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1、18.只要子链和亲本链中的一条或两条被甲基化，大肠杆菌中的错配校正系统就可以把它们区别开来，但如果两条链都没有甲基化则不行。19.大肠杆菌、酵母和真核生物病毒DNA的新一轮复制是在一个特定的位点起始的，这个位点由几个短的序列构成，可用于结合起始蛋白复合体。20.拓扑异构酶之所以不需要ATP来断裂和重接 DNA链，是因为磷酸二酯键的能量被暂时贮存在酶活性位点的磷酸酪氨酸连接处。21.酵母中的拓扑异构酶突变体能够进行 DNA复制，但是在有丝分裂过程中它们的染色体不能分开。22.靠依赖于DNA的DNA聚合酶所进行的 DNA复制要求有作为一个引发物的游离3OH的存在。游离的3OH可以通过以下三种途径获

2、得：合成一个RNA引物、DNA自我引发的或者一个末端蛋白通过磷酸二酯键共价结合到一个核苷酸。23.当 DNA两条链的复制同时发生时，它是由一个酶复合物： DNA聚合酶负责的真核生物的复制利用3个独立作用的 DNA聚合酶，Pol的一个拷贝（为了起始）和Po1的两个拷贝（DNA多聚体化，当MFl将RNA引发体移去之后填入）。24.从ori开始的噬菌体复制的起始是被两个噬菌体蛋白 O和 P所控制的，在大肠杆菌E.coli中 O和 P是 DnaA和 DnaC蛋白的类似物。基于这种比较，O蛋白代表一个解旋酶而 P蛋白调节解旋酶和引发酶结合。25拓扑异构酶 和可以使 DNA产生正向超螺旋。26拓扑异构酶

3、解旋需要ATP酶。27. RNA聚合酶 合成 DNA复制的RNA引物。28线粒体 DNA的复制需要使用 DNA引物。29. 噬菌体整合到大肠杆菌基因组上是由一个位点专一的拓扑异构酶（入整合酶）催化的，它可以识别在两条染色体上短的特异 DNA序列。30在真核生物染色体 DNA复制期间，会形成链状 DNA。31所有已知的基因转变都需要一定量的 DNA合成。32根据不同物种同一蛋白质中氨基酸的不同来估计突变率往往较实际的突变率低，因为一些突变体由于危及蛋白质功能，在选择压力下从种群中消失。33因为组蛋白 H4在所有物种中都是样的，可以预期该蛋白基因在不同物种中也是一样的。34DNA修复机制有很多种，

4、但所有这些机制都依赖于二倍体染色体上两套遗传信息的存在。35.自发的脱膘呤作用和由尿嘧啶DNA糖基化酶切去一个已脱碱基的胞嘧啶都会产生可被无膘呤嘧啶内切核酸酶作为底物识别的同样的中间产物。36.DNA修复的第一步是由专用于修复过程的酶催化的，下面的步骤由 DNA代谢过程中的常用酶催化。37.大肠杆菌中 SOS反应的最主要作用是通过在原始 DNA损伤区附近导人补偿突变来提高细胞存活率。38.DNA中四个常用碱基自发脱氨基的产物，都能被识别出来。39.在细菌细胞中，短片段修复是由损伤诱导的。相反，长片段修复是组成型的，且往往涉及长约150O一9000bp损伤 DNA片段的替换。40.真核生物中 D

5、NA的修复没有原核生物重要，这是因为体细胞的二倍体特征。41.一般性重组需要交换的双方都有一长段同源 DNA序列，而位点专一重组仅需要短而专一的核苷酸序列。某些情况下，只需要交换双方中的一方具有该序列即可。42.一般性重组包括 DNA片段的物理交换，该过程涉及 DNA骨架上磷酸二酯键的断裂 和重新形成。43.RecA蛋白同时具有位点专一的单链切割的活性和将单链从双螺旋 DNA分子上脱离 的解旋酶的功能，但需要依赖于ATP活性。44.大肠杆菌的单链结合蛋白通过与糖磷酸骨架结合并使碱基暴露，从而解开单链上的短发夹结构。45.RecA蛋白同时与单链、双链 DNA结合，因此它能催化它们之间的联会。46

6、.交叉链互换包括交叉链和未交叉链，至少其中一条链的磷酸骨架断裂才可能使这个过程逆转。47.基因转变是真菌类偶然改变性别的方式；正常情况下，一次接合产生等量的雄性与雌性孢子，但偶然也会出现13或31的比例。48.当两个 DNA的突变片段相互间不能反式互补，则可以推测这两个突变影响了同一种功能。这样的两个突变和每个不能反式互补的突变分为同一个互补群，并被认为是一个独立遗传单位的一部分。这个遗传单位可能是一个顺反子，或者如果突变稳定地干扰了转录过程，这可能是一个多顺反子转录单位。49.编码区以外的突变不会导致细胞或生物体表型改变。50.若一个二倍体酵母细胞中发生了一个错义突变，而这一突变将另外一个不

