell:1215m,核圆形稍偏于一侧,核染色质排列紧密均匀,深紫红色;胞浆量相对较多,染透明淡蓝色,可有少量大小不等的红色嗜天青颗粒。小淋巴cell:69m,核相对较小,呈圆形,核染色质紧密呈大块状,结构不清楚,染深紫红色;胞浆极少,似裸核样,如可见则呈淡蓝色,一般无颗粒。(五
6、)浆cell系统1. 原始浆cell(plasmablast):1418m,胞体圆形或椭圆形,核圆形,占cell的2/3以上,居中或偏位,核染色质呈粗颗粒网状,染紫红色,核仁25个;胞浆量多,染深蓝色,不透明,无颗粒。2. 幼稚浆cell(proplasmacyte):1216m,胞体多呈椭圆形,核圆形或椭圆形,占cell的1/2,居中或偏位,核染色质较原浆cell粗糙紧密,开始聚集,染深紫红色,核仁模糊或消失;胞浆量多,深蓝色或紫蓝色或呈蓝色火焰状,不透明,有时可有空泡及少数嗜天青颗粒。3. 浆cell(plasmacyte):815m,核明显缩小,圆形,占cell的1/3以下,偏于一侧,核
7、染色质浓集成块状,常排列呈车轮状,无核仁;胞浆量丰富,染蓝色或紫蓝色,不透明,有时有泡沫感,浆内可含有小空泡及/或少量嗜天青颗粒,偶见胞浆中有较大的红色或淡蓝色透明的球状物,称Russell小体,是球蛋白聚集而成。(六)巨核cell系统1原始巨核cell(megakaryoblast):1530m,胞体圆形或不规则形,核大,呈圆形或不规则形,核染色质较其他原始cell粗,呈粗网状或细条索状结构,染深紫红色,核仁23个,淡蓝色,不清晰,不规则;胞浆量较少,不均匀,不规则,染深蓝色,无颗粒。2幼稚巨核cell(promegkaryocyte):3050m,外形不规则,核亦不规则,有重叠,可扭转呈肾
8、形或分叶状,核染色质呈粗颗粒或粗网状或局部浓集呈小块状,排列紧密,核仁可有可无;胞浆量增多,常有伪足状突出,染蓝色或浅蓝色,在近核处出现或多或少的很细小红色嗜天青颗粒。3巨核cell(megakarycyte)颗粒型巨核cell:4070m,可达100m,外形不规则,核较大,形态不规则,多呈分叶状,核染色质较粗糙,排列紧密呈团块状,紫红色,无核仁;胞浆量丰富,染粉红色,夹杂有蓝色,内含大量细小红色颗粒,常聚集呈簇,但无血小板形成。产板型巨核cell:4070m,可达100m,形态大致与颗粒型巨核cell相似,唯有不同的一点是胞浆内充满细小的红色颗粒及数量不等的血小板。裸核型巨核cell:是产板
9、型 巨核cell的胞浆解体后,释放出大量血小板,仅剩一个cell核,称之为裸核。4. 血小板(platelet):胞体很小,24m,呈圆形、椭圆形,逗点状,不规则形,中心部位有细小紫红色颗粒,无cell核,涂片上血小板常三五成群堆集出现。(七)其他cell1组织嗜cell(tissue basophilic cell):又称肥大cell(mast cell),1220m,呈圆形,椭圆形,梭形,三角形等,核小,呈圆形或椭圆形,居中或偏位,核染色质模糊,结构不清;胞浆充满圆形、大小一致的深紫色嗜碱性颗粒。2内皮cell(endothelial cell):822m,形态极不规则,多呈梭形,核呈圆形
10、或椭圆形,核染色质呈网状,多无核仁;胞浆量少,染淡蓝色,边缘常模糊不清,常沿核长轴的两侧或一端呈尾状伸出,可有细小紫红色颗粒。3纤维cell(fibrocyte):胞体较大,不规则,多为长尾形,核圆形或椭圆形(1数个),核染色质呈或细或粗的网状结构,核仁12个,不清晰,成熟者无核仁;胞浆丰富,多在cell两端,染淡蓝色,边界模糊,内含纤维网状物及少许嗜天青颗粒。4成骨cell(osteoblast):胞体较大,2040m,长椭圆形或不规则形,单个或多个成群分布,核圆形或椭圆形,常偏于cell一侧,核染色质排列呈粗网状,染深紫红色,核仁可有13个;胞浆丰富,染深蓝色或灰蓝色,边缘常呈模糊云雾状。
