自体骨髓移植治疗骨坏死_精品文档.ppt

1、自体骨髓移植治疗骨坏死自体骨髓移植治疗骨坏死Bone Marrow for Osteonecrosis李子荣 王佰亮 史振才 孙伟中日友好医院骨科骨坏死与关节保留重建中心骨坏死：准确的发病机制仍未明确骨坏死：准确的发病机制仍未明确n n骨坏死的病理生理改变n n血管内血流血管内血流n n直接的细胞毒直接的细胞毒n n间充质细胞分化损害间充质细胞分化损害n n假设：骨坏死为骨髓间充质细胞病骨坏死为骨髓间充质细胞病骨坏死为骨髓间充质细胞病n nSuh等对比酒精性ON与股骨颈骨折的股骨近端骨髓n n酒精性骨坏死的骨髓细胞向成脂方向转化酒精性骨坏死的骨髓细胞向成脂方向转化（SuhSuh,et al.C

2、ORR 2005,431:220,et al.CORR 2005,431:220）n nLeeLee等：酒精性等：酒精性ONON、特发性、特发性ONON与与OAOA比较股骨比较股骨近端骨髓基质细胞成骨分化减少近端骨髓基质细胞成骨分化减少（Lee,et al.J Lee,et al.J OrthopOrthop ResRes 2006,24:604 2006,24:604）骨坏死为骨髓间充质细胞病骨坏死为骨髓间充质细胞病n nCui等：体外试验：克隆骨髓细胞群n n暴露在酒精中可使成骨基因表达减少暴露在酒精中可使成骨基因表达减少n n增加成脂形态特点增加成脂形态特点（Cui,et al.JBJS

3、 2006,88(suppl3):148Cui,et al.JBJS 2006,88(suppl3):148）n nYin 等：骨髓基质细胞暴露在地塞米松n n成脂基因成脂基因42422 2 (ap(ap2 2)表达增加表达增加n n甘油三脂合成增加甘油三脂合成增加n n骨标志的基因表达及细胞增加减少骨标志的基因表达及细胞增加减少（Yin L,Chin Med J.2006,119:581Yin L,Chin Med J.2006,119:581）骨髓间充质细胞改变骨髓间充质细胞改变n n成骨分化能力减少n n成脂细胞体积增加，血流减少n n本中心资料：对照股骨头颈的骨髓基质细胞（坏死与股骨颈

4、骨折）骨坏死：精确的发病机制仍未明确骨坏死：精确的发病机制仍未明确n n有许多学说：均能解释一部分现象n n假设：骨坏死可能为骨髓间充质干细胞病n n股骨头坏死：成骨干细胞明显股骨头坏死：成骨干细胞明显 (HernigouHernigou,et al.JBJS 1999,81B:349),et al.JBJS 1999,81B:349)n n本中心资料：股骨头内骨髓基质干细胞减少本中心资料：股骨头内骨髓基质干细胞减少n n股骨颈骨折股骨颈骨折n n非创伤性非创伤性ONFHONFH资料和方法资料和方法密度梯度离心法密度梯度离心法抽取抽取5 ml 骨髓血骨髓血单个核细胞接种单个核细胞接种PART

5、2 PART 2 图1a图1b图1c图1d图1e图1f人骨髓基质干细胞的分离、培养人骨髓基质干细胞的分离、培养 图1a：原代培养于24后,细胞贴壁；图1b、c：原代培养于5d后病例组的细胞集落；图1d、e：原代培养于3d后,对照组的细胞集落；图1f：细胞集落不断扩大而融合成单层长满瓶底。结结 果果PART 2 PART 2 CD44FITCCD29PE荧光双标荧光双标 X 200人骨髓基质干细胞的鉴定人骨髓基质干细胞的鉴定 结结 果果PART 2 PART 2 骨髓基质干细胞的生长曲线（MTT法）Group1：股骨颈骨折对照组；Group2：股骨头坏死股骨近端组；Group3：股骨头坏死髂骨组