7、同的氨基酸引入了一个分解代谢酶的催化位点，从而使得这个酶可以利用别的底物。这就是所谓的功能获得性突变。51因为 T4噬菌体至少编码30种参与基因组复制和转录的酶，它和寄主 DNA和RNA聚合酶都是独立的，但它必须依赖寄主蛋白质的复制机制。52.小的DNA病毒，如 SV40和噬X174完全依赖寄主复制机制来复制它们的 DNA。53. 负链病毒不包含编码蛋白的基因。54追踪有外壳病毒的一个生活周期就等于游历整个细胞。55当一个噬菌体侵染一个合适的大肠杆菌寄主细胞时，通常是裂解性侵染，释放出几百个子代噬菌体；更少见的是，它会整合到寄主染色体中，产生带有原噬菌体染色体的溶原菌。56通过从寄主细胞表面出

8、芽生殖的病毒常因为出芽造成细胞表面改变而致癌。57一种把新病毒按 DNA或RNA分类的简易方法是看它的生长是否受放线菌素 D的抑制。放线菌素 D只阻遏依赖DNA的RNA合成，而对依赖RNA的复制酶无影响，如果病毒生长受它抑制，那肯定是 DNA病毒。58大病毒比小病毒更有可能存在重叠基因，因为它们有更多的基因。59因为类病毒不编码任何蛋白但又能够复制并在植物中造成严重的疾病，所以非常特殊。60.负责噬菌体 DNA合成的酶是在裂解循环的晚期形成的。61.溶源化是一个双链 DNA病毒的生活周期中的一种状态，是当病毒的基因组整合进一个宿主细胞的基因组时形成的状态。62.c蛋白的稳定性是影响溶源和裂解循

9、环之间开关的一个关键。63.为了把噬菌体附着位点（attp）和在细菌染色体上的附着位点（attB）结合重组起来，噬菌体 DNA在感染大肠杆菌后靠末端cos位点退火成环。64下面哪些结构物能够诱导乳糖操纵子?哪些是半乳糖苷酶的底物? （a）l，4半乳糖苷 （b）l，4半乳糖苷 （c）1，6半乳糖苷 （d）l，6半乳糖苷 （e）上面既没有诱导物，也没有底物65下面哪些说法是正确的? （a）Lac A的突变体是半乳糖苷透性酶的缺陷 （b）在非诱导的情况下，每个细胞大约有4分子的半乳糖苷酶 （c）乳糖是一种安慰诱导物 （d）RNA聚合酶同操纵基因结合 （e）多顺反子 mRNA是协同调节的原因 （f）

10、Lac阻遏物是一种由4个相同的亚基组成的四聚体 （g）腺苷酸环化酶将 cAMP降解成 AMP （h） CAP和 CRP蛋白是相同的 （i）-35和-10序列对于RNA聚合酶识别启动子都是很重要的 （j）色氨酸的合成受基因表达、阻遏、弱化作用和反馈抑制的控制 （k）Trp的引导 mRNA能够同时形成三个“茎环”结构 （l）在转录终止子柄部的 A-T碱基对可以增强结构的稳定性 （m）真核生物和原核生物的转录和翻译都是偶联的 （n）在色氨酸浓度的控制下，核糖体停泊在 Trp引导区串色氨酸密码子上，但并不与之脱离 （o）Ara C蛋白既可作为激活蛋白，又可作为阻遏蛋白起作用 （p）Ara C的表达不受

11、调控66转录的起始位点（stp）决定在模板链上嘧啶核苷酸的位置，在此形成第一个杂合的 RNA和 DNA碱基对。67反转录病毒侵染常常同时导致子代病毒的非致死释放和被侵染细胞内致癌的永久性基因改变。68转座酶可以识别整合区周围足够多的序列，这样，转座子不整合到基因的中间，因为破坏基因对细胞是致死的。69转座要求供体和受体位点之间有同源性。70TnA家族的转座子通常转移三种基因：转座酶、解离酶和氨苄抗性基因。71Tn10高水平表达转座酶。72水晰的基因组比人的基因组大。73高等真核生物的大部分 DNA是不编码蛋白质的。74. 假基因通常与它们相似的基因位于相同的染色体上。75在有丝分裂中，端粒对于

