马鼻疽防治技术规范 7161517580001文档格式.docx

1、多 见于前驱及四肢，结节软化破溃后流出脓汁，形成溃疡，溃疡有堤状 边缘和油脂样底面，底面覆有坏死性物质或呈颗粒状肉芽组织。2.4实验室诊断2.4.1变态反应诊断 变态反应诊断方法有鼻疽菌素点眼法、 鼻疽菌素皮下注射法、 鼻 疽菌素眼睑皮内注射法，常用鼻疽菌素点眼法（见附件） 。2.4.2鼻疽补体结合反应试验（见附件） 。该方法为较常用的辅 助诊断方法， 用于区分鼻疽阳性马属动物的类型， 可检出大多数活动 性患畜。2.5结果判定 无临床症状慢性马鼻疽的诊断以鼻疽菌素点眼为主， 血清学检查 为辅；开放性鼻疽的诊断以临床检查为主，病变不典型的，则须进行 鼻疽菌素点眼试验或血清学试验。2.5.1具有明

2、显鼻疽临床特征的马属动物， 判定为开放性鼻疽病 畜。2.5.2鼻疽菌素点眼阳性者，判定为鼻疽阳性畜。3疫情报告3.1任何单位和个人发现疑似疫情， 应当及时向当地动物防疫监 督机构报告。3.2动物防疫监督机构接到疫情报告并确认后， 按动物疫情报 告管理办法及有关规定及时上报4疫情处理4.1发现疑似患病马属动物后，畜主应立即隔离患病马属动物， 限制其移动， 并立即向当地动物防疫监督机构报告。 动物防疫监督机 构接到报告后，应及时派员到现场进行诊断，包括流行病学调查、临 床症状检查、病理检查、采集病料、实验室诊断等，并根据诊断结果 采取相应防治措施。4.2确诊为马鼻疽病畜后， 当地县级以上人民政府畜

3、牧兽医行政 管理部门应当立即派人到现场，划定疫点、疫区、受威胁区 ; 采集病 料、调查疫源， 及时报请同级人民政府对疫区实行封锁，并将疫情逐 级上报国务院畜牧兽医行政管理部门。 县级以上人民政府根据需要组 织有关部门和单位采取隔离、扑杀、销毁、消毒等强制性控制、扑灭 措施，并通报毗邻地区。4.2.1划定疫点、疫区、受威胁区疫点 指患病马属动物所在的地点，一般是指患病马属动物的同 群畜所在的养殖场（户）或其它有关屠宰、经营单位；散养情况下， 疫点指患病马属动物所在的自然村（屯） 。疫区 由疫点外延 3 公里范围内的区域。疫区划分时注意考虑当 地的饲养环境和天然屏障（如河流、山脉等） 。受威胁区

4、是指疫区外延 5 公里范围内的区域。4.2.2封锁按规定对疫区实行封锁。 疫区封锁期间， 染疫和疑似染疫的马属 动物及其产品不得出售、转让和调群 , 禁止移出疫区；繁殖马属动物 要用人工授精方法进行配种； 种用马属动物不得对疫区外马属动物配 种；对可疑马属动物要严格隔离检疫；关闭马属动物交易市场。禁止 非疫区的马属动物进入疫区， 并根据扑灭疫情的需要对出入封锁区的 人员、运输工具及有关物品采取消毒和其它限制性措施。4.2.3隔离当发生马鼻疽时， 要及时应用变态反应等方法在疫点对马属动物 进行检测，根据检测结果， 将马属动物群分为患病群、疑似感染群和 假定健康群三类。立即扑杀患病群，隔离观察疑似

5、感染群、假定健康 群。经 6 个月观察，不再发病方可解除隔离。4.2.4检测疫区内须对疑似感染马属动物和周围的马属动物隔离饲养， 每隔6 个月检测一次，受威胁区每年进行两次血清学（鼻疽菌素试验）监 测，直至全部阴性为止 ; 无疫区每年进行一次血清学检测。4.2.5扑杀对临床病畜和鼻疽菌素试验阳性畜， 均须在不放血条件下进行扑 杀。4.2.6销毁处理病畜和阳性畜及其胎儿、胎衣、排泄物等按照 GB16548畜禽病 害肉尸及其产品无害化处理规程 进行无害化处理。 焚烧和掩埋的地 点应选择距村镇、学校、水源、牧场、养殖场等 1 公里以外的地方， 挖深坑将尸体焚烧后掩埋，掩埋土层不得低于 1.5 米。4