6、结结 果果股骨颈骨折组骨坏死组PART 2 PART 2 临床上应用植骨促进修复的机理临床上应用植骨促进修复的机理自然修复能力低，此与成骨性细胞减少有关，植骨目的自然修复能力低，此与成骨性细胞减少有关，植骨目的是提供新的生骨细胞是提供新的生骨细胞修复过程修复过程塌陷之前的自体骨髓移植塌陷之前的自体骨髓移植早期，塌陷前，骨坏死表现为早期，塌陷前，骨坏死表现为死骨的存在和力学强度的降低死骨的存在和力学强度的降低血管性标志线血管性标志线因此在骨坏死区注射成骨性细胞能有助于修复过程因此在骨坏死区注射成骨性细胞能有助于修复过程 红骨髓红骨髓2 部分部分造血干细胞来源造血干细胞来源known since

7、1950and used by haematologists基质干细胞来源基质干细胞来源suspected in 1869 by Goujonconfirmed twenty years agoby Owen and FridensteinBM-MNCsStromal Stem CellsHematopoietic Stem Cells骨髓的细胞成分骨髓的细胞成分 骨髓中有两种具有多向分化潜能的干细胞:ONE STROMAL CELL IN EVERY 250,000 CELLS IN THE MARROW AT AGE 35,BUT THIS RATIO DECREASES WITH AGE

8、.ONE HEMATOPOIETIC STEM CELL FOR EVERY 10-15,000 CELLS IN THE MARROW AND DOES NOT DECREASE WITH AGEMultipotentStem Cells基质干细胞基质干细胞成骨性干细胞和骨髓基质系统成骨性干细胞和骨髓基质系统集群形成单位成纤维细胞修复标记CFU-FOSTEOCHONDROFIBROSTROMA SYSTEM前体干细胞前体干细胞ANGIOG?正常股骨头正常股骨头 体积=65 cm CFU-F=50/cm总数总数:3000 CFU-F33股骨股骨头的的细胞成分胞成分正常骨髓：脂肪与生血组织比率为

9、1:1股骨头坏死股骨头坏死-坏死区：坏死区：CFU-F=0-外区外区CFU-F=4/cm总数总数 300 CFU-F3injected CFU-F:25 000自体骨髓移植治疗股骨头坏死自体骨髓移植治疗股骨头坏死 Hernigou,2002报告报告（CORRCORR，2002,405,142002,405,14）n n189189髋髋/116/116例例n n髓心减压及骨髓移植髓心减压及骨髓移植n nF/UF/U：7 7年（年（510510）：转为）：转为THR9/145THR9/145（stagestage、）n n至至20062006年，已积累年，已积累15001500例（坏死、骨折不愈合

10、）例（坏死、骨折不愈合）分期分期髋髋THATHA59592 2（3%3%）86867 7（8%8%）12125 5（41%41%）32322020（63%63%）Gangji:2004报告报告（JBJSJBJS，2004,86A:11532004,86A:1153）n n对比研究：n n18髋/、期，ONFH,随访24月n n结果：n n对照组：单纯减压，对照组：单纯减压，5/85/8进展到塌陷（进展到塌陷（期）期）n n骨髓移植组：减压加骨髓移植组：减压加BMGBMG，1/101/10进展到塌陷进展到塌陷赵永济：赵永济：2005在中日友好医院报告在中日友好医院报告n n36髋/31例，随访1

11、2年n n放射线进展：22.2%(8/36)n n临床失败（转为THR）：13.8%(5/36)手术方法手术方法骨髓血收集：骨髓血收集：150200ml/150200ml/例例成人红骨髓成人红骨髓iliac crest spine sternumn n2ml x 10n n4ml x 10n n6ml x 10n n4ml x 15n n4ml x 30n n5ml x 30抽吸次数抽吸次数骨髓血浓缩：cobe 2991细胞分离，离心用用3mm直径的空心钻经大转子减压与注射直径的空心钻经大转子减压与注射（双平面透视机）（双平面透视机）本中心资料本中心资料：2005.42008.2n n单纯髓心