12、染色体的正确分离是必要的。76大多数看家基因编码低丰度的 mRNA。77所有真核生物的基因都是通过对转录起始的控制进行调控的。78所有高等真核生物的启动子中都有TATA盒结构。79只有活性染色质转录的基因对 DNase 敏感。80. 内含子通常可以在相关基因的同一位置发现。8140以上的 Drosophila cirilis基因组是由简单的7bp序列重复数百万次组成。82卫星 DNA在强选择压力下存在。83真核细胞中的RNA聚合酶仅在细胞核中有活性。84. 在RNA的合成过程中，RNA链沿35方向延长。85. 候选三磷酸核苷通过对生长中RNA链的磷酸的亲和攻击加到链上。86核不均一RNA是mR

13、NA和rRNA的前体而不是tRNA的前体。87密码子AUG专门起 mRNA分子编码区的终止作用。88tRNAfMet的反密码于是 TAC。89. RNA聚合酶能以两个方向同启动子结合，并启动相邻基因的转录。但是，模板链的选择由另外的蛋白因子确定。90细菌细胞用一种RNA聚合酶转录所有的RNA，而真核细胞则有三种不同的RNA聚合酶。91. 转录因子具有独立的 DNA结合和转录激活结构域。92.每个转录因子结合位点被单个转录因子识别。93.纠正下列一段话中的错误： 在E. Coli中，通过RNA聚合酶同操纵基因的结合来起始转录。与转录起点碱基互 补的dNTP同亚基结合，然后是第二个dNTP通过与第

14、一个 dNTP形成25磷酸 二酯键而结合上。当生成的RNA链约有12个核苷酸长度时， 亚基脱离 DNA聚合酶，RN链在全酶的作用下继续延伸。当 DNA聚合酶在RNA链上遇到终止密码子时，转录作用停止。94. 在tRNA分子中普遍存在的修饰核苷酸是在掺入tRNA转录物结合前由标准核苷酸共价修饰而来。95如果tRNATyr加的反密码子发生单个碱基变化后成为丝氨酸的反密码子，被加入到无细胞系统，所得的蛋白质在原来应为丝氨酸的位置都变成了酪氨酸。96. 在肽链延伸的过程中，加入下一个氨基酸比加人氨酰 tRNA 更能激活每个氨酰tRNA间的连接。97摇摆碱基位于密码子的第三位和反密码子的第一位。98核糖

15、体小亚基最基本的功能是连接mRNA与tRNA，大亚基则催化肽键的形成。99. 蛋白质合成时，每加人一个氨基酸要水解4个高能磷酸键（4个密码子），所消耗的总能量比起 DNA转录（每加入一个核苷酸用两个高能磷酸键，6个密码子）要少。100因为 AUG是蛋白质合成的起始密码子，所以甲硫氨酸只存在于蛋白质的 N末端。101通过延缓负载tRNA与核糖体结合以及它进一步应用于蛋白质合成的时间，可使与不适当碱基配对的tRNA离开核糖体，提高蛋白质合成的可靠性。102. 延伸因子eEF1帮助氨酰tRNA进入 A位点依赖于ATP内一个高能键的断裂。103三种RNA必须相互作用以起始及维持蛋白质的合成。104G-

16、U碱基负责fMet-tRNA对GUG的识别。105.限制与修饰现象是宿主的一种保护体系，它是通过对外源 DNA的修饰和对自身 DNA的限制实现的。106.限制性内切核酸酶在 DNA中的识别切割位点的二级三级结构也影响酶切效率。一般来说，完全切割质粒或病毒 DNA，要比切割线状 DNA需要更多的酶，最高的需要20倍。107.如果限制性内切核酸酶的识别位点位于 DNA分子的末端，那么接近末端的程度也 影响切割，如Hpa和Mbo 要求识别序列之前至少有一个碱基对存在才能切割。108.能够产生防御病毒侵染的限制性内切核酸酶的细菌，其本身的基因组中没有被该核酸酶识别的序列。109限制性图谱与限制性片段长

17、度多态性（RFLP）图谱的最显著的区别在于前者是一个物理图谱而后者是一个连锁图。110用限制性内切核酸酶Hpa 分别切割载体 DNA和供体 DNA后，可用Ecoli DNA 连接酶进行连接。111已知某一内切核酸酶在一环状 DNA上有3个切点，因此，用此酶切割该环状 DNA，可得到3个片段。112.迄今所发现的限制性内切核酸酶既能作用于双链 DNA，又能作用于单链 DNA。113基因工程中使用的类限制性内切核酸酶不仅有内切核酸酶的活性，而且有甲基化酶的活性。114.DNA多态性就是限制性片段长度多态性。115.用限制性内切核酸酶 Pst 切割质粒 pBR322后，再用外切核酸酶.coli 进行

