1、感染性标志物血清学试验及检验报告的经验分享 简阳市妇幼保健计划生育服务中心检验科 刘芳我们实验室的检测项目及组合感染性标志物项目:HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、Anti-HIV、Anti-TP、Anti-HCV。感染性标志物A:1、乙肝两对半 2、艾滋 3、梅毒 4、丙肝感染性标志物B:1、乙肝表面抗原 2、艾滋 3、梅毒 4、丙肝感染性标志物C:1、艾滋 2、梅毒 3、丙肝感染标志物的方法学选择1、胶体金优点:快速、简单、可单份检测缺点:假阴性率高(灵敏度低,低滴度的阳性检测不出来;钩状效应:太高滴度的阳性检测不出来)用途:急诊手术,规避医务人员院感风险2、EL
2、ISA:优点:灵敏度高于胶体金、钩状效应远远低于胶体金。缺点:速度较慢用途:辅助诊断,适合批量检测。感染标志物的方法学选择3、化学发光优点:灵敏度高、特异性强、对灰区的检出能力强、可单个或批量上机、速度快。缺点:高灵敏度易导致假阴性。用途:辅助诊断。4、TRUST(用于梅毒非特异性抗体检测)用途:检测梅毒非特异性抗体,用于梅毒活动期、疗效及先天梅毒的判断。缺点:有假阳性(梅毒血清反应假阳性),即非梅毒患者的梅毒血清反应呈阳性的现象。感染标志物的方法学选择(1)技术性假阳性反应技术性假阳性反应 由于标本保存不当(如细菌污染或溶血)由于标本保存不当(如细菌污染或溶血)、试剂质量差或过期、或试验操作
3、错误等所造成。、试剂质量差或过期、或试验操作错误等所造成。(2)生物学假阳性反应生物学假阳性反应 非梅毒螺旋体抗原血清学试验采用的抗非梅毒螺旋体抗原血清学试验采用的抗原为脂类混合物,所检测的抗心磷脂抗体亦可见于其他多种疾病,原为脂类混合物,所检测的抗心磷脂抗体亦可见于其他多种疾病,如自身免疫性疾病(系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等)、老如自身免疫性疾病(系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等)、老人、怀孕的妇女、麻风病、肝硬化等等。甚至个别健康人也可出人、怀孕的妇女、麻风病、肝硬化等等。甚至个别健康人也可出现生物性假阳性,现生物性假阳性,这类假阳性的滴度一般较低(这类假阳性的滴度一般较低(1 1:8
4、 8以下)以下)感染标志物的方法学选择5、TPPA(梅毒抗原血清学试验)优点:优点:TPPATPPA具有较高的敏感性和特异性。是目前具有较高的敏感性和特异性。是目前WHOWHO公认的梅公认的梅毒抗原血清学试验的金标准。毒抗原血清学试验的金标准。缺点:操作繁琐,速度较慢,不适合批量检测。缺点:操作繁琐,速度较慢,不适合批量检测。关于梅毒梅毒血清学检查 当人体感染梅毒螺旋体后4周10周左右,血清中可产生一定数量的抗类脂质抗原的非特异性反应素(主要是IgM和IgG)和抗梅毒螺旋体的特异性抗体(主要是IgM和IgG)。根据检测所用抗原不同,梅毒血清学试验分为两大类:一、非梅毒螺旋体抗原血清试验应用于梅
5、毒的筛查盒疗效观察二、梅毒螺旋体抗原血清试验用于确证试验,不用于疗效观察以梅毒为例,我们实验室的梅毒检测选择1、特应性抗体检测Anti-TP:大多数情况下,一旦感染梅毒,梅毒螺旋体抗原血清学试验(即特应性抗体检测)阳性可保持数年,甚至终生。主要用于对梅毒的诊断试验,对疗效及疾病的发展过程观察意义不大。(1)Anti-TP(ELISA),用于免费项目检测,如艾梅乙母婴阻断项目、婚检、孕优等公共卫生项目。传统的ELISA结果只报告“阳性”或者“阴性”,但不能解决“灰区”的问题。ELISA CO值的设置不能区分所有正常和异常的人群,尤其是位于CO值附近的人群,并且ELISA检测具有以下几个特点:检测