6、.2.7消毒对患病或疑似感染马属动物污染的场所、 用具、物品等严格进行 消毒；污染的垫料及粪便等采取堆积泥封发酵、 高温等方法处理后方 可使用。4.2.8封锁的解除疫区从最后一匹患病马属动物扑杀处理后， 并经彻底消毒等处理 后，对疫区内监测 90 天，未见新病例；且经过半年时间采用鼻疽菌 素试验逐匹检查， 未检出鼻疽菌素试验阳性马属动物的， 并对所污染 场所、设施设备和受污染的其它物品彻底消毒后， 经当地动物防疫监 督机构检查合格， 由原当地县级以上兽医行政主管部门报请原发布封 锁令人民政府解除封锁。5预防与控制5.1加强饲养管理， 做好消毒等基础性防疫工作， 提高马匹抗病 能力。5.2检疫异

7、地调运马属动物， 必须来自非疫区； 出售马属动物的单位和个 人，应在出售前按规定报检，经当地动物防疫监督机构检疫，证明马 属动物装运之日无马鼻疽症状，装运前 6 个月内原产地无马鼻疽病 例，装运前 15 天经鼻疽菌素试验或鼻疽补体结合反应试验，结果为 阴性，并签发产地检疫证后，方可启运。调入的马属动物必须在当地隔离观察 30 天以上，经当地动物防 疫监督机构连续两次（间隔56天）鼻疽菌素试验检查，确认健康 无病，方可混群饲养。运出县境的马属动物， 运输部门要凭当地动物防疫监督机构出具 的运输检疫证明承运，证明随畜同行。运输途中发生疑似马鼻疽时， 畜主及承运者应及时向就近的动物防疫监督机构报告，

8、 经确诊后， 动 物防疫监督机构就地监督畜主实施扑杀等处理措施。5.3监测稳定控制区 每年每县抽查 200匹（不足 200 匹的全检），进行鼻 疽菌素试验检查，如检出阳性反应的， 则按控制区标准采取相应措施。消灭区 每县每年鼻疽菌素试验抽查马属动物 100 匹（不足 100 匹的全检）。6控制和消灭标准6.1控制标准6.1.1县级控制标准控制县（市、区、旗）应达到以下三项标准：A 、全县（市、区、旗）范围内 ,连续两年无马鼻疽临床病例。B、 全县（市、区、旗）范围内连续两年检查，每年抽检 200匹（不足 200 匹全检），经鼻疽菌素试验阳性率不高于 0.5%。C、 鼻疽菌素试验阳性马属动物全部

9、扑杀，并做无害化处理。6.1.2市级控制标准全市（地、盟、州）所有县（市、区、旗）均达到控制标准。6.1.3省级控制标准 全省所有市（地、盟、州）均达到控制标准。6.1.4全国控制标准全国所有省（市、自治区）均达到控制标准。6.2消灭标准6.2.1县级马鼻疽消灭标准必须具备以下两项条件：A 、达到控制标准后，全县（市、区、旗）范围内连续两年无马 鼻疽病例。B、达到控制标准后，全县（市、区、旗）范围内连续两年鼻疽菌素试验检查，每年抽检 100 匹（不足 100匹者全检），全部阴性。6.2.2市级马鼻疽消灭标准全市（地、盟、州）所有县（市、区、旗）均达到消灭标准。6.2.3省级马鼻疽消灭标准 全省

10、所有市（地、盟、州）均达到消灭标准。6.2.4全国马鼻疽消灭标准全国所有省（市、自治区）均达到消灭标准。附件马鼻疽诊断技术及判定标准1总则1.1为统一马鼻疽（以下简称鼻疽）检疫诊断技术及判定标准， 并提高鼻疽诊断技术及判定标准的准确性， 特制定鼻疽诊断技术及判 定标准（以下简称本标准） 。1.2对马、驴、骡进行鼻疽检疫时，统一按本标准规定办理。1.3本标准以鼻疽菌素点眼反应为主。必要时进行补体结合反 应、鼻疽菌素皮下注射反应或眼睑皮内注射反应。1.4凡鼻疽临床症状显著的马、骡、驴，确认为开放性鼻疽的， 可以不进行检疫。1.5各种检疫记录表（见 7 附件），须保存 2 年以上。2鼻疽菌素点眼操作