18、系列缺失，可得到一系列大小不同的缺失突变体。116.甘油会使许多限制性内切核酸酶的特异性发生改变，是导致一些酶的星活性的主要原因之一，防止的办法是酶切反应体系中，将甘油的浓度控制在5以下。117.具有EcoR 末端的外源片段只能以一个方向插入到EcoR 末端的载体中。118.从Esherichia coli K中分离的限制性内切核酸酶命名为 EcoK。119.同一种限制性内切核酸酶切割靶 DNA，得到的片段的两个末端都是相同的。120.在限制与修饰系统中，修饰主要是甲基化作用，一旦位点被甲基化了，其他的限制性酶就不能切割了121.稀有酶是指那些识别序列很长又不常用的限制性内切核酸酶。122.T

19、4 DNA连接酶和E.coli连接酶都能催化平末端和粘性末端的连接。123.T4 DNA连接酶和E.coli连接酶都能催化双链 DNA和单链 DNA的连接。124.反转录酶能够以单链RNA或单链 DNA为模板，在引物的引发下合成一条互补的DNA链。以 RNA为模板合成的 DNA是互补 DNA（complementaly DNA, cDNA）。若是以 DNA模板合成 DNA，dNTP的掺人速度很低（约5个核苷酸秒），比 T7 DNA 聚合酶的合成速度差不多低100倍。125.以RNA为模板，用反转录酶可同时产生单链和双链的cDNA，双链 DNA是由自身引 物引导合成。但这种自身引物引导的合成效率

20、远低于外加寡核苷酸引物引导的合 成。126.Ba131核酸酶（Ba131 nuclease）是 Ca2+依赖性的，在反应混合物中加入 EDTA便可抑制它的活性。127.外切核酸酶不能在双链 DNA的 gap和 nick处切割 DNA。128.当一个 DNA结合蛋白同它识别的核苷酸序列结合以后，就保护了它们的磷酸二酯 键免遭切割，其结果，电泳胶上就有明显可见的空缺带（与对照相比），这就是 DNA 足迹法。129.T4 DNA连接酶和E.coli连接酶作用时都需要ATP和NAD+作为辅助因子。130.多核苷酸激酶之所以能够用于 DNA片段的标记，是因为它能够将单个的32P标记的单核苷酸加到每一 D

21、NA链的5端。131.在反转录过程中，使用 AMV比使用 M-MLV可得到较多的产物。132.真核生物可能有两种DNA连接酶，连接酶和连接酶 都能在 DNA合成和连接中起作用。133.DNA聚合酶有三种酶活性，其中35外切核酸酶的活性在较多的dNTP存在 下，常被53合成酶的活性所掩盖。134用同一种酶切割载体和外源 DNA得到粘性末端后，为防止它们自身环化，要用 CIP将它们脱磷酸。135.外切核酸酶的作用产物可以作为末端转移酶的作用底物。136.用外切酶作系列缺失突变时，可以从突出的3端开始。137.nick和gap的含义是不同的，前者指 DNA的单链中有较小的缺失，后者仅是断开 了一个磷

22、酸二酯键。138.迄今发现的质粒 DNA都是环状的。139.线性质粒同环状质粒一样都不带有宿主必需的基因。140.有 a、b、c三个质粒，因为 a和 b能够共存于一个细胞，a和 c也可共存于同一个细胞，所以 b和 c一定能够共存于同一个细胞。141.插入元件（IS）也是一种转座元件，它除了有转座酶基因外，还有附加基因。142.如果两个不同的质粒可以稳定地共存于同一个细胞中，这两种质粒则属于同一个不亲和群。143.一个带有反向重复序列的双链 DNA经变性后，复性时其单链可形成发夹环。144.能够在不同的宿主细胞中复制的质粒叫穿梭质粒。145.任何一种质粒都可以用氯霉素扩增的方法，增加它的拷贝数。

23、146.只有完整的复制子才能进行独立复制，一个失去了复制起点的复制子不能进行独立复制。147CsCl-EB密度梯度离心法纯化SC DNA原理是根据 EB可以较多地插入到 SC DNA 中，因而沉降速度较快。148质粒 Co1El同 pSC101共整合后，得到重组质粒 pSC134，具有两个复制起点，这两个起点在任何细胞中都是可以使用的。149pBR322可以用于粘性末端连接、平末端连接和同聚物接尾法连接，无论用哪种方法连接，都可以用同一种酶回收外源片段。150所谓穿梭质粒载体是能够在两种以上的不同宿主细胞中复制的质粒，所用的复制起点不同。151.一般情况下，质粒既可以整合到染色体上，也可以独立

