高效液相色谱测定16种多环芳烃Word下载.docx

1、氮吹进行溶剂转化。214色谱分离原理：HPLC是利用样品中的溶质在固定相和流动相之间分配系数的不同，进行连续的无数次的交换和分配而达到分离的过程。2.2 适用范围本方法测定16种多环芳烃,适用于土壤等复杂基体物质。对于饮用水、地下水和地表水以及生活污水和工业污水。第一步前处理条件有待实验，其余过程均可适用。2.2.1仪器适用范围：0.08-100 mg /L。每小时能测定1个样品。3.试剂和材料乙睛、二氯甲烷、正己烷、丙酮、甲醇均为色谱纯；16种多环芳烃混合标准液：美国Supelco公司；实验用水为二次蒸馏水，0.45m膜过滤；商用硅胶柱（1g，6mL）；水系过滤头；1mL一次性注射器。4.仪

2、器设备4.1高效液相色谱仪：LC-10AVP型，日本岛津公司。4.2加速溶剂提取仪：戴安ASE200。4.3氮吹仪：哈西Caliper Turbovap II。4.4超声波发生器。5. 试样与标准样品的制备5.1 试样的制备5.11萃取：取保存于干净棕色瓶内，避光风干后过100目筛的24样品装入33L加速溶剂提取仪萃取池中，提取温度100，压强1500psi，11二氯甲烷和丙酮静态提取5min。提取液保存于收集瓶中以备用。5.12 过柱淋洗量取10mL提取液，然后过无水硫酸钠，用硅胶柱净化。之后再用3：2正己烷和二氯甲烷淋洗液淋洗，淋洗速度为1ml/min。收集淋洗液。5.13 氮吹：高纯氮气

3、吹扫浓缩，用甲醇定容至1mL。用1 mL注射器取定容样品液过0.45m膜后待测。5.2 标准溶液的制备采用美国Supelco公司制备的16种多环芳烃混合标准液；其原标准溶液浓度分别如下：多环芳烃分析项目浓度（单位ug/mL）萘1000苯并a蒽100苊烯2000苯并菲200苊苯并b荧蒽芴苯并k荧蒽菲苯并a 芘蒽二苯并a.b蒽荧蒽苯并ghi苝芘茚并1,2,3-cd芘 以甲醇作介质，采用逐级稀释法，分别得到0.0008倍、0.004倍、0.02倍、0.1倍的原标准浓度溶液。此4种溶液作为标准溶液保存于棕色瓶中。6. 仪器分析条件6.1 色谱条件 柱温为20；流动相为水/乙睛；流速为1.0mL/min

4、；进样量为10uL；紫外检测器的波长为254nm；荧光检测器发射波长为280 nm，激发波长为389 nm；梯度洗脱条件见下表。表 梯度洗脱条件时间/min水/%乙睛/%406012042506.2色谱分离图下图显示了在最佳梯度洗脱条件下，标准溶液中16种PAHs的分离情况。从图中可以看出，各色谱峰对称性好，无拖尾现象，便于分辨。柱平衡时间较短，完全分离16种PAHs的色谱周期为42 min，适宜进行常规分析。1-萘；2-苊烯；3-苊；4-芴；5-菲；6-蒽；7-荧蒽；8-芘；9-苯并（a）蒽；10-苯并菲；11-苯并（b） 荧蒽；12-苯并（k） 荧蒽；13-苯并（a） 芘；14-二苯并（a

5、,h） 荧蒽;15-苯并（g,h,i）苝;16-茚并（1,2,3）芘 图 16种PAHs色谱图7. 数据的分析与计算：7.1通过分析标准溶液。系统以采集到的标准溶液的峰面积和其浓度，一定条件下，由于浓度与峰面积成正比例，可以计算出标准曲线。利用标准曲线，采用外标法可以计算出所进样品的浓度。7.2方法的线性范围检验配制浓度为0.08,0.4,2,10 mg/L的工作标准溶液，作工作曲线如下图。浓度范围在0.08-10 mg/L具有很好的线性关系，其相关系数均可以达到0.999以上，可以满足16种PAHs同时测试。多环芳烃名称标准曲线）相关系数多环芳烃名称y = 12716x + 124.610.

6、9999y = 87962x + 294.2y = 9105.2x + 127.29y = 67117x + 704.980.9996y = 5209.8x + 90.5150.9995y = 100218x + 220.22y = 59296x + 243.89y = 75388x + 262.31y = 156697x + 773.420.9998y = 74483x + 91.71y = 324068x + 1546.8y = 19734x - 178.72y = 38828x + 1388.50.9994y = 32681x - 648.44y = 37539x + 163.840.9

7、997y = 94634x - 1216.8. 方法的检出限 根据色谱的最小检测限指检测器恰能产生与噪声相区别的响应信号时所需进入色谱柱的物质的最小量，一般为恰能辩别的响应信号，最小为噪声的两倍。最小检测限指最小检测量单位体积所对应的浓度。16种PAHS的方法检测限分别是：方法检测限（单位mg/kg0.0140.00190.0210.0360.00180.00290.00230.000780.00260.000140.0110.00160.00810.00490.00349. 精密度和准确度9.1 以石英砂作空白，6次空白加标回收率如下：回收率RSD616.531033.21624.11893

8、.84695.461124.62715.161082.34824.18962.78943.14843.111053.22792.84982.87863.259.2 精密度和加标回收实验6个平行土壤样品的平均浓度、标准差，根据加标样品计算的回收率见下表：土壤样品PAHs的测定结果浓度/mgKg-1/%检出限0827.2358L3.42630345.67674.76780145.1200763.24920373.282.2695苯并（a）蒽0353.360284.13苯并（b）荧蒽0155.32106苯并（k）荧蒽00282.45104苯并（a） 芘00692.6391二苯并（a,h） 荧蒽0243.62苯并（g,h,i）苝2.48茚并（1,2,3）芘00633.719.3不同标准物质间的比对作为对比，取国家标样进行测定国家标样测定值及结果分析标样编号芴（mg/L）菲（mg/L）荧蒽（mg/L）GSB07-1046-1999标样保证值（mg/L）306.84.4308.84.6347.52.9测得值306.4308.6355.3由上表可见,实际测定值与标样的值之间的误差较小。如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！