土壤农化分析实验指导.docx

1、土壤农化分析实验指导土壤农化分析常用指标测定方法土壤有机质测定一、原理 170-180条件下，用一定浓度的K2Cr2O7- H2SO4溶液（过量）氧化土壤有机质，剩余的K2Cr2O7用FeSO4滴定，由消耗的K2Cr2O7量计算出有机碳量，再乘以常数1.724，即为土壤有机质含量。二、试剂1、0.4mol/L（1/6 K2Cr2O7-浓H2SO4）标准溶液：称取经130烘干的K2Cr2O7(AR)39.2245g溶于水中，加热溶解后加入1000ml浓H2SO4定容至2000ml。2、0.2mol/L FeSO4溶液：称取FeSO4（AR）56g溶于水中，加浓硫酸5ml，稀释至1L。 标定：吸取

2、10.00mL重铬酸钾标准溶液置于250mL锥形瓶中，加入40mL水和3mL浓硫酸，再加3滴邻菲啰啉指示剂，用FeSO4标准溶液滴定至溶液由橙黄色经蓝绿色至棕红色为终点。3、邻菲啰啉指示剂：称取1.485g邻菲啰啉（C12H8N2H2O）和0.695g硫酸亚铁（FeSO47H2O），溶于100mL水中，形成的红棕色络合物贮于棕色瓶中。4、石英砂：粉末状三、实验步骤称取0.25mm风干土0.5xxx-1.0xxxg于干燥试管中，加入少量水润湿样品，准确沿壁缓慢加入10.0ml K2Cr2O7- H2SO4溶液，摇分散土样，盖上小漏斗，放入铁丝笼中。将铁丝笼放入已开启185-190油浴锅中（使温度

3、在170-180）沸腾准确5分钟，取出稍冷，擦净试管外壁油污（同时做空白实验）；冷却后把溶液全部转移到200-250ml三角瓶中（最后体积控制在60-70ml），加入指示剂3滴，用已知浓度的FeSO4溶液滴定。四、结果计算 （V0-V）C3.010001.11.724有机质%= 100 W 式中：V0：滴定空白所用的FeSO4溶液体积（ml）V ：滴定样品所用的FeSO4溶液体积（ml）C ：0.2mol/L FeSO4溶液准确浓度3.0：1/4碳原子的摩尔质量（g/mol）1000：将ml换算为L1.1：氧化校正系数1.724：土壤有机碳换算成土壤有机质的平均换算系数。W：烘干土质量（g）

4、注1：土样称取量视有机质含量而定：含有机质5%左右的土壤称取0.5g；含有机质3%4%的土壤称取0.5g1g；含有机质1%3%的土壤称取1g2.5g；含有机质1%以下的称取2.5g以上。如土样滴定数小于空白试验滴定数的1/3时，须减少称样量重做。有机质含量过低的土样，称样量最多不要超过10g。 土壤全氮测定一、原理 样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机化合物，经过复杂的高温分解，转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。碱性条件下蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以标准酸溶液滴定，求出全氮的含量。二、试剂1、浓硫酸（CP）2、10mol/LNaOH:称取400gNaOH（AR）溶于水中定容至1L3、2%

5、 H3BO3指示剂溶液：20gH3BO3溶于1L水中，每升H3BO3溶液中加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂5ml，并用稀酸或稀碱调节至微紫红色，宜现配，不宜久置。4、混合加速剂：K2SO4：CuSO4：Se=100：10：1即100g K2SO4（CP）、10g CuSO4（cp） 和1g Se粉混合研磨，通过80目筛充分混匀（注意戴口罩），消煮时每毫升硫酸加0.37g混合加速剂。5、0.02mol/L（1/2H2SO4）标准溶液：吸取浓H2SO42.83ml，加水稀释至5000ml，然后用0.0100mol/L硼砂标定。标定：称取1.9068g硼砂（Na2B4O710H2O），精确至0.000