11、方法2.1器材药品：2.1.1鼻疽菌素、硼酸、来苏尔、脱脂棉、纱布、酒精、碘酒、 记录表。2.1.2点眼器、唇（耳）夹子、煮沸消毒器、镊子、消毒盘、工 作服、口罩、线手套。注意：在所盛鼻疽菌素用完或在点眼过程中被污染 （接触结膜异 物）的点眼器，必须消毒后再使用2.2点眼前必须两眼对照，详细检查眼结膜和单、双瞎等情况， 并记录。眼结膜正常者可进行点眼，点眼后检查颌下淋巴结，体表状 况及有无鼻漏等。2.3规定间隔56日做两回点眼为一次检疫，每回点眼用鼻疽 菌素原液34滴（0.20.3mL）,两回点眼必须点于同一眼中，一般 应点于左眼，左眼生病可点于右眼，并在记录中说明。2.4点眼应在早晨进行，最

12、后第 9 小时的判定须在白天进行。2.5点眼前助手固定马匹， 术者左手用食指插入上眼睑窝内使瞬膜露出，用拇指拨开下眼睑构成凹兜，右手持点眼器保持水平方向， 手掌下缘支撑额骨眶部，点眼器尖端距凹兜约 1cm拇指按胶皮乳头滴入鼻疽菌素 3 4 滴。2.6点眼后注意系栓。 防止风沙侵入、 阳光直射眼睛及动物自行 磨擦眼部。2.7判定反应。在点眼后 3、6、9小时，检查 3次，尽可能于注 射 24 小时处再检查一次。判定时先由马头正面两眼对照观察，在第6 小时要翻眼检查，其余观察必要时须翻眼。细查结膜状况，有无眼 眦，并按判定符号记录结果。2.8每次检查点眼反应时均应记录判定结果。 最后判定以连续两

13、回点眼之中最高一回反应为准。2.9鼻疽菌素点眼反应判定标准：2.9.1阴性反应：点眼后无反应或结膜轻微充血及流泪， 为阴性。记录为“2.9.2疑似反应：结膜潮红，轻微肿胀，有灰白色浆液性及黏液 性（非脓性）分泌物（眼眦）的，为疑似阳性。记录为“” 。2.9.3阳性反应：结膜发炎，肿胀明显，有数量不等脓性分泌物 （眼眦）的为阳性。记录为“” 。3鼻疽菌素皮下注射（热反应操作方法）3.1药品器材3.1.1鼻疽菌素原液、来苏尔、酒精、碘酒、脱脂棉、纱布、记 录表。3.1.2工作服、口罩、线手套、毛刷、毛剪、耳夹子、注射器、 针头、体温计、煮沸消毒器、消毒盘、镊子。3.2皮下注射前一日做一般临床检查，

14、 早午晚分别测量并记录体 温，体温正常的方可做皮下注射。3.3皮下注射前所测3次体温，其中如有一次超过 39C，或3 次体温平均数超过38.5 C,或在前一次皮下注射后尚未经过一个半 月以上的，均不得做皮下注射。3.4注射部位通常在左颈侧或胸部肩胛前， 术部剪毛消毒后注射 鼻疽菌素原液 1mL。3.5牲畜在注射后 24 小时内不得使役，不得饮冷水。3.6注射通常在零点进行。 注射后 6小时起测温， 每隔 2小时测一次（即注射后 6、8、10、12、14、16、18、20、22、24 小时），连 续测温 10次后，再于 36 小时测温一次，详细记录并划出体温曲线， 同时记录局部肿胀程度，以备判定

15、。局部肿胀以手掌大（横径 10cm）为明显反应3.7皮下注射鼻疽菌素的马、 驴、骡可发生体温反应及局部或全 身反应。3.7.1体温反应：鼻疽病畜一般在皮下注射鼻疽菌素后 6 8小时体温开始上升，1216小时体温上升到最高，此后逐渐降低，有 的在注射 30 36 小时后，体温再度轻微上升。3.7.2局部反应：注射部位发热，肿胀疼痛，以注射后 2436 小时最为显著，直径可达10 20cm并逐渐消散，有时肿胀可存在2 3 天。3.7.3全身反应：注射后精神不振，食欲减少，呼吸短促，脉搏 加快，步态踉跄、战栗，大小便次数增加，颌下淋巴结肿大。3.8鼻疽菌素皮下注射（热反应）判定标准如下：3.8.1阴