6、变异大(18-65%);不同试剂盒CO值附近存在一个临床意义可疑的区域被称之为“灰区”。因此对结果的说明和解读尤为重要。(2)Anti-TP(化学发光),用于门诊、住院患者。2、非特异性抗体检测:TRUST:目前一般作为观察疗效、复发及再感染的指标。(在一般人群中的假阳性率是1-3%。假阳性血清抗体滴度常1:4,但低滴度不能排除梅毒)。临床提示临床应同时检测非特异性抗体和特异性抗体来确诊梅毒。梅毒血清学检测是诊断梅毒的重要依据,但并非唯一依据,医生应在掌握患者的个人生活史及体查的基础上,综合分析梅毒血清学检测结果,排除假阳性、假阴性情况,才能做出正确的诊断。应用策略(一)梅毒螺旋体抗原血清试验
7、梅毒螺旋体抗原血清试验(以(以ELISA和化学发光为例)和化学发光为例)阳性阳性阴性阴性报告报告ELISA阴性阴性结果,化学发结果,化学发光结果光结果非梅毒螺旋体抗原非梅毒螺旋体抗原血清定性血清定性/定量试验(以定量试验(以TRUST为例)为例)阳性阳性阴性阴性报报告告ELISA或或化化学学发发光光阳阳性性、TRUST阴阴性性报报告告ELISA或或化化学学发发光光阳阳性性、TRUST阳性及滴度阳性及滴度应用策略(二)应用策略如果梅毒螺旋体抗原血清试验,采用的是如果梅毒螺旋体抗原血清试验,采用的是ELISA、化学发光等方法,、化学发光等方法,在遇到在遇到ELISA和化学发光阳性(和化学发光阳性(
8、+)而)而TRUST试验为阴性(试验为阴性(-)时,)时,推荐采用推荐采用TPPA方法方法进行进一步验证其进行进一步验证其阳性结果。阳性结果。我院梅毒检测方式:1、化学发光(查特异性抗体)2、ELISA(查特异性抗体)3、胶体金(查特异性抗体)4、TRUST(查非特异性抗体)5、TPPA(查特异性抗体)当特异性抗体阳性时,建议做TPPA+TURST,请注意:TPPA用于确证,而非确诊!对疗效和疾病的发展过程意义不大!TRUST用于疗效观察!关于梅毒,结合我们目前做的,还想说无论使用哪一种策略,出具结果报告时,均需要注明采用的具体方无论使用哪一种策略,出具结果报告时,均需要注明采用的具体方法。法
9、。作为临床医生,在取得检验报告时,应根据病人的具体情作为临床医生,在取得检验报告时,应根据病人的具体情况,进行分析和下诊断结论。比如:况,进行分析和下诊断结论。比如:1、患者虽没有明显的皮肤表现、但近期有高危性行为、在接到、患者虽没有明显的皮肤表现、但近期有高危性行为、在接到TPPA阳性阳性、TRUST阴性阴性结果时该怎么解释?(既往感染已治愈?结果时该怎么解释?(既往感染已治愈?近期感染早期梅毒?)近期感染早期梅毒?)2、患者否认高危性行为,在接到、患者否认高危性行为,在接到TPPA阴性阴性、TRUST阳性阳性结果时,结果时,怎么解释?(生物学假阳性、其他免疫性疾病怎么解释?(生物学假阳性、其他免疫性疾病关注点:反复检验、用药治疗、职业暴露、性病传染病、孕产妇、新生儿、老年人、自身免疫性疾病等等报告解读1报告解读2报告解读3报告解读4报告解读5报告解读6报告解读7报告解读8报告解读9报告解读10与历史结果不符?关注点:自我检讨、反复检验、用药治疗、注射疫苗、职业暴露、肝胆疾病、血液系统疾病、肾脏疾病、新生儿、亚型感染等还有说法:免疫复合物在体内循环过程中,结合、分离、结合、分离?关于丙肝报告解读11报告解读12报告解读13 谢谢大家!谢谢大家!
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