有关PCR习题Word下载.docx

1、dGTP 、 dTTP 可以实现 DNA 的扩增。据此判断不合理的是AdATP 在 DNA 扩增中可以提供能量，同时作 DNA 合成的原料B dTTP 完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖CDNA 扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板 DNA 解旋D CTP 水解脱去两个磷酸基后是组成 RNA 的基本单位之一17、多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增 DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循 环：95 C下使模板DNA变性、解链t 55 C下复性（引物与 DNA模板链结合）宀72 C下引物链延伸（形 成新的脱氧核苷酸链） 。下列有关 PCR 过程的叙述中

2、不正确的是： （ ）A 变性过程中破坏的是 DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B. 复性过程中引物与 DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C. 延伸过程中需要 DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸 D. PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最 适温度较高18、 下列有关PCR技术的叙述，不正确的是：（）A . PCR技术经过变形、 复性、延伸三个阶段 B. PCR 技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等C. PCR技术需在体内进行 D . PCR技术是利用碱基互补配对的原则19、 在基因工程中，把选出的目的基因（共 1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸 460个）放

3、入PCR仪中扩增4代，那么，在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是A. 640 B. 8100 C. 600 D . 864020、对禽流感的确诊，先用 PCR技术将标本基因大量扩增，然后利用基因探针，测知待测标本与探针核酸的碱基异同。下图 P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置， M、N、Q、W是四份送检样品在测定后的电泳标记位置， 哪份标本最有可能确诊为禽流感 （）P MQW-二A . M B . N C . Q D. W21、某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中，发现了一种冰冻的已灭绝的巨大动物的肌肉。他想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的 DNA的相似性，于是做了如下

4、检测工作，其中正确的操作步骤及顺序是降低温度，检测处理后形成的杂合 DNA双链区段 通过PCR技术扩增巨型动物和大象的 DNA 把巨型动物的DNA导入大象的细胞中 在一定的温度条件下，将巨型动物和大象的 DNA水浴共热A.B. C. D.22、 PCR 的发明人是A. Mullis B. 牛顿 C.Kenny D. James23、 退火温度一般比引物的熔解温度（ Tm ）低多少合适A. 7 C B. 10 C C. 5 C D. 2 C E. 20 C24 、引物的最佳浓度为A. 0.1-0.5 M B. 1-2 凶 C.5-10 冋 D. 100 pM E.200 側25 、专门用于制备单

5、链 DNA 的 PCR 技术是A、对称 PCR B、反向 PCR C、RT PCR D、不对称 PCR E、嵌套 PCR26 、 PCR 变性温度一般为A96C B.85C C.72C D.55C E.100C27、 pre-mRNA 内含子的 5- 末端一般为 （ ） A、 AU B、 GU C、 AG D、 CG E、 AC28 、在大肠杆菌的 DNA 损伤修复时，对于填补缺口可能最重要的酶是A、 DNA聚合酶I B、DNA聚合酶H C、DNA聚合酶川 D、RNA聚合梅E、以上都不是29、 可用于扩增未知序列的 PCR方法是（）A、对称PCRB、反向PCR C、RT-PCR D、不对称PC

6、R E、嵌套 PCR30、 在聚合酶链反应（ PCR）中最常用的 DNA聚合酶是 A. T4 DNA连接酶 B. T7 DNA聚合酶 C Taq DNA 聚合酶 D E. coli DNA 聚合酶 I E E . coli DNA 聚合酶 II31 、下列关于 PCR 引物设计的说法错误的是（ ）A 设计引物时应考虑使 3 端引物和5 端引物具有相似的 Tm值B. 每条引物自身不应有稳定的发夹结构C 上下游引物之间不宜形成稳定的二聚体结构 D引物的5和3 端必须和模板严格配对结合E.引物与非特异扩增区的序列无同源性32 、Taq DNA 聚合酶可以不依赖模板在 dsDNA 的 3末端加上一个碱

7、基为（A. G B. A C. T D. C E.I33 PCR 反应中，所设计引物的长度一般为（ ）C. A . 510核苷酸 B. 1530核苷酸30个核苷酸C. 引物设计时G+ C含量在引物中一般为 4555 %D. 按经验，引物自身存在的连续互补序列一般不超过 3个碱基E. 两个引物之间不应存在互补序列，尤其避免 3 端的互补重叠F. 引物的3 端可以游离而不影响 PCR反应的进行6. 以下关于 PCR 的说法正确的是（ ）A. PCR 的模板可以是 DNA 也可以是 RNAB. PCR 的模板必须从组织细胞中分离出来C. PCR 反应的特异性取决于引物和模板 DNA 的结合位点。D.