6、1g，加水溶解后稀释至500mL，得0.0200mol/L硼砂标准溶液。吸取20.00mL 0.0200mol/L硼砂标准溶液置于100mL锥形瓶中，加1滴甲基红-溴甲酚绿混合指示剂，用盐酸标准溶液滴定至溶液由蓝色变为紫红色为终点。同时做空白试验。6、甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：称取0.099g溴甲酚绿和0.066g甲基红，溶于100mL乙醇中，变色范围pH 4.4(红)5.4（蓝），贮存期不超过2个月。三、步骤1、消煮 称取0.15mm风干土样1. g送入干燥的消煮管底部，加入加速剂2g和浓硫酸5ml，摇匀。将消煮管放置电炉上用低温加热10-15分钟，管内反应缓和时可加强火力使消煮管的土液保

7、持微沸，加热的部位不超过瓶中的液面，以防瓶壁温度过高使铵盐受热分解。消煮的温度以硫酸蒸汽在瓶颈上部1/3处冷凝回流为宜。待消煮液和土粒全部变为白色稍带绿色后，再继续消煮1h。消煮完毕，待消煮液稍冷，加水至约消煮管2/3处，冷却后定容。2、蒸馏 检查装置是否漏气，并通过水的馏出液将管道洗干净。吸取10ml消煮液加入蒸馏器中，于出口处放置一装有5ml 2%H3BO3-指示剂溶液的三角瓶，从蒸馏器的另一入口加入20ml 10mol/L的NaOH，开始蒸馏，至馏出液为60-70ml时可停止蒸馏。3、用0.02mol/L（1/2H2SO4）标准溶液滴定馏出液由蓝绿色至刚变为紫红色，记录所用的酸标准液体积

8、（ml）四、结果计算 （V-V0）C（1/2H2SO4）14.010-3土壤全氮N（g/kg）= 1000 m式中：V滴定样品时所用的酸标准液体积（ml）；V0滴定空白时所用的酸标准液的体积（ml）；C0.02mol/L（1/2H2SO4）酸标准液的浓度；14.0氮原子的摩尔质量（g/mol）；10-3将ml换算成L；m烘干土的质量（g）土壤铵态氮、硝态氮测定一、原理 土壤用氯化钾溶液浸提，浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，借以光度法测定。含氮量在0.05mg/L0.5mg/L范围内，吸光度与铵态氮含量成正比。 二、试剂 1、氯化钾溶液：2mol/L，称

9、取149.1g氯化钾，溶于水中，再稀释至1000mL。 2、Buffer（R1）:称取酒石酸钾钠（KNaC4H4O6. 4H2O）25g，磷酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O）17.9g ,氢氧化钠（NaOH）27g用超纯水定容至500ml，加brij-35 6-8滴；数周内稳定3、Salycilate B（R2）：称取水杨酸钠（NaC7H5O3）150g，硝普钠（Na2Fe(CN)5NO, 5H2O）0.3g，用超纯水溶解定容至1000ml；3周内稳定4、Dichloroisocyanuric acid Na salt C（R3）：吸取次氯酸钠（NaClO）6ml，用超纯水定容至100ml

10、，1周内稳定5、100ppm NH4-N标液：称取经60烘干8h的NH4Cl 0.3822g溶于800ml超纯水，定容至1000ml三、实验步骤称取1mm风干土样5.00g于50ml塑料瓶，加入25ml 2mol/LKCl提取液，盖紧瓶盖，摇匀，在振荡机上于20-25振荡30min（振荡频率：18020r/min），干过滤于50ml三角瓶中，同时做空白实验。上连续流动分析仪测试标准曲线：铵态氮标曲：吸取20ml 100PPM氨氮标液于100ml容量瓶，用2mol/LKCl浸提液定容，即20ppm氨氮标液，分别吸取20ppm氨氮标液0，1.00，2.00，4.00，6.00，8.00，10.00

11、ml于50ml容量瓶，用2mol/LKCl浸提液定容，即：0，0.4，0.8，1.2，2.4，3.2，4.0ppm硝态氮标曲：吸取20ml 100PPM硝氮标液于100ml容量瓶，用2mol/LKCl浸提液定容，即20ppm硝氮标液，分别吸取20ppm硝氮标液0，1.00，2.00，4.00，6.00，8.00，10.00ml于50ml容量瓶，用2mol/LKCl浸提液定容，即：0，0.4，0.8，1.2，2.4，3.2，4.0ppm原液上机，若有超标则吸取5ml待测液于25ml容量瓶，用2mol/LKCl浸提液定容。四、结果计算 .V .D铵态氮或硝态氮（N mg/kg）= 1000 m10

