27 谭燕临检Word格式文档下载.docx

1、参考文献 5致 谢 6英文摘要 6论文原创性声明 7附：综 述 7阴道分泌物瑞氏法与悬浮法检查结果的比较学生 谭燕 导师 安邦权 曾强武【摘要】 目的 对比瑞氏染色法和悬浮法阴道分泌物（白带）常见疾病信息的检出率，以证明瑞氏染色法替代悬浮法的可行性。方法 用悬浮法、瑞氏染色法对396份阴道分泌物标本同时进行镜检，瑞氏染色法检查清洁度、滴虫、真菌、线索细胞、淋球菌等，并与悬浮法查清洁度、滴虫、真菌、线索细胞等相比较。结果 悬浮法检出清洁度（-）、滴虫、真菌、线索细胞的阳性率分别为60.10%，5.56%，25.51%，21.97%，瑞氏染色法检出其阳性率分别为70.70%，5.81%，32.32

2、%，29.04%，瑞氏法对清洁度、真菌、线索细胞的检出率明显高于悬浮法（P0.05）。结论 瑞氏法对白带的阳性检出率比悬浮法高，因其涂片染色可短期保存以便复查而建立质控措施，还可筛查淋球菌、可疑肿瘤细胞等，建议临床采用瑞氏法替代悬浮法作为妇科阴道分泌物常规检查项目,以提高实验室阳性检出率和临床诊治水平。【关键词】 阴道分泌物；滴虫；真菌；瑞氏染色法；悬浮法前言阴道病为女性多发病1，分特异性和非特异性阴道炎，多由真菌、加德纳菌、滴虫引起。在临床上，三者所导致的炎症症状及白带性状没有太大差别2，但在临床治疗上却差异明显，所以为能更好的治疗患者，对其病因的诊断非常重要。国内多用简便、快速的悬浮（滴）

3、法检查滴虫、真菌等，但漏诊率高、检出率低，且不利于建立质控3。采用瑞氏染色法虽耗时要长，但便于建立质控以提高准确性2,4。我们对其进行了比较分析。1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 标本来源 2009年8月6日2009年10月25日在四川省人民医院妇科门诊就诊的病人，共396例，年龄681岁，取阴道或宫颈分泌物。1.1.2 仪器 日产OLYMPUS普通光学显微镜。1.1.3试剂 生理盐水（NS）和2.5mol/LKOH溶液（KOH 140g溶于1000ml蒸馏水中）自制。瑞氏染液为重庆医学检验试剂研究所生产。 1.2 方法与步骤将妇科医生采集的阴道分泌物制成一张厚薄均匀的大小为（1.0c

4、m2.0cm）（3.0cm4.0cm）的涂片，自然干燥后进行瑞氏染色，剩余标本用于悬浮法检查。瑞氏染色严格按试剂使用说明操作，悬浮法严格按全国临床检验操作规程5进行操作。1.2.1 瑞氏染色法清洁度检查参照表1标准5进行判断。表1 清洁度判断标准清洁度阴道杆菌球菌上皮细胞脓细胞或白细菌05个HP+-515个HP1530个HP+30个HP取瑞氏染色标本片，先低倍镜粗扫，见梨形、圆形、椭圆形或不规则形疑为滴虫者，再高倍镜细查，必要时换油镜仔细辨认，具有整个胞体似粒细胞等大或为其2倍、胞浆均匀淡蓝、核小椭圆紫色、有的可见鞭毛等特征为滴虫2,4,5。同时在高倍镜和油镜下查找真菌可疑淋病奈瑟菌。线索细胞

5、为镜下所见阴道上皮细胞因细菌繁殖覆盖胞体而使其边缘模糊不清称之，背景以球杆菌为主，乳酸杆菌很少或缺如。1.2.2悬浮法清洁度检查与瑞氏法相同。 取阴道分泌物涂于玻片上生理盐水中，低倍镜下观察，可见波状或螺旋状运动的虫体将周围白细胞或上皮细胞推动，在高倍镜下可见虫体呈顶宽尾尖倒置梨形，大小约为白细胞的1-3倍者为滴虫。取阴道分泌物涂于玻片上数滴10%的氢氧化钾溶液中，显微镜下查见菌球、芽孢及假菌丝者为真菌。线索细胞与瑞氏法相同。1.3统计学处理 悬浮法和瑞氏染色法两组数据采用2检验。2 结果 2.1 结果 396例妇科门诊病人阴道分泌物悬浮法、瑞氏染色法同时进行镜检结果见表2、3。经2检验，瑞氏