8、 PCR 反应初期，目的 DNA 片断的增加呈指数扩增。E. PCR反应一般需要含102 105拷贝的模板7以下关于 PCR 反应条件错误的是（ ）B. PCR 缓冲液中加入二甲基亚砜有利于破坏模板的二级结构，提高反应的特异性。C. Mg 浓度过高会降低 TaqDNA 酶的活性， Mg 浓度过低又会使酶催化非特异性扩增增强。D. 4 种 dNTP 应以等摩尔浓度配制，以减少错配误差。E. 引物浓度一般为 0.5-1umol/L8. PCR 反应时应设立哪种对照（ ）A. 阴性对照B. 阳性对照C. 试剂对照D .以上答案都正确9. 逆转录反应体系包括（ ）B. RNA 模板，四种 dNTPC.

9、 RNA 酶抑制剂D. 合适的缓冲液体系E逆转录酶F寡聚胸腺嘧啶核苷酸引物10. 有关 PCR 的模板说法正确的是 （ ）A. 模板可以是 DNA 也可以是 RNAB. 大多数PCR反应中对DNA模板纯度要求不高C. 模板用量低D标本处理的基本要求是除去杂质11. 以下有关 RT-PCR 反应的说法你认为正确的有 （ ）A. 反应体系一般有20卩IB. 反应体系中有缓冲液，四种dNTP, MgCI2, DTT,牛血清白蛋白，Oligo（dT）引物RNA模板和逆转录酶C. 逆转录于42 C进行，随后即进行PCRD. RT-PCR 的最终反应过程依然是以 DNA 为模板的 PCR 反应12. PC

10、R 的产物累积的特征是 （ ）B. 反应初期，目的DNA片断呈指数扩增C. PCR 进行到一定时间出现反应中的停滞效应D. 到达平台期的的PCR循环数取决于反应体系中酶的耗竭程度E. PCR 平台期的出现多数不可避免PCR 反应F到达平台期时若扩增目的 DNA片断不足，可继续加入模板，酶和缓冲液进行13. 有关 Mg2+ 在 PCR 中的作用说法不正确的是 （ ）A. Taq DNA 酶的活性维持需要 Mg2+B. Taq DNA 酶的活性与反应体系中的 Mg2+ 总浓度有关C. Mg2+ 过低 ，酶催化非特异性扩增增加D. Mg2+ 过高会降低酶的活性E. 总量应低于dNTP的量,常用1.5

11、mmol/L14. PCR 中使用的底物 dNTP 应该是 （ ）A. 使用前应将 pH 值调至 7.0-7.5B. dNTP 浓度高可以加快反应速度 ，但却增加了出错率C. 降低反应速度可以提高反应特异性D. PCR 中， 4 种 dNTP 必须按一定比例配制E. Mg2+ 会与 dNTP 结合 ，应注意二者浓度之间的关系15. Taq DNA 酶的特点是 （ ）A. 75-80 C时具有最高的聚合酶活性B. 活性的维持需要Mg2+的参与C. Taq DNA 酶和 klenow 片断一样具有校正功能D. Taq DNA 酶的忠实性很高E. 具有类似末端转移酶的活性16. 有关引物的说法正确的

12、是 （ ）A. 引物浓度一般为 0.1-1.5卩mol/LB. 引物与模板的的比至少为 108:1C. 引物浓度过高会引起错配和非特异扩增 ，降低扩增效率D. 引物Tm值位于55-80 C较理想17. PCR 反应温度应该是 （ ）A. 为使 DNA 变性完全 ，变性温度越高 ，时间越长越好B. 按模板DNA的复杂程度来调整变性温度和变性时间C .于反应管中加入 1-2d 石蜡油防止反应液的蒸发D. 温度越高时间越长,dNTP破坏增加，对PCR反应产生不利影响18. 有关退火温度正确的是 （ ）A. 引物与模板退火温度一般在 45-55 CB. 退火温度过低，使非特异扩增增加C. 退火温度过高

13、，PCR扩增含量下降D. 退火时间一般为1-2分钟E. Tm 值的允许范围内 ，应该选择较低的退火温度19. 延伸温度应有如下特点 （ ）A. 一般为72 CB. PCR 延伸时间越长 ， 产物的得率越高C. Taq DNA 酶在延伸温度时有较高的酶活性D. PCR 延伸时间根据待扩增片断的长度而定20. PCR 循环次数设定时应注意 （ ）B. 应由最初靶分子浓度而定C. 理论上 20-25 个循环后 ， PCR 产物累积达最大值D. PCR 的循环次数一般为 25-30 次E. 循环次数过多时会引起停滞效应21. PCR 样品制备时应注意 （ ）B应有专门的区域制备模板C. 提取DNA样品

14、和RNA样品时要带手套且经常更换D. 纯化样品对污染有极大的影响E. 普通分子克隆工具不能用做样品的处理和靶序列F提取核酸所用的试剂要求新鲜配制或者适当储存未经使用的试剂22. 操作中应该注意 （ ）A. 使用的溶液应该没有核酸，核酸酶B. 试剂水都是高质新鲜蒸馏水C .工具（枪头 ,试管） 都是一次性并且高压灭菌D应有专门的操作区E. 试剂应该分装保存23. PCR 反应总为阴性时应该 （ ）A. 增加Taq DNA酶的浓度B. 增加靶 DNA 的量C. 增加扩增循环或者降低退火温度D. 提纯样品E. 取10卩I扩增液再行 PCR24. PCR 反应出现非特异产物时 ，应该采取的措施是 （