12、00 查标准曲线所得待测液中铵态氮或硝态氮的浓度，g/mlV显示液体积，mlD分取倍数1000分别将g换算成mg和将g换算成kgm土壤样品质量，g土壤碱解氮的测定一、原理 碱解扩散法，使碱解、还原和扩散吸收各反应同时进行，操作简便，测定结果再现性好，与作物需氮情况有一定相关性。用氢氧化钠溶液处理土壤，硝态氮含量较高的土壤，须加还原剂还原；在扩散皿中，土壤于碱性条件下进行水解，使易水解态氮经碱解转化为氨态氮，扩散后由硼酸溶液吸收，再用盐酸标准溶液滴定而计算水解性氮量。潜育土壤由于硝态氮含量较少，不须加还原剂还原，可降低氢氧化钠溶液浓度。二、试剂1、1.07mol/L NaOH溶液：称取42.8g

13、NaOH溶于水中，定容至1L2、0.02mol/L（1/2 H2SO4）酸标准溶液 标定：称取0.9534g硼砂（Na2B4O710H2O），精确至0.0001g，加水溶解后稀释至500mL，得0.0100mol/L硼砂标准溶液。吸取20.00mL 0.0100mol/L硼砂标准溶液置于100mL锥形瓶中，加1滴甲基红-溴甲酚绿混合指示剂，用酸标准溶液滴定至溶液由蓝色变为紫红色为终点。同时做空白试验。3、2%H3BO3：20g H3BO3溶于1L水中，每100ml H3BO3溶液中加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂2ml并用稀酸或稀碱调节至微紫红色（PH=4.5）, 硼酸指示剂溶液如混合过久，将有

14、终点不灵敏的现象发生。 4、甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：称取0.099g溴甲酚绿和0.066g甲基红，溶于100mL乙醇中，变色范围pH 4.4(红)5.4(蓝)，贮存期不超过2个月。5、碱性胶：取阿拉伯胶40.0g和水50ml在烧杯中热温至70-80搅拌促溶，约1h后放冷。加入甘油20ml和饱和K2CO3水溶液20ml，搅拌，放冷。离心除去泡沫和不溶物，清液贮于具塞玻璃瓶中备用。6、FeSO47H2O粉末：将FeSO47H2O（CP）磨细，装入密封瓶，存于阴凉处7、AgSO4饱和溶液三、步骤称取1mm风干土样2.00g及FeSO47H2O粉末0.20g，置于洁净的扩散皿外室，轻轻转扩散皿，使

15、土样与FeSO47H2O粉末均匀地铺平。在扩散皿外室加入0.1ml饱和AgSO4溶液。在扩散皿内室加入2%H3BO3 2ml，然后在扩散皿外室边缘涂抹碱性胶，盖上毛玻璃，旋转数次，使皿边缘与毛玻璃完全粘合。在渐渐转开毛玻璃一边，使扩散皿外室露出一条狭缝，迅速加入1.07mol/L NaOH溶液10ml，立即盖严，轻轻旋转扩散皿，让碱液盖住左右土壤。再用橡皮筋固定，随后小心平放在401恒温箱中，碱解扩散240.5h后取出。内室吸收液中的NH3用酸标准溶液滴定。注1：由于碱性胶液的碱性很强，在涂胶液和洗涤扩散皿时，必须细心，慎防污染内室，致使造成误差。也可采用碱性甘油（甘油中溶解数十粒固体氢氧化钠），易清洗碱性污染。 注2：滴定时要用细玻棒小心搅动吸收液，切不可摇动扩散皿。接近终点时，可用细玻棒少沾滴定管尖端的盐酸标准溶液，以防滴过终点。四、结果计算 C（V-V0）14.0碱解氮N（mg/kg）= 1000 m式中：C0.02mol/L（1/2H2SO4）酸标准溶液的浓度，mol/LV样品滴定时用去酸标准溶液的体积，mlV0空白实验滴定时用去酸标准溶液的体积，ml14.0氮原子的摩尔质量，g/mol1000将L换