11、5破骨cell(osteoclast):胞体巨大,60100m,形态不规则,颇象巨核cell,核小、数量较多,3100个不等,圆形或椭圆形,大小大致相等,边缘清晰,彼此独立,无核丝相连,随意排列,核染色质呈粗网状,几乎每个核都有一个蓝色核仁;胞浆丰富,染淡蓝色或浅红色,含大小不等的紫红细小颗粒。6脂肪cell(fatty cell):3050m,胞体圆形或椭圆形,核较小,形状不规则,常被挤压在一边,核染色质呈细致密网状,无核仁;胞浆内充满大量空泡。7组织cell(histiocyte):胞体较大,2050m,形态多样,一般呈圆形或椭圆形及不规则形,核可有圆形,椭圆形,肾形,核染色质呈疏松网状结
12、构,核仁24个不等;胞浆多少不一,染色也常不一致,有深蓝,淡蓝,灰蓝色等,边缘多不规则或不清楚,无颗粒或含有少量或细或粗或粗细不一的嗜天青颗粒,可有空泡或含异物等。8吞噬cell(phagocyte):不是一种独立的cell,而是胞浆内含有吞噬物质的一组cell的总称。具有吞噬功能的cell有单核cell、组织cell、血管内皮cell,纤维cell等。吞噬cell的形态极不一致,由吞噬物的类型及吞噬物的多少而定。其胞核圆形、椭圆形或不规则形,常一个核,有时为双核,核常被挤压至一侧,核染色质较疏松,核仁可有可无。胞浆多少不一,淡蓝色或淡红色,常有空泡,并有数量不等的吞噬物,吞噬物有空泡、色素、
13、颗粒、有核cell、红cell、血小板、碳核、细菌等。有时吞噬cell成堆存在。第二节 异常血cell形态学(4学时)了解:初步认识各种异常血cell形态,并画出每一台显微镜下的cell图像。血cell形态在病理情况下,可在胞体、胞核、胞浆等方面发生异常改变。(一)粒cell系统形态异常1白血病时粒cell改变胞体:大小不等、畸形。胞浆:Auer小体,颗粒粗大、增多。Auer小体:是在cell浆内出现结构均匀一致的红色细棒状小体。产生原因是嗜天青颗粒融合而成。常见于急性非淋巴cell性白血病cell浆内。胞核:畸形、切迹、折叠、凹陷、扭曲、分叶等。如急淋时核易破碎,核分裂象增多。核浆比:增大、
14、发育不平衡(M2b)。核仁:大、数量增多、亦可不清楚。2巨大粒cell:可见于中、晚、杆、分阶段。常见巨晚幼、巨杆状。形态特征:与同期相比,胞体大、核大、核染色质较同阶段cell细致。形成原因:核酸代谢障碍。常见疾病:巨幼贫、M6、MDS、M2b、抗叶酸类药物治疗后。3中性粒cell分叶过多:分5叶以上,常见于巨幼贫、严重感染恢复期。4粒cell中毒变性改变中毒颗粒:胞浆颗粒大小不等、分布不均、染紫黑色或深紫红色。见于严重感染、大面积烧伤等。空泡:浆或核内空泡。见于严重感染。杜勒小体(Dohle):蓝斑,在cell浆内直径约12m的蓝色区域。见于严重感染,肝硬化等。核变性:核固缩、核肿胀、核碎
15、裂、核溶解。(二)红cell系形态异常1巨幼红cell与同期cell相比,胞体大、核大、核染色质细致、排列疏松“幼核老浆”。产生原因:巨幼贫、M6、MDS、抗叶酸治疗后等。2低色素性红cell与同期cell相比,浆量少、嗜碱性、着色偏蓝,核染色质无明显异常改变“幼浆老核”。成熟红cell中心淡染区明显扩大。Hb合成障碍(不能说缺铁)。IDA、Hb病、慢性感染性贫血等。3红cell大小不等、形态不整:见于各种增生性贫血。4球形红cell:6.4m,中心淡染区明显缩小或消失。见于遗传性球形红cell增多症。5椭圆形红cell:横径/长径0.78。见于遗传性椭圆形红cell增多症。6靶形红cell:
16、见于低色素性贫血、地贫等。7嗜多色性红cell:成熟红cell染灰蓝色或浅灰色。多表示骨髓造血功能活跃,多见于溶贫、失血性贫血等。8嗜碱性点彩红cell:瑞氏染色后在红cell浆中有蓝黑色细小颗粒存在。表示骨髓再生加速。铅中毒时多见。9裂红cell:即红cell碎片。可见于微血管病性溶贫、DIC及损伤性。10红cell中出现异常结构豪-周小体(Howoll-Jolly,s):属核残余物。可见于巨幼贫、溶贫、脾切除后、铅中毒等。卡波环(Cabot,s ring):可见于铅中毒、巨幼贫等。(三)淋巴cell形态异常1异型淋巴cell:分浆cell型 、单核cell、幼稚型。可见于出血热、传单及其它
17、病毒感染。2原、幼淋巴cell:淋巴cell白血病、淋巴瘤等。(四)单核-巨噬cell系统形态异常1恶组:多形性、多核异组。2急单、类单核cell白血病反应等。3戈谢cell(Gaucher):戈谢病。4尼曼-皮克cell(Niemann-pick):尼曼-皮克病。(五)巨核cell系统形态异常1幼巨产板:ITP。2小巨核:大小与成熟淋巴cell相似,形态不规则,有伪足突起,核染色质浓集,无明核仁。可见于白血病、MDS等。3巨大血小板:见于巨大血小板综合症。第二章 检验的基本方法第一节 制片方法(1学时)掌握:制片及染色的基本方法。染液及缓冲液的配制方法。一、骨髓制片1 第一次骨髓穿刺患者,骨
18、髓涂片8张以上或将所抽骨髓液全部涂完,同时涂外周血片4张。2 复查病人,骨髓涂片4张,同时涂外周血片2张。二、脱落cell制片1 一般包块穿刺,涂片12张。2 胸腹水及尿液标本,取50ml以上离心(3000r/分)10分钟,取沉淀物涂片2张。3 脑脊液标本,将全部送检物离心(3000r/分)沉淀,取沉淀物涂片1张。4 痰液标本,取可疑部分涂片35张。第二节 血cell及脱落cell瑞氏-姬姆萨染色(1学时)一、试剂1. 瑞氏染色液: 称1克瑞氏染粉,加入1瓶甲醇(分析纯,约500ml)中混匀,室温放置3个月后应用或每天混匀1次,放置室温连续7天后应用。2. 姬姆萨染色液: 称0.5克姬姆萨(吉
19、氏)染粉,加入33ml丙三醇(甘油,分析纯)中混匀,放56水浴箱中3小时以上,中间混匀35次,取出冷确至室温,再加入33ml甲醇(分析纯)中,混匀即可应用。3. 磷酸盐缓冲液(PH=6.46.8):磷酸二氢钾 (无水,分析纯) 5克磷酸氢二钠(含12.H2O,分析纯) 5克 蒸馏水 10000ml 溶解混匀备用4. 姬姆萨染色液磷酸盐缓冲液混合比例:姬姆萨染色液约23ml,加磷酸盐缓冲液约3040ml混匀即可应用。每天上下午各新鲜配制1次。二、染色方法 1 血或骨髓涂片在瑞氏染色液中固定58秒钟。2 放入姬姆萨染色液磷酸盐缓冲液混合液中染色1520分钟,慢性粒cell白血病患者涂片染色30分钟
20、,取出凉干或用滤纸吸干即作镜下观察。第三、四节 血象及骨髓象检验分析步骤(2学时)血象检验结果及骨髓象检验结果的正常值,正常骨髓象的正常形态特征。 熟悉:常见血液病的临床表现及血象、骨髓象的形态学改变特征。其他系cell的正常形态及异常形态。(一)血象检验1在做骨髓穿刺的同时须做血象检验BRC、RC、WBC、PLT计数。涂片染色观察。红cell形态有无异常。白cell形态有无异常。血小板形态及数量有无异常。有无寄生虫及其他异常cell。2、作用提供思路一系减少:Hb、WBC及PLT正常单纯贫血。 WBC、Hb及PLT正常粒cell减少或缺乏。 PLTHb及WBC正常ITP。二系减少:Hb及PL
21、TWBC正常ITP、急白、MDS、巨幼贫。三系减少:Hb、PLT及WBC均AA、急白、巨幼贫。提供诊断依据骨髓象相似,血象有区别如:球形RBC症 骨髓红系、血象有核红、球形RBC。 IDA 骨髓红系、血象无有核红、RBC中心淡染区扩大。血象相似,骨髓象不同AA 血象三系、骨髓巨核cell及无白血病cell。 非白血病性白血病 血象三系、骨髓有白血病cell。 MA 血象三系,骨髓粒系、红系、巨核系均有巨幼变。血象有明显变化、骨髓无变化传单 血象淋巴cell、异淋(10%)、骨髓无变化。 传淋 血象淋巴cell、异淋、骨髓无变化。骨髓有变化、血象无明显变化戈谢病 骨髓有戈谢cell、血象无明显变