15、）A. 增加退火温度B. 降低Taq DNA酶浓度C. 减少退火及延伸时间D. 减少引物浓度E. 减少扩增循环次数25. PCR可以广泛应用于（ ）A. 遗传性疾病的基因诊断B. 检测癌基因C. 检测病原微生物D. 法医鉴定E. DNA序列测定二：填空题1、PCR技术的发明人是2、PCR产物短期存放可在 保存，长期储存应置于 。3. PCR的基本反应过程包括 ， ， 。4. PCR引物设计的目的是在 和 间取得平衡。5. PCR反应体系含有 ， ， ， 。6. 引物与模板的退火温度一般为 ，延伸温度一般为 。7. PCR循环次数一般设定为 ，过多的循环次数会导致 的出现。8. 弓I物 3 端最

16、佳碱基选择是 禾廿 。9. PCR的反应体系一般选用 。10. PCR反应的缓冲液提供了 PCR反应 常用的为 。11. PCR的反应体系中， Mg2 +的浓度一般保持在 ，常用的是 。12. TaqDNA 聚合酶具有 ，缺乏 因此无 。13. 在变性过程中，为防止反应液的蒸发，可在反应管中加入14. （8分）聚合酶链式反应（PCR技术）是在实验室中以少量样品 DNA制备大量DNA的生化技术，反应系统中包括微量样品 DNA、DNA聚合酶、引物、足量的4种脱氧核苷酸及 ATP等。反应中新合成的 DNA又可以作为下一轮反应的模板，故 DNA数以指数方式扩增，其简要过程如右图所示。（1 ）某个DNA

17、样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基 A:G:T:C=1:2:3:4，则经过PCR仪五次循环后，将产生 个DNA 分子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是个。（2 ）分别以不同生物的 DNA样品为模板合成的各个新 DNA之间存在差异，这些差异是 （3 ）请指出PCR技术与转录过程的三个不同之处：1 2 3 15 . （ 7分）资料显示，近十年来， PCR技术（DNA聚合酶链式反应技术）成为分子生物实验的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制的特性， 在试管中进行DNA的人工复制（如下图），在很短的时间内,模板DNA澹韶脱氧核 2条完整的昔酸连按到液链DNA分子 DNA

18、单褪上DMA申犍将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体。 请据图回答:弓|物DHA单链与模板通过威草互幸I对结合（1 ）加热至94 C的目的是使 DNA样品的 键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过 酶的作用来完成的。通过分析得出新合成的 DNA分子中，A=T , C=G，这个事实说明 DNA分子的合成遵循 。（2 ）新合成的DNA分子与模板DNA分子完全相同的原因是 和 。（3 ）通过PCR技术使DNA分子大量复制时，若将一个用 15N标记的模板DNA分子（第一代）放入试 管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制到第五代时，含 15N标记的DN

19、A分子单链数占全部DNA 总单链数的比例为 。（4） PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是 否感染了艾滋病病毒，你认为可以用 PCR扩增血液中的（ ）A .白细胞DNA B.病毒蛋白质 C.血浆抗体 D .病毒核酸16 . （8分）下面甲图中DNA决定某一多肽链中的酪氨酸和丙氨酸过程示意图， 乙图示样品 DNA经PCR技术（聚合酶链式反应）扩增，可以获取大量 DNA克隆分子。分析回答：DMA样品 2牛DM好子（1） 甲图中含有 种核苷酸；丙氨酸的遗传密码子是 。该图表示了 DNA中遗传信息的_过程。（2） 有一种贫血症是血红蛋白分子的一条多肽

20、链上， 一个酪氨酸被一个苯丙氨酸所替代造成的。 此种贫血症的根本原因是，即发生了改变。乙图的“ PCR”与人体内的DNA复制相比有何特殊之处 ？ 。现在要通过“ PCR”得到甲图中DNA片段的1024个克隆片段，则至少要向试管中加入 个腺嘌呤脱氧核苷酸。17、（ 8分）PCR技术是把某一 DNA片段在体外酶的作用下，合成许许多多相同片段的一种方法，利用 它能快速而特异的扩增任何要求的目的或 DNA分子片段；电泳技术则是在外电场作用下，利用分子携带的净电荷不同，把待测分子的混合物放在一定的介质 （如琼脂糖凝胶）中进行分离和分析的实验技术，利用它可分离氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等物质和作亲子法学鉴定。下图中 14是电泳装置及相22老滅逬疔中应电泳结果。请回答:电泳过程中分子的迁（1 ）电泳与叶绿体色素分离采用的纸层析法比较，后者使用的介质是移速率除与本身所带净电荷的多少有关外，你认为还受什么因素影响 （至少列出一种）？ 。（2） PCR技术能把某一 DNA片段进行扩增，是依据什么原理？