16、性反应：体温升至摄氏39C以下并无局部或全身反应。3.8.2疑似反应：体温升至39C（不超过39.6 C）,有轻微全身 反应及局部反应者，或体温升至 40C以上稽留并无局部反应时，也可认为疑似反应。3.8.3阳性反应：体温升至 40C以上稽留及有轻微局部反应， 或体温在39C以上稽留并有显著的局部反应（肿胀横径 10cm以上）或有全身反应。4鼻疽菌素眼睑皮内注射操作方法4.1药品及器材4.1.1鼻疽菌素（用前随时稀释，鼻疽菌素 1 份用 0.5%石炭酸生理盐水 3 份充分混匀）4.1.212mL注射器、针头（用前煮沸消毒）、消毒盘、煮沸消 毒器、镊子、耳夹子、工作服、口罩、线手套。4.1.3酒

17、精、碘酒、硼酸、来苏尔、纱布、脱脂棉、记录表。4.2注射前检查结膜及眼睛是否单、 双瞎等情况。 注射后检查颌 下淋巴结及有无鼻漏，并详细记录检查情况。4.3注射部位通常在左下眼睑边缘 12cm内侧眼角三分之一处 皮肤实质内，注射前用硼酸棉消毒注射部位。4.4 注射前助手保定马匹，术者用食指、拇指捏住下眼睑，右手 持注射器，手掌 （小指外缘）支撑头部对左手捏起的眼睑皱襞术部斜 向刺入下眼睑皮内，注入0.1mL鼻疽菌素，食指感觉注射液推进迟滞， 局部呈现小包，即为药液已进入皮内。4.5注射一般在早晨。注射后第 24、 36、 48 小时分别进行检查。 详细记录结果。4.6鼻疽菌素眼睑皮内注射反应判

18、定标准：4.6.1阴性反应：无反应或下眼睑有极轻微肿胀、流泪的，为阴 性反应。记录为“” 。4.6.2疑似反应：下眼睑稍肿胀， 有轻微疼痛及发热， 结膜潮红， 无分泌物或仅有浆黏液性分泌物的，为疑似阳性，记录为“4.6.3阳性反应：下眼睑肿胀明显，有显著的疼痛及灼热，结膜 发炎畏光，有脓性分泌物的，为阳性。5开放性鼻疽临床诊断鉴别要领5.1将病畜保定，术者和助手穿工作服（避免白色） ，带胶皮手 套、口罩、风镜及保护面具，先用 3%来苏尔水，洗净病畜鼻孔内外 后，在病畜前侧面适当位置，术者用手打开鼻孔，助手用反射镜或手 电筒照射鼻腔深部， 仔细检查黏膜上有无鼻疽特有结节溃疡及星芒状 瘢痕及其它异

19、状。检查完毕将服装、器材分别进行消毒（用 3%来苏尔水浸 1 小时或煮沸 10 分钟），避免交叉传染。5.2鼻腔鼻疽临床症状如下：5.2.1鼻汁：初在鼻孔一侧（有时两侧）流出浆液性或黏液性鼻 汁，逐渐变为不洁灰黄色脓性鼻汁，内混有凝固蛋白样物质，有时混 有血丝并带有臭味，呼吸带哮鸣音。5.2.2鼻黏膜发生结节及溃疡： 在流鼻汁同时或稍迟， 鼻腔黏膜 尤其是鼻中膈黏膜上出现新旧大小不同灰白色或黄白色的鼻疽结节， 结节破溃构成大小不等、深浅不一、边缘隆起的溃疡（结节与溃疡多 发生于鼻腔深部黏膜上） ，已愈者呈扁平如星芒状、冰花状的瘢痕。5.2.3颌下淋巴结肿大： 急性或慢性鼻疽的经过期颌下淋巴结肿

20、 胀，初有痛觉，时间长久，则变硬、触摸无痛感，附着于下颌骨内面 不动，有时也呈活动性。5.3皮肤鼻疽临床症状如下：皮肤鼻疽多发于四肢、 胸侧及下腹部， 在皮肤或皮下组织发生黄 豆大小或胡桃、鸡蛋大结节，不久破裂流出粘稠灰黄或红色脓汁（有 时带血） 形成浅圆形溃疡或向外穿孔呈喷火状溃疡。 结节和溃疡附近 淋巴结肿大，附近淋巴管粗硬呈念珠状索肿，肿胀周围呈水肿浸润，皮肤肥厚，有时呈蜂窝织炎，橡皮腿，公畜并发睾丸炎。5.4开放性鼻疽判定标准：5.4.1凡有 5.2.1 、 5.2.2 、5.2.3 病变的，均为开放性鼻疽。5.4.2凡有第 5.2.1 病状而无 5.2.2 、5.2.3 病状的或有