6、染色法清洁度（-）、滴虫、真菌、线索细胞阳性率均明显高于悬浮法（P0.05）。表2 瑞氏染色法与悬浮法检测结果Table 2 The result of Wright staining and suspension悬滴法/瑞氏法滴虫真 菌线索细胞+220182294769609813733426146263表3 瑞氏染色法与悬浮法检测阳性率对比Table 3 The positive rate comparison of Wright staining and suspension清洁度（-）滴 虫瑞氏法悬滴法70.70%5.81%32.32%29.04%60.10%5.56%25.51%21

7、.97%3.讨论 真菌、滴虫及细菌性阴道病（BV）是妇科常见病、多发病。国外报道其妇科门诊BV的检出率为10%-35%6,7,国内统计不同人群BV的患病率为15%45%8, 真菌、滴虫感染率因时间、地点、人群、生活水平及检测方法等不同而出入较大。由于患者临床表现和阴道分泌物性状常无明显区别，但在治疗上及引起的后果均存在差异9，所以检验人员及时准确发出白带常规报告对临床诊治病人尤其重要。从表2、3可看出，虽然悬浮法简便、快速、易掌握、对鲜活滴虫检查有优势而被常用，但其检出阴道分泌物清洁度（-）、滴虫、真菌、线索细胞的阳性率（60.10%，5.56%，25.51%，21.97%）低于瑞氏染色法（7

8、0.70%，5.81%，32.32%，29.04%），尤其清洁度、真菌、线索细胞的阳性检出率存在明显差异（P0.05）。此外，在我们的工作中还发现悬浮法可因实验室生理盐水污染（真菌和滴虫，后者相对少见）、标本中粗大球杆菌及患者妇科用药后的药物残渣等的影响而出现其假阳性；还可能因生理盐水对标本的稀释作用、细胞或渣子的掩盖导致在视野下未发现病原体、或冬春季无保温措施下查滴虫等而出现其假阴性。进一步证明瑞氏染色法替代悬浮法可以提高阴道分泌物准确性，有利于患者早日康复。我们在对比分析396例阴道分泌物中，瑞氏染色法发现中性粒细胞内肾形相对双球菌3例，经革兰氏染色检查为阴性双球菌，可能是淋球菌，因例数太

9、少（包括可疑肿瘤细胞），悬浮法无法检测而未行单独统计。但对肾形相对双球菌阳性标本，建议有条件的实验室进一步做细菌培养与药敏试验以确诊，瑞氏染色法对淋球菌检查只有筛选作用10,11。瑞氏染色法操作步骤少、用时短、费用低、查滴虫时更易识别其形态、可观察有无恶性细胞，发现可疑淋球菌时加做革兰氏染色更能保证其检测质量，即针对悬浮法而言、瑞氏染色法有如下优点：一张涂片多项目检查；冬春季节查滴虫时不受保温措施的限制；涂片送到实验室即可染色镜检，做到随到随查方便了病人；标本染色后病原体基本被消灭，大大降低了环境污染4,；染色标本可较长时间保存以便复查监督质量；另外还可挑选染色良好、病原体典型的标本作为教学片

10、及送往各家医院临检室进行交流，以提高对清洁度、滴虫、真菌、线索细胞等整体检验水平。4.结论 通过比较,瑞氏法可以取代悬浮法用于临床阴道分泌物检验。参考文献:1Rauh VA, Culhane JF, Hogan VK. Bacterial vagionsis:a public health problem for women. J Am Med Womens Assoc,2000,55（4）:220-2242安邦权，周湘红，凌晓午.阴道分泌物常规多项目检查3种方法对比分析.中国妇幼保健，2009，24（1）：127-128.3 邓光贵.用吖啶橙染色法快速检查阴道分泌物涂片J.中华医学检验杂志，

11、1992，15（4）：225.4 安邦权，凌晓午，胡玫，等. 瑞氏和革氏染色法查滴虫、霉菌及淋球的方法学探讨及质控.1998，13：3335.5叶应妩，王毓三，申子瑜. 全国临床检验操作规程. 第3版. 南京：东南大学出版社，2006，3246 Biswas MK. Bacteral vagionsisJ. Clin Obstet Gynecol; 1993,36:166.7 Mead PB. Epidemiology of bacterial vaginosisJ. Am J Obstet Gynsecol,1993;169:446.8温百端细菌性阴道病的发病率及治疗的探讨J重庆医学，200

12、6，35（13）：120612089 谭红霞，李春香. 1 164例阴道分泌物涂片快速染色的检测分析.检验医学与临床2007，4（1O）：101810 王霞平，欧阳淑兰，胡先泳. 1 138例妇科白带涂片多功能染色的结果分析.中国厂矿医学2006，19（6）：556-55811安邦权，凌晓午，谢 淼.阴道分泌物常规检验质量控制.上海医学检验杂志，2002, 17（ 3）：181-182致谢:本论文是在导师安邦权及曾强武老师的悉心指导下完成的。导师渊博的专业知识，严谨的治学态度，精益求精的工作作风，诲人不倦的高尚师德，严以律己、宽以待人的崇高风范，朴实无华、平易近人的人格魅力对我影响深远。不仅使