24、存在。152. Co1El是唯一用作基因工程的自然质粒载体，它具有四环素抗性标记，因而很容易选择。153.某一染色体 DNA经内切酶Sal 切割后，产生了若干个具有粘性末端的 DNA片段，将这些片段分别在 T4 DNA连接酶的作用下自身连接成环，然后导人受体细胞，都可以进行独立地复制。154如果细菌的某种表型特征在UV处理下丧失后不再恢复，这种表型有可能是质粒赋予的。155基因克隆中，低拷贝数的质粒载体是没有用的。156.代型载体（replacement vector）是指同一种限制性内切核酸酶在DNA中具有两 个切点。外源 DNA通过取代这两个切点间的片段被克隆。157现在最常用的 pUC载

25、体是 pUC18，它的分子量小，具有多克隆位点和易于选择的分子标记，并且是松弛型复制。另外，这种载体可在辅助质粒的帮助下合成单链 DNA。158.噬菌粒（phagemid）pUC118pUC119载体是集质粒和丝状噬菌体有利特征于一身 的载体，既能合成单链 DNA，又能合成双链 DNA。159.噬菌体 DNA和 M13单链噬菌体 DNA在成熟前的 DNA复制都是用滚环模型。160.M13噬菌体每个世代裂解宿主后，可释放100个子代噬菌体。161.以粘粒为载体的重组体虽然在平板上生长的速度不同，但是转化子中插入片段的扩增量是相同的。162.氯霉素扩增 DNA时，加氯霉素的时间是重要的，因为加得太

26、早，菌数不够，加入时间过迟，菌龄过老，容易自溶。163所谓引物就是同 DNA互补的一小段RNA分子。164脉冲凝胶电泳采用一个很强的电场来分离非常长的DNA分子，其原理在于迫使 DNA分子根据长度的不同而具有不同的速度，并按大小顺序通过凝胶。165Agarose-EB电泳法分离纯化 CCC DNA原理是根据 EB可以较多地插入到 CCC DNA 中，因而迁移速度较快。166.如果 PCR的每一次循环都把上一次循环中合成的 DNA都加了一倍，那么，10个循环就扩增了1000倍，20个循环就扩增了100万倍，30个循环就扩增了10亿倍。167PCR既能用于扩增任何天然存在的核苷酸序列，又能重新设计

27、任何天然核苷酸序列的两个末端。因此，任意两个天然存在的 DNA序列都能快速有效的扩增，并拼接在一起。168最有效的制备纯RNA的方法是让其在细胞中超表达，然后提纯。169大量制备已被克隆基因编码蛋白产物的常用方法是体外转录和翻译。170.通过报告基因与来自于目的基因上游和下游各种 DNA片段的结合，研究基因的调控序列。171.温度敏感突变型是非常有用的，在这些突变型中，可以通过对温度的改变控制这些突变体中异常表型的出现。172用人工合成的含有所需碱基变化的寡聚核苷酸，可以将特殊突变引入克隆的基因。173蛋白质的氨基酸序列中各种重要信号都可以通过短氨基酸序列同报告蛋白的融合进行研究。174简并引

28、物是根据已知 DNA序列设计的引物群。175在 DNA贮存液中加一滴三氯甲烷，可防止真菌的污染。176密码的偏爱性是指不同种属的生物对简并密码具有不同的使用频率。177插入到质粒 DNA中的 EB可以用正丁醇抽提除去。178碱法和煮沸法分离质粒 DNA的原理是不相同的。179酚法和碱法分离质粒 DNA都要用溶菌酶破壁，但碱法用的溶菌酶的浓度要高。180外源基因（或 DNA片段）插入到某一基因内的位点后，这个基因不再有任何功能。181用不同的产生粘性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源 DNA，得到的粘性末端是不亲和的粘性末端。182.基因组 DNA文库是含有某一生物中全部 DNA序列随机克隆的克隆群，而cDNA文库是含有某一生物中所有表达基因随机克隆的克隆群。183.cDNA克隆较之基因组克隆最重要的优越性就是它们含有一个基因的完整序列。184通过差示杂交后制备的 cDNA文库使克隆那些只在特定分化细胞中表达基因的机率大为提高。185在染色体步移中，可通过 DNA测序知道已到达所感兴趣的基因。186一旦有了一套已知顺序的基因组克隆，通过从文库中获得覆盖目的突