21、5.2.1 、5.2.3 项病状而无 5.2.2 病状的，可用鼻疽菌素点眼， 呈阳性反应的为开放 性鼻疽。5.4.3凡有 5.3 症状的，即为开放性鼻疽。5.5不具备 5.4 项症状，并有可疑鼻疽临床症状的， 判定为可疑 开放性鼻疽。6鼻疽补体结合反应试验操作办法6.16.1.1药品器材：6.1.1.1来苏尔、石炭酸、酒精、碘酒、纱布、脱脂棉。6.1.1.2灭菌试管、试管架、试管签、送血箱、煮沸消毒器、消 毒盘、镊子、毛刷、毛剪、采血针（带胶管、每针采一次后必须清洗 煮沸消毒后，再行使用） 。6.1.2在被检牲畜颈前三分之一处静脉沟部位剪毛消毒， 将灭菌 采血针刺入颈静脉， 使血液沿管壁流入试

22、管内， 防止血液滴入产生泡 沫，引起溶血现象。6.1.3采出的血液， 冬季应放置室内防止血清冻结， 夏季应放置 阴凉之处并迅速送往实验室。 如在 3 昼夜内不能送到， 应先将血清倒 入另一灭菌试管内，按比例每1mL血清加入12滴5%石炭酸生理盐水溶液，以防腐败。运送时使试管保持直立状态，避免振动。6.2预备试验（溶血素、补体、抗原等效价测定）6.2.1准备下列材料6.2.1.1标准血清：鼻疽阴、阳性马血清。6.2.1.2鼻疽抗原。6.2.1.3溶血素。621.4 补体：采取健康豚鼠血清。采血前饥饿 78小时，于 使用前一日晚由心脏采血，如检查材料甚多，需大量补体时，亦可由 颈动脉放血， 放于培

23、养皿或试管中， 待血液凝固后再轻轻划破或剥离 血块后移于冰箱，次日清晨分离血清。如当日采血，可直接盛于离心 管中，置恒温箱 20 分钟，将血块搅拌后，在离心器中分出血清亦可。 每次补体应由 34 个以上豚鼠血清混合。6.2.1.5绵羊红细胞：绵羊颈静脉采血，脱纤防止血液凝固，并 离心 3次，以清洗红细胞；第一次 15002000rp/m 离心 15分钟，吸 出上清液加入细胞量 3 4 倍的生理盐水轻轻混合后做第二次离心， 方法同前。使用前将洗涤后的细胞做成 2.5%细胞液（即 1： 40 倍溶液）。稀释后的红细胞最多保存一天，但离心后的红细胞在冰箱中可 保存 3 4 日。6.2.1.6生理盐水

24、：1000mL蒸馏水中加入8.5g氯化钠，灭菌后 使用。6.2.2溶血素效价测定， 每一月左右测价一次， 按下列方法进行 （参照表一）。622.1将稀释成1: 1001: 5000不同倍数的溶血素血清各0.5mL分别置于试管中。6.2.2.2将1： 20倍补体及1:40绵羊红细胞各0.5mL分别加入 上述试管中。622.3另外制作缺少补体、缺少溶血素的对照管，并补充等量 生理盐水。622.4每管分别添加生理盐水1mL置于摄氏3738C水浴箱 中15分钟。6.2.2.5观察结果：能完全溶血的最少量溶血素，即为溶血素的 效价，也称为1单位（对照管均不应溶血），当补体滴定和正式试验 时，则应用2单位

25、（或称为工作量）即减少1倍稀释。表溶血素1 :1:对昭八、稀释100500100015002000250030003500400050000.5- 20补体2.5%红细胞生理盐水1.01.52.06.2.3补体效价测定每次进行补体结合反应试验，应于当日测定补体效价。先用生理盐水，将补体做1: 20稀释，然后按表二进行操作。管号成分12345678910对照管11121320倍补体0.100.130.160.190.220.250.280.310.340.370.40抗原（工作 量）（不加 抗原管加 生理盐水）10倍稀释 阳性血清 或10倍稀 释阴性阴 性血清震荡均匀后置3738 C水浴20分钟二单位溶血素/2.5%红细胞悬液振荡均匀后置3738 C水浴20分钟阳f性血清加抗原#+阳性血清未加抗原+阴性血清加抗原+阴f性血清未加抗原