13、我树立了远大的学术目标、掌握了基本的研究方法，还使我明白了许多待人接物与为人处世的道理。本论文从选题到完成，每一步都是在导师的指导下完成的，倾注了导师大量的心血。在此，谨向导师表示崇高的敬意和衷心的感谢！Vaginal secretions Wright Law and suspension comparison of examination resultsYan Tan; GuiZhou province Peoples hospital;550004Abstract Objective To compare the Wright staining and suspension vagina

14、l secretions （leucorrhea） detection rate of common diseases of information to prove that Wrights stain the feasibility of an alternative suspension method. Methods suspension, Wright stain of the 396 vaginal discharge samples were simultaneously microscopy, Wright staining checking cleanliness, tric

15、homoniasis, fungi, clue cells, Neisseria gonorrhoeae, etc., and check with the suspension cleanliness, drip insects, fungi, clue cells, and so compared. Results suspension detection cleanliness （ - ）, trichomoniasis, fungi, clue cells, positive rates were 60.10%, 5.56%, 25.51%, 21.97%, Wright staini

16、ng detected in the positive rates were 70.70% , 5.81%, 32.32%, 29.04%, Wright law cleanliness, fungi, clue cell detection rate was significantly higher than suspension （P 0.05）. Conclusion Wright method leucorrhea positive detection rate higher than the suspension, its stained smears can be stored s

17、hort term in order to review and establish quality control measures, but also screening for Neisseria gonorrhoeae, suspicious tumor cells and so on, the proposed method of clinical use of Wright Alternative suspension as a routine gynecological examination vaginal secretions of the project to improv

18、e the positive rate and clinical laboratory diagnosis and treatment.Key words vaginal secretions; trichomoniasis; fungi; Wright staining; suspension论文原创性声明：本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。 声明人： 2010年4月20日综述瑞氏染色法在阴道分泌物常规中的重要作用学生

19、谭燕 审 校 安邦权 曾强武【摘 要】目的 对比瑞氏染色法和悬浮法、快速染色法（CTB法）、超高倍显微诊断系统以及酶法对阴道分泌物（白带）常见疾病信息的检出率，以证明瑞氏染色法推广使用的可行性。方法 瑞氏染色法和悬浮法、快速染色法（CTB法）、超高倍显微诊断系统以及酶法对阴道分泌物标本进行检查，瑞氏染色法检查清洁度、滴虫、真菌、线索细胞、淋球菌等，并与悬浮法、快速染色法（CTB法）、超高倍显微诊断系统以及酶法查清洁度、滴虫、真菌、线索细胞等相比较。结果 悬浮法检出清洁度（-）、滴虫、真菌、线索细胞的阳性率没有瑞氏染色法、快速染色法（CTB法）、超高倍显微诊断系统以及酶法的阳性率高。结论 瑞氏法

20、等方法对白带的阳性检出率比悬浮法高，而因瑞氏染色可短期保存标本以便复查而建立质控措施，还可筛查淋球菌、可疑肿瘤细胞等，并且与快速染色法（CTB法）、超高倍显微诊断系统以及酶法比较，具有成本低和操作简单的优点，故建议临床采用瑞氏法作为妇科阴道分泌物常规检查项目病加以推广。【关键词】 瑞氏染色法 悬浮法 快速染色法（CTB法） 超高倍显微诊断系统以及酶法 阴道分泌物常规检查 Wrights staining in the vaginal secretions of the important role of conventional【Abstract】 Objective To compare t

21、he Wright staining and suspension, fast stain （CTB Law）, super microscope diagnostic systems as well as the enzyme to the vaginal secretions （leucorrhea） detection rate of common diseases of information to prove that Wright stain France to promote the use of feasibility. Method of Wright staining an

22、d suspension, fast stain （CTB Law）, super microscope diagnostic systems as well as enzyme samples of vaginal secretions examined, Wright staining checking cleanliness, trichomoniasis, fungi, clue cells, Neisseria gonorrhoeae, etc., and with the suspension, fast stain （CTB Law）, super microscope diag

23、nostic systems as well as enzymatic investigation cleanliness, trichomoniasis, fungi, clue cells, and so compared. Results suspension detection cleanliness （ - ）, trichomoniasis, fungi, clue cells, Wright stain positive rate is not fast stain （CTB Law）, super microscope diagnostic systems as well as