22、化。 尼曼-皮克病 骨髓有尼曼-皮克cell、血象无明显变化。(二)骨髓象检查凡疑有血液系统或并发血液系统疾病均应作骨髓穿刺检查1、适应症检查血常规有问题:血象增高、减少。临床体征有不明原因贫血、出血、发热、骨痛、肝脾淋巴结肿大。2、禁忌症由于凝血因子缺陷引起的出血性疾病,如血友病。晚期妊娠作骨穿检查要慎重。小儿及不合作患者不宜作胸骨穿刺术。3、标本采集:一般由临床医生作。采集部位:胸骨、脊突、髂骨、胫骨粗隆(2岁以下小儿)。采集质量保证无菌、严防感染。死亡病例应在30分钟内完成。量不能多,一般不超过0.2ml,否则导致血稀(混血),影响判定诊断。对某些疾病采取多部位穿刺可提高诊断率。如转移癌
23、、骨髓瘤等在病变或骨痛部位穿刺其阳性率较高;如AA多部位穿刺有利确诊。涂片质量保证推片时角度太大、太快都使涂片厚,反之则薄。先涂血片、后涂骨髓片。骨髓抽太多,制片人应将剩骨髓液的玻片斜立,用棉花在斜面的底部吸去部分血液,再行涂片,底片不能丢。作好标识:姓名、血片(B)、骨髓(M)。涂片中前3张涂片,对估计PLT量较好。判定骨髓取材满意的几项指标抽吸骨髓时病人有特殊的痛感。骨髓液及涂片均可见骨髓小粒(骨髓渣)和脂肪滴。显微镜观察涂片可发现骨髓特有cell。含有大量幼粒幼红cell,粒cell杆状核与分叶核的比值大于血片中的比值。干抽的概念:是指非技术错误或穿刺位置不当而抽不出骨髓液或只得到少量血
24、液。其常见疾病有:原发性或继发性骨髓纤维化。骨髓增生极度活跃,cell过于浓集。白血病、真红。骨髓增生减低:AA。肿瘤骨髓浸润:恶淋、MM、转移癌等。4、检验的方法及步骤(1)低倍镜观察取材、涂片、染色情况:采用“良好”、“尚可”、“欠佳”等标准进行评价。判定骨髓有核cell增生程度:有核cell与成熟红cell之比,分五级:增生极度活跃:平均约 1:1增生明显活跃:10增生活跃: 平均约 1:20增生减低:50增生极度减低:200观察涂片尾部及边缘有无大的或成群(团)的异常cell,同时计数全片巨核cell。(2)油镜观察选择部位:在涂片体、尾交界处,选择cell分布比较均匀处。有核cell
25、分类计数:可根据增生程度确定分类总数增生减低及极度减低: 分100或200个cell。 分200或500个cell。增生明显活跃及极度活跃: 分500个cell。观察cell形态粒系:中毒颗粒、空泡、有无巨幼变粒cell、Aure小体等。红系:幼红cell及成熟红cell有无异常变化。巨核系:小巨核、幼巨产板、巨大血小板、估计血小板量。注意有无寄生虫。判定低倍镜下观察到的异常cell性质。(3)计算结果根据分类结果计算出各系统及各阶段cell的百分率。计算粒红比值:粒cell系总和/红cell系总和。(4)填写报告根据骨髓象分类结果,按报告单要求逐项进行填写。做好骨髓象所见的形态特征描述。(5
26、)骨髓报告分析及意见良好、尚可、欠佳。骨髓增生程度,粒:红=? : ?。粒系:红系:淋巴系或单核系:全片巨核cell数,根据血小板分布估计其量是多、正常、少。有无寄生虫。血片分类及所见进行描述。写出诊断意见:根据血象、骨髓象和cell化学染色所见,结合临床资料,提出具体诊断意见或供参考的意见。诊断意见分为以下几种:肯定性诊断:骨髓有特异性变化,临床表现又典型者,如各种白血病、MA、MM、转移癌、戈谢病、尼曼-皮克病等。支持性诊断:血象、骨髓象有形态改变,可解释临床表现,如IDA、AA、溶贫等。可疑性诊断:骨髓象有部分变化或出现少量异常cell,临床表现又不典型,可能为某种疾病的早期或前期或不典型病例者,如难治性贫血等,要结合临床、作相应的检查,并动态观察其变化。排除性诊断:如临床上怀疑ITP的患者,其骨髓中血小板易见(
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