12、减压单纯髓心减压 1313髋髋/10/10例例n n髓心减压加髓心减压加BMG 144BMG 144髋髋/110/110例例n n随访随访630630月，平均月，平均17.617.6 46.1246.12月月 5959髋髋/45/45例例n n分期：（分期：（ARCOARCO）n nc c：2 2髋髋n n：（A A 7 7；B B 1313；C C2828 ）4848髋髋n n：9 9髋髋n n平均年龄：平均年龄：37.537.5岁（岁（16561656）n n激素性：激素性：2929髋髋/20/20例，酒精性：例，酒精性：2222髋髋/18/18例，特发例，特发性：性：8 8髋髋/7/7例

13、例随访结果随访结果n nHarris评分：术前71.20 术后83.74（p9090）良（良（良（良（80898089）一般一般一般一般（70797079）差（差（差（差（7070）优良率优良率优良率优良率（2 2）2 2100100A A（7 7）6 61 1100100B B（1313）9 93 31 192.3192.31C C（2828）6 617172 23 382.1482.14（9 9）0 04 44 41 144.4444.44总计总计总计总计222225256 65 579.6679.66转为关节置换病例转为关节置换病例分期分期分期分期THATHA（2 2）0 0A A（7

14、7）1 1B B（1313）1 1C C（2828）4 4（3 3例）例）（1919）1 1总计总计7 7（11.8611.86）刘X，男，55岁，ARCO分期，右2C术前刘X，男，55岁，ARCO分期，右2C术后1.5年郭X，男，36岁，双3A，ARCO分期术前郭X，男，36岁，双3A，ARCO分期术后9月庄X，男，43岁，ARCO分期，双2C术前庄X，男，43岁，ARCO分期，双2C术后12月；塌陷刘X，女，33岁，右2B，ARCO分期（左侧3B 打压植骨）术前术后12月孙X，男，50岁，ARCO分期（左侧3C THA，右2C）孙X，男，50岁，ARCO分期（左侧3C THA，右2C）术后

15、1年；塌陷尚未解决的几个问题尚未解决的几个问题n n修复的骨组织是由植入的骨髓细胞分化而来吗？n n人体无法证实人体无法证实n n动物实验：干细胞标记示踪动物实验：干细胞标记示踪n n骨髓有核细胞的数量多大合适？n n与年龄的关系与年龄的关系n n骨髓血抽取量骨髓血抽取量骨髓浓集对照骨髓浓集对照研究者研究者研究者研究者骨髓血量骨髓血量骨髓血量骨髓血量分离前有核细胞分离前有核细胞分离前有核细胞分离前有核细胞计数计数计数计数分离后有核细胞分离后有核细胞分离后有核细胞分离后有核细胞计数计数计数计数HernigouHernigou150ml150ml16.4111.5*1016.4111.5*106

16、6/ml/ml40.35*1040.35*106 6/ml/mlGaugiGaugi400ml400ml14*1014*106 6/ml/ml405*10405*106 6/ml/ml戴尅戎戴尅戎戴尅戎戴尅戎250ml250ml164*10164*106 6/ml/ml435*10435*106 6/ml/ml本研究本研究本研究本研究126ml15126ml1512.233.2*1012.233.2*106 6/ml/ml35.2312*1035.2312*106 6/ml/ml尚未解决的几个问题尚未解决的几个问题n n加入哪些物质可增加干细胞向成骨方向转化？n n使用载体好？还是不好？n n能否在体外培养后定向成骨再植入？n n注入靶向血管还是坏死骨中？n n细胞种在死骨上如同沙漠种树，能否成活？n n疗效能否好于自然修复的情况？自然修复的病例自然修复的病例目前我们建议的适应证目前我们建议的适应证n n分期：ARCO、期n n年龄10g/l）白细胞4000/mm3n n全身及局部无感染病灶n n有必要的设备n n可移动X线机n n血液分离仪（cobe 2991）谢谢！谢谢！