24、 the positive rate of enzymatic . Conclusion Wright method and other methods of leucorrhea positive detection rate higher than the suspension, but because of Wrights stain may be present in order to review the short-term preservation and the establishment of quality control measures, but also screen

25、ing for Neisseria gonorrhoeae, suspicious tumor cells and so on, and with Rapid staining method （CTB Law）, super microscope diagnostic systems as well as enzymatic comparison with low-cost and the advantages of simple operation, it is suggested the clinical use of Wrights law as a gynecologic vagina

26、l【Key Words】 Wright stain suspension, fast stain （CTB Law）, super microscope diagnostic systems as well as enzymatic routine examination vaginal secretions 引言由于女性阴道及其特定的菌群共同形成一个巧妙的平衡生态,其中阴道环境控制着菌群,而菌群也控制着阴道环境。许多因素如性交、经期、妊娠期内分泌激素水平改变、阴道灌洗或冲洗、抗生素的滥用、不注意个人卫生等对阴道正常生态系统起破坏作用,从而导致生殖道感染，使越来越多的女性罹患妇科疾病。对医务工

27、作者来说，找到一种能快速对阴道分泌物进行准确检测的方法尤为重要，这种方法可以使疾病在早期及时被发现并治疗，对整个社会的经济文化发展都有着重要意义。目前，我国大多数县级以下医院普遍采用悬浮法进行阴道分泌物常规检查，其受到检测者经验、显微镜质量、盐水是否新配置以及涂片厚度等因素影响，误差较大。而近年来，国内在阴道分泌物常规检测方面也有所进展，某些大医院使用了快速染色法（CTB法）、超高倍显微诊断系统以及酶法来进行阴道分泌物常规检查，但是由于各种原因，其推广使用的可能性都不大。而瑞氏染色法操作简便，易于保存标本，成本较低，已经在许多大医院使用，其可以用作室内质控，更便于推广。1 正文妇科阴道分泌物常

28、规检测（简称白带常规）是女性泌尿生殖道健康水平的一项重要医学检查项目，主要用于监测女性泌尿生殖道感染与否及种类。特别是孕前女性白带常规筛查尤为重要，患有阴道炎症的女性在受孕时会影响精子的质量甚至导致不孕，即使怀孕孕期也很容易引起宫内感染、产道感染等环节感染新生儿，造成流产、早产、先天发育畸形、智力低下等严重后果。因此通过白带常规筛查细菌性阴道病、滴虫性阴道炎、念珠菌性阴道炎等阴道疾病对女性优生具有重要的意义。正常阴道分泌物呈白色、絮状、高度黏稠、pH值44.5，无腥臭味。主要成分由脱落的阴道鳞状上皮细胞和阴道内寄生的各种细菌构成。当机体抵抗力降低或阴道正常菌群改变或大量致病菌入侵繁殖时，导致阴

29、道pH值改变，清洁度增高，引起阴道炎1。目前，国内外许多医院采用了较为先进的方法进行阴道分泌物常规检测，现将其介绍如下。1.1快速染色法（CTB） 缩短分散染料染色过程的染色工艺。特点是严格控制快速吸附温度区间内的升温速度，以求达到均匀染色的效果。该工艺具有染色周期短、染料利用率高和节能等优点。染夜的配制称取瑞氏染色粉1g,姬姆萨粉1g,加入500nl蒸馏水,然后再加入少许碎玻璃,用力振摇,促使染色粉溶解,此液当天应用2。（3.0cm4.0cm）的涂片，自然干燥后进行染色，5秒钟后即可用中性蒸馏水冲洗净。干燥后镜检。1.2超高倍显微诊断系统应用超高倍显微诊断系统代替普通显微镜作阴道分泌物检查己

30、在部分医学实验室使用,由于超高倍显微镜放大倍率高,分辨率不减,又有相差视野,暗视野等多种功能,使观察到的各种细胞及病原体,在无级放大过程中始终清晰可见,越来越被医学界所认可3。应用Dimaunit2000型多功能超高倍显微镜作阴道分泌物直接活体镜检并结合G染色、PH值测定等进行阴道各种炎症的病原体初筛检查能大大提高各种病原体的检出率，方便了我们作阴道分泌物病原体初筛工作。1.3酶法过氧化氢浓度测定的意义H2O2浓度的测定是分析阴道微生态是否正常的良好指标，阴道微生态的异常是病原体存在的强烈提示信号，会诱发其他致病微生物或阴道内条件致病菌成为事实病原体，是其他病原体（如滴虫、霉菌等）易复发、难以治愈的重要原因之一。正常阴道内寄生着乳酸杆菌，链球菌，表皮葡萄球菌，引导加德纳菌及大肠杆菌以及厌氧的消化链球菌属、消化球菌、厌氧